愈宁散对CITP模型小鼠外周血共刺激分子CD86影响的实验研究

[目的]通过观察应用愈宁散后CITP模型小鼠外周血中血小板计数及共刺激分子CD86水平的变化,初步探讨愈宁散对CITP模型小鼠的作用机理。[方法]采用注射豚鼠抗小鼠血小板血清(APS)的免疫造模方法,建立BALB/c小鼠CITP模型;应用愈宁散对模型小鼠进行实验研究,全自动血细胞计数仪检测CITP模型小鼠血小板计数;流式细胞仪测定CITP模型小鼠外周血CD86的水平。[结论]愈宁散能升高模型小鼠外周血小板数,降低CITP模型小鼠外周血中CD86水平,对BALB/c小鼠CITP动物模型具有较好的治疗效果。     

蚕砂提取物联合环孢菌素A治疗再生障碍性贫血的实验研究

目的:研究蚕砂提取物联合环孢菌素A治疗再障的作用机制。方法:建立免疫介导的小鼠再障模型,随机分为4组,每组10只。对照组胃饲生理水,SCC组胃饲SCC,CsA组胃饲CsA,SCC+CsA组胃饲SCC+CsA,连续胃饲13天,检测外周血象及外周血CD3+、CD4+、CD8+、TNF-α、IFN-γ、IL-6水平。结果:蚕砂提取物联合环孢菌素A灌胃,可提高小鼠外周血白细胞、血红蛋白、血小板,有效调节再障小鼠外周血CD3+、CD4+、CD8+、TNF-α、IFN-γ、IL-6水平。结论:蚕砂提取物联合环孢菌素A治疗再障具有协同增效作用。     

二号再生胶囊治疗特发性血小板减少性紫癜的实验研究

目的:探讨二号再生胶囊治疗特发性血小板减少性紫癜(ITP)的疗效.方法:用免疫法建立小鼠ITP模型,设正常对照组、豚鼠血清对照组、模型组、阳性药组、低剂量实验组和高剂量实验组共6组,实验组和阳性药组灌胃给予不同剂量的药物,其他各组给予等量生理盐水.实验过程中观察小鼠一般情况的改变.给药10d后处死小鼠,检测小鼠体重、脾脏和胸腺指数、血象、骨髓象、脾脏病理和T淋巴细胞亚群等各项指标的改变.结果:模型组小鼠出现紫癜和胃肠道出血症状,血小板显著降低,与其他各组相比有显著性差异(P<0.01),并有骨髓巨核细胞数增多,表现出骨髓细胞成熟障碍.实验组和阳性药组对ITP小鼠有明显的治疗作用,表现为血小板明显增多,与模型组相比差异显著(P<0.01), 骨髓细胞成熟障碍减轻,巨核细胞数恢复正常,尤其以产板巨核细胞显著增多(P<0.01),脾脏指数降低,外周血CD8降低,CD4/CD8比值升高.各实验组中以高剂量实验组效果最为明显.结论:二号再生胶囊治疗特发性血小板减少性紫癜模型小鼠疗效显著,尤其以升高血小板的作用最为明显.其作用机制与调节机体的免疫功能有关.     

雷公藤多苷对特发性血小板减少性紫癜小鼠T细胞亚群的影响

目的:通过雷公藤多苷(TG)对特发性血小板减少性紫癜(ITP)小鼠的T细胞亚群的影响及疗效观察,探讨雷公藤多苷治疗ITP作用机制。方法:采用现代医学免疫法腹腔注射豚鼠抗小鼠血小板抗血清(APS),建立ITP动物模型。小鼠随机分为5组,每组12只,分别为正常组,模型组,TG大、小剂量组,泼尼松组,均从第1次注射APS36h后灌胃,每日1次,连续10d,实验结束后,检测外周血象、骨髓象,流式细胞术检测T淋巴细胞亚群。结果:雷公藤多苷大剂量组有明显回升血小板、降低骨髓巨核细胞、CD8+明显降低及CD4+/CD8+上升的作用。结论:大剂量雷公藤多苷对ITP模型小鼠有明显治疗作用,使造模后动物死亡率明显降低,血小板及血红蛋白明显上升白、骨髓巨核细胞数明显下降,T淋巴细胞亚群得以改善,提示其疗效可能是通过对细胞免疫功能的调节而发挥作用的。     

益气通阳汤对血小板减少性紫癜小鼠模型的作用

目的:观察益气通阳汤对特发性血小板减少性紫癜(ITP)模型小鼠外周血血小板(PLT)数、骨髓巨核细胞数和巨核细胞数分类、外周血T,B淋巴细胞亚群变化的影响。方法:设计用豚鼠抗小鼠血小板血清(APS)连续注射小鼠,造成ITP小鼠模型,分别给益气通阳汤(150,75,37.5 g.kg-1.d-1)组,正常对照组、模型对照组给予生理盐水,连续给药14 d。应用血细胞分析仪测定PLT、显微镜观察巨核细胞形态分类、塑料包埋法计数小鼠股骨巨核细胞数、流式细胞仪检测T,B淋巴细胞亚群。结果:模型小鼠外周血PLT数持续明显减低、骨髓巨核细胞数增多、其中原幼巨核细胞比例明显增高,产板巨核细胞比例明显减低,外周血CD3+CD4+T细胞减低,CD3+CD8+T细胞明显增高,CD4+/CD8+明显降低。给予益气通阳汤治疗小鼠的PLT明显增高、巨核细胞数减少、产板巨核细胞比例明显增高,CD3+CD4+T细胞增高,CD3+CD8+T细胞比例降低,CD4+/CD8+升高。结论:益气通阳汤能提升ITP模型小鼠PLT数,提高产板巨核细胞比例,改善T淋巴细胞的失衡,达到治疗ITP的作用。     

紫茜胶囊对ITP模型小鼠外周血血小板相关抗体的影响

目的:观察紫茜胶囊对原发性血小板减少性紫癜(ITP)模型小鼠血小板相关抗体的变化,来阐述紫茜胶囊治疗ITP的药理作用。方法:采用注射豚鼠抗小鼠血小板血清(APS)的免疫造模方法,建立BALB/C小鼠免疫性血小板减少性紫癜模型,选用紫茜胶囊对模型小鼠进行实验研究,并用泼尼松、升血小板胶囊作为阳性对照药,观察用药前后血小板相关抗体的变化。结果:模型小鼠血小板降低,而血小板相关抗体PAIgG、PAIgM、PAIgA均升高;紫茜胶囊、泼尼松和升血小板胶囊都能不同程度降低血小板相关抗体,与模型对照组相比有显著差异(P<0.05);而紫茜胶囊组与泼尼松组、升血小板胶囊组相比无显著差异(P>0.05)。结论:紫茜胶囊能降低外周血血小板相关抗体,减少血小板的破坏。     

紫茜胶囊对原发性血小板减少性紫癜鼠外周血的影响研究

目的：通过观察用紫茜胶囊治疗后外周血各项指标的变化，来阐述紫茜胶囊治疗原发性血小板减少性紫癜（ITP）的药理作用。方法：采用注射豚鼠抗小鼠血小板血清（APS）的免疫造模方法，建立BALB／C小鼠免疫性血小板减少性紫癜模型，选用紫茜胶囊对模型小鼠进行实验研究，并用泼尼松、升血小板胶囊作为阳性对照药，观察用药治疗后外周血各项指标的变化。结果显示：①紫茜胶囊、泼尼松、升血小板胶囊提高模型小鼠外周血血小板数，降低模型小鼠白细胞数，与模型对照组相比有显著差异（P〈0．05）；②紫茜胶囊尤其是高剂量组能升高模型小鼠外周血红细胞数、血红蛋白，与模型组相比有显著差异（P〈0．05）。结论：紫茜胶囊能提高模型小鼠外周血血小板数及外周血红细胞数，降低模型小鼠白细胞数，能升高模型小鼠外周血血红蛋白。     

紫茜胶囊对CITP患者骨髓巨核细胞及IL-4的影响

目的:观察紫茜胶囊对慢性特发性血小板减少性紫癜(CITP)患者骨髓巨核细胞及外周血细胞因子IL-4的影响,进而探讨紫茜肢囊治疗ITP的作用机理。方法:将CITP患者分为紫茜胶囊治疗组和升血小板胶囊对照组,观察治疗前后骨髓巨核细胞及IL-4变化情况。结果:CITP患者,治疗后血小板计数升高,骨髓原、幼巨核和颗粒巨核细胞明显减少,产板巨核细胞明显增多,IL-4水平下降。结论:紫茜胶囊具有促进巨核细胞成熟,提高血小板计数,调节IL-4水平的作用。     

补肾活血方对慢性特发性血小板减少性紫癜小鼠血小板功能的影响

目的:观察补肾活血方对血小板活化和聚集相关糖蛋白表达的影响,探讨该方是否能够通过改善血小板功能进而治疗慢性特发性血小板减少性紫癜(CITP)。方法:将60只小鼠随机分为正常对照组、CITP模型组、醋酸泼尼松组和补肾活血方组。通过被动免疫造模法成功建立CITP小鼠模型,然后分别用0.9%生理盐水、醋酸泼尼松和补肾活血方干预14 d,采用全自动动物血液分析仪检测小鼠外周血血小板数量和凝血时间;采用流式细胞仪检测各组小鼠血小板活化和聚集相关糖蛋白(CD41、CD61、CD62p、PAC-1)的表达。结果:与正常对照组比较,CITP模型组血小板显著下降、凝血时间显著延长。醋酸泼尼松、补肾活血方干预14 d后,与CITP模型组比较,其血小板显著增加,凝血时间显著下降;其糖蛋白CD41、CD61、CD62p和PAC-1的荧光强度和阳性率显著下降。结论:补肾活血方能在一定程度上有效增加血小板数量和降低凝血时间,并且能够通过改变血小板糖蛋白的表达进而改善血小板的功能,减轻患者的出血。     

止血、消瘀、宁血、补虚法对CITP患者调节性T细胞影响的研究

目的:探讨止血、消瘀、宁血、补虚法对慢性特发性血小板减少性紫癜(CITP)患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞(Tr)的影响。方法:采用血细胞计数仪和流氏细胞术测定紫癜圣愈散治疗前后对患者及正常对照组外周血血小板计数、CD4~+CD25~+Foxp3~+表达水平。结果:治疗组治疗前CD4~+CD25~+Foxp3~+在淋巴细胞中的比例及血小板计数与正常对照组相较明显降低,差异显著(P0.05);治疗后CD4~+CD25~+Foxp3~+水平、血小板计数,比治疗前明显提高,差异显著(P0.05);治疗后CD4~+CD25~+Foxp3~+表达水平虽有所提高,但未达到正常,与正常对照组比较,差异显著(P0.05)。结论:CITP患者CD4~+CD25~+Foxp3~+细胞的免疫抑制作用受损,可能参与了CITP的发病,止血四法可能通过提高CD4~+CD25~+Foxp3~+细胞表达水平,进而抑制异常的免疫状态,使血小板计数提升,发挥其治疗作用。     

升板合剂提升血小板作用的实验研究

目的:观察升板合剂的提升血小板作用,探讨升板合剂治疗原发性血小板减少性紫癜的作用机制。方法:用升板合剂每日1次给健康及60Co照射小鼠和家兔灌胃,检测动物外周血小板计数,出、凝血时间,骨髓巨核细胞分化及骨髓细胞增殖情况。结果:升板合剂可刺激骨髓细胞增殖,促进骨髓巨核细胞的分化与成熟,明显提升正常家兔和小鼠以及60Co照射所致血小板减少症动物模型的血小板计数,缩短小鼠出、凝血时间。结论:升板合剂对60Co照射所致血小板减少症动物模型有良好的保护作用。     

天升元口服液对再生障碍性贫血模型小鼠血液 T淋巴细胞异常和造血调控因子GM-CSF水平的影响

目的:观察天升元口服液对免疫介导的再生障碍性贫血(immune-mediated aplastic anemia,IAA)模型小鼠外周血T淋巴细胞异常和正负造血调控因子水平的影响,以探讨其作用机制。方法:给予IAA模型小鼠天升元口服液(含生药6.2,12.4 g.kg-1.d-1)ig,14 d后,通过流式细胞术检测外周血CD4+,CD8+及其比值,并结合荧光免疫分析法检测外周血中造血正负调控因子(GM-CSF,TNF-α)的含量。结果:天升元口服液高剂量组CD8+及CD4+/CD8+分别为(15.89±8.32)%和(2.34±1.10),(n=7),模型对照组CD8+及CD4+/CD8+分别为(35.13±13.13)%和(0.92±0.33)(n=12),组间有非常显著差异(P<0.01～0.001);同时,天生元口服液高剂量组的GM-CSF含量(1 400±670)ng.L-1,(n=10),也显著高于模型对照组(665±276)ng.L-1,(n=12,P<0.01)。此外,TNF-α有一定程度的降低。结论:天升元口服液通过降低CD8+T淋巴细胞的产生,提高CD4+/CD8+比值,促进T淋巴细胞亚群的平衡,同时促进造血正调控因子(GM-CSF)的产生,从而呈现对IAA模型小鼠的治疗作用。     

葶苓合剂治疗慢性支气管炎的实验研究

目的:初步探讨葶苓合剂治疗慢性支气管炎的作用机理.方法:通过"香烟、SO2交替熏法"建立慢性支气管炎动物模型,光镜下观察各组病理组织切片炎性细胞的浸润、分类及支气管各超微结构改变情况,观察各组实验动物模型在使用葶苓合剂治疗过程中对小鼠血清IgA、IgG、1gM和外周血CS3 、CS4 CD8 的含量变化及小鼠淋巴细胞转化率、血红蛋白、白细胞计数的影响,分析、比较各组间的相关性.结果:葶苓合剂能明显提高小鼠血清IgA、IgG、IgM的含量,明显提高小鼠外周血CD3 、CD4 、CD8 的含量和明显提高小鼠血红蛋白、白细胞计数值;能减少炎性细胞浸润,修复上皮组织损伤、减少粘液腺体的分泌.结论:葶苓合剂能调节小鼠免疫功能、提高小鼠免疫能力并具有明显的抗炎作用.     

补肺汤治疗支气管哮喘及对免疫功能的影响

目的:观察益气健脾、补肺纳肾类中药治疗支气管哮喘缓解期的疗效及对免疫功能的影响。方法:采用补肺汤(黄芪、党参、白术、防风、蛤蚧等)治疗本病35例,并设对照组,观察两组疗效及外周血T淋巴细胞亚群和肺功能的变化。结果:治疗组总有效率为94.28%,显著优于对照组74.28%(P<0.05);治疗后治疗组CD4+水平降低,CD8+水平升高,CD4+/CD8+下降,与对照组比较均有显著差异(P<0.05);治疗组治疗后肺功能(FVC%、FEV1、FEV1%)的改善方面明显优于对照组(P<0.05)。结论:本方法对本病有益气健脾,补肺纳肾的功效,可缓解症状、改善肺功能及调节免疫的作用。     

桑椹三仙胶对慢性特发性血小板减少性紫癜患者B淋巴细胞表达共刺激分子的影响

目的:观察桑椹三仙胶对慢性特发性血小板减少性紫癜患者B淋巴细胞表达共刺激分子的影响。方法:采用流氏细胞术测定桑椹三仙胶治疗前后CITP病人及正常对照组外周血CD19+阳性细胞CD80+和CD86+的表达。结果:CITP患者疗前外周血B淋巴细胞共刺激分子CD80+、CD86+表达阳性率较正常组相应的共刺激分子表达阳性率明显增高,具有显著性差异(P0.01)。桑椹三仙胶治疗后CITP患者外周血B淋巴细胞共刺激分子CD80+、CD86+表达阳性率较治疗前有所降低,但仍未达正常水平,与疗前和正常组比较均有显著性差异(P0.01)。结论:CITP患者B淋巴细胞共刺激分子CD80+、CD86+的异常表达可能参与了CITP的发病机制。桑椹三仙胶可能通过纠正共刺激分子异常表达、调节抗原递呈细胞的抗原呈递功能从而达到治疗目的。     

健脾理气方药对荷瘤小鼠外周血T淋巴细胞亚群的影响

目的:探讨健脾理气方药对荷瘤小鼠免疫功能的调节作用及其抗肿瘤机制。方法:建立小鼠脾虚肝郁的动物模型,再选用小鼠Hca-F腹水型肝癌细胞株,制作肿瘤动物模型,观察健脾理气方药对荷瘤小鼠外周血中T淋巴细胞亚群的调节作用。结果:健脾理气方药可以使CD4+TP细胞表达增加,CD+8T细胞表达降低。结论:健脾理气方药能够通过调节荷瘤小鼠异常的免疫状态而发挥其抗肿瘤作用。     

四君子汤合当归补血汤提高化疗荷瘤小鼠免疫功能的实验研究

目的:观察四君子汤合当归补血汤对环磷酰胺化疗荷瘤小鼠的免疫保护作用。方法:建立小鼠肉瘤S180移植性肿瘤模型,24 h后随机分为5组:模型组、环磷酰胺(CTX)组及四君子汤合当归补血汤低、中、高剂量~+CTX组。各组接种肿瘤细胞24 h后开始用药,1次/d,连续10 d。分别检测溶血素、碳粒廓清速率、体温及外周血c AMP/c GMP、血小板和T细胞亚群,处死小鼠,检测腹腔巨噬细胞吞噬功能和骨髓有核细胞数。结果:与模型组比较,CTX组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、外周血CD3~+、CD4~+T细胞比例、CD4~+/CD8~+比值、外周血c AMP/c GMP、血小板计数和骨髓有核细胞显著降低(P0.05),CD8~+T细胞比例升高(P0.05)。与CTX组比较,四君子汤合当归补血汤各组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、外周血CD3~+、CD4~+T细胞比例、CD4~+/CD8~+比值、外周血c AMP/c GMP、血小板计数和骨髓有核细胞均有不同程度提高(P0.05),CD8~+T细胞比例均有不同程度降低(P0.05)。结论:四君子汤合当归补血汤能拮抗化疗引起的机体免疫功能下降,增强机体免疫功能。     

补肾填髓活血方对慢性特发性血小板减少性紫癜患者T细胞亚群的影响

目的:观察补肾填髓活血方在慢性特发性血小板减少性紫癜(ITP)治疗中对T细胞亚群的影响。方法:治疗组30例慢性ITP病例,给予补肾填髓活血方(阿胶、仙灵脾、巴戟肉、菟丝子、女贞子、枸杞子、参三七等)治疗3个月,观察治疗前后血小板计数、CD3、CD4、CD8、CD4/CD8水平的变化,并与西药强的松对照组23例进行比较。结果:与治疗前相比,治疗组和对照组均能提高血小板计数(P<0.05),但两组之间没有统计学差异(P>0.05);治疗组CD3、CD4、CD4/CD8有不同程度提高CD8水平有所下降(P<0.05);对照组CD3、CD4/CD8较前提高,CD4、CD8水平降低(P<0.05),两组相比在提高CD3、CD4/CD8,降低CD8水平方面无统计学差异(P>0.05)。结论:补肾填髓活血方治疗慢性ITP的疗效确切,对T细胞亚群免疫功能有调节作用,可能是其发挥治疗作用的机制,尚需进一步深入研究。     

慢性特发性血小板减少性紫A治疗前后调节性T细胞及其FOXP3表达的变化

目的:探讨桑椹三仙胶对慢性特发性血小板减少性紫癜(CITP)患者外周血调节性T(Treg)细胞及FOXP3表达的影响.方法:采用流氏细胞术测定桑椹三仙胶治疗前后CITP病人及正常对照组外周血CD4+ CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)在外周血中的表达及CD4+ CD25+ FOXP3+在CD4+CD25+ Treg的比例.结果:CITP组疗前CD4+CD25+Treg在淋巴细胞中的比例及CD4+CD25+ FOXP3+在CD4+ CD25+Treg的比例较正常对照组均明显降低,具有显著性差异(P<0.01);桑椹三仙胶治疗后CD4+CD25+Treg水平与治疗前相比明显提高,具有显著性差异(P<0.01),CD4+CD25+FOXP3+也有所提高,但与疗前比较无显著性差异(P>0.05).治疗后CD4+ CD25+ Treg,CD4+ CD25+FOXP3+表达水平虽有所上升,但未恢复正常,与正常组比较,仍有显著差异(P <0.01).结论:CITP患者CD4+CD25+Treg细胞的免疫抑制作用受损可能参与了CITP的发病,桑椹三仙胶可能通过提高CD4+CD25+Treg细胞及其抑制性标志物的表达,进而抑制异常的免疫状态发挥其治疗作用.     

紫癜圣愈散调节慢性特发性血小板减少性紫癜外周血CTLA-4水平的研究

目的:探讨CITP患者外周血CTLA-4表达比例的变化与发病机制的关系,分析紫癜圣愈散治疗CITP可能的作用机制。方法:采用流式细胞术检测CITP患者治疗前后外周血CD4+CD2+5T细胞中CTLA-4的表达比例。结果:治疗组和对照组两组患者在经过治疗后血小板计数分别与治疗前比较,均有统计学意义(P<0.05),组间比较无统计学意义(P>0.05)。两组外周血CD4+CD2+5 T细胞中CTLA-4+细胞的表达比例治疗后与治疗前比较,均有显著差异(P<0.05),治疗前后均明显低于正常组(P<0.01),组间比较无显著差异(P>0.05)。结论:CITP患者CTLA-4表达比例低于正常组,紫癜圣愈散和泼尼松均可上调其表达比例,提示紫癜圣愈散可能是通过调节细胞免疫功能而发挥其治疗作用。