GABAA受体激动剂和拮抗剂对大鼠梨形皮质、海马Fos表达的影响及其与癫痫发病的关系

为探讨γ－氨基丁酸受体（ＧＡＢＡＡ）与癫痫发病机制之间的关系,应用免疫组化技术结合脑电图就ＧＡＢＡＡ受体激动剂蝇蕈醇对马桑内酯致痫大鼠大脑皮质、海马Ｆｏｓ表达的影响进行研究,并与ＧＡＢＡＡ受体拮抗剂荷包牡丹碱致痫大鼠的Ｆｏｓ表达进行比较。结果显示：侧脑室注射马桑内酯诱发癫痫发作后１ｈ,双侧齿状回颗粒细胞层、海马锥体细胞层及注射侧梨形皮质有大量Ｆｏｓ阳性细胞,对侧梨形皮质未检测到Ｆｏｓ表达;侧脑室注射蝇蕈醇可明显抑制齿状回、海马Ｆｏｓ的表达,但梨状皮质Ｆｏｓ表达未受影响。一侧侧脑室注射荷包牡丹碱诱发癫痫发作后１ｈ,双侧梨状皮质有较强的Ｆｏｓ表达,但齿状回、海马未见表达。脑电图也证实马桑内酯及荷包牡丹碱均能诱发棘慢波、尖慢波,蝇蕈醇则能明显抑制这种痫样放电。结果提示,ＧＡＢＡＡ受体在癫痫发病过程中起重要作用     

谷氨酸NMDA受体在马桑内酯致痫中的作用

采用马桑内酯大鼠癫痫模型和大鼠高体海马脑片CA1区锥体细胞癌样放电模型，观瘵了非竞争性NMDA受体结抗剂氯胶团对马桑内酯致癌作用的影响．结果发现：实验组大鼠的癫痫发作推迟，程度减轻；痫样脑电图出现的潜伏期延长，波幅下降（P＜0．05）；马桑内酯所致高体海马脑片CA1；区锥体细胞的痫样PS波被抑制：EPSPs幅度下降（P＜0．05）．结果提示：马桑内酯致痫的作用之一可能通过激活交触后膜上NMDA受体，使神经元兴奋性突触传递增强而产生痫样放电．     

代谢性谷氨酸受体1α在大鼠马桑内酯点燃致癫模型中的表达

目的探讨代谢性谷氨酸受体1α(MGLUR1α)在马桑内酯(CL)点燃致癫模型大鼠脑组织不同区域表达的差异。方法35只雄性SD大鼠随机分为对照组(n=5,大鼠予1.0ml/kg生理盐水肌注)和3个不同剂量CL点燃致癫模型组(分别予0.75、1.0、1.25ml/kg马桑内酯提取液肌注)。分别对点燃、未点燃、对照组大鼠行皮层脑电图描记、取脑组织作HE和MGLUR1α的免疫组化染色,观察MGLUR1α在脑组织不同区域的表达。结果点燃组大鼠在肌注马桑内酯后产生了1~5级的痫性发作,与皮层脑电图的表现相一致。MGLUR1α在点燃组大鼠海马以及海马以外的颞叶皮质的表达较之未点燃和对照组增强(P<0.05),这种表达的增强在神经元与神经胶质细胞间未发现有明显的差异。结论MGLUR1α在点燃大鼠海马和海马以外的颞叶皮质的表达较之未点燃和对照组增强,可能参与了癫痫的发生。     

激活多巴胺受体对大鼠脊髓背角Fos样蛋白生成的抑制作用

以免疫细胞化学ＡＢＣ法，观察多巴胺受体激动剂和拮抗剂对伤害性电激大鼠单侧后爪诱发的同侧腰段脊髓背角Ｆｏｓ阳性神经元的影响。发现伤害性电刺激诱发的Ｆｏｓ阳性神经元，多数位于同侧背角浅层，排列密集，少数位于同侧背角深层，排列稀疏；腹腔注射多巴受体激动剂使同侧背角浅层和深层的Ｆｏｓ阳性神经元显著减少，而多巴胺二型受体拮抗剂能够完全阻断多巴受受体激动剂的抑制作用。提示多巴胺受体参与疹水平伤害性信息递的调     

马桑内酯癫痫大鼠脑内ETmRNA表达的改变

目的：本文从分子水平观察马桑内酯所致的癫痫大鼠脑内ETmRNA表达以及硝苯吡啶对其表达的影响,进而分析ET在马桑内酯癫痫中的可能作用。方法：将24只SD大鼠分三组（生理盐水对照组、癫痫组和抗痫组）,采用自行标记的地高辛－ET RNA探针作大鼠脑片原位杂交。结果：在癫痫大鼠脑切片的广泛区域可见阳性杂交信号,尤以下丘脑和海马为明显;抗痫组（硝苯吡啶＋马桑内酯）大鼠脑内均未见到明显的杂交信号,与生理盐水对照组相似。表明马桑内酯致痫时,大鼠脑内ETmRNA表达增强,该作用可被L－型Ca^2 通道阻断剂硝苯吡啶阻断。结论：ET在马桑内酯致痫时,可能作为一种神经肽,通过激活L－型Ca^2 通道使细胞内Ca^2 浓度增加而产生致痫作用。     

新的癫痫相关基因的筛选及部分cDNA序列的分离鉴定

用ｍＲＮＡ差异显示技术从大鼠癫痫状态的海马分离到２０个ｃＤＮＡ差异片段，对４个ｃＤＮＡ片段进行序列分析并在基因库中进行相同性比较，发现ＥＲＧ８，ＥＲＧ１１，ＥＲＧ１２无相同性序列，ＥＲＧ１４与鼠的微管相关蛋白基因有６４％￣６９％的相同性。由于这些基因的差异表达是致痫剂马桑内酯和抗痫剂ＭＫ－８０１所致，所以，ＥＲＧ８可能是新的候选癫痫基因，ＥＲＧ１１和ＥＲＧ１２可能是新的候选抗痫基因；由于微管相关蛋     

大脑皮质及海马雌、孕激素受体在癫痫发作后的变化

目的 探讨雌、孕激素受体与癫痫发病的关系。方法 采用免疫组织化学ABC法观察了侧脑室注射谷氨酸致痫雄性大鼠相关脑区雌、孕激素受体的变化。结果 雌、孕激素受体广泛分布于大脑皮质及海马区域，定位于胞核及胞浆，致痫组大鼠雌激素受体较正常对照组明显降低，而孕激素受体较正常对照组明显升高。结论 雌、孕激素受体的不同变化提示受体激素可能通过与其相应受体作用分别发挥致痫和抗痫作用。     

大鼠液压颅脑伤后脑内Fos蛋白的表达

目的：研究颅脑损伤后脑内Ｆｏｓ蛋白表达情况。方法：采用大鼠液压颅脑伤模型，应用免疫组织化学ＰＡＰ法和计算机图像分析技术，观测不同程度颅脑损伤后不同时间脑内Ｆｏｓ蛋白的表达情况。结果：伤后１５ｍｉｎ脑内开始出现Ｆｏｓ蛋白表达，伤后１ｈ达高峰，此后逐渐消退，伤后６ｈ基本恢复至正常水平。Ｆｏｓ阳性神经元主要分布在损伤灶周围皮质、同侧梨状皮质和双侧海马齿状回，同侧海马较对侧显著。轻、中和重度脑损伤，Ｆｏｓ     

大鼠延髓背角内GABA或甘氨酸免疫阳性终末与Fos阳性投射神经元的联系

目的　观察大鼠延髓背角 (ＭＤＨ)内向丘脑或臂旁核投射的Ｆｏｓ阳性神经元与γ 氨基丁酸 (ＧＡＢＡ)或甘氨酸 (Ｇｌｙ)阳性终末的联系 .方法　四甲基罗达明 (ＴＭＲ)逆行追踪结合ＴＭＲ ,Ｆｏｓ,ＧＡＢＡ或Ｇｌｙ的免疫荧光三重染色技术 .结果　ＧＡＢＡ或Ｇｌｙ阳性终末主要分布于延髓背角浅层 (Ⅰ ,Ⅱ层 ) ;给予面口部痛刺激后 ,Ｆｏｓ阳性神经元也主要分布于浅层 ;ＴＭＲ注入一侧丘脑或臂旁核 ,逆标神经元分别主要见于对侧或同侧ＭＤＨ的浅层 ;部分逆标神经元呈Ｆｏｓ阳性 ;ＧＡＢＡ或Ｇｌｙ阳性终末与Ｆｏｓ阳性投射神经元形成密切接触…     

丁苯酞对癫痫大鼠认知功能的影响

目的:观察丁苯酞对癫痫持续状态模型大鼠学习记忆功能,及皮质、海马NR1和NR2B表达的影响,探讨丁苯酞影响癫痫大鼠认知功能的可能机制。方法:40只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、致痫组、丁苯酞低剂量组、丁苯酞高剂量组,每组各10只;造模后第12天起,用药组大鼠腹腔注射丁苯酞,假手术组注射等量的生理盐水,采用Morris水迷宫对大鼠进行行为学检测;采用免疫组织化学染色法测定皮质NR2B,海马NR1和NR2B蛋白的表达。结果:水迷宫实验显示,致痫组找到平台的时间明显长于对照组(P<0.01);而与致痫组大鼠相比,丁苯酞低剂量组和高剂量组找到平台的时间明显减少(P<0.05;P<0.01);与致痫组相比,丁苯酞低剂量组和高剂量干预组大鼠皮质NR2B,海马NR1和NR2B的积分光密度值均明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:1丁苯酞可以改善癫痫模型大鼠学习和空间记忆能力。2丁苯酞可以促进癫痫大鼠皮质NR2B,海马NR1和NR2B蛋白的表达,从而改善癫痫大鼠认知功能障碍。     

实验性癫痫大鼠脑内Bcl—2蛋白折表达及意义

为探讨Ｂｃｌ－２蛋白在神经元死亡中的作用，以戊四氮为致痫剂，诱导大鼠ＧＣＳＥ（Ｇｅｎｅｒａｌ ｃｏｎｖｕｌｓｉｖｅ ｓｔａｔｕｓ ｅｐｉｌｅｐｔｉｃｕｓ，ＧＣＳＥ），腹腔注射戊四氮后不同点，用末端标记ＴＵＮＥＬ法检测脑内海马凋亡细胞，并用免疫组织化学法检测Ｂｃｌ－２蛋白的表达，并对其意义进行探讨。结果发现海马神经元凋亡发生较迟，戊四氮腹腔注射后４８ｈ达高峰，而Ｂｃｌ－２表达高峰为戊四氮腹腔注射后４     

杏仁核点燃癫痫发作时大鼠脑内C－fos蛋白的表达

既刻早期基因Ｃ－ｆｏｓ被作为是神经元兴奋性的一个标志。本实验利用Ｆｏｓ蛋白的免疫组织化学方法在杏仁核点燃癫痫动物模型上观察了癫痫发作后脑内Ｃ－ｆｏｓ蛋白的变化，结果表明致痫时海马部位见到较多的Ｃ－ｆｏｓ表达。提示：杏仁核点燃致痫能引起脑内某些部位Ｃ－ｆｏｓ的表达。     

海藻酸诱导复杂部分发作癫痫大鼠海马GABAA受体α1亚单位的表达

目的:研究海藻酸(KA)致痫大鼠海马GABAA受体α1亚单位的动态表达水平以及加巴喷丁(GBP)干预对它们的影响,探讨复杂部分发作癫痫(CPS)的发生机制,为开发针对GABA受体亚单位水平的新型抗癫痫药物(AEDs)提供理论依据。方法:成年雄性Wistar大鼠海马CA3区注射2μgKA建立复杂部分发作模型,采用免疫组化SABC法检测癫痫大鼠海马各区GABAA受体α1亚单位(GABAARα1)的动态表达水平,并用GBP干预癫痫的发作观察GBP对GABAARα1表达的影响。结果:KA致痫后海马CA1区、CA3区GABAARα1表达呈先升后降趋势,齿状回(DG)表达水平则逐渐增加。GBP对癫痫早期GABAARα1表达无直接影响。结论:在KA诱导的CPS模型中,GABAARα1表达减少和由此所引起的抑制功能减弱,可能是癫痫发生的一种分子机制。     

杏仁核点燃癫痫发作时大鼠脑内C—fos蛋白的表达

既刻早期基因Ｃ－ｆｏｓ被作为早神经元兴奋性的一个标志。本实验利用Ｆｏｓ蛋白的免疫组织化学方法在杏仁核点燃癫痫动物模型上观察了癫痫发作后脑内Ｃ－ｆｏｓ蛋白的变化，结果表明致痫时海马部位见到较多的Ｃ－ｆｏｓ表达，提示：杏仁核点燃致痫能引起脑内其些部位Ｃ－ｆｏｓ的表达。     

马桑内酯致痫大鼠海马神经细胞外NA^＋,K^＋活度的变化

探讨癫痫过程中神经细胞膜离子通透性变化。方法：应用Ｎａ＾＋、Ｋ＾＋选择性微电极检测了马桑内酯致痫大鼠海马脑片神经细胞外Ｎａ＾＋、Ｋ＾＋活度的改变。结果：海马内注射马桑内酯致痫大鼠３０ｓ，１ｍｉｎ和２ｍｉｎ后，与对照组比较，海马神经细胞外Ｎａ＾＋活度分别下降了２７．７ｍｍｏｌ／Ｌ、５０．３ｍｍｏｌ／Ｌ和５７．９ｍｍｏｌ／Ｌ，而Ｋ＾＋活度则分别上升了２．３ｍｍｏｌ／Ｌ、２．４ｍｍｏｌ／Ｌ、２．９ｍｍｏ     

甲减影响新生期鼠脑梨六皮质Goα及Gsα的基因表达

目的 研究甲状腺功能低下对新生期鼠脑梨状皮质Ｇｏα及ＧｓαｍＲＮＡ表达的影响。方法 采用地高辛标记寡核苷酸探针原位杂交技术，对围生期正常及甲减Ｗｉｓｔａｒ大鼠动物模型梨状皮质Ｇｏα及ＧｓαｍＲＮＡ的表达状况进行研究。结果 １４ｄ龄甲减鼠脑梨状皮质ＧｏαｍＲＮＡ的表达明显升高，但其ＧｓαｍＲＮＡ与对照组无显著差异。结论 在鼠脑发育过程中，甲状腺激素对梨状皮质Ｇｏα基因的表达具有负调作用，而地该区Ｇｓ     

红藻氨酸诱导大鼠癫痫发作时海马mGluR1mRNA表达的动态变化

目的：探讨红藻氨酸（ＫＡ）诱导大鼠癫痫发作时海马ｍＧｌｕＲ１ ｍＲＮＡ表达变化的时空特征．方法：采用地高辛标记的ｃＤＮＡ探针原位杂交法检测海马ｍＧｌｕＲ１ ｍＲＮＡ表达,通过图像分析系统进行定量处理．同时观察大鼠行为学及脑电变化．结果：ＫＡ注射后大鼠均出现严重边缘性惊厥,脑电图表现为持续性癫痫样放电．海马ｍＧｌｕＲ１ ｍＲＮＡ表达在注射ＫＡ后１ｈ开始增高,４ｈ￣８ｈ达高峰,之后逐渐回落,７２ｈ降至     

UPP对匹罗卡品致痫大鼠PSD95/NR2B表达的影响

目的研究泛素-蛋白酶体途径(UPP)对匹罗卡品致痫大鼠海马突触后致密物质-95(PSD95)/N-甲基-D-天(门)冬氨酸2B受体(NR2B)表达的影响及其在癫痫发生和发展中的作用。方法用免疫荧光方法检测匹罗卡品致痫大鼠及经UPP抑制剂(MG-132)预处理大鼠海马PSD95/NR2B的表达,并观察组织病理学变化。结果MG-132能明显抑制匹罗卡品致痫大鼠海马PSD95/NR2B表达下调,并且明显加重致痫大鼠海马神经元损伤。结论UPP能调控匹罗卡品致痫大鼠海马PSD95/NR2B的表达。     

马桑内酯致痫大鼠海马TNF-α和TNFR1免疫反应的变化

目的　研究TNF α与癫痫发病的关系 ,进一步探讨癫痫发病机理及为癫痫的临床治疗提供依据。方法　将SD大鼠随机分为空白对照组、生理盐水对照组和马桑内酯 (CL)致痫组 ,侧脑室给药后观察记录两组大鼠行为变化 ,存活 2h灌注取材切片 ,用SABC法进行免疫组织化学染色及图像分析观察大鼠海马内TNF α和TNFR1表达的变化。结果　CL致痫组均出现Ⅲ～Ⅴ级痫性发作 ,对照组无发作 ;CL致痫组TNF α与TNFR1在大鼠海马各区阳性细胞数较对照组增多 ,表达较对照组增强 ,其中TNF α在海马CA1、CA3区锥体细胞层 ,TNFR1在海马CA3区锥体细胞层表达显著增强 (均P <0 0 1)。结论　TNF α在癫痫发病中起促进作用 ,其作用可能是通过TNFR1介导的。     

电磁脉冲对大鼠视交叉上核及松果体中Fos蛋白表达的影响

目的：观察电磁脉冲（ＥＭＰ）照射后大鼠视交叉上核（ＳＣＮ）与松果体（ＰＧ）中Ｆｏｓ蛋白表达情况,探讨ＥＭＰ对大鼠尽夜节律的影响及其机制。方法采用ＳＡＢＣ免疫组织化学染色法对ＥＭＰ照射后大鼠ＳＣＮ与ＰＧ中Ｆｏｓ阳性神经元的变化进行检测。结果光照早期照射组,大鼠ＳＣＮ与ＰＧ组织中Ｆｏｓ阳性细胞率及染色灰度值对照组相比无明显差异（Ｐ。〉０．。０５）;黑暗早期照射组ＳＣＮ的Ｆｏｓ阳性细胞率比对照组增高,染