一氧化氮与血吸虫病肝损伤发病机制的关系研究

为了研究一氧化氮在血吸虫病肝损伤发病中的作用，采用Ｓ－Ｐ免疫组织化学法，观察家兔（ｎ＝４０）经皮肤感染血吸虫尾蚴后８、１２、１６、２０、２４周家兔肝诱导型一氧化氮合成酶（ｉＮＯＳ）和巨噬细胞（ＣＤ６８）的免疫组织化学表达与定位。结果显示，血吸虫病家兔肝的虫卵肉芽周围、门静脉分支管壁、肝窦壁、中央静脉壁有ｉＮＯＳ和ＣＤ６８阳性免疫反应物，肝细胞内有ｉＮＯＳ阳性免疫反应物。正常家兔肝脏ｉＮＯＳ和ＣＤ６８免疫组织化学染色均为阴性。认为一氧化氮在血吸虫肉芽形成及肝脏微循环障碍中具有重要作用     

cDNA探针地高辛标记法检测肺中诱生型一氧化氮合成酶的表达

目的：探讨内毒素（ＬＰＳ）诱导后家兔肺组织中诱生型一氧化氮合成酶（ｉＮＯＳ）的表达。方法：采用地高辛标记ｉＮＯＳｃＤＮＡ探针，并用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交技术和比色法检测ｉＮＯＳ表达。结果：经内毒素诱导后ｉＮＯＳ在家兔肺组织中有表达，注射ＬＰＳ５小时后表达量最大，２４小时表达量减少。结论：地高辛标记ｉＮＯＳｃＤＮＡ探针可较好地用于ｉＮＯＳ基因表达的研究。     

cDNA探针对高辛标记法检测肺中诱生型一氧化氮合成酶的表达

目的；探讨内毒素（ＬＰＳ）诱导后家兔肺组织中诱生型一氧化氮合成酶的表达。方法：采用地高辛标记ｉＮＯＳ探针，并用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交技术和比色法检测ｉＮＯＳ表达。结果：经内毒素导后ｉＮＯＳ在家兔肺组织中有表达，注射ＬＰＳ５小时后表达量最大，２４小时表达最减少。结论：地高辛标记ｉＮＯＳｃＤＮＡ探针可较好地用于ｉＮＯＳ基因表达的研究。     

诱生型一氧化氮合酶在正常豚鼠耳蜗内的分布

目的：观察诱生型一氧化氮合酶（ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ－ｓｙｎｔｈａｓｅ,ｉＮＯＳ）在正常豚鼠耳蜗内的分布,方法：以特异性ｉＮＯＳ抗体,应用免疫组化ＡＢＣ法结合显微图像定量分析技术,在１０只正常豚鼠耳蜗冰冻切片上检测ｉｎＯＳ。结果：ｉＮＯＳ的阳性免疫反应产物分布于耳蜗的血管纹、螺旋神经节细胞、Ｃｏｒｔｉ器的内、外毛细胞及神经纤维。结论：正常豚鼠耳蜗有ｉＮＯＳ表达,提示ｉＮＯＳ可     

骨肉瘤iNOS过度表达与血管生成及预后的关系

目的 探讨骨肉瘤中诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）的表达及其与血管生成和预后的关系。方法 应用免疫组化方法检测８０例骨肉瘤标本ｉＮＯＳ的表达,ＦⅧ－ＲＡ和ＣＤ３１免疫组化染色显示肿瘤内微血管密度。结果 ８０例骨肉瘤中５２例ｉＮＯＳ阳性（６５％）,肿瘤细胞境质中的巨噬细胞和部分血管内皮细胞均为阳性。ｉＮＯＳ阳性表达和肿瘤内微血管密度（ＭＶＤ）显著正相关,而且ｉＮＯＳ阳性组病人生成率显著低于ｉＮＯＳ阴性     

肝硬化腹水大鼠肾脏一氧化氮合酶（NOS）免疫组织化学化学研究

为探讨肝硬化腹水大鼠钠潴留的发生机制,应用免疫组织化学法对胆管结扎诱导的胆汁肝硬化腹水大鼠和假手术大鼠肾组织内皮型一氧化氮合酶（ｅＮＯＳ）及诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）的表达进行比较性研究。结果显示二组大鼠肾组织ｅＮＯＳ表达无显著性差异,而ｉＮＯＳ在肝硬化腹水大鼠呈强阳性表达,在假手术大鼠则为阴性,提示胆汁性肝硬化腹水大鼠肾脏ｉＮＯＳ表达显著增高,肾脏ＮＯ途径可能参与了肝硬化钠潴留的发生机制。     

SD幼鼠内毒素血症小肠iNOS免疫活性表达

目的 探讨ＳＤ幼鼠内毒素血症时小肠ｉＮＯＳ免疫活性表达,方法 用生物化学方法测定内毒素血症幼鼠小肠组织积匀浆中ＮＯＳ和ＮＯ水平,用免疫组织化学方法显示小肠诱导性一氧化氮合成酶（ｉＮＯＳ）免疫活性表达。结果 内毒素可使ＮＯＳ活性增加ＮＯ浓度提高,并且ＮＯＳ和ＮＯ之间有较好的相关性,内毒素可增加小肠巨噬细胞,嗜中性粒细胞和嗜酸性粒细胞的ｉＮＯＳ表达。结果 小肠ｉＮＯＳ免疫活性表达和小肠匀浆中ＮＯＳ和Ｎ     

兔内毒素血症肺组织诱生型一氧化氮合酶基因表达的原位检测

本实验观察了家兔内毒素的主要成分脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈｒｉｄｅ，ＬＰＳ）注入后１小时和５小时，诱生型一氧化氮合酶ｉＮＯＳ蛋白和基因表达的肺内分布。一、材料与方法图１阳性信号可见于ＬＰＳ注入后５小时组肺内的巨噬细胞，棕黄色ＡＢＣ法×４００图...     

诱生型一氧化氮合酶在妊娠高血压综合征患者胎盘与脐带中的表 …

目的：研究诱生型一氧化氮合酶（ｉｎｄｕｃｉｂｌｅｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ,ｉＮＯＳ）在正常足月妊娠和妊娠高血压综合征孕妇胎盘,脐带中的表达。方法 形态学观察,免疫组织化学,原位杂交,图像分析定量研究,检测ｉＮＯＳｍＲＮＡ和蛋白质表达水平,结果：妊娠高血压综合征患者胎盘合体滋养层细胞及脐带内皮细胞的ｉＮＯＳ表达增加,绒毛血管平滑肌细胞免疫组化染色显示ｉＮＯＳ表达减弱,原位杂交则显示有较     

诱生型一氧化氮合酶在妊娠高血压综合征患者胎盘与脐带中的表达及定量研究

目的：研究诱生型一氧化氮合酶（ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ,ｉＮＯＳ）在正常足月妊娠和妊娠高血压综合征孕妇胎盘、脐带中的表达。方法：形态学观察、免疫组织化学、原位杂交、图像分析定量研究,检测ｉＮＯＳｍＲＮＡ和蛋白质表达水平。结果：妊娠高血压综合征患者胎盘合体滋养层细胞及脐带内皮细胞的ｉＮＯＳ表达增加;绒毛血管平滑肌细胞免疫组化染色显示ｉＮＯＳ表达减弱,原位杂交则显示有较强的ｉＮＯＳｍＲＮＡ表达;绒毛间质中表达ｉＮＯＳ的Ｈｏｆｂａｕｅｒ 细胞增多。结论：妊娠高血压综合征患者胎盘及脐带中ｉＮＯＳ表达异常,可能在妊高征发病过程中起生理或病理作用。     

iNOS与内毒素血症中淋巴循环的关系

目的：研究内毒素血症中诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）对大鼠肠系膜淋巴管微循环动力学的影响。方法：给大鼠注入脂多糖（ＬＰＳ）和Ｓ－甲基异硫脲（ＳＭＴ），用倒置显微镜和图像处理系统观察及测量大鼠淋巴管的口径和运动频率，用免疫组化染色法观察ｉＮＯＳ在大鼠淋巴管的表达。结果：ＬＰＳ组肠系膜淋巴管口径比正常扩大，运动频率降低，ｉＮＯＳ阳性细胞增多。而ＬＰＳ＋ＳＭＴ组的淋巴管口径和运动频率未见明显变化，ｉＮＯＳ阳性细胞较ＬＰＳ组显著降低。结论：ｉＮＯＳ过量表达影响了淋巴循环；ＳＭＴ可通过抑制ｉＮＯＳ的活性而对内毒素血症期间的淋巴管起保护作用。     

脂多糖对血管平滑肌细胞一化氮合酶基因表达的影响

探讨脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ,ＬＰＳ）对大鼠血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｌｓ,ＶＳＭＣ）诱导型一氧化氮合酶基因表达及一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ,ＮＯ）合成的影响。方法细胞培养,ＲＮＳ迹分布和亚硝酸盐含量。结果ＬＰＳ是ｉＮＯＳ的强效诱导物,可在转录水平上诱导ＶＳＭＣｉＮＯＳｍＲＮＡ表达,促进ＮＯ的合成,其作用强度与ＬＰＳ剂量呈正相关;刺激     

次声对大鼠大脑皮层神经元型NOS和诱导型NOS mRNA表达的影响

探讨次声作用于大鼠后,大脑皮层神经元型一氧化氮合酶（ｎＮＯＳ）和诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）表达的变化。方法雄性ＳＤ大鼠放入次声舱,经８Ｈｚ,１２０ｄＢ作用２ｈ,每日１次,分别于１,７和１４ｄ处死动物,取大脑皮层提取总ＲＮＡ,进行ＲＴ－ＰＣＲ,以未经次声作用的作照,检测ｎＮＯＳ和ｉＮＯＳｍＲＮＡ表达的变化。结果次声连续作用,７,１４ｄ后,ｎＮＯＳｍＲＮＡ表明显降低次声作用１ｄ后,ｉＮＯＳ开始表达     

SOD免疫家兔组织中抗氧化酶及LPO的变化

研究外源性超氧化物歧化酶对机体的影响。方法：测定ＳＯＤ免疫家兔组织中ＳＯＤ，过氧化氢酶，谷城肽过氧化物酶及过氧化脂持的水平。结果；与对照组相比，ＳＯＤ免疫的家兔心，肾的ＳＯＤ活力，以及心，肾，肝的ＧＳＨ－ＰＸ活力明显下降；而心，肝，肾和脑的ＬＰＯ含量均明显增加。     

成年和老年小鼠机体HSP70.iNOS及iNOSmRNA表达的意义

目的：观察成年小鼠和老年小鼠腹腔巨噬细胞ＨＳＰ７Ｏ．ｉＮＯＳ及ｉＮＯＳｍＲＮＡ表达的情况，探讨成年和老年机体免疫功能差异的机制，为老年医疗保健提供理论依据。方法：取成年小鼠和老年小鼠各１０只，取小鼠腹腔巨噬细胞制作标本，采用免疫组化、组织化学、原位杂交及完整细胞斑点印迹技术检测ＨＳＰ７０，ｉＮＯＳ及ｉＮＯＳｍＲＮＡ的表达，并对所有斑点印迹信号进行扫描，其扫描值采用ｔ检验进行统计学处理。结果：成年小     

大鼠脑、肝和前列腺一氧化氮合酶mRNA表达

根据大鼠脑型一氧化氮合酶（ｂＮＯＳ）和内皮型一氧化氮合酶（ｅＮＯＳ）的ｃＤＮＡ序列分别设计特异引物，用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测２种ＮＯＳ在脑、肝脏和前列腺中的ｍＲＮＡ表达差异。结果表明：ｂＮＯＳ在小脑、大脑皮质和海马中有表达，并且在肝脏和前列腺组织中也有表达：ｅＮＯＳ在肝组织中有表达，在小脑、大脑皮质和海马等脑组织中均有表达，但前列腺组织中未检测到ｍＲＮＡ表达。２种ＮＯＳ在上述组织中的广泛分布提示ＮＯ具有多种复杂的、有时甚至是相反的生理功能可能与ｂＮＯＳ和ｅＮＯＳ甚至诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）分别或共同作用有关。     

一氧化氮合酶,P物质在慢传输型便秘结肠壁内的异常表达

目的：研究一氧化氮（ＮＯ）和Ｐ物质（ＳＰ）在慢传输型便秘（ＳＴＣ）发病中的作用。方法：应用一氧化氮合酶（ＮＯＳ）和ＳＰ的兔多克隆抗体。对１５例ＳＴＣ患者和１１例对照组 状结肠标本进行免疫组织化学染色和半定量分析。结果：肌间神经丛ＮＯＳ免疫组化反应阳性增强,而ＳＰ明显降低,粘膜下神经丛ＮＯＳ及ＳＰ免疫反应阳性与对照组无显著差异。结论：ＳＴＣ患者结肠壁内ＮＯ含量增多,ＳＰ含量下降,可能是其结肠传输减慢     

妊高征患者胎盘中一氧化氮合酶含量的变化及其意义

为探讨胎盘中一氧化氮合酶（ＮＯＳ）在妊高征发病中的作用,采用免疫组化ＡＢＣ法分析了３２例妊高征患者胎盘和３２例正常足月孕胎盘中,内皮型一氧化氮合酶（ｅＮＯＳ）和诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）含量的变化情况。结果：（１）正常足月孕胎盘和妊高重点中层得胎均存在ｅＮＯＳ和ｉＮＯＳ抗原,两者均分布于绒毛血管内皮细胞和合体滋养细胞浆内;（２）九坑征患者患者胎盘中ｅＮＯＳ含量显著低于正常足月孕者（Ｐ〈０．００     

诱导型一氧化氮合酶选择性抑制剂对大鼠免疫性肝损伤的影响

目的探讨大鼠免疫性肝损伤模型中一氧化氮（ＮＯ）的作用及诱生规律,诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）选择性抑制剂的作用机制。方法采用原位ＰＣＲ法对免疫损伤性肝细胞ＮＯＳ基因表达进行原位检测,并观察细胞培养上清中ＮＯ生成量及乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活性的变化。结果用卡介苗（ＢＣＧ,１５、３０、５０ｍｇ／只静脉注射）单独投与或与炎性细胞因子配伍（ＣＭ,含白细胞介素１β,干扰素γ,肿瘤坏死因子α及细菌脂多糖）可引起培养上清ＮＯ浓度及ＬＤＨ活性明显升高（均Ｐ＜０．０５）,ＮＯ生成量与肝损伤程度成正比,而与ＢＣＧ剂量成反比;大鼠免疫损伤性肝实质细胞ＮＯＳ基因表达以可溶性胞浆型ｉＮＯＳ为主;ｉＮＯＳ选择性抑制剂氨基胍在明显抑制细胞培养上清中ＮＯ生成（８３．４％,Ｐ＜０．０５）的同时,减轻肝细胞损伤的程度（３６．０％,Ｐ＜０．０５）;而转录抑制剂放线菌素Ｄ则加重肝损伤（增加２５．５％,Ｐ＜０．０５）。结论在免疫刺激条件下诱导生成的ＮＯ主要参与肝损伤机制     

烧伤大鼠胃组织中一氧化氮合酶的变化观察

目的 研究烧伤后大鼠胃组织中一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的变化及与一氧化氮（ＮＯ）的关系。方法 采用３０％ＴＢＳＡⅢ度烧伤大鼠模型,分别检测了胃组织中ＮＯ含量及原生型ＮＯＳ（ｃＮＯＳ）和诱导型ＮＯＳ（ｉＮＯＳ）的活性,并分析了ＮＯ的变化规律及其与两型ＮＯＳ之间的关系。结果 烧伤后胃组织中ｉＮＯＳ活性大幅上升,与ＮＯ的变化趋势一致,二者呈显著正相关（ｒ＝０．９４,Ｐ〈０．０１）,而ｃＮＯＳ活性呈下降趋势,与ＮＯ相关不显著（ｒ＝－０．５３,Ｐ〉０．０５）。结论 烧伤后胃组织中ＮＯ的变化受ｉＮＯＳ活性影响,ｉＮＯＳ活性上升,ｃＮＯＳ活性下降可能与烧伤后胃肠道病理变化密切相关。