荧光定量PCR检测外周血CK20 mRNA对子宫内膜癌微转移的诊断意义

目的:研究子宫内膜癌患者外周血中角蛋白20(CK20)mRNA的表达情况,并探讨荧光定量PCR(FQ-PCR)检测子宫内膜癌微转移的可行性及临床价值。方法:采用FQ-PCR方法对64例子宫内膜癌患者外周血、42例良性子宫病变患者及20位健康女献血员外周血中的CK20 mRNA表达水平进行检测;并同法检测20例术中切除的肿瘤组织的CK20 mRNA。结果:子宫良性病变患者及健康女性外周血中CK20 mRNA表达均<103copies/μL的检测下限;子宫内膜癌组织CK20 mRNA表达水平为(2.08±0.84)×106copies/μL,阳性率为100%。而64例子宫内膜癌患者外周血中CK20 mR-NA表达水平为(5.52±1.14)×104copies/μL,高表达率(阳性率)为40.6%(26/64)。CK20 mRNA表达水平与临床分期差异有统计学意义,P<0.05,与病理分级无关,P>0.05。结论:FQ-PCR可快速、灵敏地定量子宫内膜癌外周血CK20 mRNA的表达,对预测子宫内膜癌微转移以及判断患者预后具有一定指导意义。     

荧光定量PCR检测外周血CK20 mRNA对子宫内膜癌微转移的诊断意义

目的：研究子宫内膜癌患者外周血中角蛋白20（CK20）mRNA的表达情况，并探讨荧光定量PCR（FQ-PCR）检测子宫内膜癌微转移的可行性及临床价值。方法：采用FQPCR方法对64例子宫内膜癌患者外周血、42例良性子宫病变患者及20位健康女献血员外周血中的CK20mRNA表达水平进行检测；并同法检测20例术中切除的肿瘤组织的CK20mRNA。结果：子宫良性病变患者及健康女性外周血中CK20mRNA表达均〈10^3 copiesuL的检测下限；子宫内膜癌组织CK20 mRNA表达水平为（2．08&#177;0．84）&#215;10^4 copies／uL，阳性率为100％。而64例子宫内膜癌患者外周血中CK20 mRNA表达水平为（5．52&#177;1．14）&#215;10^4 copies／uL，高表达率（阳性率）为40．6％（26／64）。CK20 mRNA表达水平与临床分期差异有统计学意义，P〈0．05，与病理分级无关，P〉0．05。结论：FQPCR可快速、灵敏地定量子宫内膜癌外周血CK20 mRNA的表达，对预测子宫内膜癌微转移以及判断患者预后具有一定指导意义。     

肺癌患者外周血CK19-mRNA的测定及其临床意义

目的：建立一种敏感的方法来检测肺癌患者外周血循环癌细胞,并探讨其临床应用的意义。方法：采用反转录聚合酶链反应（RT－PCR）技术检测肺癌患者患者外周血CK19－mRNA的表达情况。结果：40例肺癌外周血标本中16例（40％）CK19－mRNA阳性,15例肺良性病变中1例＊（6．6％）阳性,5例正常人为阴性,10例有转移的肺癌患者,其外周血CK19－mRNA均为阳性（100％）,30例检测时尚我转移证据者,有6例阳性（20％）,经过半定量分析,两组CK19－mRNA在量上判别有显著性,结论：CK19－mRNA可作为一个标志物来检测肺癌患者外周血微转移,定量检测外周血CK19－mRNA有助于诊断肺癌的血行转移,定期检测外周血CK19－mRNA,尚可作为疗效的观察指标。     

大肠癌患者外周血CK19 mRNA检测的临床意义

目的：探讨大肠癌外周血中上皮性骨架蛋白CK19 mRNA的表达，与不同临床病理指标间的关系及对术后治疗的指导意义。方法：应用RT-PCR方法检测71例大肠癌患者外周血CK19 mRNA的表达．其中35例同时测定肠系膜静脉血的CK19 mRNA表达。结果：71例大肠癌惠者外周血CK19 mRNA阳性检出率为59．1％（42／71），肿瘤回流血（肠系膜静脉血）为68．6％（24／35），两者间差异无统计学意义。71例患者中Duke’s分期C＋D期的惠者CK19 mRNA表达率（84．6％）明显高于Duke’s A＋B期（44．4％）的患者，X^2=7．86，P=0．05。CK19 mRNA表达与其他病理指标间无相关性。结论：CK19 mRNA在大肠癌外周血中有较高的检出率，随病期进展，阳性率增高。     

荧光定量PCR对NO期结直肠癌淋巴结微转移的检测及其临床意义

目的 探讨NO期大肠癌淋巴结微转移的检测及其临床意义.方法 采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测45例行根治术的NO期大肠癌患者的453枚淋巴结中细胞角蛋白20(cytokeratin,CK20)mRNA的表达以检出微转移.结果 45例NO期大肠癌病人的453枚淋巴结中,有20例(44.4%)共46枚(10.2%)淋巴结检出微转移.微转移与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度等无关,但与肿瘤浸润深度相关(X2=5.445,P＜0.05).20例微转移患者与25例无微转移患者平均随访时间分别为19.6和21.4月.20例微转移患者中7例发生复发转移,5例死亡;而无微转移25例中仅1例因复发转移而死亡(X2=7.305,P＜0.05).有微转移组和无微转移组的生存率分别是75.0%(15/20)和96.0%(24/25),两组患者之间差异有统计学意义(X2=4.240,P＜0.05).结论 CK20 mRNA的FQPCR是检测NO期大肠癌淋巴结微转移灵敏而特异的方法,可对精确临床分期、判断患者预后及制定合理的治疗方案提供一定的理论依据.     

大肠癌患者外周血CK19 mRNA检测的临床意义

目的探讨大肠癌外周血中上皮性骨架蛋白CK19 mRNA的表达,与不同临床病理指标间的关系及对术后治疗的指导意义.方法应用RT-PCR方法检测71例大肠癌患者外周血CK19 mRNA的表达,其中35例同时测定肠系膜静脉血的CK19 mRNA表达.结果71例大肠癌患者外周血CK19 mRNA阳性检出率为59.1%(42/71),肿瘤回流血(肠系膜静脉血)为68.6%(24/35),两者间差异无统计学意义.71例患者中Duke's分期C+D期的患者CK19 mRNA表达率(84.6%)明显高于Duke's A+B期(44.4%)的患者,χ2=7.86,P=0.05.CK19 mRNA表达与其他病理指标间无相关性.结论CK19 mRNA在大肠癌外周血中有较高的检出率,随病期进展,阳性率增高.     

RT-PCR方法检测大肠癌患者外周血中组织特异性mRNA的表达及其临床意义

目的：检测大肠癌患者外周血中组织特异性mRNA的表达并分析其临床意义。方法：用RT－PCR方法检测70例大肠癌患者和35例正常健康人外周血中组织特异性mRNA的表达。结果：70例大肠癌患者中有30例外周血中组织特异性mRNA表达阳性，阳性率为42．9％，与健康对照人群相比差异有显著性（P＜0．05），DukesC和Dukes D期大肠癌患者外周血中组织特异性mRNA的表达高于Dukes A期大肠癌患者（P＜0．05），在不同分化程度大肠癌患者外周血中的表达差异无显著性（P＞0．05），手术后比手术前的阳性表达率低，但差异无显著性（P＞0．05），结论：大肠癌患者外周血中组织特异性mRNA的阳性表达同肿瘤的分期有关，可作为大肠癌微转移的监测指标。     

荧光定量PCR对N0期结直肠癌淋巴结微转移的检测及其临床意义

目的探讨N0期大肠癌淋巴结微转移的检测及其临床意义。方法采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测45例行根治术的N0期大肠癌患者的453枚淋巴结中细胞角蛋白20(cytokeratin,CK20)mRNA的表达以检出微转移。结果45例N0期大肠癌病人的453枚淋巴结中,有20例(44.4%)共46枚(10.2%)淋巴结检出微转移。微转移与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度等无关,但与肿瘤浸润深度相关(χ2=5.445,P<0.05)。20例微转移患者与25例无微转移患者平均随访时间分别为19.6和21.4月。20例微转移患者中7例发生复发转移,5例死亡;而无微转移25例中仅1例因复发转移而死亡(χ2=7.305,P<0.05)。有微转移组和无微转移组的生存率分别是75.0%(15/20)和96.0%(24/25),两组患者之间差异有统计学意义(χ2=4.240,P<0.05)。结论CK20mRNA的FQ-PCR是检测N0期大肠癌淋巴结微转移灵敏而特异的方法,可对精确临床分期、判断患者预后及制定合理的治疗方案提供一定的理论依据。     

外周血癌胚抗原mRNA在大肠癌组织中的表达及其临床意义

目的：应用RT—PCR技术检测大肠癌患者外周血CEAmRNA，探讨与不同临床病理指标之间的关系，评估复发转移的早期预测意义。方法：应用RT—PCR技术，选择特异性CEAmRNA引物，检测29例大肠癌患者外周血CEAmRNA，同期定量检测外周血CEA和CA19-9糖蛋白。另抽取12例健康志愿者外周血标本作为对照。结果：29例大肠癌患者外周血中CEAmRNA、CEA、CAl9-9阳性率分别为24．14％（7／29）、17．24％（5／29）、13．79％（4／29）。12例对照组外周血中CEAmR—NA、CEA、CA19-9均阴性。有淋巴结转移者外周血CEAmRNA阳性率（35．29％，6／17）高于无淋巴结转移者（8．33％。1／12），但x^2=2．79，P=0．095。TNM分期Ⅳ期中外周血CEAmRNA阳性率66．67％（4／6），Ⅲ期16．67％（2／12）。Ⅰ、Ⅱ期9．09％（1／11），差异有统计学意义。x^2=7．65，P=0．022。外周血CEAmRNA表达在患者的年龄、性别、病理类型等差异无统计学意义，P〉0．05。结论：CEAmRNA、CEA和CA19-9在大肠癌患者中的阳性率，以CEA mRNA阳性率最高，随TNM分期进展，阳性率更高，提示预后不良，应加强治疗。     

胃肠道癌外周血CK20 mRNA的表达及临床意义

背景与目的:检测上皮组织特异性标志物,如CK19、CK20、多形上皮粘蛋白的核心蛋白(MUC1)及CEA等,在外周血、淋巴结及骨髓中的表达,是诊断早期胃肠道癌微转移的重要手段之一。本研究通过检测手术前、后胃肠道癌患者外周血细胞角蛋白20信使核糖核酸(CK20mRNA)的表达,了解胃肠道癌血行播散转移情况及在围手术期综合治疗中的意义。方法:采用巢式逆转录-聚合酶链式反应(Nest-RT-PCR)检测62例胃肠道癌患者手术前后外周血CK20mRNA的表达状况。结果:62例样本中,34例(54.3%)术前CK20mRNA检测为阳性,31例(50.0%)术后CK20mRNA检测为阳性,对照组10例正常人及12例良性胃肠病患者CK20mRNA测定均为阴性。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者外周血CK20mRNA阳性率依次为37.5%、36.3%、66.7%、100.0%。Ⅰ、Ⅱ期患者与Ⅲ、Ⅳ期患者比较,两者间CK20mRNA的阳性率(分别为36.9%和83.3%)有显著性差异(P<0.05)。胃肠道癌的分化程度及癌栓的形成与外周血CK20mRNA的表达无关。有局部淋巴结转移患者与无淋巴结转移患者的阳性表达率有显著性差异(P<0.01)。手术前后外周血CK20mRNA阳性率差异无显著性(P>0.05)。结论:外周血CK20mRNA检测可作为胃肠道癌微转移的判断指标之一,对临床正确分期及治疗起指导作用。     

黏蛋白-1和细胞角蛋白-20在食管癌中的表达及意义

Objective To investigate the expressions and clinical significances of MUC1-mRNA and CK20-mRNA in peripheral blood of esophageal cancer patients.Methods MUC1-mRNA and CK20-mRNA were detected in 53 patients with esophageal cancer,10 patients with esophageal benign tumor and 20 healthy volunteers by RT-PCR technique.Results The expressions of MUC1-mRNA,CK20-mRNA and combining group were 35.85 % (19/53),49.06 % (26/53) and 62.26 % (36/53) in peripheral blood of 53 esophageal cancer patients.In control group,there was no expression of MUC1-mRNA and CK20-mRNA in peripheral blood of 10 patients with benign esophageal disease and 20 healthy volunteers.The positive rate increased by combining test(x2 =11.0228,P ＜0.05).Conclusion MUC1-mRNA and CK20-mRNA might be specific and sensitive markers to detect circulating tumor cells in peripheral blood and their expressions are closely related to TNM stages of the esophageal cancer patients.The combining test might be of high value of the diagnosis of micrometastasis.     

黏蛋白-1和细胞角蛋白-20在食管癌中的表达及意义

 目的　研究食管癌患者外周血黏蛋白-1（MUC1）和细胞角蛋白-20（CK20）表达情况及临床意义。方法　采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测53例食管癌患者外周血MUC1-mRNA和CK20-mRNA水平,以10例食管良性肿瘤患者及20名健康体检者为对照。结果　在良性肿瘤组及健康对照组中,MUC1-mRNA及CK20-mRNA均无表达,而在食管癌患者中的阳性率分别是35.85 %（19／53）和49.06 %（26／53）,二者联合检测阳性率为62.26 %（36／53）,较单项阳性率高（χ2＝11.0228,P＜0.05）。二者在食管癌患者中的表达与患者性别、年龄及肿瘤分化程度无明显相关性,而与肿瘤临床分期明显相关。结论　MUC1-mRNA和CK20-mRNA作为食管癌肿瘤标志物具有较高的敏感性及特异性;其表达与食管癌的临床分期密切相关;两种标志物联合检测有助于提高食管癌微转移的检出率。     

黏蛋白-1和细胞角蛋白-20在食管癌中的表达及意义

Objective To investigate the expressions and clinical significances of MUC1-mRNA and CK20-mRNA in peripheral blood of esophageal cancer patients.Methods MUC1-mRNA and CK20-mRNA were detected in 53 patients with esophageal cancer,10 patients with esophageal benign tumor and 20 healthy volunteers by RT-PCR technique.Results The expressions of MUC1-mRNA,CK20-mRNA and combining group were 35.85 % (19/53),49.06 % (26/53) and 62.26 % (36/53) in peripheral blood of 53 esophageal cancer patients.In control group,there was no expression of MUC1-mRNA and CK20-mRNA in peripheral blood of 10 patients with benign esophageal disease and 20 healthy volunteers.The positive rate increased by combining test(x2 =11.0228,P ＜0.05).Conclusion MUC1-mRNA and CK20-mRNA might be specific and sensitive markers to detect circulating tumor cells in peripheral blood and their expressions are closely related to TNM stages of the esophageal cancer patients.The combining test might be of high value of the diagnosis of micrometastasis.     

早期宫颈癌患者外周血CK19和CK20mRNA的检测及临床意义

目的:研究早期宫颈癌患者外周血中CK19、CK20mRNA的表达及其临床意义。方法:采用RT-PCR法术前检测250例ⅠA~ⅡA期宫颈癌患者和50例妇科良性肿瘤患者及18名健康自愿者外周血中CK19、CK20mRNA的表达,并分析其与临床病理因素的关系。结果:250例早期宫颈癌患者外周血中CK19、CK20mRNA的阳性表达率分别为36%和24%,而在妇科良性肿瘤中分别为3.0%和0%,18例健康自愿者无一例表达CK19、CK20mRNA阳性(P<0.01);CK19、CK20mRNA的单独阳性表达率除与脉管瘤栓显著相关外(P<0.01),与宫颈癌的预后因素如分期、分化、组织类型、淋巴结转移、肿瘤大小均无关(P>0.05),而CK19、CK20mRNA双阳性表达与淋巴结转移和脉管浸润及近期盆腔外的转移显著相关(P<0.01)。结论:外周血中CK19、CK20mRNA的表达可以作为检测早期宫颈癌微转移的生物学指标,但对预后的意义有待于进一步研究。     

检测尿脱落细胞CK20表达的临床意义

目的探讨尿路移行细胞癌(TCC)患者尿脱落细胞CK20的表达及其意义.方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测38例TCC患者、6例泌尿系非移行细胞癌肿瘤患者、14例泌尿科非肿瘤患者以及7例健康志愿者尿脱落细胞CK20表达.以GAPDH作为内参照.结果38例TCC患者中33例尿脱落细胞CK20阳性表达,阳性率为86.8%.6例泌尿系非移行细胞癌肿瘤患者、14例泌尿科非肿瘤患者以及7例健康志愿者尿脱落细胞CK20表达阴性.结论检测尿脱落细胞CK20表达诊断TCC敏感性和特异性高,可作为TCC筛查的方法之一.     

大肠癌患者外周血癌细胞CK20检测及其意义

目的:探讨大肠癌患者外周血癌细胞角蛋白20(cytokeratin,CK20)检测与转移复发的关系。方法:以非同位 素RT-PCR方法,检测30例大肠癌患者术前和术后外周血中大肠癌细胞的标志物CK20,同时检测20例健康者外周血作对 照。结果:30例患者外周血中查出CK20阳性表达23例,阳性率76.67%,20例健康者外周血均无CK20表达。CK20阳性检 出与Dukes分期、淋巴结转移和肝转移存在显著性差异(P<0.05),术后3天内外周血CK20阳性检出较术前多出2例。随访 发现,外周血CK20扩增阳性者,术后发生肝转移的机会增加(33.3%)。结论:检测大肠癌患者外周血微转移癌细胞CK20可 提高大肠癌临床分期的准确性,帮助综合判断患者的预后,且可能有助于早期诊断大肠癌肝脏微小转移。     

联合免疫组化和PCR检测CK20在早期宫颈鳞癌淋巴结中的表达和意义

目的：探讨早期宫颈鳞癌淋巴结微转移阳性率,阳性淋巴结分布以及与病理类型、临床分期之间的关系.方法：用免疫组化法和RT-PCR法分别及联合检测492枚（52例）早期宫颈鳞癌手术切除淋巴结中CK20的表达情况.结果：联合法检测CK20阳性率与单独使用一种方法的阳性率相比有显著性差异,且显著高于常规HE染色（P＜0.05）.闭孔淋巴结CK20阳性率最高.CK20表达与宫颈鳞癌临床分期、病理分级有关（P＜0.05）,而与年龄无关（P＞0.05）.结论：联合免疫组化和PCR检测CK20敏感性较高,闭孔淋巴结可作为检测CK20表达的首选淋巴结,对于评价早期宫颈癌微转移具有重要意义.     

卵巢上皮性癌患者血清无细胞DNA的检测及临床意义

目的：检测循环无细胞DNA中的肿瘤相关cfDNA（ALU247／ALU115）及CA-125基因片段（CA125-cfDNA）在卵巢上皮性癌患者血清中的表达，探讨其是否可作为卵巢上皮性癌早期诊断及病情监测的指标。方法：采用半定量RT-PCR方法检测48例卵巢上皮性癌、16例良性卵巢上皮性肿瘤和12例正常健康对照血清中游离的ALU247、ALU115、CA125、β-actin DNA片段的表达。结果：卵巢上皮性癌患者血清中的肿瘤相关cfDNA（ALU247／ALU115）和CA125-cfDNA的相对水平（CA125-cfDNA／β-actin）明显高于卵巢良性肿瘤患者、正常对照及术后化疗二疗程者的值，晚期患者（Ⅲ-Ⅳ期）血清中的表达明显高于早期患者（Ⅰ-Ⅱ期），早期患者的表达明显高于正常对照组（P〈0．05），该两项指标与病理学类型及病理分级无关。CA125-cfDNA的相对水平与血清CA125的值存在相关性，在晚期卵巢上皮性癌未化疗患者腹水中的值显著高于血清中的值（P〈0．05）。结论：检测血清中ALU247／ALU115及CA125-cfDNA基因片段的水平可作为血清CA125的有效补充指标，用于卵巢上皮性肿瘤良恶性鉴别诊断、早期诊断和病情监测。