小檗碱及其盐类纳米制剂的研究进展

小檗碱及其盐类拥有多种药理活性,但目前上市的临床剂型较为单一,且因药物本身某些不足使其
难以发挥最大疗效。本文将总结近年小檗碱及其盐类的新型纳米制剂的研究进展,旨在为该领域提供研究
基础。     

表达幽门螺杆菌粘附素BabA重组蛋白菌株的构建及其粘附活性评价

目的 构建表达幽门螺杆菌(Hp)粘附素BabA重组蛋白的候选菌株并测定其粘附活性。方法 用PCR方法从Hp染色体DNA上扩增粘附素babA2基因，将其定向插入表达载体pET-22b( )中，并在BL21(DE3)大肠杆菌中表达，利用光镜计数法测定其粘附活性。结果 DNA序列分析表明，所克隆的粘附素babA2基因序列与GeneBank公布的一致。在37℃诱导表达3h后，粘附素BabA重组蛋白表达量占菌体总蛋白的34．8％，体外实验证实BabA参与了粘附过程。结论 本研究获得了表达有生物活性的Hp粘附素BabA的克隆，为深入研究其相关功能奠定了良好基础。     

表达幽门螺杆菌粘附素BabA重组蛋白菌株的构建及其粘附活性评价

目的构建表达幽门螺杆菌(Hp)粘附素BabA重组蛋白的候选菌株并测定其粘附活性。方法用PCR方法从Hp染色体DNA上扩增粘附素babA2基因,将其定向插入表达载体pET-22b( )中,并在BL21(DE3)大肠杆菌中表达,利用光镜计数法测定其粘附活性。结果DNA序列分析表明,所克隆的粘附素babA2基因序列与GeneBank公布的一致。在37 ℃诱导表达3 h后,粘附素BabA重组蛋白表达量占菌体总蛋白的34.8%,体外实验证实BabA参与了粘附过程。结论本研究获得了表达有生物活性的Hp粘附素BabA的克隆,为深入研究其相关功能奠定了良好基础。     

非洛地平口腔粘膜粘附片的制备及其性质评价

目的:制备非洛地平口腔粘膜粘附片,并对其进行性能评价.方法:以HPMC K4M和Carbopol 974P为生物粘附聚合物,加入碳酸氢钠采用直接压片法制备非洛地平口腔粘膜粘附片.以鸡嗉囊为模型测定其粘附力,采用改进的桨法测定粘附片的体外释放行为,并测定了粘附片的表面pH值,对粘附片的体内粘附行为和刺激性也进行了评价.结果:粘附片的表面pH值为7.01±0.11.非洛地平从粘附片中以Super Case-Ⅱ机制释放,表观释放速率常数k为3.3%h～.粘附片与鸡嗉囊接触后产生的粘附力平均为181.35±31.08g,经体内验证与口腔粘附性较为合适,且对口腔粘膜刺激性较小.结论:此给药系统可用于模型药物非洛地平的口腔粘膜给药.     

黄芩苷-小檗碱复合物纳米晶的制备和在体肠吸收评价

[目的]研究纳米晶对黄芩苷-小檗碱复合物的肠吸收促进作用.[方法]使用抗溶剂法结合高压均质法制备黄芩苷-小檗碱复合物纳米晶,进行初步体外评价.建立在体单向肠灌流模型,评价纳米晶对复合物吸收的促进效果.[结果]制备了黄芩苷-小檗碱复合物纳米晶.体外评价结果表明,黄芩苷-小檗碱复合物纳米晶为圆柱状,粒径为(225.10±9...     

幽门螺杆菌重组粘附素的安全性、免疫原性和生物学活性的体外评价

目的通过体外实验确定重组粘附素(rBabA)的安全性、免疫原性及粘附作用,探讨rBabA在幽门螺杆菌(Hp)疫苗应用中的可行性。方法二苯胺法测定rBabA致T细胞凋亡率,ELISA法测定Hp感染者血清中抗rBabA抗体,MTT法测定T细胞对rBabA的增殖反应,光镜计数法研究rBabA对Hp与胃癌细胞粘附的影响。结果体外安全性实验表明rBabA无明显致BabA抗体阴性者T细胞凋亡的作用,而且可刺激rBabA抗体阳性者T细胞的增殖;ELISA法共检测了38份Hp感染患者血清,rBabA抗体阳性率为18.4%。rBabA能部分阻断Hp与胃癌细胞系的粘附。结论研究表明rBabA是安全的、具有免疫原性的Hp菌体成分,既可以刺激体液免疫,又能够提高细胞免疫,有望成为针对BabA2基因阳性Hp菌株疫苗研制中一种有效的新抗原。     

13-取代小檗碱衍生物的合成及其抗肿瘤活性研究

目的通过在小檗碱的13位上引入不同取代基,探讨13-取代小檗碱衍生物的体外抗肿瘤活性构效关系,并对其抗肿瘤作用机制开展初步研究。方法以小檗碱为起始原料,13-烷基小檗碱（3a-3j）可经选择性还原后与脂肪醛反应而制备;13-取代苄基小檗碱（3k-3n）可经碱性条件下丙酮加成后与取代溴苄反应而制备。采用磺酰罗丹明B（SRB）法和流式细胞仪分别检测化合物的肿瘤细胞活性及周期的影响。结果设计合成了14个目标化合物,其中7个为全新化合物,其结构经1H-NMR和高分辨质谱确证。所有目标物的抗肿瘤活性均强于小檗碱,其中3h对人肝癌HepG2细胞和白血病细胞HL60的IC50分别达到了0.08μg/mL和0.06μg/mL。初步构效关系研究表明：13位烷基取代衍生物活性明显优于13位苄基取代衍生物;13位烷基链长度适中时活性最好。初步作用机制显示：3h可将肿瘤细胞周期阻滞于G2/M期,使细胞增殖受阻,达到抗肿瘤效果。结论 13-取代小檗碱具有发展成为一类新型抗肿瘤药物的潜力。     

小檗碱体外抗五种支原体的活性研究

本文报道采用液体培养基稀释法与琼脂稀释法，测定小檗碱体外抗５种支原体活性。结果显示：小檗碱有较强的抗唾液支原体、口腔支原体的作用，其ＭＩＣ５０与ＭＩＣ９０分别为４与８μｇ／ｍｌ。抗尿素支原体与人型支原体作用相同，ＭＩＣ５０与ＭＩＣ９０为８与１６μｇ／ｍｌ。抗精氨酸支原体作用较弱，ＭＩＣ５０与ＭＩＣ９０为１６与３２μｇ／ｍｌ。本研究结果提示：小檗碱在体外有明显的抗支原体作用，但尚须进一步临床研究。     

盐酸小檗碱治疗消化性溃疡的临床观察(附139例临床报告)

目的:探讨盐酸小檗碱对幽门螺杆菌(Hp)所致的消化性溃疡的临床疗效.方法:采用分组对照的方法,选择在内科门诊及住院的有胃肠道症状并经胃镜或上消化道钡餐诊为消化性溃疡的患者139例,随机分为3组.结果:阿莫西林治疗组较小檗碱治疗组疗效更好,但两组显效率和有效率均无显著差异(P＞0.05),而小檗碱治疗组与左氧氟沙星治疗组相比,显效率和有效率差别显著(P＜0.05).结论:盐酸小檗碱对Hp具有一定的抗菌活性,小檗碱和阿莫西林在治疗消化性溃疡时,疗效没有显著差别.     

抗幽门螺杆菌蛋黄免疫球蛋白IgY的制备及生物活性的研究

目的:从免疫了幽门螺杆菌(Hp)抗原的母鸡蛋黄中提取抗Hp-IgY。方法:用超声破碎的Hp抗原免疫21周龄罗曼产蛋母鸡,取免疫后所产鸡蛋卵黄,利用水稀释法加硫酸铵盐析方法,提纯IgY,ELISA间接法检测抗体效价,Bradford法检测抗体蛋白含量,SDS-PAGE法检测其相对分子质量及纯度。结果:母鸡初次免疫后第7天,抗体效价即渐渐升高,约第45天达到高峰;蛋黄抗体经纯化后,抗Hp-IgY蛋白纯度可达90%以上,含量为6.25 g/L。结论:用超声破碎的Hp抗原免疫母鸡,盐析法提纯免疫母鸡产蛋黄中的抗Hp-IgY,可获得高纯度及高效价的抗Hp的特异性蛋黄抗体。     

幽门螺杆菌感染情况及其抗体与胃癌前疾病、胃癌的相关性研究

目的研究宁夏惠农区回、汉族人群幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染的情况及其与胃癌前病变、胃癌的相关性。方法选择宁夏惠农区回、汉族383例,其中正常对照组99例(回族45例,汉族54例)、慢性萎缩性胃炎组97例(回族45例,汉族52例)、胃溃疡组75例(回族35例,汉族40例)和非贲门胃癌组112例(回族50例,汉族62例)。采用免疫印迹法检测血清Hp抗体、细胞毒素相关基因蛋白(CagA)、空泡毒素(VacA)、尿素酶B(UreB)、尿素酶A(UreA)。结果①回、汉族正常对照组Hp阳性率分别为68.9%和70.3%,差异无统计学意义(P>0.05);回、汉族Hp阳性率在胃溃疡和非贲门胃癌组中高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);②回、汉族CagA抗体阳性的Hp在慢性萎缩性胃炎、胃溃疡和非贲门胃癌组中高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。CagA+VacA、VacA、UreA和UreB抗体阳性率在对照组、慢性萎缩性胃炎、胃溃疡和胃癌中差异均无统计学意义(P>0.05)。结论①宁夏惠农区回、汉族正常人群Hp感染率高,回、汉族之间Hp感染差异无统计学意义。②宁夏惠农区回、汉族人群胃癌前疾病及胃癌高发与CagA抗体阳性Hp感染率高密切相关,表明Hp致病因子中毒素CagA发挥着主要作用。     

13C尿素呼气试验对根除幽门螺杆菌疗效的观察

目的探讨根除幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)治疗后疗效评估的最佳方法。方法对50例血清HP细胞毒素相关基因(Cytotoxin associated gene A,CagA)抗体阳性和13C尿素呼气试验(13C-UBT)阳性患者抗HP治疗后,进行13C-UBT与HP-CagA抗体测定。结果50例HP感染患者抗HP治疗后,HP-CagA抗体阳性例数48例(96%),13C-UBT阳性例数8例(16%)。结论13C-UBT是抗HP治疗临床疗效监测的最佳方法。     

抗幽门螺杆菌治疗在特发性血小板减少性紫癜中的作用

目的探讨特发性血小板减少性紫癜（ITP）与幽门螺杆菌（HP）的关系及抗HP治疗在ITP患者中的意义。方法选取71例确诊为ITP的初治总者,采用14碳尿素呼气试验（14C—UBT）分为HP阳性者48例和HP阴性者23例。HP阳性者随机分为联合用药组24例,泼尼松组24例,HP阴性者23例为对照组,联合用药组予抗HP治疗及泼尼松治疗,泼尼松组、对照组仅用泼尼松治疗。结果3组患者治疗后2周、4周、3个月血小板计数均呈递增趋势,联合用药组增加最明显,同时与泼尼松组、对照组比较差异均有显著性（P〈0．05）,但泼尼松组和对照组血小板计数差异无显著性（P〉0．05）;联合用药组、泼尼松组、对照组总有效率分别为88．67％、62．50％、56．52％,联合用药组总有效率均明显高于泼尼松组（P〈0．05）、对照组（P〈0．01）;泼尼松组和对照组总有效率比较差异无显著性（P〉0．05）。结论HP感染与特发性血小板减少性紫癜的发病有一定的相关性,对HP阳性的ITP患者行抗HP治疗能提高临床疗效。     

13C尿素呼气试验对根除幽门螺杆菌疗效评估的研究

目的：探讨根除幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)治疗后疗效评估的最佳方法。方法：对50例血清HP细胞毒素相关基因(Cytotoxin associated gene A，CagA)抗体阳性和13C尿素呼气试验(13C-UBT)阳性患抗HP治疗后，进行13C-UBT与HP-CagA抗体测定。结果：50例HP感染患抗HP治疗后，HP-CagA抗体阳性例数48例(96％))13C-UBTb阳性例数8例（16％)。结论：13C-UBT是抗HP治疗临床疗效监测的最佳方法。     

幽门螺杆菌的培养与尿素酶试验的比较

采用细菌培养法和尿素酶法分别检测了 10 2例消化道疾病患者幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori ,H .pylori)感染情况。标本经输送培养基运送、匀浆后 ,分别涂布于 3种选择性培养基和非选择性培养基上 ,38℃微需氧环境 (85 %N2 ,10 %CO2 ,5 %O2 )培养。标本同时采用尿素酶法进行检测。结果表明 ,3种细菌培养法与尿素酶法检测阳性率接近 ,分别为 4 3 1% ,39 2 % ,4 3 1%和 37 2 % ;非选择性培养基不适于H .pylori的培养检测     

幽门螺杆菌感染与短暂性脑缺血发作的相关性研究

目的：探讨幽门螺杆菌(Hp)感染与短暂性脑缺血发作(TIA)的关系及抗Hp治疗对TIA预后的影响。方法随机选择2014年1＿12月在该院发病1周内的TIA患者(56例﹚与健康体检者(50名﹚,检测血清Hp抗体。 Hp阳性的TIA患者随机分为抗Hp治疗组(20例﹚和常规治疗组(19例﹚。抗Hp治疗组给予根除Hp治疗并随访1年,观察终点事件的发生。结果 TIA组Hp感染率显著高于正常对照组(69.64% vs 48.00%,x2=5.21,P﹤0.01﹚;抗Hp治疗组TIA复发率显著低于对照组(5.00% vs 26.32%,x2=4.02,P﹤0.05﹚;抗Hp治疗组急性脑梗死发生率显著低于对照组(0% vs 15.79%,x2=4.56,P﹤0.05﹚。结论 Hp感染与TIA相关;抗Hp治疗可显著降低TIA患者复发率,减少缺血性脑卒中的发生。     

幽门螺杆菌感染与胃十二指肠溃疡的相关性研究

目的:探讨胃十二指肠溃疡与幽门螺杆茵感染的关系。方法:对280例消化性溃疡的患者施行胃镜检查及14C-尿素呼气检验。结果:内镜下诊断胃溃疡116例(41.4%),十二指肠溃疡118例(42.1%),复合性溃疡46例(16.4%)。消化性溃疡Hp感染阳性率达91.1%,其中胃溃疡Hp感染率最高(94.8%),十二指肠溃疡Hp感染率最低(86.4%)。结论:Hp感染是消化性溃疡的重要病因,根除Hp感染是治疗消化性溃疡疾病的重要措施。     

反流性食管炎与幽门螺杆菌感染的相关性研究

目的探讨反流性食管炎（RE）与幽门螺杆菌（Hp）感染的相关性。方法回顾性分析2009年1月~2011年12月上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院的胃镜检查病例,比较反流性食管炎和慢性胃炎的Hp感染率,并将反流性食管炎按洛杉矶分类法分级,比较各级反流性食管炎的Hp感染率。收集经胃镜检查确诊的Hp阳性反流性食管炎患者107例,按1∶1比例随机分为治疗组54例,对照组53例,治疗组第1周给予标准三联疗法根除Hp治疗（口服雷贝拉唑10 mg,2次/d＋克拉霉素500 mg,2次/d＋阿莫西林1000 mg,2次/d）,后口服雷贝拉唑10 mg,2次/d;对照组给予雷贝拉唑10 mg,2次/d口服治疗。两组疗程均为8周。治疗结束复查胃镜,治疗组行14C呼气试验检测Hp,观察两组患者临床症状改善和胃镜下食管炎症的改善。结果回顾性分析发现反流性食管炎和慢性胃炎Hp感染率分别为38.12%和56.22%,差异有高度统计学意义（P〈0.01）;反流性食管炎A、B、C、D级HP感染率分别为41.87%、37.74%、31.63%和25.64%,差异无统计学意义（P〉0.05）,但呈现反流性食管炎等级越轻,Hp感染率越高的趋势;随机对照研究发现治疗组进行Hp根除治疗后,临床症状积分改善有效率为90.48%,与对照组的88.68%相当,胃镜下食管黏膜炎症改善有效率治疗组为55.88%,对照组为80.0%,两者差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 HP感染可能是反流性食管炎的一种保护性因素。     

幽门螺杆菌液体培养的研究

目的 :建立一种适用于幽门螺杆菌 (Hp)大量扩增并提取致空泡变性细胞毒素 (Vac A)的液体培养方法。 方法 :采用TSB及 MHB培养液 ,加入小牛血清 (FBS)或环糊精 (CD)作为支持剂 ,比较其对 Hp的扩增效果及上清中空泡毒素活性的差异。结果 :TSB+CD组 Hp平均扩增速度及菌体湿重与 TSB+FBS组相比无显著差异 ,二者均显著高于 MHB培养液组 (P<0 .0 1)。 TSB+CD组上清蛋白浓度为 (2 .4 4± 0 .39) m g/ m l,显著高于 MHB+CD组。 TSB培养液组浓缩上清具有明显的空泡毒性 ,且蛋白电泳可见相对分子质量为 95 0 0 0的 Vac A,而 MHB培养液组无空泡毒性。 结论 :以 TSB为培养液 ,加入适量的CD作为支持剂 ,在不损失 Vac A活性的前提下 ,可明显增加浓缩上清液中的蛋白纯度 ,是大量提取和制备 Hp Vac A蛋白理想的液体培养方法。