凝血因子Ⅶ基因突变的检测

目的 为检测福建省福州市一个遗传性凝血因子Ⅵ缺乏症先证者的因子Ⅶ基因突变类型。方法 采用PCR结合限制性内切酶HgiCI，以先证者及其母亲的FVⅡ基因片进行分析。结果 表明先证者的FVⅡ基因为C329G纯合子，其母亲为杂合子。结论 该家系为FVⅡ基因存在C329G突变的第2个遗传性因子Ⅶ缺乏症家系。     

温度和时间对Ⅴ、Ⅷ凝血因子活性的影响

目的探讨温度、时间对Ⅴ、Ⅷ凝血因子活性的影响。方法对同份血浆留多个样本,每种标本留2份(其中1份离心处理),分别置于4℃24 h、72 h,室温24 h,测其Ⅴ、Ⅷ凝血因子活性。结果①Ⅴ、Ⅷ凝血因子标本在4℃、室温放置24h、4℃放置72 h,标本间离心前与离心后,其活性Ⅷ因子平均下降1.1%(IU/m l),Ⅴ因子平均下降1.9%。②Ⅷ因子4℃24 h后与新鲜相比活性下降7.8%,72 h后下降11.2%,Ⅴ因子24 h后下降了3.3%,72 h后下降18.2%。③置4℃24 h与72 h,Ⅷ因子平均下降3.4%,Ⅴ因子下降14.8%。④4℃与室温24 h比较,Ⅷ因子活性平均下降了0.73%,Ⅴ因子活性平均下降了1%。⑤血型之间差异,4℃24 h后Ⅷ和Ⅴ因子活性分别为:A型下降了8%和2%,B型下降了8%和5%,O型下降了7%和3%,AB型下降了8%和3%;4℃72 h后Ⅷ和Ⅴ因子活性分别为:A型下降10.5%和19.5%,B型下降11%和20.1%,O型下降11.3%和20.3%,AB型下降12%和11.8%。结论①血浆在4℃放置24 h与在室温放置24 h相比较,对Ⅴ、Ⅷ凝血因子活性影响差异很小。②4℃和室温下,同份标本在放置同样的时间离心前后Ⅴ、Ⅷ凝血因子活性下降很小。③Ⅷ因子活性在标本置24 h检测时下降相对较大,Ⅴ因子活性在72 h检测时下降相对较大。④Ⅷ因子活性在4℃24 h和72 h后下降程度,ABO血型间相差很小;Ⅴ因子活性在4℃24 h后下降程度,ABO血型间相差相对较大,72 h后A、B、O下降在20%左右,而AB型下降相对较少,为12%左右。     

凝血因子Ⅶ与冠心病

组织因子凝血途径在生理与病理性血栓形成过程中具有重要意义，活化的因子Ⅶ是组织因子途径启动历子。因子Ⅶ水平受饮食脂肪，遗传，年龄，性别等因素影响，冠心病患者因子Ⅶ凝血活性水平（ＦⅦｃ）明显升高，高ＦⅦｃ水平可能通过促进冠状动脉血栓形成参与冠心病发病，目前被普遍认为是冠心病的危险因素之一。     

凝血因子Ⅶ C329G突变导致遗传性凝血因子Ⅶ缺乏症

目的探讨遗传性凝血因子Ⅶ缺乏症发病的分子机制。方法将野生型和C329G突变型的FⅦ真核表达载体转染BHK-21细胞进行体外表达,并对表达产物进行免疫学和凝血活性检测。结果FⅦC329G突变后,其蛋白的合成和分泌不受影响,突变型与野生型FⅦ的表达量相近,但突变型FⅦ无凝血活性。结论FⅦ第329位的半胱氨酸对其凝血活性功能起关键作用。当它被甘氨酸替换后,即丧失其凝血活性,此为FⅦC329G突变导致遗传性凝血因子Ⅶ缺乏症发病的分子机制。     

糖尿病时凝血因子Ⅶ异常

凝血因子Ⅶ（FactorⅦ,FⅦ)是启动外源性凝血途径的重要因子,其在人类生理及病理凝血过程中的作用日益受到重视。糖尿病时FⅦ异常可能是此类患者血栓栓塞并发症及死亡高发生率的潜在原因。本文对糖尿病时FⅦ异常、可能机制及临床意义进行综述。     

血浆凝血因子Ⅶ的测定及其广州地区参考值的建立

检测血浆凝血因子Ⅶ(FⅦ)并建立广州地区成人的参考值.用酶联免疫吸附法(ELISA)测定因子Ⅶ抗原(FⅦ:Ag),用重组可溶性组织因子法测定活化凝血因子Ⅶ (FⅦa),用一阶段凝固法测定因子Ⅶ活性(FⅦ:C).结果,广州地区献血员血浆中FⅦa为1 .8±0.6 μg/L,FⅦ:C为71±13%,FⅦ:A g为68±16%.广州地区老年人FⅦa为2.2±0.7 μg/L,FⅦ:C为86±22%,FⅦ:Ag为8 4±1 9%.老年人组高于献血员组,差异显著(P＜0.05),结果显示,老年人FⅦ功能亢进, 处于高凝状态.     

尿毒症患者凝血因子Ⅶ水平及其影响因素

本研究检测慢性肾功能衰竭尿毒症期患者血浆凝血因子Ⅶ (FⅦ )水平并初步探讨其影响因素。选取 3 0例慢性肾功能衰竭尿毒症期患者 ,采用一期凝血法分别检测血液透析前及血液透析 1月后血浆凝血因子Ⅶ水平∶因子Ⅶ活性 (FⅦ∶C) ;采用重组可溶性组织因子一期凝血法检测活化因子Ⅶ (FⅦa) ;采用酶联免疫吸附法检测因子Ⅶ抗原 (FⅦAg)。结果显示 :①尿毒症患者血液透析前FⅦa、FⅦ∶C和FⅦAg水平分别为 4 .0 0± 0 .86μg/L、( 14 8.5± 4 0 .4 ) %和 ( 99.8± 2 1.1) % ,健康对照则分别为 2 .77± 1.0 2 μg/L、( 113 .1± 3 3 .0 ) %和 ( 73 .7± 18.3 ) % ,尿毒症患者的FⅦa ,FⅦ∶C ,FⅦAg水平与健康对照比较显著增高 (P 值均 <0 .0 5 ) ;②尿毒症患者血液透析后FⅦa,FⅦ∶C和FⅦAg水平分别为 5 .5 6± 1.4 5 μg/L、( 2 0 0 .8± 68.7) %和 ( 12 4 .1± 19.3 ) % ,与血液透析前相比较 ,FⅦa,FⅦ∶C和FⅦAg水平均显著增高 ( P值均 <0 .0 5 ) ;③尿毒症患者血液透析前FⅦAg ,FⅦ∶C及FⅦa水平与血尿素氮水平呈正相关 (相关系数分别为r =0 .3 7,P <0 .0 5 ;r =0 .4 0 ,P <0 .0 5 ;r =0 .2 8,P <0 .0 5 ) ;与血肌酐水平亦呈正相关 (相关系数分别为r =0 .14 ,P <0 .0 5 ;r =0 .2 3 ,P <0 .0 5 ;r =0 .18,P     

糖尿病时凝血因子Ⅶ异常

凝血因子Ⅶ(FactorⅦ,FⅦ)是启动外源性凝血途径的重要因子,其在人类生理及病理凝血过程中的作用日益受到重视。糖尿病时FⅦ异常可能是此类患者血栓栓塞并发症及死亡高发生率的潜在原因。本文对糖尿病时FⅦ异常、可能机制及临床意义进行综述。     

不同保存温度对血浆部分凝血因子活性的影响

目的:探讨在不同保存温度,不同保存时间血浆部分凝血因子活性的变化,为临床选择不同血浆输注提供实验室依据。方法:采集10袋(200mL/袋)的ACD-B血液保存液保存的血液,在采血后1h内留样10mL作为对照组样本;每份全血在无菌条件下平均分为2袋,作为2个实验组,热合封口。第1组保存于(4±2)℃,保存48h;第二组先保存于(22±2)℃,保存6h之后,转移到(4±2)℃保存42h。两个实验组分别在采血后6h,24h和48h留取样本。将对照组及实验组样本在取样后立即离心,分离血浆,于-18℃保存30d后,进行凝血因子Ⅴ(FⅤ)、凝血因子Ⅷ(FⅧ)、纤维蛋白原和凝血因子Ⅶ的检测。结果:两组血浆在不同温度、不同保存期的凝血因子Ⅴ、纤维蛋白原和凝血因子Ⅶ水平无显著改变;而在保存8h后,实验组血浆凝血因子Ⅷ水平均低于对照组凝血因子Ⅷ水平(P<0.05)。在保存24h后,实验组血浆凝血因子Ⅷ水平进一步下降(P<0.05)。结论:在采血后24h保存期内,血浆中凝血因子,除凝血因子Ⅷ外,凝血因子Ⅴ,纤维蛋白原和凝血因子Ⅶ活性均没有明显改变;凝血因子Ⅷ水平在4℃保存8h后下降14%;在保存24h后,凝血因子Ⅷ水平下降约30%...     

血浆凝血因子Ⅶ和uPA系统对恶性肿瘤影响的临床研究

目的　研究血浆凝血因子 和尿激酶型纤溶酶原激活物 ( u PA)及其特异性受体 ( u PAR)纤溶酶原激活物抑制物 - 1 ( PAI- 1 )在恶性肿瘤中的表达水平和临床意义。方法　F a采用重组可溶性组织因子( r STF)一期法 ,F ∶ C采用经典一期法 ,F ∶ Ag,u PA和 PAI- 1采用 ELISA法测定。结果　 1肿瘤组较对照组 F a,F Ag,F a/F Ag,u PA,u PAR和 PAI- 1升高 ( P<0 .0 5～ 0 .0 1 )。 2组间比较 :合并感染 F ∶ Ag升高 ( P<0 .0 5 ) ;已转移 F a,F Ag,u PA,u PAR和 PAI- 1升高 ( P<0 .0 5～ 0 .0 1 ) ;手术后F a,F ∶ Ag,u PA和 PAI- 1降低 ( P<0 .0 5～ 0 .0 1 ) ;二周内死亡者全部指标升高 ( P<0 .0 5～ 0 .0 1 )。结论　恶性肿瘤患者凝血和纤溶过度激活 ,后者与肿瘤转移和预后相关     

凝血因子Ⅶ与心脑血管疾病

凝血因子Ⅶ（FⅦ）是外源性凝血途径启动过程中关键性的凝血因子，在动脉血栓形成过程中意义重大。本文就某些因素对血浆FⅦ水平的影响及FⅦ与心脑血管疾病间的关系作一综述。     

凝血因子Ⅶ与心脑血管疾病

凝血因子Ⅶ (FⅦ )是外源性凝血途径启动过程中关键性的凝血因子 ,在动脉血栓形成过程中意义重大。本文就某些因素对血浆FⅦ水平的影响及FⅦ与心脑血管疾病间的关系作一综述。     

冠心病患者血浆凝血因子Ⅶ水平及其基因多态性研究

目的：研究冠心病（CHD）患者血浆凝血因子Ⅶ（FⅦ）水平及其基因多态性。方法：对60例CHD患者[其中急性心肌梗死（AMI）33例]及正常对照者149名的血浆活化因子Ⅶ（FⅦa)、FⅦ活性（FⅦc）与FⅦ抗原（FⅦ：Ag)进行测定。应用PCR、限制性片段长度多态性分析及琼脂糖凝胶电泳的方法鉴定Ⅶ基因中的5个可能与血栓有关的多态性位点：－401G/T、－402G／A、5′F7 A1/A2、IVS7 H5/H6/H7/H8和R335Q M1／M2。结果：与正常对照组相比，CHD组的FⅦa、FⅦc与FⅦAg平均值均有升高，但仅AMI组FⅦa与FⅦc的增高有统计学意义（P＜0．05）；AMI组IVS7基因型频率与正常对照组比较差异有显著性（P＜0．05），其余各组间各基因型频率与等位基因频率差异均无显著性；－402A纯合子与－402G纯合子相比，血浆FⅦ：Ag水平显著升高（P＜0．05）。结论：血浆FⅦa与FⅦc增高，可能对AMI时冠状动脉血栓形成有促进作用；AMI组IVS7基因型频率与正常对照组比较差异有显著性；而且－402A纯合子血浆FⅦ：Ag水平显著高于－402G纯合子，故－402G／A多态性可能主要是影响血浆FⅦ：Ag水平，进而影响血栓形成。     

血浆凝血因子Ⅶ测定在缺血性心脑血管病中的临床意义

前瞻性研究表明,凝血因子Ⅶ活性（FⅦ：C）增高为缺血性心脑血管病的危险因子,甚或与心肌梗死及猝死相关[1,2]。FⅦ：C受许多因素的影响,而且其增高可能是FⅦa增高或凝血因子Ⅶ抗原（FⅦ：Ag）增高或两者同时增高所致。动脉粥样硬化因血管内皮广泛损伤而致组织因子（TF）过度表达,但TF与FⅦ两者各自单独存在时并无促凝活性,只有当两者结合为TF-FⅦ复合物时才有促凝作用,而TF-FⅦa的促凝活性比TF-FⅦ大25～100倍。因此有人认为,通过测定血浆FⅦa水平预估高凝状态,并作为缺血性心脑血管病的危险因子更为恰当。我们测定了缺血…     

重组人凝血因子Ⅶ的纯化与鉴定

目的建立重组人凝血因子Ⅶ(rhFⅦ)的纯化方法。方法首先将制备并纯化的单克隆抗体与CNBr-Sepharose 6B Fast Flow介质偶联,制备单克隆抗体亲和层析柱,并用rhFⅦ标准品验证层析柱的层析效果;采用DE-AE-Sephadex A-50吸附细胞表达的上清,对吸附产物用Sephadex G-25脱盐柱做脱盐处理;然后用单克隆抗体亲和层析柱做亲和层析;通过SDS-PAGE、Western Blot等试验测定纯化产物的纯度;通过凝血酶原时间(PT)测定纯化产物的促凝活性。结果制备出rhFⅦ单克隆抗体亲和层析介质;细胞表达产物经DEAE-Sephadex A-50、Sephadex G-25脱盐和亲和层析纯化后,经SDS-PAGE鉴定获得了分子量为50kD的单一蛋白洗脱峰;纯化所获得的重组蛋白具有促凝活性,促凝时间(DT)为52s。结论建立了纯化rhⅦ的亲和层析方法 ,为rhFⅦ的研制奠定了基础。     

因浆凝血因子Ⅶ的测定及其广州地区参考值的建立

检测血浆凝血因子Ⅶ (FⅦ )并建立广州地区成人的参考值。用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定因子Ⅶ抗原 (FⅦ :Ag) ,用重组可溶性组织因子法测定活化凝血因子Ⅶ (FⅦa) ,用一阶段凝固法测定因子Ⅶ活性 (FⅦ :C)。结果 ,广州地区献血员血浆中FⅦa为 1 8± 0 6 μg/L,FⅦ :C为 71± 1 3% ,FⅦ :Ag为 6 8± 1 6 %。广州地区老年人FⅦa为 2 2± 0 7μg/L,FⅦ :C为 86± 2 2 % ,FⅦ :Ag为 84± 1 9%。老年人组高于献血员组 ,差异显著 (P <0 0 5 ) ,结果显示 ,老年人FⅦ功能亢进 ,处于高凝状态     

遗传性凝血因子Ⅶ缺陷症研究进展

遗传性凝血因子Ⅶ缺陷症是一种常染色体隐性遗传病 ,是由凝血因子Ⅶ基因突变所致。体外测定凝血因子Ⅶ :C与临床表型无明显的相关性。而基因突变能够较好地解释其临床表型     

遗传性凝血因子Ⅶ缺陷症研究进展

遗传性凝血因子Ⅶ缺陷症是一种常染色体隐性遗传病，是由凝血因子Ⅶ基因突变所致。体外测定凝血因子Ⅶ:C与临床表型无明显的相关性。而基因突变能够较好地解释其临床表型。     

不同温度、时间制备新鲜冰冻血浆中各种凝血因子含量研究

目的对不同温度、时间制备的新鲜血浆进行检测,观察FⅤ、FⅦ、FⅧ、FⅨ、FⅩ凝血因子活性的变化情况,以发挥对临床血浆输注或制备冷沉淀选择原料血浆的指导作用。方法在2℃~6℃、15℃左右和室温各制备20份血浆,每一试管留取5ml,同一温度、不同时间来源于同一份血浆,分别于6h、8h、10h、14h、18h速冻标本,并在72h内将速冻成固体的血浆与37℃水温解冻后立即运用血凝法检测各凝血因子活性。结果 2℃~6℃环境中保存的血浆在6h、8h、10h、14h、18h内Fib、FⅦ、FⅨ、FⅩ因子活性的降低不是太明显,但均在正常范围内,而FⅤ、FⅧ因子活性在6~10h也在正常范围,但在14~18h时出现低于正常值的现象。15℃左右和室温保存的血液在6~10h制备FFP中的Fib、FⅦ、FⅨ、FⅩ因子活性下降速度不明显,FⅤ、FⅧ因子随着温度升高和保存时间的延长活性下降速度明显,8~10h与6h相比,所有凝血因子水平的降低都有统计学意义。结论采集的血液保存在2℃~6℃环境中制备的新鲜冰冻血浆中凝血因子活性优于15℃、室温情况下保存血液制备的FFP,建议血站成分科制备冷沉淀原料血浆时,最好用2℃~6℃冷藏环境6~10h内和15℃、室温环境下8h内制备的新鲜冰冻血浆作为制备冷沉淀的原料血浆。     

新一代凝血因子产品——重组FⅦa

新一代凝血因子产品——重组ＦⅦａ６１００８１中国医学科学院中国协和医科大学输血研究所周宇王憬惺用基因重组技术生产血浆蛋白制品取代传统的血浆来源的制品用于临床，一直是各国科学家研究的热门课题。近年来，由于血浆来源的制品传播病毒性疾病的危险，使这一研究更...