腺病毒介导AT2R基因转染表达抑制肾间质纤维母细胞增殖

目的 :探讨血管紧张素Ⅱ (AngⅡ ) 2型受体 (AT2R)表达对人肾间质纤维母细胞 (hRIF)增殖的影响。方法 :构建携带AT2R基因的重组复制缺陷型腺病毒载体 (AdCMV -AT2R) ,转染体外培养hRIF并检测AT2RmRNA表达及细胞表达率 ,用细胞周期分析、分裂指数、MTT比色法和 5 -溴尿苷 (BrdU)掺入法检测hRIF增殖。结果 :构建的AdCMV -AT2R体外转染培养hRIF表达率为 90 .5 7%。AT2R峰值表达时 ,增殖期hRIF(S期和G2 -M期 )比率从 3 1.7%降低到 13 .9% (P <0 .0 5 ) ,分裂指数从 3 7.4%降低到 9.6% (P <0 .0 1) ,MTT吸光度和BrdU掺入量分别降低 60 .1%和 5 4.2 % (P <0 .0 1)。结论 :AT2R转染表达可显著抑制体外培养hRIF的增殖 ,这一作用对肾间质纤维化防治是有益的     

三种大鼠肾小管间质损伤模型的比较实验研究

目的　比较三种大鼠肾小管间质损伤模型。方法　采用庆大霉素腹腔注射、单侧输尿管梗阻、环孢素A(CsA)灌胃三种不同的方法 ,损伤大鼠的肾小管间质 ,测定尿液、血液各项生化指标 ,观察肾脏病理改变情况。结果　与对照组比较 ,三种模型的肾脏指数均明显增加 ,差异有极显著性 (P <0 0 1) ;庆大霉素模型尿蛋白和NAG酶在 7d时急剧增高 ,而在 15d时NAG酶差异已无显著性 ,单侧输尿管梗阻模型尿蛋白和NAG酶均显著增高 ,CsA模型的尿蛋白则呈下降趋势 ( 7dP <0 .0 5 ,15dP <0 0 1) ;三种模型的血清SCR、BUN均显著升高 ,TP、ALB均显著下降 ,15d时庆大霉素模型和单侧输尿管梗阻模型差异无显著性。镜下可见 :三种模型的肾间质均可见炎性细胞浸润 ,肾小管明显扩张 ,上皮空泡变性 ,仅单侧输尿管梗阻模型的间质趋向纤维化 ,CsA模型的病变相对轻微。结论　三种方法均可造成大鼠不同程度的肾小管间质损伤 ,单侧输尿管梗阻模型的肾小管间质纤维化病变明显 ,与临床肾脏病的表现相似 ,是一个较为理想可行的肾小管间质损伤模型 ,而庆大霉素模型 7d即能严重损伤肾小管间质 ,可作为急性的肾小管间质损伤模型 ,CsA模型则不如庆大霉素模型与单侧输尿管梗阻模型理想。     

血管紧张素II1A受体在大鼠肾间质损伤的表达及转移酶…

目的 从蛋白质和基因水平探讨血管紧张素Ⅱ１Ａ（ＡＴ１Ａ）受体在大鼠肾小管间质病变过程中的作用机理及转移酶抑制剂的调节作用。方法 大鼠单侧输尿管结扎术后，分为两组，治疗组用转换酶抑制剂（苯那普利）５０ｍｇ／Ｌ置自来水中喂饲，在手术前２４小时开始喂饲直至将大鼠处死时止。对照组单纯用自来水喂饲。利用免疫组化及原位杂交方法观察ＡＴ１Ａ受体表达，并同时测定血压和观察组织学变化。结果 单侧输尿管梗阻术后１０在     

脂质体瞬时转染siRNA抑制肾小管上皮细胞AngⅡ 1型受体表达

目的建立有效的脂质体瞬时转染法,转染小分子RNA（siRNA）,抑制人肾小管上皮细胞（human kidneytubular epithelial cells,HKC）血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）1型受体（AT1R）的表达。方法针对人AT1R mRNA135到156位点,由美国Ambion公司设计并合成AT1R siRNA序列,以脂质体法瞬时转染至HKC,利用RT-PCR及Western blot技术检测HKC内AT1R mRNA及蛋白表达。结果AT1R siRNA转染对人肾小管上皮细胞AT1R的抑制效果在48h达到最大抑制作用;转染后,HKC细胞AT1R mRNA表达下调（68.5±6.4）%,AT1R蛋白表达下调（80.7±5.3）%,与对照组比较存在显著性差异（P〈0.001）。使用AngⅡ刺激,特异性AT1R siRNA转染组AT1R表达明显下降,无转染及非特异性转染组AT1R表达升高。特异性AT1R siRNA转染HKC细胞后,其炎症因子单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）表达明显下降。结论本研究利用脂质体瞬时转染siRNA方法,成功抑制肾小管上皮细胞表达AT1R,为后续相关研究提供实验方法。     

血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA和蛋白在人胰腺癌组织中的表达

目的：探讨血管紧张素Ⅱ1型受体（angiotensin Ⅱ type 1 receptor,AT1R)mRNA和蛋白在人胰腺癌组织中的表达。方法：标本取向8例手术切除的胰腺癌、癌旁组织及3例正常胰腺组织，RT－PCR方法检测人胰腺癌及正常胰腺组织中AT1R mRNA的表达；免疫组织化学方法与聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS－PAGE）检测人胰腺癌组织中蛋白的表达。结果：AT1R mRNA和蛋白在人胰腺癌组织中均有表达。RT－PCR显示AT1R mRNA在人胰腺癌组织与人正常胰腺组织中的阳性表达率分别为87．5％（7／8）和0（0／3），免疫组织化学染色显示AT1R蛋白在人胰腺癌组织中的阳性表达率为62．5％（5／8），明显高于癌旁组织的12．5％（1／8），差异有高度显著性（P＜0．01）；SDS－PAGE蛋白电泳也证实胰腺癌组织有AT1R蛋白的存在，而在人正常胰腺组织中则未见AT1R蛋白的阳性表达。结论：AT1R在人胰腺癌的生长中具有重要作用，抑制AT1R可能是一种有效的治疗策略。     

AT2R转染表达抑制人肾间质成纤维细胞迁移活性

目的　探讨血管紧张素Ⅱ (AngⅡ ) 2型受体 (AT2R)基因表达对人肾间质成纤维细胞 (hRIF)迁移活性的影响。方法　构建带AT2R基因的重组复制型腺病毒载体 (AdCMV -AT2R) ,转染培养的hRIF ,用流式细胞仪检测AT2R细胞表达率 ,RT -PCR方法检测AT2RmRNA表达。用改良Boyden’s趋化小室和激光共聚焦显微镜检测hRIF迁移活性。结果　构建的AdCMV -AT2R转染培养hRIF表达率为 90 6%。改良Boyden’s趋化小室检测表明 ,迁移细胞数抑制比例最高可达 62 2 % (P <0 0 1) ,激光共聚焦显微镜检测表明 ,转染组F -actin表达明显受抑制。结论　AT2R转染表达可显著抑制hRIF迁移活性 ,这对延缓肾间质纤维化是有益的     

AT1R在肾间质纤维化中的表达及银杏叶片的干预作用

目的：探讨AT1R（血管紧张素Ⅱ1型受体）在肾间质纤维化发生发展中的作用及意义,并观察银杏叶片对AT1R在肾脏中表达的影响。方法：采用单侧输尿管梗阻（UUO）手术复制大鼠肾间质纤维化模型,通过免疫组织化学技术,从细胞水平及分子水平研究AT1R在UUO大鼠肾间质中的表达情况。结果：UUO2周后,与假手术组比较,模型组大鼠AT1R表达量明显增加;与模型组比较,银杏叶片治疗组与苯那普利治疗组肾间质AT1R表达量明显减少。结论：AT1R在UUO大鼠肾脏中高表达,AngⅡ与其结合后,通过多种途径参与肾间质纤维化的形成,促进纤维化病变的发展。银杏叶片有减轻肾间质纤维化程度、延缓肾间质纤维发展进程的作用。     

UUO模型大鼠肾间质纤维化动态进展及α-SMA、TGF-β1和VDR表达变化

目的 观察单侧输尿管梗阻(UUO)模型大鼠肾小管间质纤维化动态进展,研究该病理过程中肾脏纤维化相关蛋白表达的变化.方法 32只清洁级SD大鼠随机分为假手术组(n=16)和UUO模型组(模型组,n=16).两组大鼠分别于术后(模型组建模后)第2、5、9、14天分批(n=4)处死,留取手术侧(模型组梗阻侧)肾脏组织.分别采用HE和Masson染色、免疫组织化学染色及Western blotting等方法,评价肾小管间质纤维化损伤程度并检测肾脏组织α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)、维生素D受体(VDR)及转化生长因子β1(TGF-β1)等相关蛋白的表达.结果 肾脏组织形态学观察显示,随着输尿管梗阻时间的延长,肾小管间质纤维化程度逐步加重.免疫组织化学染色显示,模型组大鼠建模后各时间点肾间质α-SMA和FN阳性面积百分比均显著高于假手术组(P＜0.05),且随着梗阻时间的延长逐渐升高,至建模后第14天时达到高峰.Western blotting分析表明,模型组大鼠建模后各时间点α-SMA和TGF-β1相对表达量均显著高于假手术组(P＜0.05),而VDR相对表达量显著低于假手术组(P＜0.05);建模后第2天,模型组大鼠肾脏组织α-SMA相对表达量已显著增加;建模后第14天,模型组α-SMA和TGF-β1相对表达量分别增高至假手术组的12.7倍和8.8倍,而VDR相对表达量下降至假手术组的3%.结论 UUO模型大鼠建模后第14天可出现显著的肾间质纤维化;建模早期肾间质中α-SMA表达增加提示肾间质成纤维细胞的活化;VDR表达的进行性减少提示其与肾间质纤维化有关.     

AT1R及AT2R在宫颈癌中的表达及其意义

目的探讨血管紧张素Ⅱ受体AT1R、AT2R与宫颈癌发生、发展的关系。方法在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变（CIN）和宫颈癌组织中，采用免疫组织化学的方法检测血管紧张素Ⅱ受体Ⅰ型（AT1R）和受体Ⅱ型（AT2R）的表达。结果AT1R在宫颈癌各组中的阳性表达率大于正常宫颈组和宫颈上皮内瘤变（CIN）各组（P〈0．01），AT2R在宫颈癌各组和CINⅡ／Ⅲ组中的阳性表达率均大于正常宫颈组、CINⅠ组（P〈0．05）。结论AT1R、AT2R参与宫颈癌的发生、发展。     

血管紧张素 Ⅱ1A 受体在大鼠肾间质损伤的表达及转换酶抑制剂的调节作用

目的从蛋白质和基因水平探讨血管紧张素Ⅱ１Ａ（ＡＴ１Ａ）受体在大鼠肾小管间质病变过程中的作用机理及转换酶抑制剂的调节作用。方法大鼠单侧输尿管结扎术后，分为两组，治疗组用转换酶抑制剂（苯那普利）５０ｍｇ／Ｌ置自来水中喂饲，在手术前２４小时开始喂饲直至将大鼠处死时止。对照组单纯用自来水喂饲。利用免疫组化及原位杂交方法观察ＡＴ１Ａ受体表达，并同时测定血压和观察组织学变化。结果单侧输尿管梗阻术后１０天，对照组大鼠平均动脉压升高（１６．６±０．７ｋＰａ）并出现明显的肾小管间质改变，治疗组肾小管间质病变明显减轻，平均动脉压降低（１４．２±０．６ｋＰａ），两组比较Ｐ＜０．０５，免疫组化和原位杂交结果显示对照组肾小管上皮细胞、肾间质及血管周围有大量ＡＴ１Ａ受体表达，而治疗组ＡＴ１Ａ受体表达明显减弱。结论肾小管间质损伤时可以使ＡＴ１Ａ受体表达上调。苯那普利可以减少ＡＴ１Ａ受体表达，减缓肾小管间质的损伤，从而进一步解释了肾脏局部的血管紧张素Ⅱ可能主要是与ＡＴ１Ａ受体的结合而产生作用。     

人参皂苷Rbl对大鼠脑缺血再灌注JAK2/STAT3信号转导通路的影响

目的探讨人参皂苷Rbl对脑缺血再灌注损伤JAK2/STAT3胞内信号通路的影响,明确其保护机制。方法建立大脑中动脉缺血再灌注(MCAO/R)模型,将大鼠随机分为假手术组、溶媒组、人参皂苷Rbl低剂量组、人参皂苷Rb1高剂量组,观察大鼠神经行为学障碍程度,ELISA检测脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的含量,免疫组织化学染色法观察缺血侧大脑p-JAK2和p-STAT3的表达。结果 (1)与溶媒组比较,人参皂苷Rbl高剂量组显著降低大鼠神经行为学评分(P<0.05)。(2)人参皂苷Rbl高剂量组明显减少TNF-α、IL-6的含量(P<0.05或P<0.01),而在低剂量组,TNF-α含量显著减少(P<0.05),IL-6的含量也有所降低但差异无统计学意义(P>0.05)。(3)人参皂苷Rbl高剂量组、低剂量组显著降低p-JAK2和p-STAT3的表达(P<0.05或P<0.01)。结论人参皂苷Rbl可能通过调控细胞因子介导的JAK2/STAT3信号途径保护脑缺血再灌注损伤。     

宫颈癌中JAK2／STAT3信号通道介导bax、bcl-2的表达

目的探讨JAK2/STAT3信号通道的激活及其介导bax/bcl-2在宫颈癌中的表达作用。方法选取本院2011-2014年宫颈癌患者40例,CINⅠ级组28例,CINⅡ/Ⅲ级组12例;选择正常宫颈15例为对照组。病理切片采用免疫组织化学方法测定P-JAK2、P-STAT3、bax、bcl-2的表达。结果1）对照组未见P-JAK2、PSTAT3蛋白表达;与对照组比较,CINⅠ级组及CINⅡ/Ⅲ级组表达增多（P〈0.05）;与CINⅠ级组比较,CINⅡ/Ⅲ级组表达增多（P〈0.05）。2）对照组可见少量bax、bcl-2蛋白表达;与对照组比较,CINⅠ级组及CINⅡ/Ⅲ级组表达增多（P〈0.05）;与CINⅠ级组比较,CINⅡ/Ⅲ级组的bax/bcl-2比率降低（P〈0.05）。3）CINⅠ级组和CINⅡ/Ⅲ级组通道蛋白P-JAK2、P-STAT3与bax/bcl-2比率呈正相关（P〈0.05）。结论宫颈癌患者JAK2/STAT3信号通道激活,可能与上调bax/bcl-2的表达和调节细胞凋亡有关。     

TF-1细胞增殖特性与信号蛋白JAK2/STAT3表达研究

目的 探索JAK／STAT途径活化与细胞增殖和凋亡之间的关系。方法 通过表达内源性GM-CSF、受体的TF-1细胞，观察细胞增殖与凋亡；建立免疫沉淀和Western blot印迹方法，检测经GM-CSF100 ng／ml瞬时诱导的TF-1细胞信号蛋白JAK2和STAT3酪氨酸磷酸化情况。结果 经过GM-CSF刺激，细胞不但免于凋亡，TF-1细胞还呈现剂量与时间信赖性的增殖反应。当耗竭细胞因子6～12h后，倒置显微镜下TF-1细胞呈现折光性改变，细胞开始凋亡，呈现凋亡特征性形态改变和出现DNA梯形条带，而加入0．1ng／ml的GM-CSF，TF-1细胞即开始进入增殖状态，提示GM-CSF对细胞具有凋亡保护作用。经过100ng／ml GM-CSF的瞬时诱导，在分子量130kd区域见到JAK2蛋白条带，显示GM-CSF可诱导TF-1细胞磷酸化JAK2表达；而在分子量90kd区域未见到STAT3蛋白条带，显示无磷酸化STAT3表达；而未经GM-CSF诱导的TF-1细胞，既无磷酸化JAK2也无磷酸化STAT3表达。结论 GM-CSF、为TF-1细胞增殖诱导和凋亡保护所必需；GM-CSF诱导的TF-1细胞生物学效应涉及到胞浆信号分子JAK2磷酸化而非STAT3磷酸化。     

加味防己黄芪汤对UUO大鼠纤维化干预作用及对JAK2/STAT3信号通路影响

[目的]证实加味防己黄芪汤对于单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠纤维化的干预作用以及对JAK2/STAT3信号通路的影响。[方法]选取SPF级雄性SD大鼠共60只,构建UUO模型,随机分为假手术组、模型组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、缬沙坦组,每组10只,术后第14天取材。观测肾脏脏器系数、血肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量;苏木精-伊红染色法（HE）、马松（Masson）病理染色;Real-time qPCR法检测NF-κB、IκBa前后表达变化;Western Blot法检测JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、α-平滑肌肌动特异性蛋白（α-SMA）前后表达变化。[结果]各组大鼠肾脏脏器系数、血肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量、HE、Masson病理染色结果显示,药物干预组较模型组明显改善,且中剂量、高剂量组整体改善较为明显。Real-time qPCR结果显示,NF-κB、IκBa药物干预组同模型组相比表达水平明显下降（P<0.01）。Western Blot结果,E-cad、α-SMA、p-Jak2、p-Stat...     

SOCS3经JAK/STAT信号通路调控气道黏蛋白高分泌

目的 研究细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)在炎症情况下经JAK/STAT通路调控气道黏液高分泌.方法 培养人气道16HBE上皮细胞,设置空白对照组、白介素(IL)-6处理组、IL-6和microRNA (miR)-203处理组,Westernblot法分析细胞中磷酸化JAK激酶(p-JAK1/2)、SOCS3、黏蛋白(MUC) 5AC蛋白水平;Real-time法检测各组细胞中SOCS3、STAT3、MUC5AC mRNA表达量;ELISA法检测各组培养上清液中p-JAK1/2、SOCS3、MUC5AC蛋白含量.结果 在IL-6刺激下,IL-6处理组的p-JAK1/2、SOCS3、MUC5AC蛋白量及SOCS3、STAT3 mRNA含量较空白对照组显著升高(P＜0.05),IL-6和miR-203处理组的p-JAK1/2、MUC5AC蛋白量及STAT3 mRNA含量较IL-6处理组显著升高(P＜0.05),但SOCS3 mRNA与IL-6处理组比较差异无统计学意义,SOCS3蛋白含量较IL-6处理组显著降低(P＜0.05).结论 细胞在IL-6刺激后SOCS3呈现高表达,同时经JAK/STAT信号通路负反馈调控MUC5AC.     

大肠癌中自噬相关蛋白与JAK2/STAT3 信号通路的相关性

目的 探讨大肠癌发生、发展过程中自噬相关蛋白LC3、p62 与JAK2/STAT3 信号通路的关系。 方法 采用免疫组织化学法检测93 例大肠癌组织和癌旁组织中LC3、p62、p-JAK2 和p-STAT3 的蛋白表 达,并对其阳性表达率进行比较分析。结果 大肠癌中LC3、p-JAK2 和p-STAT3 阳性表达率高于癌旁组织 （P <0.05）,高中分化大肠癌LC3、p-JAK2 和p-STAT3 蛋白阳性表达率低于低分化大肠癌（P <0.05）,有淋 巴结转移患者LC3、p-JAK2 和p-STAT3 蛋白阳性表达率高于无淋巴结转移（P <0.05）。大肠癌p62 蛋白阳 性表达率低于癌旁组织（P <0.05）,高中分化大肠癌p62 蛋白阳性表达率高于低分化大肠癌（P <0.05）,有淋 巴结转移患者p62 蛋白阳性表达率低于无淋巴结转移（P <0.05）。LC3 蛋白表达与p-JAK2、p-STAT3 蛋白 表达均呈正相关（r s=0.315 和0.295,P <0.05）,而p62 蛋白与p-JAK2、p-STAT3 蛋白表达均呈负相关（r s=-0.320 和-0.326,P <0.05）。结论 LC3、p62 在大肠癌中表达增加可能与JAK2/STAT3 信号通路有关,为大肠癌的 发病机制研究提供可能的理论基础。     

2型糖尿病大血管病变患者血清诱导的人脐静脉内皮细胞中JAK2/STAT3信号通路的表达

目的 探讨Janus蛋白酪氨酸激酶2/信号转导子和转录激活子3(JAK2/STAT3)信号通路在2型糖尿病大血管病变发病机制中的作用.方法 取健康志愿者、单纯2型糖尿病患者和2型糖尿病大血管病变患者的血清孵育人脐静脉内皮细胞(HUVEC)24 h,通过给予JAK2特异性抑制剂AG490阻断JAK2/STAT3信号通路,并将细胞按不同处理方式分为对照组(NC组)、单纯糖尿病组(DM组)、糖尿病大血管病变组(DV组)、单纯糖尿病+AG490组(DM+AG490组)及糖尿病大血管病变+AG490组(DV+AG490组),各30例.采用实时定量PCR技术检测各组细胞JAK2、STA T3、血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子受体(FLT1)mRNA表达水平,蛋白质印迹法检测JAK2、STAT3和磷酸化STAT3 (p-STAT3)蛋白表达量.结果 与NC组比较,DM组和DV组HUVEC细胞内JAK2、STA T3mRNA和JAK2、p-STAT3的蛋白表达水平均上调(P＜0.05),且DV组JAK2、STA T3 mRNA和JAK2、p-STAT3蛋白表达水平均高于DM组(P＜0.05).DM+AG490组和DV+AG490组的JAK2、STA T3 rnRNA和JAK2、p-STAT3蛋白表达水平分别低于DM组、DV组(P＜0.05).与NC组和DM组比较,DV组VEF和FLT1 mRNA的表达水平上调(P＜0.05);而与DV组比较,DV+AG490组VEGF和FLT1 mRNA的表达水平均下调(P＜0.05).结论 JAK2/STAT3信号通路可能参与2型糖尿病大血管病变的发病过程.     

JAK2/STAT3通路在表皮生长因子诱导结肠癌细胞侵袭迁移中的作用

目的探讨JAK2/STAT3通路在表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)诱导结肠癌细胞侵袭迁移中的作用。方法以人结肠癌细胞株LoVo为研究对象,分为对照组、表皮生长因子处理组(EGF组)、表皮生长因子与JAK2激酶抑制剂AG490共处理组(EGF+AG490组)。采用免疫荧光和Western blot检测各组LoVo细胞E钙粘素蛋白、磷酸化STAT3表达水平;Transwell法检测细胞侵袭能力;细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果细胞划痕实验对照组细胞划痕闭合约38%,EGF+AG490组细胞划痕闭合约40%,而EGF组闭合约80%。EGF组显著高于另2组(P<0.05);体外侵袭实验显示对照组透膜细胞数为(21.24±2.65)/视野,EGF+AG490组为(23.19±3.50)/视野,EGF组为(55.08±2.14)/视野。EGF组显著高于另2组(P<0.05);与EGF+AG490组结肠癌LoVo细胞相比,EGF组细胞P-STAT3表达增加72.4%,E-cadherin蛋白表达降低68.5%(P<0.05);免疫荧光显示EGF组细胞E-cadherin向细胞质内移位...     

促炎因子在实验性重症急性胰腺炎早期对JAK2/STAT3信号通路的影响

目的探讨重症急性胰腺炎( SAP)早期炎症因子的分泌与JAK2/STAT3信号通路之间的关系。方法以4%牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射诱导大鼠 SAP模型。32只雄性SD大鼠随机分为4组：对照组和SAP造模组(6、12、18 h),每组8只。动态测定各组血清淀粉酶( AMY )和胰脂肪酶( LPS)、血钙( Ca2+)水平;光镜下观察胰腺病理变化;ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α( TNF-α)、白介素-1β( IL-1β)及白介素-18(IL-18)表达情况;RT-PCR和Western blot法分别检测胰腺组织中JAK2和STAT3在胰腺中的表达水平变化。结果各SAP造模组血清学指标水平、TNF-α、IL-1β及IL-18均明显高于对照组;病理学显示胰腺组织随病情进展逐步加重;SAP造模组胰腺JAK2和STAT3基因和蛋白的表达均明显增高,且JAK2和STAT3表达变化与胰腺组织的严重程度相一致。结论 SAP早期促炎因子过度表达是病情进展的损伤因子,可能通过诱导 JAK2/STAT3信号通路的活化,加重SAP早期器官损伤程度。     

JAK2/STAT3信号传导通路在瘦素促进子宫内膜癌细胞增殖中的作用

目的 探讨JAK2/STAT3信号传导通路在瘦素促进子宫内膜癌细胞(Ishikawa细胞)增殖中的作用.方法 免疫荧光染色法检测瘦素受体(OB-Rb)在Ishikawa细胞的表达.Ishikawa细胞分别用不同浓度的瘦素(0、10、50、100、150 ng/ml)作用不同的时间(6、12、24 h)后,MTT法检测各组细胞的增殖情况;另应用不同浓度(0、25、50、100 μmol/L)JAK2激酶特异性抑制剂AG490阻断STAT3磷酸化后,采用MTT法检测瘦素对Ishikawa细胞增殖的影响;瘦素(100 ng/ml)作用Ishikawa细胞不同时间(0、20、40、60 min)后,采用免疫印迹法(Western blot)检测细胞STAT3磷酸化水平.结果 免疫荧光染色证实Ishikawa细胞膜存在OB-Rb的表达;瘦素能明显促进Ishikawa细胞的增殖,在0 ～100 ng/ml范围内呈剂量依赖性,于150 ng/ml瘦素作用24 h时细胞增殖效应最大;AG490可明显抑制瘦素对Ishikawa细胞的促增殖作用,呈剂量依赖性;Ishikawa细胞经100 ng/ml瘦素处理后,随时间的延长,STAT3活化程度逐渐增高,至少可持续60 min.结论 瘦素可能通过激活JAK2/STAT3信号传导通路促进子宫内膜癌细胞的增殖.