反相高效液相色谱法测定骆驼蓬总碱片中去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱的含量

目的 :建立RP HPLC法测定骆驼蓬总生物碱片中去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱含量的方法。方法 :以甲醇 0 .0 1mol·L-1硫酸铵溶液 二乙铵 (6 0∶40∶0 .4,用磷酸调 pH至 (3.8± 0 .1)为流动相 ,进样量 2 0 μl,分别在 32 0 ,372nm处用RP HPLC法测定去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱的含量。结果 :去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱分别在浓度为 2～ 2 5 μg·ml-1的范围内与峰面积成良好的线性关系。方法的回收率分别为 (10 1.8± 1.8) %和 (10 1.3± 1.4) %。结论 :该法简便 ,准确 ,可靠     

骆驼蓬种子中骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱的制备与鉴定

目的从骆驼蓬种子中大量制备骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱单体。方法取骆驼蓬种子压榨后的油饼,用体积分数为95%的乙醇提取获得含生物碱的浸膏,该浸膏先后用体积分数为10%的硫酸和25%的氨水处理得到骆驼蓬种子总生物碱,再用氧化铝柱层析和溶剂重结晶等方法进一步纯化,得到骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱单体。结果目标产物经过1 H-NMR、13 C-NMR、IR和ESI-MS等定性分析,再采用HPLC/DAD定量分析,骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱的产物色谱图中以面积归一化法计质量分数达到98.7%和99.8%。结论该方法简便、有效,可用于骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱对照品的制备。     

高效液相色谱法测定 哈林胶囊中去氢骆驼蓬碱与骆驼蓬碱含量

［摘要］目的建立高效液相色谱（HPLC）法测定哈林胶囊中去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱含量的方法。方法以甲醇 0.01moL·L 1硫酸铵溶液（40：60，用磷酸调pH至4.0）为流动相，进样量10 μL，在320 nm处用HPLC法测定去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱的含量。结果去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱浓度均在1～50 μL·mL 1范围内与峰面积成良好的线性关系。回收率分别为 98.37% 和 99.28%，RSD分别为1.39%和0.82%。结论该方法简便，准确，可靠。     

去氢骆驼蓬碱衍生物的合成和抗肿瘤活性研究

目的 合成去氢骆驼蓬碱衍生物并研究其抗肿瘤活性。方法 以去氢骆驼蓬碱为原料,在NaH催化下先用卤代烷烃对9位氮原子进行烷基化,然后用溴化苄将2位氮原子进行季铵化,得到一系列去氢骆驼蓬碱衍生物,用 MTT 法考察其对肿瘤细胞的抑制作用。结果 合成了6个新的去氢骆驼蓬碱衍生物,结构经1H-NMR、MS和红外光谱确证。与去氢骆驼蓬碱相比,所合成的化合物均有明显的抗肿瘤活性。结论 初步药理实验结果表明去氢骆驼蓬碱9-苯丙基取代能够明显提高抗肿瘤效果。     

盐酸去氢骆驼蓬碱血浆蛋白结合率的测定

目的:测定盐酸去氢骆驼蓬碱的血浆蛋白结合率.方法:采用超滤法和高效液相色谱法对盐酸去氢骆驼蓬碱的血浆蛋白结合率进行测定.结果:盐酸去氢骆驼蓬碱与小牛血清白蛋白、人血清白蛋白和正常人血浆的蛋白结合率分别为( 74.6 ± 9.8 )%、( 69.1 ± 8.7 )%、( 87.1 ± 5.3 )%.结论:盐酸去氢骆驼蓬碱与血浆蛋白具有中等强度的结合.     

盐酸去氢骆驼蓬碱平衡溶解度及溶解速率常数的测定

测定了盐酸去氢骆驼蓬碱在水和无水乙醇中的平衡溶解度以及在水和0.1mol/L盐酸中的溶解速率常数.平衡溶解度分别为39.17和7.686mg/ml,溶解速率常数分别为2.923和2.733mg·min-1·cm-2.     

去氢骆驼蓬碱脂质体的制备和体外释放特性

目的：研究去氢骆驼蓬碱（harmine,HM）脂质体的制备工艺和体外释放特性。方法：运用薄膜分散-pH值梯度法制备HM．脂质体以及高速离心法分离脂质体与游离药物,并测定其包封率;借助综合评分法,评价其粒径、多分散系数、包封率、载药量指标;运用正交优化实验法考察磷脂-胆固醇与药-脂比、超声时间、外相pH值对脂质体的影响,述选最优工艺处方,评价脂质体与原料药的体外释放情况。结果：最优处方因素为磷脂-胆固醇比值为4：1,超声时间为300S,药-脂比值为1：5,外相pH值为6,8,即X13X23X32X43,经实验验证其粒径为（155.0±14．5）nm,多分散系数为（0．148±0．011）,包封率为（80．90±0．01）％,载药量为（11．16±0．01）％;其原料药0．5h累积释放百分比大于50％,不到2h已全部释放,而优化后的脂质体在1h内其累积释放百分比大于50％,4h后释放完成。结论：采用薄膜分散-pH值梯度法,以最优处方制得HM-脂质体,其粒径大小适中、形态均匀,包封率和载药量相对较高,体外释放显示具有较好的缓释特性。     

去氢骆驼蓬碱体外抗消化道肿瘤活性和对小鼠脾细胞增殖反应的抑制作用

目的 研究骆驼蓬中代表性的成分去氢骆驼蓬碱体外对抗7个消化道肿瘤株活性和对小鼠脾细胞增殖反应的抑制作用,为临床上的用药提供理论依据和参考佐证.方法 采用MTT法测试7个消化消化道肿瘤株活性并对量效关系进行了总结;用对小鼠脾细胞增殖反应的抑制作用与临床常见的抗肿瘤药顺铂与羟基喜树碱的作用进行比较.结果 去氢骆驼蓬碱对抗7个消化道肿瘤株活性明显,其IC50值分别为TE1 3.44、TE13 3.31、BGC823 3.52、HCG27 3.27、AsPC1 3.59、H22 3.33、Colon26 3.79 (μg·mL-1);对小鼠脾细胞增殖反应的抑制作用较羟基喜树碱与顺铂小.结论 去氢骆驼蓬碱可以应用于消化消化道肿瘤治疗而且其结构可为抗肿瘤活性化合物设计的模式之一.     

去氢骆驼蓬碱体外抗消化道肿瘤活性和对小鼠脾细胞增殖反应的抑制作用

目的研究骆驼蓬中代表性的成分去氢骆驼蓬碱体外对抗7个消化道肿瘤株活性和对小鼠脾细胞增殖反应的抑制作用,为临床上的用药提供理论依据和参考佐证。方法采用MTT法测试7个消化消化道肿瘤株活性并对量效关系进行了总结;用对小鼠脾细胞增殖反应的抑制作用与临床常见的抗肿瘤药顺铂与羟基喜树碱的作用进行比较。结果去氢骆驼蓬碱对抗7个消化道肿瘤株活性明显,其IC₅₀值分别为TE1 3.44、TE13 3.31、BGC823 3.52、HCG27 3.27、AsPC1 3.59、H22 3.33、Colon26 3.79(μg.mL^-1);对小鼠脾细胞增殖反应的抑制作用较羟基喜树碱与顺铂小。结论去氢骆驼蓬碱可以应用于消化消化道肿瘤治疗而且其结构可为抗肿瘤活性化合物设计的模式之一。     

高效液相色谱-荧光检测法测定红景天苷的含量

目的:建立高效液相色谱-荧光检测法测定红景天苷的含量。方法:色谱柱为 Eclipse XDB-C_8柱(4.6 mm × 150 mm,5μm),流动相为水-甲醇(85:15),流速为1.0 mL·min~(-1),柱温为25℃,荧光检测波长λ_(EX)=220 nm,λ_(EM)=315 nm。结果:该方法的线性范围为1.00～500 ng(r=0.999 9)。平均加样回收率为 99.2％,RSD为 1.4％(n=5)。最低检测限为1.5 pg。结论:本方法快速,简单,灵敏度极高。     

高效液相色谱—荧光检测法测定异丙酚的血药浓度

目的:建立测定异丙酚血药浓度的方法。方法:应用反相高效液相色谱技术,血浆样品经10％三氯乙酸甲醇溶液沉淀后,离心取上清液,以甲醇-水(85:15)为流动相,流速1mL·min~(-1),进样量50μL,经C_(18)柱分离后,荧光检测,λex=276nm,λem=310nm。结果:在0.1～8.0μg·mL~(-1)浓度范围内,异丙酚峰面积与浓度呈良好的线性关系(r=0.9994)。异丙酚的平均加样回收率大于90％,日内和日间RSD均小于4％。本实验最低检测浓度为0.05μg·mL~(-1),绝对回收率大于70％。结论:本法快速、简便、准确、灵敏,可用于异丙酚的血药浓度监测。     

人血浆中西酞普兰的HPLC-荧光法测定

建立了HPLC-荧光法测定人血浆中西酞普兰的浓度.血浆样品经液-液萃取后测定,用Zorbax SB C8色谱柱,磷酸二氢铵缓冲液(pH 3.5)-乙腈(65:35)为流动相,激发波长240 nm,发射波长302 nm.血浆中西酞普兰线性范围为1～100ng/ml,最低定量浓度为1ng/ml,日内、日间RSD均小于4.0%,方法平均回收率为93.2%.     

高效液相荧光法测定乙胺吡嗪利福异烟片中盐酸乙胺丁醇的含量

目的：建立高效液相色谱荧光法测定乙胺吡嗪利福异烟片中盐酸乙胺丁醇（EMB）的含量。方法：用苯乙基异氰酸酯（PEIC）作为衍生剂,选择不同溶媒介质,考察反应温度、摩尔比对衍生物的影响,确定反应条件。色谱条件：kromasil C18（200mm×4．6mm,5μm）柱,流动相：甲醇-水（70：30）,荧光检测波长：λex 210nm,λem285nm。结果：以碱性乙腈作衍生化反应条件反应溶媒,在室温下振荡5min,衍生剂与盐酸乙胺丁醇摩尔比6：1。盐酸乙胺丁醇线性范围10～120μg·m^-1（r=0．9967）,平均回收率为99．7％,RSD为0．96％。结论：该方法专属性强,衍生化反应迅速,操作简单,容易控制,适用于复方制剂中盐酸乙胺丁醇的含量测定。     

高效液相-荧光检测法测定兔血浆中羟基喜树碱的含量

目的建立高效液相-荧光检测法测定兔血浆中羟基喜树碱含量的方法学。方法色谱柱为D iscovery C18(15cm×4.6mm,5μm),流动相为柠檬酸缓冲液-乙腈-75nm o.lL-1-磷酸二氢钾(70∶23∶7),75nm o.lL-1磷酸二氢钾中含1%三乙胺。流速为1.0m.lm in-1,柱温为40℃,荧光检测波长为λex363nm和λem 530nm。结果该方法的线性范围为13.7656~1957.4468ng.mL-1(r=0.9993)。提取回收率和方法回收率分别为80.90%~103.59%,102.72%~108.16%.日内RSD 7.49%,日间RSD 9.40%。最低检测限为5.2ng.mL-1。结论该方法专属性强,重现性好,操作简便,适用于羟基喜树碱的药代动力学研究和血药浓度监测。     

大鼠血浆中葛根素的HPLC-荧光法测定及其药动学

建立了HPLC-荧光法测定葛根素的血药浓度，并研究了大鼠尾静脉注射葛根素900μg／kg后6h内的药动学。采用C18柱，流动相为3．5mmol／L磷酸盐缓冲液（pH7．8）-甲醇（55：45），大豆苷元作内标，激发波长为350nm，发射波长为470nm。葛根素血药浓度的线性范围为0．01～10μg／ml，最低定量限为10ng／ml，日内和日间RSD均小于15％，回收率大于95％。主要药动学参数：t1/2α（0．96±0．25）min，t1/2β（17．82±3．76）min，AUC0-t（124．8±19．9）mg·min·L^-1，V1（0．084±0．006）L·kg^-1，CL（0．007±0．001）L·min^-1·kg^-1。结果显示，静脉注射葛根素的大鼠体内药动学里开放式二室模型。     

兔血浆中盐酸阿扑吗啡的HPLC-荧光法测定

建立了HPLC-荧光法测定兔血浆中盐酸阿扑吗啡的浓度。以吡哌酸为内标，采用C18柱，流动相为1mmol／LEDTA-2Na缓冲液（含0．1％三乙胺，磷酸调至pH3．2）-乙腈（85：15）。荧光检测的激发波长270nm、发射波长450nm。血浆样品经液液萃取后进样测定。盐酸阿扑吗啡在4～500ng／ml范围内线性良好，定量限为4ng／ml。平均提取回收率均大于70％，日内、日间RSD均小于10％。     

人血浆中右美沙芬及去甲右美沙芬的HPLC-荧光法测定

建立了简便、准确、灵敏的反相高效液相色谱-荧光检测法测定人血浆中右美沙芬和活性代谢物去甲右美沙芬的血药浓度。线性范围分别为0．5～30ng／ml和20～1200ng／ml，定量限分别为1．0和20．0ng／ml，回收率在97％以上，日间、日内RSD小于8．5％。对18名受试者单剂量口服60mg右美沙芬缓释混悬液后至24h血浆样品进行了测定，血浆中去甲右美沙芬浓度比右美沙芬高100倍左右。     

HPLC-荧光检测法测定人血浆中厄贝沙坦的浓度

目的:建立以HPLC-荧光检测法测定人血浆中厄贝沙坦浓度的方法。方法:色谱柱为Diamonsil C18,流动相为0.02mol方芸L-1磷酸二氢钾-乙腈(50∶50),荧光激发波长为250nm,发射波长为375nm,流速为1.0mL·min-1,柱温为40℃。结果:厄贝沙坦检测浓度在1.0~1000ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9998);低、中、高3种浓度(2.0、50.0、500.00ng·mL-1)的平均相对回收率分别为97.4%、106.1%、101.6%,日内、日间RSD均小于10%。结论:本方法简便、快速、准确、特异性和灵敏度高,可用于厄贝沙坦的血药浓度测定和药动学研究。