HPLC-MS-MS法检测人血浆中氯吡格雷的浓度

目的:建立HPLC-MS-MS法测定人血浆中氯吡格雷浓度。方法:待测血浆样品经甲基叔丁基醚萃取,以地西泮为内标,采用Agilent ZORBAX SB-C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,10 mmo·lL-1醋酸铵(含0.1%甲酸)-甲醇(23∶77)流动相梯度洗脱,以多反应离子监测模式(MRM)进行正离子检测。结果:氯吡格雷与内标地西泮及血浆杂质分离良好;线性范围为10.02~10 020 n·gL-1,定量下限为10.02 n·gL-1,提取回收率为61.5%~68.4%;批内和批间精密度与准确度、基质效应及稳定性均符合相关要求。结论:该方法简便、准确、灵敏度高、专属性强,适用于人血浆中氯吡格雷的测定。     

硫酸氢氯吡格雷片的餐后人体生物等效性研究

目的 评价硫酸氢氯吡格雷片的生物等效性.方法 按随机自身对照的二重3×3拉丁方试验设计,48名健康男性受试者餐后口服两种规格的受试制剂与参比制剂,通过LC-MS/MS法测定氯吡格雷及其羧酸代谢物SR26334的血药浓度,采用WinNonlin 6.3.0软件和SPSS 19.0软件计算药动学参数并进行生物等效性的统计分析,评价3种制剂的生物等效性.结果 受试者单剂量餐后口服150 mg两种受试制剂和参比制剂后,血浆中氯吡格雷的Tmax分别为1.85±0.78、1.95±0.89、1.78±0.75 h,Cmax分别为3.59±2.22、4.12±2.20、4.01±2.44 ng·mL-1,AUC0-36 h分别为10.80±6.80、10.73±6.40、10.45±6.48 ng·mL-1·h,AUC0→∞分别为11.09±6.93、11.06±6.53、10.71±6.50 ng·mL-1·h,t1/2分别为5.76±3.35、7.59±5.98、6.03±4.45 h.结论 两种规格受试制剂与参比制剂具有生物等效性.     

液-质联用测定大鼠血浆中氯吡格雷羧酸代谢物SR26334浓度及其药动学研究

目的建立大鼠血浆氯吡格雷羧酸代谢物SR26334的液-质联用检测方法,研究氯吡格雷代谢物SR26334的药代动力学。方法血浆经乙酸乙酯和正己烷提取,以ZORBAX SB-C18为色谱柱;流动相为乙腈-0.1%甲酸,流速为0.3mL·min-1;通过电喷雾离子源,以多反应监测方式(MRM)进行离子检测,通道为(m/z)为m/z 308.1→m/z 198.1(SR26334)和m/z 383.2→337.0(氯雷他定)。6只雄性大鼠单剂量灌胃给予7.5mg·kg-1氯吡格雷,分别在给药后多点尾静脉采血;用该方法检测血浆中SR26334的浓度。用DAS(数据采集系统)计算药代动力学参数。结果 SR26334浓度在1～5000ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9991);最低检测限为1ng·mL-1;方法回收率大于97%,提取回收率大于85%,日内和日间RSD小于8%。结论本方法准确可靠、简便快速,适用于大鼠血浆SR26334浓度的测定及其药代动力学研究。     

HPLC法测定患者血浆中氯吡格雷的羧酸代谢产物浓度

目的:建立一种简易快速的方法测定人血浆中氯吡格雷代谢产物羧酸氯吡格雷(CCA)的浓度。方法:血浆样品经6%高氯酸液-液萃取后采用高效液相色谱-紫外(HPLC-UV)法进样测定,内标为苯妥英钠,色谱柱为Hypersil ODS C18,流动相为0.05mol/L磷酸二氢钾(三乙胺调pH至5.7)-乙腈(78∶22),紫外检测波长为220 nm,流速为1.0 ml/min,柱温为50℃。结果:CCA血药浓度在0.10⁸.0μg/ml范围内线性关系良好(r=0.999 5),分析方法最低检测限为0.05μg/ml;方法回收率为99.7%8.0μg/ml范围内线性关系良好(r=0.999 5),分析方法最低检测限为0.05μg/ml;方法回收率为99.7%¹00.2%,提取回收率>75%;日内、日间RSD均小于3%,冻融稳定性RSD均小于10%(n=5)。结论:本方法简便、准确、灵敏度高,专属性和稳定性较好,适用于氯吡格雷的临床研究和药动学研究。     

液质联用测定人血浆中伪麻黄碱的浓度

目的:建立液质联用法测定人血浆中伪麻黄碱的浓度。方法:采集到的血浆样品以苦参碱为内标,经0.2 mL 0.02 mol·mL~(-1)碳酸钠溶液碱化后氯仿萃取进行 LC-MS 分析。色谱条件为 Kromasil C_(18)柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸(13:87),流速为1.0 mL·min~(-1);质谱条件为大气压电喷雾离子源(ESI 源),正离子方式检测;扫描方式为选择离子监测(SIM),用于定量分析的离子分别为 m/z 166(伪麻黄碱)和 m/z 249(苦参碱)。结果:方法的线性范围为5～300 ng·mL~(-1),定量下限为5 ng·mL~(-1),提取回收率均大于77.9%,日内、日间精密度(RSD)均小于12.7%。结论:本方法灵敏、专属,适于伪麻黄碱人体血浆药物浓度的测定。     

氯吡格雷与PPIs联用

近日美国有心脏病专家表示，接受了冠脉支架植入术的患者服用了抗凝药物氯吡格雷（clopidogrel）后，应尽可能避开同时使用质子泵抑制剂（PPIS）如埃索美拉唑（Nexiunl），兰索拉唑（Prevacid）和奥美拉唑（Prilosec）等，该类药物能有效快速抑制胃酸分泌。     

HPLC-MS法测定氯吡格雷酸人体尿药浓度及氯吡格雷酸经尿排泄研究

目的：建立测定氯吡格雷酸人体尿药浓度的高效液相色谱-质谱联用方法,并通过监测硫酸氢氯吡格雷片经健康受试者口服后其主要Ⅰ相代谢物氯吡格雷酸尿药浓度的经时变化过程,考察氯吡格雷酸经尿排泄特征。方法：色谱采用Lichrospher C18柱（150 mm×2.1 mm,5μm）,以甲醇-10 mmol·L^-1醋酸铵水溶液（含0.1%甲酸）（42∶58）为流动相。质谱采用电喷雾离子源四级杆质谱,以选择性离子监测方式进行正离子检测。6名健康受试者单次口服硫酸氢氯吡格雷片75 mg后,定时收集尿样。采用甲醇直接稀释法处理尿样后,评价氯吡格雷酸经尿排泄特征。结果：氯吡格雷酸在4.780～9 559μg·L^-1质量浓度范围内线性关系良好,平均回收率大于93.4%。受试者服药后0～2小时间,氯吡格雷酸经尿排泄速率最大;36小时内有（1.1±0.5）%的氯吡格雷以氯吡格雷酸形式从尿中排出。结论：该测定方法符合生物样品分析要求;氯吡格雷在体内以氯吡格雷酸形式经尿排泄迅速,24小时内基本排泄完全。     

LC-MS/MS法同时测定人血浆中氯吡格雷及其羧酸代谢物的浓度

目的建立快速测定人血浆中氯吡格雷及其羧酸代谢物SR26334含量的LC-MS/MS法。方法乙醚-正己烷(4:1,V:V)2次液-液提取法(中性和酸化条件下),采用Teknokroma C_(18)色谱柱,以那格列奈和吡格列酮为内标,同时测定血浆中氯吡格雷和SR26334的浓度。流动相:甲醇-0.1%甲酸(80:20,V:V);流速:0.2mL·min~(-1);以多反应离子监测方式检测:氯吡格雷[M+H]~+,m/z 322.1→212.1;那格列奈[M+H]~+,m/z 318.3→166.2;氯吡格雷羧酸代谢物SR26334[M+H]~+,m/z 308.1→q98.1;吡格列酮[M+H]~+,m/z 357.2→134.2。结果氯吡格雷和内标那格列奈的保留时间分别在4.4和3.7min,SR26334和内标吡格列酮的保留时间分别在1.3和1.7min,氯吡格雷的线性范围为5～5000ng·L~(-1);SR26334的线性范围为20～2500μg·L~(-1)。提取回收率大于75%,方法回收率大于90%,日内、日间RSD小于10%(n=5)。结论本方法简便快速,适用于氧吡格雷制剂的新药临床研究和临床长期治疗病人血药浓度的常规监测。     

柱前衍生-气质联用法同时测定人血浆中水杨酸、阿司匹林和氯吡格雷的浓度

目的：建立一种同时测定人血浆中水杨酸、阿司匹林和氯吡格雷浓度的GC-MS方法。方法：使用SH-Rxi-5Sil（30 m×0.25 mm ID，0.25 μm）气相色谱柱，以甲醇作为样品溶剂同时也是甲酯衍生化试剂，在气相进样口高温衬管内衍生化并气相分离，质谱定量检测样本中的水杨酸和阿司匹林衍生物，以及氯吡格雷的含量。结果：水杨酸、阿司匹林和氯吡格雷分别在0.26～127.5μg·mL^-1、1.93～965μg·mL^-1和5.45~2180ng·mL^-1范围内线性良好，三种待测物的定量下限分别可达0.26，1.93，5.45 ng·mL^-1。结论：该方法所用的血浆样本量少，操作相对简便污染小，测定周期短，对水杨酸、阿司匹林和氯吡格雷的测定结果稳定性和重复性良好，可以作为临床血药浓度检测的方法推广。     

高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中瑞舒伐他汀的浓度

目的建立HPLC-MS/MS方法定量测定人血浆中瑞舒伐他汀浓度。方法用液液萃取法处理血浆,以瑞舒伐他汀-D6为内标,色谱柱:ThermoHypersI I GOLD柱(2.1 mm×100 mm,3.0μm),柱温:40℃,流动相:甲醇-0.1%甲酸+5 mmol·L^-1甲酸铵水溶液,等度洗脱,流速:0.35 mL·min^-1。用正离子扫描,多反应监测方式(MRM)测定样品中药物的质量浓度。考察该方法的专属性、标准曲线与定量下限、精密度与准确度、回收率、基质效应和稳定性。结果血浆样品中瑞舒伐他汀回归方程为y=3.29×10^-1x-3.46×10^-3(r=0.998 8),瑞舒伐他汀在0.05~25.00 ng·mL^-1内线性关系良好,定量下限为0.05 ng·mL^-1。日内、日间精密度的RSD均<15%,平均回收率>95%,稳定性较好。结论本方法简便快速、特异性强、灵敏准确,适用于人体血浆中瑞舒伐他汀浓度的测定。     

液相色谱-质谱联用测定全身麻醉患者血浆中舒芬太尼浓度

目的建立液相色谱质谱联用法,测定全麻患者血浆中舒芬太尼(镇痛药)浓度,并用其进行全身麻醉患者靶控输注性能的评价。方法血浆中加入内标芬太尼后,用乙腈沉淀蛋白法处理,用AgilentXDBC18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),乙腈-醋酸铵(10mmol.L-1,pH3.0)85∶15,流量为1mL·min-1。质谱用APCI离子源,正离子模式,多反应监测模式(MRM)。结果舒芬太尼在0.1～2ng.mL-1内,呈良好的线性关系,γ=0.9994。精密度及稳定性均RSD<13%。结论本法是一种简单、快速、准确、灵敏的测定舒芬太尼血药浓度的方法,可用于全身麻醉患者靶控输注性能的评价。     

HPLC/MS/MS法测定人血浆中麦考酚酸浓度

目的 建立测定人血浆中麦考酚酸(免疫抑制剂)含量的HPLC/MS/MS方法 .方法 血浆样品经乙腈沉淀蛋白后,以15 mmol·L-1醋酸铵-甲醇梯度洗脱,用Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18色谱柱,通过电喷雾离子化三重四极杆串联质谱,经多反应监测模式检测,m/z321.2→m/z 303.0(麦考酚酸),m/z237.0→m/z194.0(卡马西平,内标).结果 血浆中麦考酚酸的线性范围为0.1～10 μg·mL-1,方法 回收率为104.1%～106.6%,日内、日间精密度均小于7%.结论 本法简便、快速、灵敏、准确,已应用于肾移植后患者麦考酚酸酯的治疗药物监测.     

HPLC/MS法测定人全血中的雷米芬太尼

目的 建立全血中雷米芬太尼的高效液相色谱/质谱(HPLC/MS)测定方法,并测定围麻醉期患者体内雷米芬太尼的血药浓度.方法 全血样品用1-氯丁烷进行提取,以50%甲醇含乙酸铵(20 mmol/L)为流动相,色谱柱为SunfireTMC -18柱(2.1 mm×150 mm,5 μm),流速0.3 ml/min.质谱采用电喷雾电离(ESI)方式,正离子采集,以选择离子(SIR)方式进行定量,检测离子为雷米芬太尼377.结果 芬太尼在0.5～70.0 ng/ml 浓度范围内呈良好的线性(r=0.9995).日内、日间精密度均在15%以内,提取回收率大于82.3% ,方法回收率在97.62% ～100.58%.结论 HPLC/MS方法灵敏、准确,适合雷米芬太尼的体内药物浓度测定.     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆氯吡格雷浓度及其生物等效性评价

目的:建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定人血浆中氯吡格雷的浓度,研究2种硫酸氢氯吡格雷片的人体药动学及相对生物利用度。方法:血浆样品中加入内标美利曲辛,经乙腈沉淀蛋白提取,采用液相色谱-串联质谱法。用建立的方法测定20例健康男性受试者单剂量口服硫酸氢氯吡格雷受试制剂或参比制剂后的血药浓度,求得药动学参数,并对2种制剂的生物等效性进行评价。结果:在0.02～20 ng·mL-1内呈良好的线性关系,方法回收率98.4%～103.2%,日内、日间RSD均小于15%。单次口服75 mg硫酸氢氯吡格雷受试制剂或参比制剂后的Cmax分别为(1.9±1.5)ng·mL-1和(1.8±1.1)ng·mL-1;tmax分别为(0.8±0.5)h和(1.0±0.8)h;t1/2分别为(3.4±1.6)h和(3.5±1.5)h;AUC(0-48)分别为(4.4±4.3)h·ng·mL-1和(4.4±4.6)h·ng·mL-1;AUC(0-∞)分别为(4.7±4.4)h·ng·mL-1和(4.7±4.7)h·ng·mL-1。受试制剂对参比制剂的相对生物利用度为(98.2±32.8)%。结论:该方法灵敏,无杂质干扰。测得的受试制剂与参比制剂的主要药动学参数之间无明显差异,表明2种制剂在人体内生物等效。     

HPLC/MS/MS联用技术测定全血中的瑞芬太尼

目的:建立全血中瑞芬太尼的HPLC／MS／MS测定方法,并测定围麻醉期患者体内瑞芬太尼的血药浓度。方法:全血样品中加入枸橼酸芬太尼作内标,用1-氯丁烷进行提取。以乙腈与三氯甲烷(V乙腈:V三氧甲烷= 1:1)混合液加乙酸铵(2 mmol·L-1)为流动相,色谱柱为Intersil ODS-3(50 mm×2．1 mm,3μm),流速0．3 mL·min-1。三级四极杆质谱采用正离子模式,离子采集方式为多反应监测模式(MRM),离子源温度200℃,离子源电离电压为5 000 V,雾化气流速8 L·min-1。采集离子(母离子／子离子)为瑞芬太尼377／228,芬太尼337／188。结果:瑞芬太尼在0．5～50．0 ng·mL-1浓度范围内呈良好的线性(r=0．9994)。日内、日间精密度均在15％以内,提取回收率大于67．3％,方法回收率在95．0％～97．6％。结论:本方法灵敏、准确,适合瑞芬太尼的体内分析。     

液相色谱-质谱联用法测定人血浆双氢青蒿素浓度

目的:建立液相色谱-质谱联用法测定健康人血浆中双氢青蒿素浓度的方法。方法:以青蒿素为内标,血浆样品采用液-液萃取法处理。用电喷雾离子化和正离子多离子反应监测方式检测双氢青蒿素。结果:该方法双氢青蒿素线性范围为1.01~2020 ng.ml-1;定量下限为1.001±0.072 ng.ml-1;方法回收率在93.0%~98.2%;批内、批间变异系数均<10%。结论:该方法准确、灵敏、特异、简便,适用于健康人血浆双氢青蒿素浓度的测定。     

高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆中伊托必利的浓度

目的:建立HPLC-MS法测定人血浆中的伊托必利浓度.方法:以舒必利为内标,选用液液萃取法,然后进行LC-MS/MS分析.色谱柱为Phenomenex Luna C18柱(150 mm×2.0 mm,5μm),流动相为乙腈-10 mmol·L-1甲酸胺水溶液(含0.1%甲酸)(60:40),流速为0.2 mL·min-1,柱温40℃,进样量为10μL,质谱采用ESI正离子方式进行扫描,MRM方式检测,用于定量分析的监测离子为m/z 359.9→71.9(伊托必利)和m/z 343.0→112.2(舒必利).结果:本方法线性范围是0.336～688 ng·mL-1,r=0.999 3,最低定量限为0.336 ng·mL-1.绝对回收率均在80%以上,相对回收率在85%～115%之间,日内、日间RSD均<5%.结论:本方法灵敏、快速和稳定,可用于伊托必利血药浓度检测和药动学研究.     

液-质联用法测定瑞芬太尼在手术患者的全血浓度及其药代动力学

目的建立瑞芬太尼(麻醉药)在手术患者全血体内药物浓度的HPLC/MS/MS测定方法,并进行药代动力学研究。方法10名外科手术受试者静脉给予瑞芬太尼3~6μg·kg-1,用液质联用法测定全血中瑞芬太尼浓度,用3P87程序进行药代动力学数据处理。结果所建立瑞芬太尼全血药物浓度测定方法,回收率和精密度符合要求,符合二房室模型,其主要的药代动力学参数:Cmax=(32.57±7.38)ng·mL-1;t1/2β=(22.07±10.30)min;CL=(30.84±8.15)mL·(kg·min)-1;AUC=(192.80±35.72)ng·min·mL-1。结论测定方法简单、灵敏、准确,适于瑞芬太尼的药代动力学研究。     

氯吡格雷活性代谢物在人体内的血药浓度测定

目的：采用液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）建立人血浆中氯吡格雷活性代谢产物浓度测定的方法。方法：血浆经冷冻干燥处理,以Accucore C₁₈为色谱柱;乙腈（含0.01%甲酸）-水（含0.01%甲酸）为流动相,流速0.4 mL·min^-1,柱温30 ℃,进样量2 μL;通过正离子模式多反应监测扫描分析,离子通道分别为氯吡格雷活性代谢产物衍生物（CAMD）m/z 504.2→155.1,内标氯雷他定m/z 382.8→336.9。结果：血浆中氯吡格雷活性代谢产物衍生物在0.5~500 ng·mL^-1范围内线性关系良好;最低检测限为0.5 ng·mL^-1;提取回收率为83.81%~97.65%;日内和日间精密度的RSD均小于9.86%。结论：本方法准确可靠,简便快速且灵敏度高,适用于人血浆中氯吡格雷活性代谢物的测定,可进一步用于研究氯吡格雷活性代谢产物的药代动力学特征。