人精子tPA和PAI-1的测定及精子上tPA的定位研究

目的 :人精子上组织型纤溶酶原原激活因子 (tPA)的分布及精子中tPA、纤溶酶激活物抑制因子 (PAI 1)活性研究。　方法 :应用底物显色法测定 6 1例人精子中tPA及其PAI 1的活性 ,其中正常对照组 2 0例 (已婚生育男子 ,经 2次精液分析正常者 ) ,少弱畸精症组 41例 ;用免疫组化法进行精子表面膜上tPA定位分析。　结果 :正常对照组精子中tPA和PAI 1的活性分别为 (0 2 4± 0 0 4)IU/ 10 6精子和 (0 2 3± 0 0 3)AU/ 10 6精子 ,少弱畸精症组的tPA和PAI 1活性分别为 (0 12± 0 0 3)IU/ 10 6精子和 (0 35± 0 0 9)AU/ 10 6精子 ,经分析二者之间有极显著差异 (P <0 0 1) ;tPA主要分布在精子的顶体膜、赤道板、颈部和尾部。　结论 :正常健康人精子中的tPA和PAI 1活性有别于弱精症者 ,提示精子上的tPA和PAI 1活性可能与精子活力、精子形态以及精子数有关 ;精子的顶体膜、赤道板、颈部及尾部存在着tPA ,推测其与精子运行、获能等有关。     

烧伤血清对血管内皮细胞损伤及抗凝特性的影响

采用血管内皮细胞培养模型，动态观察了家兔烧伤早期（３０％ＩＩＩ度）血清对内皮细胞结构和功能的影响；通过相差显微镜动态观察，台盼兰染色，ＨＥ染色光镜检查及扫描电镜检查，同时检测孵育不同时相点培养液中ＬＤＨ，６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α及ｔＰＡ含及内皮细胞抗血小板粘附，聚集能力的变化。结果显示：①烧伤早期烧伤血清对内皮细胞有明显的损伤作用，功能改变早于结构损害，而结构损害又以细胞间连接及其表面结构的改变为     

马兜铃酸对人脐静脉内皮细胞的作用

目的探讨马兜铃酸对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的作用。方法用马兜铃酸钠盐（AA-Na）干预体外培养原代HUVEC。用四唑盐比色法及乳酸脱氢酶释放法分别检测细胞增殖反应及细胞毒性作用。RT-PCR及酶联免疫吸附法分别检测转化生长因子β1 （TGF-β1）、纤溶酶原激活物抑制物1（PAI-1）及血小板反应蛋白1（TSP-1）的mRNA表达及上清液含量。结果10、20、40及80 mg/L浓度的AA-Na能显著抑制HUVEC增殖及有明显细胞毒效应（P〈0.01）。与对照组相比,5 mg/L的AA-Na显著上调了HUVEC的TGF-β1、PAI-1及TSP-1 mRNA和蛋白表达（P〈0.05）。结论AA-Na可上调HUVEC的TGF-β1、PAI-1及TSP-1表达,此作用可能在慢性马兜铃酸肾病小动脉管壁病变的发病中起一定作用。     

肾病综合征患者血浆中t-PA/PAI-1的变化及糖皮质激素治疗的影响

目的:探讨肾病综合征患者糖皮质激素治疗前后不同阶段组织型纤溶酶原激活物(t-PA)与纤溶酶原激活物抑制物-1(PA1-1)的变化.方法:分为健康对照组、肾病综合征组,采用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测血浆中t-PA和PAI-1水平的变化.结果:t-PA的血浆水平在各组之间无统计学差异(P>0.05);PAI-1的水平在肾病综合征组较正常明显升高(P<0.05),激素治疗1周后进一步升高(P<0.05),治疗4周后比1周组有显著下降(P<0.05),但较正常仍高(P<0.05).结论:t-PA/PAI-1平衡的紊乱,可能参与了肾病综合征的损伤机制,经糖皮质激素治疗后高凝状态短期内无明显改善.     

纤维蛋白对肾小球内皮细胞表达纤溶酶原激活物及纤溶酶原激活物抑制物的作用

目的：观察体外培养人肾小球内皮细胞（GEC）表面原位形成的纤维蛋白对GEC表达纤溶酶原激活物及纤溶酶原激活物抑制物（PA／PAI）的影响。方法：应用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）,酶谱分析法与反向酶谱法分别在基因转录水平与蛋白质活性水平上检测纤维蛋白对GEC表达tPA,uPA gn PAI-1r 作用,纤维蛋白平板法检测纤维蛋白对GEC PA／PAI系统的综合效应,结果：纤维蛋白能够明显促进tPA,uPA与PAI－1的mRNA表达上调,无血清RPMI 1640培养下的GEC几乎检测不到PAI知性,但可检测到PAI－1的活性。纤维蛋白能够浓度依赖性刺激GEC tPA与uPA活性增加以及PAI01的活性增加,呈浓度依赖性与时间依赖性,相同剂量的纤维蛋白原与纤维蛋白的作用相似,放线菌酮与放线菌素D均可抑制纤维蛋白上调GEC表达tPA,uPA与PAI的作用,纤维蛋白平板法显示,纤维蛋白对GEC PA／PAI系统的综合效应是以升高PA活性为主,其活性能够被抑肽酶完全阻断。结论：肾脏局部毛细血[管内沉积的纤维蛋白可能通过对GEC PA／PAI系统的调节发挥其病理作用。     

TGF-β_1、PAI-1与糖尿病肾病

糖尿病时 ,多种机制引起转化生长因子 β1 (TGF β1 )和纤溶酶原激活物抑制物 1 (PAI 1 )在肾脏局部过度表达。TGF β1有抑制细胞有丝分裂 ,促进细胞外基质 (ECM)合成 ,抑制其降解的作用 ,PAI 1则抑制ECM降解 ,二者共同作用 ,导致肾脏肥大和ECM积聚。近年来 ,二者对糖尿病的诊断和治疗的临床意义备受人们的关注     

t-PA和PAI-1与腹腔镜手术的关系

t-PA和PAI-1是纤溶系统的重要组成部分,传统开腹手术,t-PA与PAI-1之间的平衡被打破,易导致术后腹腔粘连及血栓形成。腹腔镜手术对人体创伤小,腹膜刺激少,因此,对t-PA和PAI-1之间的平衡影响减小,术后粘连及血栓形成的发生率及程度也随之降低。     

福辛普利钠对糖尿病肾脏病大鼠肾组织PAI-1表达的影响

目的观察福辛普利钠对糖尿病肾脏病（diabete kidney disease，DKD）大鼠PAI-I表达的影响。方法将45只Wistar大鼠随机分为3组，正常对照组（A组）13只，糖尿病组（B组）16只，福辛普利钠干预组（C组）16只。采用链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病模型。于第4、8、12周末各组随机选取4只大鼠处死并收集标本，记录体重、右肾重；检测血糖、血肌酐、血尿素氮、血胆固醇、血甘油三酯、24h尿蛋白排泄量。用逆转录PCR方法检测肾皮质PAI-1mRNA表达水平。结果造模成功，随时间增加，各组观察的指标有不同程度升高，但药物干预组与糖尿病组比较有不同程度下降。结论福辛普利钠可以抑制PAI-1 mRNA表达、延缓DKD的进展。     

血清t-PA和PAI-1水平在腹腔镜手术中的临床意义

目的:探讨腹腔镜与开腹手术中血浆纤维蛋白溶酶的变化。方法:在腹腔镜与开腹手术前、术后8h分别测量血浆中组织型纤溶酶原激活物(Tissue-type p lasm inogen activator,t-PA),纤溶酶原激活物抑制物-1(P lasm inogen activator inh ib itortype-1,PAI-1)浓度。结果:血浆t-PA浓度在腹腔镜手术和传统腹部手术两组病例术后均下降,但在传统腹部手术组下降更显著(P<0.05),而血浆PAI-1浓度在腹腔镜手术和传统腹部手术两组病例术后均升高,但在传统腹部手术组升高更显著(P<0.05)。结论:本次临床研究结果表明:腹腔镜手术组术前、术后血浆中t-PA、PAI-1浓度的变化小于传统腹部手术组,腹腔镜手术组引起腹腔粘连严重程度也低于传统腹部手术组。     

烧伤血清对血管内皮细胞损伤及抗凝特性的影响

采用血管内皮细胞培养模型,动态观察了家兔烧伤早期(30%Ⅲ度)血清对内皮细胞结构和功能的影响,通过相差显微镜动态观察、台盼兰染色、HE 染色光镜检查及扫描电镜检查,同时检测孵育不同时相点培养液中 LDH、6-keto-PGF_(1α)及 tPA 含量及内皮细胞抗血小板粘附、聚集能力的变化。结果显示:①烧伤早期烧伤血清对内皮细胞有明显的损伤作用,功能改变早于结构损害,而结构损害又以细胞间连接及其表面结构的改变为早;②烧伤血清可明显降低内皮细胞抗血小板粘附、聚集能力,这可能是局部微血栓形成的促发因素;③烧伤血清还降低了内皮细胞的纤溶能力,主要是由于表面结构严重破坏,表面的各种纤溶成份丢失或破坏;同时释放的 tPA 虽然增多,但其活性可能减弱。     

Effect of dextran on plasma tissue plasminogen activator (t-PA) and plasminogen activator inhibitor-1(PAI-1) during surgery

Dextran is known to increase the plasminogen activation rate in vitro and to decrease the α₂-antiplasmin activity.
We decided to explore the effect of dextran on plasma tissue plasminogen activator (t-PA) and plasminogen activator inhibitor-1(PAI-1) during surgical trauma.
Thirty-one patients undergoing elective surgery were given 500 ml of 6% dextran 70. Another nine patients serving as controls were given 500 ml of a glucose-electrolyte solution. The activities of t-PA and PAI-1during surgery were determined, as was the concentration of t-PA antigen.
PAI-1activity was decreased by 19% after infusion of 250 ml of dextran. After 500 ml, the activity was reduced by 22% (both P <0.05). The activity of t-PA was increased by 43% and 29% (both P <0.05) and the antigenic amount of t-PA was increased by 18% and 15% (both P <0.05) after infusion of 250 ml and 500 ml of dextran, respectively. No changes in these variables were observed in the control patients.
It is concluded that infusion of dextran promotes fibrinolysis by enhancing plasminogen activation in patients subjected to trauma. Since elevated levels of PAI-1prior to surgery are known to predispose to deep vein thrombosis, which may form already during the operation, the effect of dextran on PAI-1described here may explain its clot preventing properties.     

辛伐他汀对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞炎性反应抑制作用

目的：运用脂多糖（LPS）诱导体外培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）的炎性反应,观察辛伐他汀对HUVECs炎性反应的抑制作用。方法：体外培养HUVECs,细胞至第3代,随机分为空白对照组、LPS（100 ng/mL）组、辛伐他汀（5 mg/mL）组、辛伐他汀（5 mg/mL）和LPS（100 ng/mL）共作用组,运用实时荧光定量PCR和ELISA的方法,测定各组细胞单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、白介素-1（IL-1）、白介素-6（IL-6）和尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体（uPA/uPAR）的mRNA和蛋白表达的变化。结果：与对照组相比,LPS组细胞的MCP-1I、L-1I、L-6及uPA/uPAR的mRNA表达和上清液中各因子蛋白的表达均明显增加（P均〈0.01）;与LPS组相比,辛伐他汀和LPS共作用组的细胞MCP-1I、L-1、IL-6及uPA/uPAR的mRNA表达和上清液中各因子蛋白的表达均明显降低（P均〈0.05）。结论：辛伐他汀可抑制HUVECs合成及分泌细胞因子MCP-1I、L-1I、L-6及uPA/uPAR,延缓动脉粥样硬化的进程。     

t-PA/PAI-1在乙型肝炎病毒相关性肾炎中的表达及意义

目的：探讨t-PA/PAI-1在乙型肝炎病毒相关性肾炎（HBV-GN）中的表达及临床意义。方法：选择2002年～2004年间获得的100例HBV-GN肾活检标本为实验对象,运用免疫组化方法观察HBV-GN肾组织t-PA/PAI-1的表达特点,并统计分析其与病理类型、肾小球病变程度及临床指标之间的关系。结果：各病理类型组t-PA/PAI-1阳性积分差异无统计学意义（P〉0.05）;而在不同的肾小球病变等级中,Ⅱ级、Ⅲ级组t-PA阳性积分开始升高,以Ⅲ级组最高（P〈0.05）,Ⅳ级组积分下降（P〈0.05）;PAI-1随肾小球病变等级的增加阳性积分升高（P〈0.05,P〈0.01）,并随肾功能减退阳性积分增高（P〈0.05,P〈0.001）。结论：t-PA/PAI-1在乙肝肾中的表达平衡失调促进肾小球硬化;肾组织内PAI-1随肾功能减退而表达增强,可能是HBV-GN预后不良的指标之一。     

腹腔镜结直肠癌手术对腹膜微结构损伤和纤维溶解分子表达的影响

目的 探讨腹腔镜结直肠癌根治术对腹膜微结构损伤和腹膜纤维溶解分子表达的影响.方法 前瞻性纳入2011年6月至2012年2月间山西省人民医院收治的50例结直肠癌患者,根据患者意愿和医生决策分为腹腔镜组(27例)和开腹组(23例).分别在光镜和电镜下观察术后腹膜微结构损伤程度;采用ELISA法比较手术前后腹膜组织型纤溶酶原激活物t-PA和纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)水平的改变.结果 术后标本光镜和电镜观察显示,开腹组肠管浆膜完整性受损、系膜脂肪细胞与间皮细胞覆盖脱失、炎性细胞聚集程度较腹腔镜组严重,两组损伤评分比较的总平均秩次分别为38.22和14.67,差异有统计学意义(P＜0.01).术后网膜组织t-PA、肠管浆膜组织t-PA及PAI-1水平的差异均无统计学意义(均P＞0.05);但腹腔镜组网膜组织中PAI-1水平显著低于开腹组(P＜0.05).结论 相对于开腹手术,腹腔镜结直肠癌根治术腹膜损伤程度较轻,对腹膜纤溶功能的影响较小,有利于防止肠粘连的形成.     

Plasminogen activator inhibitor‐1: a potential etiological role in livedoid vasculopathy

Livedoid vasculopathy (LV) is a chronic, recurrent skin disorder with unknown aetiology and pathogenesis that seriously affects the quality of life of people who suffer from it. Plasminogen activator inhibitor (PAI)‐1 is a primary inhibitory component of the endogenous fibrinolytic system in blood coagulation. PAI‐1 also plays a role in many other physiological processes and activities, including thrombosis, fibrosis, wound healing, angiogenesis, inflammation, cell migration, and adhesion. Enhanced expression and genotype polymorphism of PAI‐1 have been observed in LV patients. In this review, we summarise the known functions of PAI‐1 with emphasis on the roles that PAI‐1 probably plays in the pathogenesis of LV, thereby illustrating that PAI‐1 represents a potential LV biomarker and therapeutic target for treating LV.     

睾酮诱导人脐带静脉内皮细胞ERK1/2磷酸化的研究

目的:观察生理浓度睾酮(3×10-8mol/L)对人脐带静脉内皮细胞(HUVEC)细胞外信号调节激酶ERK1/2磷酸化水平的影响。方法:将体外培养的HUVEC分为5个时间段睾酮组(睾酮作用后0、5、15、30、60min)和雄激素受体拮抗剂氟他胺预处理组,Western印迹测定睾酮作用于HUVEC后ERK1/2的活化程度。结果:睾酮可激活HUVEC ERK1/2,30min后达到高峰,而雄激素受体拮抗剂氟他胺可抑制睾酮对ERK1/2的激活。结论:生理浓度睾酮可通过雄激素受体促进细胞外信号调节激酶ERK1/2磷酸化,且在作用30min后达到最大效应。