蛋白磷酸酶抑制剂对人成神经细胞瘤细胞钙瞬态的影响

应用荧光倒置显微镜系统,分别检测了蛋白磷酸酶ＰＰ－２Ａ和ＰＰ－１抑制剂岗田酸（Ｏｋａｄａｉｃａｃｉｄ,ＯＡ）和ＰＰ－２Ｂ抑制剂三氟吡拉嗪（Ｔｒｉｆｌｕｏｐｅｒａｚｉｎｅ,Ｔｒｉ）处理的人成神经细胞瘤细胞（ＳＨ－ＳＹ５Ｙ）胞浆钙瞬态变化。结果发现：１ｎｍｏｌ／ＬＯＡ抑制ＰＰ－２Ａ时,胞浆游离Ｃａ２＋浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）瞬时波动明显增强,［Ｃａ２＋］ｉ在２０ｍｉｎ内逐步轻微升高,后逐渐回复;而用１００ｎｍｏｌ／ＬＯＡ同时抑制ＰＰ－２Ａ和ＰＰ－１时,则引起［Ｃａ２＋］ｉ即刻持续升高,并同时伴有［Ｃａ２＋］ｉ瞬时波动明显增强;用１００μｍｏｌ／ＬＴｒｉ抑制ＰＰ－２Ｂ时,则引起［Ｃａ２＋］ｉ即刻持续升高,［Ｃａ２＋］ｉ瞬时波动没有明显变化。提示：蛋白磷酸酶降低可能通过钙瞬态变化而参与Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病（ＡＤ）的发病过程。     

钙超载大肠系膜血管平滑肌细胞钙离子稳态调节的改变

目的 探讨钙超载模型大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）胞内是否存在钙离子（Ｃａ＾２＋）稳态调节异常。方法 以Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ作为Ｃａ＾２＋批示剂,应用激光扫描共聚焦显微镜技术,比较钙超载模型大鼠肠系膜ＶＳＭＣ（ＣａＯＭＶ）与正常Ｗｉｓｔａｒ大鼠肠系膜ＶＳＭＣ（ＷＭＶ）静息态的胞浆与核内游离Ｃａ＾２＋水平（〖Ｃａ＾２＋〗ｉ,〖Ｃａ＾２＋〗ｎ）,以及在多各药物刺激下Ｃａ＾２＋稳态调节的差异。结果 两种Ｖ     

硝苯地平和SK＆F96365对cyclopiazonic acid触发的大鼠主…

探讨介导Ｃａ＾２＋池操纵性Ｃａ＾２＋内流的Ｃａ＾２＋通道特性。方法取大鼠胸主动脉环,每个动脉环长约２．５ｍｍ。用张力换能器记录主动脉环收缩反应。结果（１）ｃｙｃｌｏｐｉａｚｏｎｉｃ ａｃｉｄ（ＣＰＡ,１－１００μｍｏｌ．Ｌ＾－１）以浓度依赖性触发大鼠主动脉环的双相收缩反应（收缩峰和平台）,１０μｍｏｌ．Ｌ＾－１Ｏ阻断电电压依赖性Ｃａ＾２＋通道６０μｍｏｌ．Ｌ＾－１）以浓度依赖性抑制ＣＰＡ触发血管环     

高钾离子引起PC12细胞内游离Ca2+浓度升高的机制

目的：分析高钾离子（Ｋ＾＋）引起ＰＣ１２细胞内游离钙离子浓度（［Ｃａ＾２＋］ｉ）升高的可能机制。方法：利用ＭｉｒａＣａｌ Ｉｍｉａｇｅ Ｓｙｓｔｅｍ检测［Ｃａ＾２＋］ｉ，Ｃａ＾２＋荧光探针为Ｆｕｒａ－２／ＡＭ。结果：（１）ＫＣ１浓度为３０￣１００ｍｍｏｌ／Ｌ时，可剂量依赖性地诱导ＰＣ１２细胞［Ｃａ＾２＋］ｉ升高；（２）在细胞外无Ｃａ＾２＋时，高Ｋ＾＋对ＰＣ１２细胞［Ｃａ＾２＋］ｉ无影响；（３）Ｌ－     

胞内Ca^2＋,Na^＋和ATP的稳定性介导NMDA诱导兴奋保护作用

目的;研究Ｎ－甲基－Ｄ－天冬氨酸（ＮＭＤＡ）诱导大鼠小脑颗凿神经元兴奋毒性保护作用的机制。方法：分别用Ｃａ＾２＋和Ｎａ＾＋敏感的染料Ｆｕｒａ－２／ＡＭ和ＳＢＦＩ／ＡＭ测定胞内Ｃａ＾２＋和Ｂａ＾＋浓度「（Ｃａ＾２＋）ｉ,（Ｎａ＾＋）ｉ」,并用反向高效液相法测定胞内三磷酸腺苷（ＡＴＰ）的含量。结果：（１）在ＮＭＤＡ预处理组与非处理组,谷氨酸均迅速触发胞内Ｃａ＾２＋反应高峰,两者无显著性差异。而后在ＮＭ     

一氧化碳对大鼠肺动脉平滑肌细胞[Ca2+]、cAMP、cGMP的作用

目的 观察低密度一氧化碳（ＣＯ）对大鼠肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）的作用。方法 应用细胞培养,ｏｗｒｙ法测量蛋白质含量,Ｆｕｒａ－２荧光批示剂测ＰＡＳＭＣ的人钙浓度（〖Ｃａ＾２＋〗,放射免疫ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ药盒测ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ浓度。结果 （１（缺氧组ＰＡＳＭＣ内质网扩张,胞浆内出现髓鞘样结构,线粒体肿胀、空泡化。低浓度ＣＯ组ＰＡＳＭＣ的损害减轻、仅线粒体稍肿大,部分内质网有扩张。（２）缺氧     

知管紧张素Ⅱ及其拮抗剂对纱膜细胞内游离钙的影响

目的 探讨Ｌｏｓａｒｔａｎ拮抗局部肾素－血管紧张系（ＲＡＳ）对预防高血压致肾脏靶器官损伤的意义,方法 应用细胞培养和Ｆｕｒａ－２方法,观察血管紧张素Ⅱ和血管紧张素Ⅱ型受体（ＡＴ１受体）拮抗剂Ｌｏｓａｒｔａｎ对自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）和正常血压大鼠（ＷＫＹ）肾小球系膜细胞内游离钙浓度的影响。结果 ＡｎｇⅡ使ＳＨＲ系膜细胞「Ｃａ＾２＋」ｉ增高,对ＷＫＹ无影响;ＡｎｇⅡ对ＳＨＲ系膜细胞「Ｃａ＾２＋」ｕ     

不同年龄自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞Ca^2＋转运功…

应用不同年龄自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）血管平滑肌原代与传代细胞（ＶＳＭＣ），观察Ｃａ＾２＋转运功能障碍及某些相关因素的变化，结果表明：（１）在血压未升高的ＶＳＭＣＣａ＾２＋内流已较同龄对照组ＷＫＹ大鼠明显增加，而Ｃａ＾２＋外流量较ＷＫＹ大鼠显著降低。表明ＳＨＲＶＳＭＣ膜Ｃａ＾２＋转运功能障碍在血压升高前就已发生，并随年龄及血压增高有加重趋势；（２）ＶＳＭＣｃＡＭＰ及钙调素含量变化与细胞膜Ｃａ＾２＋     

兔脑局部缺血后脑组织ATP酶活性及SEP,TCD改变

建立兔脑ＭＣＡＯ局部脑缺血实验模型。用生化方法分别测定Ｎａ＾＋、Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ＾２＋，Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活性，并行体感诱发电位（ＳＥＰ）及经颅多普勒超声检查（ＴＣＤ）。结果发现：脑缺血早期Ｎａ＾＋，Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶活性迅速下降，Ｃａ＾２＋，Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶略有下降。ＳＥＰ的Ｎ１波、Ｐ２波的潜伏期明显延长。ＴＣＤ检查中，ＭＣＡＯ侧不能测出波形，而对侧平均流速（Ｖｍ）显著增快，再通后ＭＣ     

单核细胞流变特性异常在动脉粥样硬化进程中的作用

目的：了解单核细胞流变特性异常在动脉粥样硬化进程的作用。方法：大耳白兔６０只随机分为实验组（ＡＧ）４０只及对照组（ＣＧ）２０只，ＡＧ给予胆固醇ｌｇ．ｄ＾－１只＾－１在喟养的第２，４，８和１２周分别抽血检测单核细胞变形性，膜脂流动性及单核细胞（Ｃａ＾２＋０ｉ。结果：在兔ＡＳ阶段性进程中，单核细胞变形性，膜脂流动性下降趋势，细胞内（Ｃａ＾２＋）ｉ呈上升趋势，膜流动性与细胞内（Ｃａ＾２＋）ｉ呈负相关，变     

一氧化氮合酶抑制剂阴断可片耐受和依赖的信号转导途径

目的 探讨一氧化氮合酶（ＮＯＳ）抑制剂Ｎ＾Ｇ－硝基－Ｌ－精氨酸（Ｌ－ＮＮＡ）对阿片耐受和依赖机制中腺苷酸环化酶－环磷酸腺苷（ＡＣ－ｃＡＭＰ）系统、Ｃａ＾２＋系统和一氧化氮－环磷酸鸟苷（ＮＯ－ｍＧＭＰ）系统变化的影响。方法 实验共分为对照组,阿片激动剂组,阿片激动剂组,阿片激动剂＋纳洛酮组;Ｌ－ＮＮＡ＋阿片激动剂组和Ｌ－ＮＮＡ＋阿片激动剂＋纳洛酮组。采用竞争性蛋白结合试验,＾３Ｈ－精氨酸转化成＾３Ｈ     

应用共聚焦激光扫描技术研究阿片受体介导胞内Ca^2＋？…

目的 观察阿片激动剂急性和长时程作用于稳定ｉＮＯＳ基因的ＮＧ－ＬＮＣＸｉｎＯＳ细胞,对细胞内游离钙（〖Ｃａ＾２＋〗ｉ）的影响及Ｇ－蛋白的调节作用。方法 应用共聚焦显微镜和荧光探针Ｆｌｕｏ－３,监测单细胞〖Ｃａ＾２＋）ｉ含量。结果 δ－阿片激动剂ＤＰＤＰＥ和吗啡急性刺激细胞诱发〖（Ｃａ＾２＋〗ｉ）增加,纳洛酮对其起番转作用,用百日咳毒素预处理细胞后,吗啡急性激素不能引起〖（Ｃａ＾２＋〗ｉ增加,ＤＰＤ     

血管紧张系Ⅱ受体基因敲除对跨膜钙内流的作用

目的 观察血管紧张素Ⅱ受体亚型（ＡＴ１ａ）基因敲除对跨膜钙内流的影响。方法 培养ＡＴ１ａ基因敲除及其野生型对照小鼠的主动脉血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）和应用荧光倒置显微镜及钙荧光指示剂Ｆｕｒａ－２／ＡＭ动态观测ＶＳＭＣ钙离子（Ｃａ＾２＋）ｉ变化。结果 在血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）刺激下钙内流显著增加,ＡＴ１ａ敲除组ＶＳＭＣ钙净增值为（２０４±２２）ｎｍｏｌ／Ｌ,基础（Ｃａ＾２＋）ｉ为（１０８±９）ｎｍ     

不同年龄大鼠血管平滑肌Ca^2＋／CaM—PP活性特点

本文应用酶学测定方法,测定了８周,１０周,１６周,２０周和２４周Ｗｉｓｔａｒ大鼠主动脉（Ａ）,尾动脉（ＣＡ）和肠系膜动脉（ＭＡ）平滑肌依赖钙的钙调素依赖性蛋白磷酸酶（Ｃａ＾２＋／ＣａＭ－ＰＰ）的活性,结果发现;（１）８Ｗ和１０Ｗ各血管间和组间Ｃａ＾２＋／ＣａＭ－ＰＰ活性无明显差异（Ｐ〉０．０５）;（２）１６Ｗ三种血管间Ｃａ＾２＋／ＣａＭ－ＰＰ活性无显著差异,但活性均明显高于８Ｗ和１２Ｗ组（Ｐ〈０．     

年龄作为高血压危险因素的分子基础

目的 研究高血压的发病基础和年龄与高血压的关系。方法 我们应用酶学测定方法,测定了幼年期、童年期、青春期、青年期和壮年期Ｗｉｓｔａｒ大鼠主动脉（Ａ）、尾动脉（ＣＡ）和肠系膜动脉（ＭＡ）平滑肌的钙／钙调素依赖性蛋白磷酸酶（Ｃａ＾２＋／ＣａＭ－ＰＰ）的活性。结果 幼年期和童年期各血管间和组间Ｃａ＾２＋／ＣａＭ－ＰＰ活性坎显著差异（Ｐ〉０．０５）;青春期三种血管间Ｃａ＾２＋／ＣａＭ－ＰＰ活性无显著差异,但活性均明显高于幼年期和童年期组（Ｐ〈０．０１）;青年期三种血管间的Ｃａ＾２＋／ＣａＭ－ＰＰ活性无显著差异,但活性均明显高于青春期（Ｐ〈０．０１）;壮年期组Ａ和ＣＡ血管Ｃａ＾２＋／ＣａＭ－ＰＰ活性与青年期组无显著差异,但ＭＡＣａ＾２＋／ＣａＭ－ＰＰ活性明显低于青年期（Ｐ〈０．０１）。结论 不同血管的舒张功能随年龄增长逐     

健康人红细胞Na^＋—D^＋ATP酶,Ca^2＋—Mg^2—ATP酶活性与胞浆游…

用生物化学法及荧光法测定了成年人、老年人的红细胞Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋ＡＴＰ酶、Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾２＋ＡＴＰ酶活性及胞浆游离Ｃａ＾２＋。结果显示：老年前期组Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋ＡＴＰ酶及Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾２＋ＡＴＰ酶活性均显著低于成年人组（Ｐ＜０．０５），而胞浆游离Ｃａ＾２＋深度明显高于成年人组（Ｐ＜０．０５）。老年组的两个ＡＴＰ酶活性均较老年前期组低，胞浆游离Ｃａ＾２＋浓度高于老年前期组。上述三个指标的随     

缺血预处理对大鼠心肌离子泵,离子及氧自由基的影响

目的：探讨心肌缺血预处理（Ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ，ＩＰＣ）的心肌保护作用机制。方法：通过大鼠在低心肌缺血预处理模型，观察预处理（ＰＣ）对缺血再灌注心肌钠泵（Ｎａ＾２＋Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶）、钙泵（Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶）活性、Ｎａ＾＋、Ｃａ＾２＋浓度及超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、丙二醛（ＭＤＡ）的影响。结果：与单纯缺血再灌注组相比，ＰＣ组缺血再灌注心肌缺泵、钙泵的活性降低幅度小（     

醋氨酚大鼠肝细胞损伤及其机制的研究

醋氨酚（ＡＡＰ）引起大鼠肝细胞膜损伤发生在肝细胞还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）明显下降之后，提示ＧＳＨ下降是ＡＡＰ损伤肝细胞的原因之一。同步测定培养大鼠肝细胞ＧＳＨ和胞浆自由钙离子浓度（［Ｃａ＾２＋ｆ］ｃ）的结果证明：加１０ｍｍｏｌ／Ｌ ＡＡＰ培养２．５小时可引起ＧＳＨ显著降低，［Ｃａ＾２＋ｆ］ｃ明显升高。二巯基苏糖醇（ＤＴＴ）５ｍｍｏｌ／Ｌ可使加ＡＡＰ后，细胞ＧＳＨ仍维持较高水平，［Ｃａ＾２＋ｆ］ｃ明     

CaO—BaO—SiO2—TiO2系统溶胶涂液的制备和凝胶化过程

采用溶胶－凝胶工艺制备０．１ＣａＯ－０．１ＢａＯ－ＸＳｉＯ２－（０．８－Ｘ）ＴｉＯ２和ＹＣａＯ－（０．３－Ｙ）ＢａＯ－０．３ＳｉＯ２－０．４ＴｉＯ２（Ｘ＝０～０．５，Ｙ＝０～０．３摩尔分数）两组四元系统浸涂液。根据粘度变化和凝胶时间研究了组成、水和醋酸加入量对溶胶涂液稳定性的影响，得出了配制稳定期长的浸涂液的配比。利用红外光谱和Ｘ－射线衍射（ＸＲＤ）探讨溶胶形成过程和凝胶向玻璃态转变过程中的结构变化。结果表明：溶液中ＣＨ３ＣＯＯ－取代醇盐中的ＯＲ基团分别与Ｓｉ４＋和Ｔｉ４＋配位，形成反应活性不同于原醇盐的新的前驱体醇盐；经５００°Ｃ热处理后凝胶的红外光谱中出现由Ｔｉ—Ｏ—Ｓｉ伸缩振动所引起的吸收带。ＸＲＤ谱证实６０°Ｃ干凝胶中有醋酸盐晶体，５００°Ｃ热处理后，这种晶体消失，凝胶中生成Ｂａ２ＴｉＯ４晶相。     

P型Ca^2＋通道在高K^＋引起的大鼠小脑一氧化氮合酶激活中作用

目的：用大鼠小脑脑片研究Ｐ型Ｃａ＾２＋通道在高Ｋ＾＋引起的一氧化氮合酶激活中的作用。方法：通过测定Ｌ－「＾３Ｈ」精氨酸转变成Ｌ－「＾３Ｈ」瓜氨酸来判定一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性。结果：表明５０ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１Ｋ＾＋可明显提高ＮＯＳ活性,特异性Ｐ型钙通道阻断剂蜂蛛毒素ＡＧＡ０．１ｎｍｍｏｌ．Ｌ＾－１和蜂蛛毒素ＦＴＸ１００ｎｍｍｏｌ．Ｌ＾－１可以明显阻断５０ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１Ｋ＾＋引起ＮＯＳ活性增强作用,ＮＭＤＡ受体通道阻断剂ＭＫ－８０１１０ｎｍｍｏｌ．Ｌ＾－１不能阻断５０ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１Ｋ＾＋引起ＮＯＳ活性增强作用。结论：说明高Ｋ＾＋引起ＮＯＳ活性增强主要是由于Ｃａ＾２＋通过Ｐ型钙通道进入细胞内引起的,谷氨酸受体不参与高Ｋ＾＋引起ＮＯＳ激活。