同系异体移植当归多糖动员的外周造血干细胞治疗小鼠弥漫性酒精性肝损伤

目的:探讨当归多糖动员的外周造血干细胞对小鼠酒精性肝损伤的作用.方法:采用磁珠分选技术,提取当归多糖动员的正常小鼠外周血造血干细胞,将其注入小鼠酒精性损伤的肝,观察经当归多糖动员的造血干细胞对小鼠酒精性肝损伤的作用.结果:注射当归多糖动员出的造血干细胞后,小鼠酒精损伤的肝组织在48 h左右,肝细胞得到明显修复,肝小叶的正常结构增多,小鼠生存期延长.结论:当归多糖可促进骨髓造血干细胞增殖并向外周动员;当归多糖动员至外周的造血干细胞对小鼠酒精性肝损伤有显著治疗作用;同系异体之间干细胞可进行移植.     

外周血干细胞动员调节CD34+细胞β整合素及L-选择素的表达

目的观察造血干细胞表面粘附分子的变化在外周血干细胞动员中的作用。方法用双色免疫荧光法研究15例恶性血液病患者经化疗+G-CSF动员外周血干细胞前后、骨髓和外周血CD34+细胞表面β1整合素(CD49d)、β2整合素(CD11a、CD11b)及L-选择素(CD62L)的表达。结果①动员后第7天CD34+细胞表面较动员前CD49d、CD11a、CD62L表达下降(P＜0.01),而CD11b无变化(P＞0.05)。②外周血CD34+细胞表达CD49d、CD11a、CD11b、CD62L较骨髓低(P＜0.05)。③外周血CD34+细胞绝大多数处于GO/G1期,该期的干细胞CD49d的密度低于S+G2/M期。结论化疗+G-CSF通过粘附分子的变化而使造血干细胞从骨髓进入外周血中。     

外周血干细胞动员调节CD34^＋细胞β整合素及L—选择素的表达

目的：观察造血干细胞表面粘附分子的变化在外周血干细胞动员中的作用。方法：用双色免疫荧光法研究15例恶性血液病患者经化疗＋G－CSF动员外击血干细胞前后、骨髓和外周血CD34^ 细胞表面β1整合素（CD49d）、β2整合素（CD11a、CD11b）及L－选择素（CD62L）的表达。结果：①动员后第7天CD34^ 细胞表面较动员前CD49d、CD11a、CD62L表达下降;（P＜0．01）,而CD11b无变化（P＞0．05）。②外周血CD34^ 细胞表达CD49d、CD11a、CD11b、CD62L较骨髓低（P＜0．05）。③外周血CD34^ 细胞绝大多数处于GO／G1期,该期的的干细胞CD49d的密度低于S＋G2／M期。结论：化疗＋G－CSF通过粘附分子的变化而使造血干细胞从骨髓进入外周血中。     

当归多糖对小鼠造血干细胞的动员作用及其对急性酒精性肝损伤的保护

目的:探讨当归多糖对小鼠造血干细胞的动员作用及其对急性酒精性肝损伤肝组织的保护作用.方法:采用免疫细胞化学、磁珠分选等实验技术检测小鼠外周血及骨髓的CD34+细胞数,并建立一次性暴饮小鼠急性酒精性肝损伤模型,连续腹腔注射当归多糖6d,动态观察小鼠的一般情况、肝病理形态学变化及生存率.结果:当归多糖动员后外周血中CD34+细胞百分率明显高于生理盐水组;小鼠急性酒精性肝损伤腹腔注射当归多糖约10 d,肝组织得到明显修复,约30 d肝小叶完全修复,小鼠生存期延长.结论:当归多糖对小鼠造血干细胞有一定的动员作用;当归多糖对急性酒精性肝损伤肝组织具有一定保护作用.     

当归多糖对小鼠粒单系血细胞发生的影响

采用造血祖细胞体外培养等技术研究当归多糖(AP)对小鼠粒单系血细胞发生的影响.结果表明:注射AP对正常或骨髓抑制,贫血鼠的粒单系祖细胞(CFU-GM)增殖有明显刺激作用;AP体内、外刺激制备的脾细胞条件培养液,腹腔巨噬细胞培养上清液对CFU-GM增殖具有较高刺激活性;AP体内注射制备的肌条件培养液亦对CFU-GM增殖有较高调控活性;注射AP对骨髓粒单系造血有显著促进作用;并能增高外周血白细胞.提示AP可能通过直接和/或间接途径激活造血微环境中的巨噬细胞、淋巴细胞等,也可刺激肌组织,促进其产生造血调控因子,进而促进多能造血干细胞和CFU-GM增殖分化,这或许是当归"补血"的细胞生物学机理之一.     

营养组合物促进再障小鼠造血干细胞增殖与血红蛋白合成

目的评价促进造血干细胞增殖与血红蛋白合成营养组合物对小鼠再生障碍性贫血造血功能的影响。方法BALB/c小鼠100只,适应性喂养1周后,随机分为:正常对照组、再障模型组及不同剂量的营养组合物组。采用乙酰苯肼、X射线、环磷酰胺联合应用的方法建立再生障碍性贫血小鼠模型,以铅砖屏蔽施以假照射及单纯等量生理盐水相应部位注射为正常对照组。试验第7天开始,营养组合物高、中、低剂量组小鼠每天灌胃,分别给予1445.55,963.7,674.59 mg/(kg·d)营养组合物,直至第45天,颈椎脱臼法处死小鼠,观察试验小鼠的血象、骨髓象、造血细胞内的线粒体、造血干细胞集落的形成及肝脏、脾脏的病理变化。结果营养组合物组的外周血象三系细胞、骨髓有核细胞数、造血干细胞集落的形成明显高于再障模型组(*p<0.05,*p<0.01),且呈剂量-效应关系,促红细胞生成素(EPO)因代偿作用含量显著降低(*p<0.01)。骨髓透射电镜显示,不同剂量的营养组合物组与再障模型组比较,同类造血细胞内线粒体数目明显增多(*p<0.01)。造血干细胞集落实验证明,营养组合物组集落形成率明显高于再障组。不同剂量的营养组合物组与再障模型组相比,肝脏组织水肿减轻,小叶结构明显清晰,肝细胞形态正常,脾脏虽仍有部分充血,但脾小体个数较再障模型组明显增多。结论营养组合物促进再障小鼠外周血细胞生成和骨髓造血干细胞的增殖,促进骨髓造血细胞内线粒体的增加,对肝、脾的损伤具有明显恢复作用。     

真性红细胞增多症患者骨髓单个核细胞植入再生障碍性贫血小鼠

背景：真性红细胞增多症患者骨髓的高增殖低凋亡特性使其造血干细胞植入NOD/SCID小鼠后成功分化出粒红系细胞,但其能否植入并改善再生障碍性贫血小鼠造血功能,目前国内外尚未有报道。 目的：探讨JAK2阳性真性红细胞增多症患者骨髓单个核细胞植入后对再生障碍性贫血小鼠造血重建的影响。 方法：应用注射用重组人γ-干扰素联合白消安的方法建立再生障碍性贫血小鼠模型,随机分为实验组(n=10)和对照组(n=10),给药结束后第5天实验组经尾静脉输注真性红细胞增多症患者骨髓单个核细胞悬液,对照组同法输注等容积生理盐水。输注后第14天检测小鼠外周血常规、骨髓细胞形态、骨髓组织病理变化以及小鼠外周血和骨髓内CD45+细胞的百分含量。 结果与结论：输注后第14天,实验组小鼠血细胞计数三系减少,骨髓涂片可见散在淋巴细胞和早期造血细胞,骨髓组织活检可见骨髓增生减低,少量粒系细胞及幼红细胞,未见巨核细胞,与对照组比较,造血功能无明显改善。对照组小鼠外周血及骨髓均未检测到CD45+细胞,实验组小鼠外周血及骨髓均可检测到人源化的CD45+细胞,且骨髓中CD45+细胞比外周血高,提示JAK2V617F阳性真性红细胞增多症患者骨髓单个核细胞能成功植入再生障碍性贫血小鼠体内,但血常规、骨髓涂片及活检结果显示未能明显改善骨髓造血功能。  中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

人脐血间充质干细胞移植修复骨髓造血损伤

文题释义：间充质干细胞：是一种多功能干细胞,由胚胎发育早期的中胚层发展而来,存在于人的各种组织、器官中,如骨、软骨、脂肪、外周血和肌肉等。骨髓组织中的间充质干细胞最多,但其在骨髓细胞中的比例仍很低,只有0.01%-1.00%,且年龄越大其含量越少,骨髓中的间充质干细胞分化能力也呈下降趋势。与骨髓相比,脐血中所含的间充质干细胞更加原始,因而有更强的增殖、分化能力。相较于骨髓间充质干细胞而言,人脐血间充质干细胞具有来源广泛、取材方便、无伦理方面的限制,使得人脐血间充质干细胞成为再生医学中的另一重要来源。骨髓造血损伤动物模型：建立骨髓造血损伤动物模型的方法有很多,主要分为物理方法、化学方法及物理化学方法等。物理方法包括各种射线,如X射线等,化学方法主要指以环磷酰胺为代表的烷化剂类化疗药物,而物理化学方法也叫混合性方法,联合应用放射线和化疗药物建立动物模型。  摘要背景：大多数研究间充质干细胞体外培养对造血干细胞的增殖作用和骨髓间充质干细胞移植可降低辐照引起的造血细胞死亡,增加骨髓细胞存活,修复造血功能,而少有研究人脐血间充质干细胞移植对骨髓造血损伤的修复。目的：探讨人脐血间充质干细胞对骨髓造血微环境的修复情况。方法：选用雄性BALB/c小鼠随机分为3组,实验组和对照组小鼠进行总剂量为6 Gy的X射线全身照射,建立骨髓造血损伤模型,正常组为未经处理的正常小鼠。实验组小鼠照射当天经尾静脉输入CM-DiL标记的人脐血间充质干细胞5×10⁶/只(0.2 mL),对照组和正常组经尾静脉输入生理盐水0.2 mL,移植后第1,5,7,14,21天观察外周血血象恢复情况和骨髓造血微环境修复情况。结果与结论：①外周血常规：移植后第1,5,7天,实验组和对照组小鼠与正常组小鼠比较,白细胞、血小板、红细胞计数及血红蛋白浓度进行性下降,第7天下降最为明显,移植后第14天三系较前有所恢复,移植后第21天基本恢复正常,与实验组相比,对照组三系下降更为明显,移植后第14天实验组较对照组恢复快;②骨髓涂片情况：移植后第1,5,7,14天实验组及对照组小鼠骨髓出现造血功能抑制,以第7天最为明显,移植后第14天骨髓增生较前有所恢复,实验组优于对照组;移植后第21天实验组及对照组小鼠骨髓造血功能恢复,与正常组相比无差异;③骨髓病理切片情况：移植后第1,5,7,14天实验组及对照组小鼠骨髓出现造血功能抑制;移植后第14天实验组及对照组小鼠的骨髓造血功能较前开始恢复,实验组小鼠的骨髓增生情况优于对照组小鼠, 移植后第21天实验组及对照组小鼠骨髓增生情况与正常组比较无差异;④结果表明,人脐血间充质干细胞对骨髓造血功能恢复均有明显促进作用。ORCID: 0000-0002-7547-9664(高坤莉) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

八珍汤对血虚模型小鼠造血调控因子影响的实验研究

探讨八珍汤对由环磷酰胺引起的小鼠骨髓造血功能抑制的调控作用。采用环磷酰胺致小鼠血虚模型 ,测定八珍汤对骨髓抑制小鼠外周血象及其细胞因子产生的影响。结果表明 ,八珍汤对环磷酰胺所致血虚模型小鼠骨髓细胞有促进增殖作用 ;经八珍汤诱导制备的巨噬细胞、脾细胞、肺条件培养液和骨骼肌条件培养液能促进血虚模型小鼠骨髓细胞增殖 ,促进血虚模型小鼠骨髓基质细胞分泌肿瘤坏死因子 (TNF)。八珍汤对环磷酰胺所致化疗损伤的造血调控作用可能与直接或间接刺激造血微环境的基质细胞分泌正性和负性造血生长因子有关。     

Cx43在造血调控及重建中的作用

目的:采用条件性基因敲除技术构建造血系统间隙连接蛋白43(Cx43)基因敲除(Cx43~(-/-))小鼠模型,并探讨Cx43在维持造血细胞自我更新及功能稳定中的作用。方法:将引进的2对转基因小鼠Cx43 loxP/loxP和Lyz-Cre/+杂交,选取F1雌性子代Cx43 loxP/-_Lyz-Cre/+与雄性Cx43 loxP/loxP合笼回配,提取所获得子代小鼠鼠尾组织基因组DNA,采用PCR方法鉴定小鼠基因型,RT-PCR方法筛选Cx43~(-/-)小鼠,同时分析小鼠不同器官中Cx43基因的表达差异;该类小鼠经5-氟尿嘧啶(5-FU;125 mg/kg)处理,在化疗前及化疗后第5、10和15天经眼球取血分析其血象变化。Cx43~(-/-)及Cx43~(+/+)小鼠予7.5 Gy(~(60)Co-γ)的致死量照射,剂量率1 Gy/min,照射后6 h分别给予事先准备就序的骨髓细胞,每只3×10~6细胞于尾静脉注入,2周后处死小鼠检测造血是否重建:分离股骨切片后,收集骨髓细胞进行细胞表型分析(选用的单抗为CD45R、Gr-1、CD4、 CD8a、TCRαβ、Mac-1、抗sIgM、TER119、Sca-1及CD117);同时进行体外造血细胞集落实验观察造血细胞的体外增殖能力。结果:本研究通过2种转基因小鼠间杂交和回交,成功获得造血系统选择性Cx43基因敲除小鼠;该类小鼠骨髓及外周血细胞无Cx43表达,参与造血的组织,如肝脏和脾脏中Cx43表达也显著下调(P0.01),而心脏和肾脏的Cx43表达则无影响,小鼠成年后外周血象分析并无明显异常,但应急代偿能力下降,经5-FU处理后,其造血功能恢复显著减缓,处理15 d后,Cx43~(+/+)小鼠造血功能已接近正常水平,而Cx43~(-/-)小鼠仍无明显的恢复迹象,血红蛋白、白细胞及血小板仍处低位,2者差别有统计学显著性(P0.01);体外集落试验也证实Cx43~(-/-)小鼠造血干/祖细胞的增殖能力下降,其CFU-GM或CFU-E集落数均明显少于Cx43~(+/+)小鼠(P0.01),但流式细胞术结果显示,Cx43~(-/-)小鼠骨髓中Lin~-/c-Kit~+/Sca-1~+细胞亚群数量与Cx43~(+/+)小鼠相比差异并无统计学显著性;Cx43~(-/-)小鼠在化疗或移植后其骨髓造血功能重建均延迟,且化疗15 d后骨髓切片及涂片均证实其骨髓中造血细胞增生程度明显降低,脂肪组织显著增多,而且T、B细胞发育也有异常。此外,其外周血中CD4~+CD8~+细胞比例比野生型小鼠增多(P0.05),但CD4~+T细胞显著减少(P0.01),尤其是TCRαβ亚群细胞减少最为明显(P0.01)。同样,Cx43~(-/-)小鼠外周血中CD45R~+sIgM~-细胞亚群比例与野生型小鼠相比显著减少(P0.01)。结论:骨髓中Cx43基因表达在造血干/祖细胞发育(尤其是应急状态时)具重要作用,敲除Cx43基因后造血干/祖细胞增殖减缓,造血及免疫重建功能受损。     

四种细胞移植重建C57BL雌鼠免疫功能的对比

背景：据报道肌肉来源的细胞能重建造血功能,还需要进一步观察其他系细胞是否也能重建造血功能。 目的：对比不同细胞对C57BL雌鼠造血功能恢复的作用。 方法：摘眼球取绿色荧光蛋白转基因雄鼠外周血,溶血后制成白细胞,再取脾脏、肝脏制成脾细胞和肝细胞悬液,同时制备骨髓细胞。将C57BL雌鼠半致死量射线照射后,回输4种细胞,并在移植后18,39,53 d检测外周血绿色荧光蛋白阳性细胞。同时标记CD4-PE和CD8-PE,并在移植后100 d杀鼠取骨髓检测Y染色体阳性率。 结果与结论：移植后18,39,53 d均在C57BL雌鼠外周血检测到绿色荧光蛋白阳性细胞;C57BL雌鼠外周血绿色荧光蛋白阳性细胞百分比：回输脾细胞和骨髓细胞>回输肝细胞>回输外周血白细胞。同时在回输脾细胞和骨髓细胞的C57BL雌鼠外周血中检测到绿色荧光蛋白和CD4双阳性细胞、绿色荧光蛋白和CD8双阳性细胞,而回输肝细胞和外周血白细胞的C57BL雌鼠外周血中几乎未检测到双阳性细胞。移植后100 d检测到的Y染色体阳性率与外周血中绿色荧光蛋白阳性率呈正相关。结果说明绿色荧光蛋白转基因雄鼠的外周血白细胞、脾细胞、肝细胞和骨髓细胞均有重建造血功能的作用,其中脾细胞与骨髓细胞作用相似,作用大于肝细胞,肝细胞作用大于白细胞。     

AMD3100联合地塞米松对造血干细胞的动员作用

BACKGROUND:The number of hematopoietic stem cells in the peripheral blood is very low at normal physiological state. So it is critical to mobilize hematopoietic stem cells from donor’s bone marrow into the peripheral blood. OBJECTIVE:To study the combination effect of AMD3100 and dexamethasone on the mobilization of hematopoietic stem cells in mice, thereby laying the foundation for clinical application. METHODS:C57BL/6 mice were injected with AMD3100 and dexamethasone alone or in combination. Then, hematopoietic stem cells in the peripheral blood and bone marrow were collected. CD34⁺ cell concentration in the peripheral blood and bone marrow was determined by flow cytometer and the content of leucocytes in the peripheral blood was counted by a normal method. The CFU-Mix colony formation ability of hematopoietic stem cells was identified by cell colony forming assay. RESULTS AND CONCLUSION:The concentration of CD34⁺ cells in the peripheral blood and bone marrow, the content of leukocytes in the peripheral blood and the CFU-Mix colony formation ability of hematopoietic stem cells were all improved by both AMD3100 and dexamethasone and especially their combined use. This indicates that both AMD3100 and dexamethasone could mobilize hematopoietic stem cells to migrate from the bone marrow to the peripheral blood, and when used in combination, the mobilization effect is better than that of single drug.     

骨髓间充质干细胞和心脏Sca1阳性细胞移植治疗心肌梗死的效果比较及其机制研究

目的探讨骨髓来源的间充质干细胞(MSCs)和心脏来源的Sca1阳性干细胞移植对小鼠急性心肌梗死后的心功能恢复的影响。方法分别从成年C57BL/C小鼠的骨髓分离获取骨髓间充质干细胞,从心脏利用流式分选获取Sca1阳性干细胞,并在体外进行培养、扩增。C57BL/C小鼠雄性小鼠24只,按照以下方式分组,每组6只,假手术组,生理盐水对照组,MSCs治疗组和Sca1阳性细胞治疗组。小鼠麻醉后开胸,利用结扎心脏冠状动脉的左前降支建立急性心肌梗死模型,建模成功后分别在梗死区周围心肌内注射上述细胞或者生理盐水,假手术组小鼠不结扎冠状动脉。4周后,利用心脏超声观察小鼠左心室射血分数(LVEF)以及左心室舒张末期容积,以此评估心功能改变。细胞培养至第4代,采用荧光半定量PCR的方式分析细胞表达血管内皮生长因子(VEGFa和VEGFb)的情况。结果分离培养的骨髓MSCs贴壁生长,呈梭形;Sca1阳性干细胞在心脏组织的阳性率约为18%,培养后细胞贴壁生长,成短梭形,形态较MSCs更饱满。在细胞移植治疗后,与Sca1阳性干细胞治疗相比,MSCs治疗可以增加心梗后小鼠的存活率。细胞移植治疗4周后,骨髓来源MSCs治疗组的LVEF明显高于心脏来源Sca1阳性干细胞,且更有利于减少心梗后左心室舒张末期容积的扩大,改善心肌重塑。骨髓来源的MSCs表达VEGFa和VEGFb明显高于Sca1阳性细胞。结论心脏来源的Sca1阳性干细胞和骨髓来源的MSCs均可提高LVEF,促进心功能的恢复,且后者优于前者,这可能与MSCs高表达VEGF有关。     

Hematopoietic Stem Cell Antigen-1 (Sca-1) Expression in Different Lymphoid Tissues of Female Mice Treated With GnRH Agonist

PROBLEM : Our earlier studies have demonstrated a general suppression of leukocyte maturation upon GnRH agonist treatment in mice and suggested a potential effect at an early stem cell stage of leukocyte development. METHOD : Three-week old Balb/c and C57BL/6 female mice received 50 μlg injections of Lupron depot or placebo. Sequential changes in Sca-1⁺ cells in the bone marrow, thymus, blood and spleen were studied by flow cytometry. RESULTS : In bone marrow, the absolute numbers of Sca-1⁺ cells were significantly decreased at 2 weeks in C57BL/6 mice whereas a decreasing trend was noted in Balb/c mice following agonist administration. Concomitantly, thymocytes expressing Sca-1⁺ cells were significantly increased at 2 weeks in C57BL/6 mice, but were significantly decreased in Balb/c mice. Significant decreases in Sca-1⁺ cells were also observed in spleen and blood in Balb/c mice whereas no significant differences were observed in C57BL/6 mice. CONCLUSIONS : These data suggest GnRH agonists affect hematopoietic stem cell development in mice. The effects observed vary with different genetic backgrounds. In Balb/c mice these effects are more pronounced, and appear to result in the inhibition of stem cell maturation. In contrast, GnRH agonist enhances stem cell maturation in C57BL/6 mice.     

同基因造血干细胞移植免疫重建诱导小鼠皮肤移植耐受

背景：器官移植耐受的最佳效果是能够诱导对移植抗原的特异性免疫耐受。 目的：探讨小鼠异基因皮肤移植后,通过受体同基因造血干细胞移植重建免疫系统诱导移植皮肤免疫耐受的可行性。 方法：取BALB/c小鼠骨髓。以C57BL/6小鼠为供体,BALB/c小鼠为受体,进行异基因皮肤移植;32只受体鼠随机均分为4组：移植对照组、环孢素A组、照射组和骨髓移植组。 结果与结论：照射组小鼠10 d内全部死亡,外周血白细胞数呈持续性降低;而骨髓移植组小鼠长期存活,白细胞数全身照射后6 d降到最低,之后持续性增高,照射后21 d与环孢素A组比较差异无显著性意义(P > 0.05),移植皮肤存活时间显著长于其他各组(P < 0.01),其淋巴细胞浸润及组织结构破坏明显减少,小鼠脾细胞对供体小鼠脾细胞增殖反应显著降低。说明同基因骨髓细胞移植重建免疫系统可显著延长小鼠移植皮肤存活时间,可诱导供者特异性免疫耐受。     

同种异基因骨髓细胞移植诱导嵌合体小鼠生成

采用C57BL/J和BALB/c两种小鼠进行骨髓细胞移植。移植前受体小鼠经 6 0Gy6 0 Coγ射线照射。用细胞染色法和流式细胞术分析了射线对小鼠淋巴细胞的损伤强度和照射后移植了骨髓细胞的小鼠在不同时间内的淋巴细胞亚群变化。结果表明 ,(1 ) 6 0Gyγ射线照射受体鼠 ,能杀伤 95 5 %的外周淋巴细胞 ,但是不影响自身H 2Kb 分子在淋巴细胞表面表达的百分数。残留细胞中CD3+ T细胞、NK1 1 + 淋巴细胞、CD3+ /NK1 1 + 淋巴细胞的阳性率分别由照射前的 40 44%增加到45 30 %、 1 1 3 %增加到 37 41 %和 1 0 7%增加到 5 86 % (P≤ 0 0 1 ) ;(2 )小鼠的淋巴细胞数量从照射后 30d开始恢复 ,到1 90d达到正常值 ;(3 )照射后进行同种异基因骨髓细胞移植后的第 60天 ,受体淋巴细胞表面自身H 2Kb 抗原表达下降 ,CD3+ /NK1 1 + 淋巴细胞百分数增加。随H 2Kb 的抗原表达的恢复 ,CD3+ /NK1 1 + 淋巴细胞百分数下降 ;(4)在细胞移植的第 1 90天 ,受体小鼠 (黑色 )表型呈现出供体鼠 (白色 )颜色特征。在嵌合体小鼠外周淋巴细胞中 ,有 2 5 %为供体H 2Kd 阳性细胞 ,CD3+ /NK1 1 + 淋巴细胞百分数为 1 88% ,明显高于正常值 (P≤ 0 0 1 )。以上结果表明 ,6 0Gy6 0 Coγ射线照射能诱导免疫耐受 ,其耐受性的形成可能与最初保     

Analysis of peripheral immune tolerance uncovers a mouse strain-dependent in situ type of graft tolerance

We screened various mouse strains [C57BL / 6, BALB / c, DBA / 2, CBA / Ca, (CBAxC57L / 6)F1, SJL, C3H] for induction of peripheral immune tolerance. Only CBA / Ca mice treated with anti-CD4 + CD8 monoclonal antibodies and grafted with allogeneic skin showed long-term graft survival (150 to > 200 days). Interestingly, T cells from the tolerant CBA / Ca mice rejected bone marrow / spleen cells of the skin graft donor strain and caused lethal graft-versus-host disease when transplanted to the donor strain. Furthermore, peripheral tolerance was easily broken: CBA / Ca mice could be reactivated to reject their tolerated grafts via immunization with (graft donor x recipient strain)F1 bone marrow cells. Thus, in contrast to the generalized nature of central tolerance, our experiments show that peripheral immune tolerance is strain dependent and locally restricted to graft tissue.     

Early regulation of CD8 T cell alloreactivity by CD4+CD25- T cells in recipients of anti-CD154 antibody and allogeneic BMT is followed by rapid peripheral deletion of donor-reactive CD8+ T cells, precluding a role for sustained regulation

While acquisition of regulatory function by CD4+CD25- T cells has been reported following antigenic stimulation, "naturally occurring" regulatory CD4+ T cells (Treg) are believed to express CD25. We examined the mechanisms involved in peripheral CD8 T cell tolerance by induction of mixed chimerism using non-myeloablative conditioning with low-dose (3 Gy) total body irradiation and anti-CD154 antibody. Recipient CD4+ T cells were initially required for the induction of CD8 cell tolerance, but were not needed beyond 2 weeks. Depletion of CD25+ Treg prior to bone marrow transplantation and blockade of IL-2 with neutralizing antibody did not impede tolerance induction. Tolerance was dependent on CTLA4, but not on IFN-gamma. In C57BL/6 mice containing a fraction of 2C TCR transgenic CD8+ T cells, which recognize the MHC class I alloantigen Ld, induction of chimerism with L(d+), but not Ld-, bone marrow cells led to deletion of peripheral 2C+ CD8+ cells within 1 week in peripheral blood and spleen. Complete deletion required the presence of recipient CD4+ T cells. Thus, a novel, rapid form of regulation by CD4+CD25- T cells permits initial CD8 T cell tolerance in this model. Rapid peripheral deletion of donor-specific CD8 T cells precludes an ongoing requirement for CD4 T cell-mediated regulation.     

骨髓源干细胞参与的血管内皮更新

背景：研究表明骨髓源干细胞可塑性强,但其参与组织更新及修复的机制在转分化及细胞融合间尚存在争议。 目的：通过性别交叉骨髓移植建立雌雄嵌合体小鼠模型,观察骨髓源性干细胞是否参与内皮细胞的更新并探讨其可能的机制。 方法：采用雌性C57BL/6-GFP小鼠为供体,雄性C57BL/6小鼠为受体进行骨髓移植建立嵌合体小鼠,并应用流式细胞术分析骨髓嵌合情况。骨髓移植后20周采用Y染色体荧光原位杂交法对脑、肾、肝、脾及心脏组织Y染色体进行标记,荧光显微镜观察各组织器官中血管内皮细胞Y染色体及绿荧光蛋白表达情况。 结果与结论：①嵌合体小鼠骨髓细胞流式细胞学检测显示移植骨髓后1周骨髓GFP⁺细胞为(7.48±1.38)%、4周时达(73.92±5.57)%,结果表明成功建立性别交叉骨髓移植模型。②骨髓移植后20周嵌合体小鼠脑、肾、肝和脾组织血管壁可见绿荧光蛋白表达,且部分细胞同时表达Y染色体,表明发生骨髓源细胞和血管内皮细胞融合。脑实质及心肌组织未见绿荧光蛋白表达。结果提示骨髓源干细胞可能通过细胞融合机制参与不同组织器官中血管内皮细胞的更新。     

The effect of an immunoglobulin mu transgene on B cell maturation.

In mu 17.2.25-transgenic (M54) mice the absolute number of surface IgM (sIgM) B cells in lymphoid organs is drastically reduced compared to normal C57BL/6 mice and a high frequency of B cells express the immunoglobulin (Ig) encoded by the transgene rather than endogenous Ig on the surface. To determine the effect of a mu transgene on B cell development, adoptive cell transfers were performed using mu transgenic (M54) bone marrow and fetal liver cells. The data presented support the following conclusions: (a) adult transgenic bone marrow contains functional B cell precursors able to mature and repopulate the spleen and peritoneum of recipient mice. The relative frequency of transgene (sIgMa) and endogenous (sIgMb) surface sIgM-positive B cells reconstituted by transgenic bone marrow in allotype-matched C57BL/6 recipients is the same as in the M54 donors; (b) serum analysis indicates that transgenic bone marrow donor cells can reconstitute B cells in congenic and severe combined immunodeficient (SCID) recipient mice; (c) transgenic fetal liver cells are not a richer source of precursors for B cells expressing endogeneous Ig; (d) in transgenic mice sIgM+ B cells are not restricted to the CD5+ phenotype, however, the relative frequency of sIgMb B cells that are CD5+ is higher in transgenic than normal mice; and (e) bone marrow cells from adult normal and transgenic mice are able to generate CD5+ B lymphocytes in the spleen and peritoneum of allotype-congenic and neonatal SCID recipient mice. The results indicate that the presence of a complete mu heavy chain transgene does not result in a selective developmental block of "conventional" bone marrow-derived pre-B and B cells.