三氧化二砷诱导人胃癌细胞株MGC—803细胞凋亡的研究

为探讨三氧化二砷对胃癌细胞的作用及可能的机制。用不同浓度的Ａｓ２Ｏ３作用于增减的胃癌细胞株ＭＧＣ－８０３细胞。噻唑蓝细胞活力测定显示Ａｓ２Ｏ３能明显抑制ＭＧＣ－８０３细胞生长；     

三氧化二砷体外诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的研究

目的 :探讨三氧化二砷 (As2 O3 )对人胃癌SGC 790 1细胞抑制生长、诱导凋亡的生物学效应。方法 :光学显微镜观察细胞形态 ,四甲基偶氮唑蓝 (MTT)还原法检测As2 O3 对该细胞株生长的影响 ,流式细胞仪 (FCM )及 3′ OH末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞。结果 :SGC 790 1细胞经As2 O3 作用后 ,细胞增殖受到明显抑制 ,且呈剂量和作用时间依赖关系 ,细胞周期分析显示G2 M期阻滞 ;FCM检测在细胞周期G1期前出现低于 2倍体的凋亡峰 ;TUNEL标记发现DNA链的断裂。结论 :As2 O3 能抑制人胃癌SGC 790 1细胞增殖 ,并诱导该细胞系凋亡 ,其发生机制可能与细胞周期阻滞有关。     

三氧化二砷对人胃癌MKN45细胞凋亡的影响

目的研究三氧化二砷(As2O3)对人胃癌细胞的生物学效应及其作用机制。方法胃癌细胞经As2O3处理后,用台盼蓝方法检测As2O3的IC50,采用流式细胞仪、DAPI荧光染色、DNA电泳检测细胞凋亡。结果As2O3在一定浓度范围内以浓度依赖的方式抑制胃癌细胞生长,其IC50为(11.05±0.25)μmol/L。经1～10μmol/LAs2O3处理胃癌细胞后,流式细胞仪检测出凋亡峰,流式细胞光度计下可见明显的凋亡细胞形态特征,琼脂糖凝胶电泳出现DNA梯形条带。结论As2O3在体外可诱导胃癌细胞的凋亡,这是其对胃癌细胞产生生物学效应的基础。     

As2O3诱导人胃癌细胞凋亡的研究

目的：观察As2O3对人胃癌细胞 株 的作用,并探讨其抗胃癌作用的机制。方法： 不同浓度进口分析纯A s2O3 0.1-2.0 μmol/L与人胃癌细胞株共育一定时间后,观察细胞的 存活、形态学改变及细胞DNA含量的分布,并以NIH3T3细胞作对照。结果：1.0-2.0 μmol/L As2O3处理的胃癌细胞呈典型的凋亡特征性改变：在形态上 表现为胞膜完整、染色质固缩、核碎裂、凋亡小体形成;流式细胞术分析显示在G1期细胞 前出现亚二倍体峰,与As2O3作用的时间及浓度呈正相关趋势。结论：As2O3抗胃癌作用机制之一可能是诱导胃癌细胞凋亡。     

Bcl-2家族成员在紫杉醇诱导胃腺癌细胞凋亡中的表达

目的研究Bcl-2家族成员在紫杉醇诱导胃腺癌细胞凋亡中的表达，探索紫杉醇作用的分子机制。方法流式细胞仪PI单染法检测细胞凋亡率；Western blotting检测紫杉醇诱导胃腺癌细胞凋亡过程中Bcl-2家族成员的表达水平变化。结果紫杉醇诱导胃腺癌细胞凋亡具有剂量和时间依赖性，SGC-7901较BGC-823胃腺癌细胞株对紫杉醇更为敏感。紫杉醇诱导胃腺癌细胞凋亡中，Bcl-2家族成员中促凋亡分子Bim表达水平增高，而抗凋亡分子Bcl-2、Bcl—xL表达降低。结论Bcl-2家族成员在紫杉醇诱导胃腺癌细胞凋亡中发挥重要的调节作用。     

三氧化二砷诱导肿瘤细胞凋亡与Caspase3及Bcl-2蛋白家族的关系

目的：探讨三氧化二砷（As2O3)诱导肿瘤细胞凋亡的机制。方法：以Namalwa,SGC7901和Bcap37细胞为体外模型，通过流式细胞仪检测亚G1期（sub－G1）细胞含量和细胞膜磷脂酰丝氨酸（phosphatidylserine,PS)外翻量鉴定细胞凋亡；流式细胞仪检测Bcl-2和Bax蛋白表达及细胞线粒体跨膜电位（△φm）；比色法8测定半胱氨酸酶3（Caspase3）活性。结果：As2O3诱导肿瘤细胞凋亡与Bax和Bcl-2蛋白表达及Caspase3活性有密切关系。结论：As2O3可能通过调节Bax和Bcl－2蛋白的表达引起△φm下降从而激活Caspase3最终导致肿瘤细胞凋亡。     

三氧化二砷诱导人胰腺癌细胞凋亡的实验研究

目的：研究三氧化二砷（As2O3)体外抑制人胰腺癌细胞株SW1990增殖及诱导其凋亡的作用。方法：以不同浓度的As2O3处理SW1990,用MTT法测定细胞增殖情况,并利用AnnexinⅤ早期凋亡检测试剂盒、电子显微镜、流式细胞仪以及免疫组化染色等检测细胞凋亡情况。结果：（1）As2O3抑制SW1990细胞增殖的作用与相同浓度的顺铂相似。（2）10ug/mlAs2O3作用12h后即观察到细胞凋亡明显增多,48h后凋亡率达24%;免疫组化染色证实As2O3作用后细胞Bcl-2表达阳性率较作用前及对照组减少,Bcl-2/Bax比值耳降。结论：As2O3体外可抑制SW1990增殖,其主要途径是诱导细胞凋亡。     

Bcl-2与胃癌的化学治疗

既往认为胃癌的形成是细胞无限增生所致的细胞聚集，近年发现胃癌中不仅存在细胞增生，同时也存在细胞凋亡，胃癌发生是细胞凋亡与增生比例失调的结果，而且，细胞凋亡受许多因素(凋亡相关基因、放疗、化疗、细胞因子等)的影响。诱导肿瘤细胞凋亡而不伤及或少伤及正常组织细胞，是肿瘤治疗的新思路。研究证明，许多药物对细胞的诱导凋亡作用与抑制Bcl-2蛋白有关。     

Bcl-2基因与细胞凋亡

细胞凋亡是机体细胞衰老与死亡过程的一种主要形式,它是一个生理性调节机制,在生物体的发育形成及功能维持中起重要作用。近年来研究发现Bcl-2及其相关蛋白在细胞凋亡的调控中起着很重要的作用。本文就Bcl—2分子生物学、生理功能、作用机制以及Bcl—2研究的应用展望等方面进行了讨论。     

三氧化二砷诱导人卵巢癌细胞凋亡及对线粒体的影响

目的 研究三氧化二砷(As2O3)诱导人卵巢癌细胞凋亡中是否发生线粒体系统和Bcl-2蛋白表达的改变,探讨As2O3诱导凋亡的可能引发机制.方法 采用光镜、电镜和流式细胞术等技术,观察细胞凋亡、线粒体超微结构改变及检测线粒体跨膜电位(Δψm).结果 As2O3可诱导卵巢癌细胞凋亡,具有剂量依赖性和细胞株类型差异性;不同浓度As2O3均可诱导SKOV3、3AO细胞Δψm的降低,且随浓度升高,下降愈明显;电镜观察到As2O3作用SKOV3、3AO 72 h后,线粒体明显肿胀,内嵴消失,基质电子密度降低.免疫荧光染色显示As2O3能抑制SKOV3、3AO细胞的Bcl-2蛋白表达.结论 线粒体Δψm的下降和Bcl-2蛋白表达的抑制,是As2O3诱导细胞凋亡的重要环节.     

Overexpression of Bcl-2 partly inhibits apoptosis of human ce rvical cancer SiHa cells induced by arsenic trioxide

ＳｏｍｅｒｅｓｅａｒｃｈｅｒｓｆｒｏｍｔｈｅＨａｒｂｉｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙａｎｄｔｈｅＳｈａｎｇｈａｉＳｅｃｏｎｄＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｒｅｐｏｒｔｅｄｔｈａｔａｒｓｅｎｉｃｔｒｉｏｘｉｄｅ (Ａｓ2 Ｏ3)ｉｓａｎｉｄｅａｌｃｌｉｎｉｃａｌｃｏｍｐｏｕｎｄｆｏｒｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆａｃｕｔｅｐｒｏｍｙｅｌｏｃｙｔｉｃｌｅｕｋｅｍｉａ (ＡＰＬ)ａｎｄｉｔｃｏｕｌｄｉｎｄｕｃｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆＮＢ4ｃｅｌｌｓ 1 3　Ｔｈｒｏｕｇｈｉｎｖｉｔｒｏａｎｄｉｎｖｉｖｏｅｘｐｅｒ…     

三氧化二砷影响肝癌细胞系Hep201凋亡的研究

目的　研究三氧化二砷对肝癌细胞生长的抑制作用。方法　采用三氧化二砷处理人肝癌细胞系Hep2 0 1,通过生长曲线的绘制观察三氧化二砷对肝癌细胞生长的影响 ,并应用原位缺口末端DNA标记技术检测肝癌细胞的凋亡情况 ,同时用免疫组织化学和NorthernBlot方法检测凋亡相关基因bc1- 2和bax蛋白与mRNA的表达强度 ,探讨三氧化二砷影响肝癌细胞凋亡的机制。结果　经三氧化二砷连续作用 72h后 ,肝癌细胞生长受到抑制 ,发现试验组凋亡的细胞明显多于对照组 ,bc1- 2在试验组中表达强度低于对照组 ,而bax的表达高于对照组。结论　在三氧化二砷的作用下 ,肝癌细胞的生长受到抑制 ,凋亡细胞增加 ,肝癌细胞凋亡增加的机制可能是凋亡的主要调节因子bc1- 2和bax两种基因表达比例发生变化。     

Bcl-2和Bcl-6在胃癌患者中的表达及意义

目的：观察B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和B淋巴细胞瘤-6(Bcl-6)在胃癌患者中的表达情况,并探讨其临床意义。方法选取2013年1月至2014年1月期间在北京大学深圳医院就诊并诊断为胃癌的患者30例(胃癌组)及正常对照者30例,采用免疫组化的方法检测并比较两组受检者Bcl-2和Bcl-6的表达情况。结果胃癌组患者Bcl-2表达为(0.588±0.210),明显高于正常组的(0.397±0.171),差异有统计学意义(P<0.05);胃癌组患者Bcl-6表达为(0.255±0.083),明显低于正常组的(0.334±0.112),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Bcl-2和Bcl-6的表达水平与胃癌的发生、发展相关,为胃癌的诊断、治疗提供新的靶点。     

Bcl-2、Survivin基因在胃癌组织中的表达及意义

目的探讨Bcl-2、Survivin基因的表达及与胃癌生物学行为的关系。方法采用免疫组化两步法检测40例胃癌组织标本及相应癌旁组织、20例慢性萎缩性胃炎病变组织中Bcl-2、Survivin基因的表达。结果（1）胃癌组织中Bcl-2及Survivin基因的阳性表达率明显高于癌旁组织及慢性萎缩性胃炎病变组织。Bcl-2表达与淋巴结有无转移情况有关;Survivin在胃癌组织中的表达与临床分期及淋巴结转移情况关系密切;（2）胃癌组织中Bcl-2蛋白豹表达与Survivin基因的表达有相关性。结论（1）Bel-2、Survivin基因的异常表达而引起的细胞凋亡抑制在胃癌的发生中起一定作用。（2）胃癌组织中,Survivin的表达与Bcl-2的表达呈正相关。     

三氧化二砷诱导人肝癌HepG2细胞凋亡及细胞周期阻滞的研究

目的 研究三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)对人肝癌HepG2细胞的生长抑制作用,以及诱导细胞凋亡和对周期分布的影响.方法 采用MTF法、DNA ladder检测、流式细胞术等方法 检测As2O3对人肝癌HepG2细胞的生长抑制,诱导细胞凋亡以及对细胞周期分布的影响.结果 MTT法显示:As2O3对HepG2细胞有明显的生长抑制作用,且具有剂量和时间依赖性.12μmol/L As2O3作用HepG2细胞24、48、72 h后,DNA ladder检测,48、72 h均出现凋亡典型的DNA ladder条带;流式细胞仪分析显示:As2O3处理HepG2细胞24、48、72 h后,凋亡率分别为(9.74±1.22)%、(21.89±2.14)%、(42.72±0.83)%,均显著高于对照组细胞的凋亡率(0.98±0.11)%(P<0.01).同时,流式细胞仪分析显示,As2O3对HepG2细胞有明显的S期和G2期阻滞作用.结论 As2O3对人肝癌HepG2细胞S期和G1期阻滞并诱导细胞凋亡可能是其抗肿瘤的机制之一.     

异丙酚对缺氧复氧损伤人血管内皮细胞caspase-3和Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨异丙酚对缺氧复氧损伤所致人血管内皮细胞凋亡及caspase-3、Bcl-2蛋白表达的影响。方法建立人脐静脉内皮细胞缺氧复氧损伤模型。将细胞缺氧培养30min再复氧,或加入不同浓度异丙酚孵育30min后再进行缺氧复氧处理,在复氧不同时相点（2、6、24和48h）以流式细胞仪计数凋亡细胞数量,并采用免疫细胞化学方法检测caspase-3和Bcl-2蛋白表达的变化。结果缺氧复氧后内皮细胞呈现典型的凋亡形态,复氧2h凋亡细胞数量开始增加,复氧6h时升高显著,至24h达峰值;异丙酚明显抑制复氧后细胞凋亡的发生。正常体外培养人血管内皮细胞Bcl-2蛋白表达较低,随复氧时间延长Bcl-2表达明显下调;25μmol/L异丙酚预处理可使复氧后内皮细胞Bcl-2表达升高,与相应缺氧复氧组比较差异有显著性（P〈0.01）,50、100μmol/L异丙酚组作用相似,不同浓度异丙酚作用呈现一定的剂量效应关系。缺氧复氧损伤使caspase-3蛋白表达增强,复氧24h后达高峰;异丙酚预处理以剂量依赖方式显著下调caspase-3表达（P〈0.01）。结论异丙酚降低缺氧复氧损伤所致的内皮细胞凋亡,可能与其抑制缺氧复氧引起的caspase-3活化、上调Bcl-2蛋白表达有关。     

维生素K3诱导人肝癌细胞SMMC-7721损伤中Bcl-2和Bax表达的变化及意义

目的：探讨Bcl-2、Bax在维生素K3 (VK3)诱导人肝癌细胞SMMC-7721损伤过程中的变化,为研究VK3诱导肝癌细胞损伤的机制提供参考。方法：体外培养SMMC-7721细胞,取对数生长期细胞分为对照组和不同浓度VK3处理的实验组（20、40和60 μmol•L^-1）,MTT法检测各组SMMC-7721细胞生存率;紫外分光光度法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放率;RT-PCR检测Bcl-2及Bax mRNA表达水平;Western blotting检测Bcl-2及Bax蛋白表达水平。结果：与对照组比较,20 μmol•L^-1 VK3组细胞存活率、LDH释放率、Bcl-2和Bax mRNA表达量及其蛋白表达量未见明显变化;与对照组比较,40和60 μmol•L^-1 VK3组细胞存活率降低(P<0.05或P<0.01);LDH释放率增加(P<0.05或P<0.01);Bcl-2 mRNA表达率降低(P<0.05);Bax mRNA表达量率升高(P<0.05);Bcl-2蛋白表达水平下降(P<0.05);Bax 蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论：40 μmol•L^-1剂量的VK3能够诱导SMMC-7721细胞损伤,其机制可能与下调Bcl-2和上调Bax蛋白表达有关。     

Bcl-2家族在阿司匹林诱导人小细胞肺癌A549细胞凋亡中的作用

摘要 目的: 研究阿司匹林对人小细胞肺癌A549细胞体外增殖抑制作用及凋亡的影响,探究Bcl-2在诱导凋亡机制中的作用。方法:运用体外细胞培养,阿司匹林以不同浓度（1,2.5,5,7.5,10mmol/L）作用于人小细胞肺癌A549细胞。采用噻唑蓝(MTT)法测定阿司匹林对细胞杀伤率;用流式细胞检测法测定细胞周期时相改变及细胞凋亡率;琼脂糖电泳法观察凋亡细胞DNA Ladder 现象;Western blot检测凋亡相关基因Bcl-2等表达;荧光染色观察细胞线粒体膜电位的改变。结果：阿司匹林对人小细胞肺癌A549细胞有较强的抑制作用,有明显的时间和剂量依赖性;可使A549细胞G0/G1期和G2/M期比例明显下降,S期比例升高;诱导细胞凋亡发生;阿司匹林作用A549细胞后,Bcl-2表达量减少,Bax表达增加,Caspase3活化,线粒体膜电位改变。结论：阿司匹林在体外可有效抑制人小细胞肺癌A549细胞增殖,可能通过影响肿瘤细胞DNA合成,改变细胞周期时相分布、诱导凋亡发挥抑制细胞增殖作用,其凋亡机制与Bcl-2表达减少,线粒体膜跨膜电位下降相关。     

Annexin A2、Bcl-2在宫颈癌中的表达及意义

目的检测宫颈癌(ICC)和宫颈上皮内瘤变(CIN)中Annexin A2、Bcl-2蛋白的表达,探讨两者在宫颈癌、宫颈上皮内瘤变及慢性宫颈炎(CCS)中表达的意义。方法用免疫组化SP法检测34例ICC、20例CIN及20例CCS患者宫颈组织中Annexin A2、Bcl-2蛋白的表达情况,并分析其与临床病理特征的关系。结果①Annex-in A2、Bcl-2在ICC组的阳性表达率显著高于CIN、CCS组;Annexin A2、Bcl-2在CIN组的表达明显高于CCS组。②Annexin A2的表达与病理分级及淋巴结转移呈正相关(P<0.05);Bcl-2的表达与组织类型、病理分级显著相关(P<0.05)。③在ICC组织中,Annexin A2、Bcl-2的表达呈正相关(r=0.610,P<0.05)。结论 AnnexinA2、Bcl-2在宫颈癌的发生发展中可能起重要作用,并为宫颈癌的早期诊断及预后提供可能的理论依据。