B系急性淋巴细胞白血病与基因重排

分子生物学是当今生命科学中最热门的前沿学科,尽管它在恶性血液病中的应用尚处于起始阶段,对细胞学诊断的影响也还有限。但是愕然回首,它已深深地影响到我们对细胞形态学和细胞遗传学,以及它们与临床之间诸多联系的理解,对肿瘤细胞生物行为和临床行为之间的了解,分子生物学检查能提供精确的证据、超前的信息和崭新的视角。本文就B系细胞白血病的相关基因重排与临床表型之间的关系作一综述。1　相关基因的结构与功能在B系急性淋巴细胞白血病(acutelymphoblasticleukaemia ,ALL)中,已检测到t(8;14 ) (q2 4 ;q32 )、t(2 ;8) (p11～12 ;q2 4 …     

PCR技术检测B-淋巴系肿瘤IgH重排基因的进展

PCR技术检测IgH重排基因已广泛应用于微小残留病等研究。假阴性、多重重排等现象严重影响检测意义。本文就PCR检测B-淋巴系肿瘤IgH重排基因所存在问题及解决方法,新的PCR技术及应用中注意的问题等进行综述。     

PCR技术检测B—淋巴系肿瘤IgH重排基因的发展

ＰＣＲ技术检测ＩｇＨ重排基因已广泛应用于微小残留病等研究。假阴性、多重重排等现象严重影响检测意义。本文就ＰＣＲ检测Ｂ－淋巴系肿瘤ＩｇＨ重排基因所存在问题及解决方法，新的ＰＣＲ技术及应用中注意的问题等进行综述。     

伴有染色体11q23易位的急性淋巴系和髓系白血病MLL基因重排

染色体11q23易位在急性淋巴系和髓系白血病中很常见,是患白血病婴儿最常见的基因异常。常见的易位类型包括t(4;11)、t(6;11)、t(9;11)和t(11;19),有11q23易位的急性白血病患者预后甚差。一个主要问题是11q23上的一个还是几个基因和这些白血病有关。作者在有11q23的白血病中已识别出染色体断裂点区并克隆出覆盖11q23断裂点的髓系和淋巴系混合型白血病(Myeloid-Lymphoid     

血液系统恶性肿瘤的染色体易位基因重排

几乎所有的血液系统恶性肿瘤有染色体易位重排和基因突变,不同的恶性疾病,其基因改变有其特异性。本文主要阐述血液系统恶性肿瘤的特异性分子标志以及其产生机理;简述用多聚酶链式反应检测这些分子标志的原理和应用。     

BCR基因重排的儿童急性淋巴细胞白血病

ＢＣＲ基因重排的儿童急性淋巴细胞白血病金晓明，林坤治，李奇志，吕联煌，郭瑞官，邓国仁ｂｃｒ（ｂｒｅａｋｐｏｉｎｔｃｌｕｓｔｅｒｒｅｇｉｏｎ，断裂点密集区）基因长５．８ｋｂ，位于ＢＣＲ基因的中部，定位于人染色体的２２ｑ１１．２１。已知该区域断裂与慢性粒...     

儿童淋巴系恶性肿瘤糖皮质激素受体表达的临床研究

糖皮质激素（GC）与其位于细胞膜和细胞浆的受体（GR）结合后诱导恶性细胞凋亡。GR在这一过程中起着重要作用。但有关GR的分布、表达与肿瘤治疗及预后关系的报道不多。我们建立了流式细胞术检测淋巴细胞GR的方法，以探讨GR表达与儿童淋巴系恶性肿瘤疾病危险度、化疗疗效及预后的关系。     

T-细胞急性淋巴细胞白血病的κ轻链基因重排

免疫球蛋白(Ig)和T-细胞受体(TCR)基因重排是检测淋巴系统增殖性疾病克隆性的灵敏方法。已经证明了Ig重链TCRβ和γ基因探针对急性白血病缺乏谱系特异性,而传统认为Ig轻链基因重排是B—细胞谱系的一项很特异的指标。本文报道了1例T-细胞急性淋巴细胞白血病(ALL)患者,其TCRβ链基因发生重排,意外的是Igκ轻链基因也发生重排,未发现Ig重链基因重排。其中T-细胞ALL的κ轻链基因重排尚属首例报道。     

混合系白血病基因重排的检测方法及其临床意义

为了研究混合系白血病（MLL）基因重排在急性白血病（AL）中的发生率、融合基因类型及其临床意义，用荧光原位杂交技术检测60例急性白血病（AL）患者MLL基因重排，对于MLL基因重排阳性的患者，用巢式RT—PCR方法检测MLL基因重排形成的6种常见融合基因类型。结果表明：7例AL患者有MLL基因重排，发生率为11．67％，其中2例为急性髓细胞白血病M5（AML—M5），融合基因均为MLL／AF9；男5例为B细胞系急性淋巴细胞白血病（B—ALL），其中2例融合基因为MLL／ENL，1例MLL／AF4，2例未扩增出融合基因产物。结论：荧光原位杂交技术是检测ALMLL基因易位重排的快速、特异、灵敏的方法，巢式RT-PCR是检测MLL基因重排产生的融合基因类型的简便可行的方法；MLL基因重排的检测对急性白血病预后判断和治疗方案的选择具有重要意义。     

儿童急性淋巴细胞白血病IgH基因重排的定量检测研究

目的建立免疫球蛋白重链（IgH）的实时定量（RQ）-PCR检测体系，以用于儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）微小残留病（MRD）检测。方法采用定性PCR筛选109例儿童B细胞ALL（B-ALL）IgH基因单克隆重排，根据连接区序列设计等位基因特异性引物，应用RQ-PCR技术，采用胚系Taqman探针与引物，在41例患儿中建立RQ-PCR定量检测方法，并分析其敏感度、特异性等。结果109例儿童B-ALL初诊标本中IgH单克隆重排有48例，经测序分析发现，V、D、J片段频率最高的分别为V3家族、D3家族和J4家族。RQ-PCR方法扩增48例IgH单克隆重排的初诊DNA，其中41例可重复敏感度和最大敏感度均≤10^-4，非特异性扩增的循环阈值（Ct值）均〉40，与特异性扩增Ct值的差距均〉3。标准曲线斜率均值为-3．314±0．19，截距均值为37．664±1．23，相关系数均为0．97以上。结论以IgH基因重排为靶分子，采用RQ-PCR方法和胚系探针策略检测儿童B-ALL，敏感性≤10^-4，并具有较高的特异性，适于MRD的定量研究。     

非放射法测定急性淋巴细胞白血病Ig和TCR基因重排

确定Ig 和TCR 基因重排已成为诊断急性淋巴细胞白血病的一个组成部份。标准的Southern 印迹技术是用对应于IgH 和TCRβ基因J 区的放射性同位素标记的DNA 探针作印迹杂交后,通过放射自显影确定有无该基因的重排。本文总结了用生物素标记的DNA 探针作Southern 印迹分析25例B 前体细     

急性淋巴细胞白血病IgH与TCRγ基因重排模式的探讨

急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblasticleukemia,ALL)IgH和TCRγ基因重排产生了特异性的肿瘤标记,其重排模式反映了白血病细胞克隆形成情况。本研究应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术,体外扩增检测了30例ALL病人IgH和TCRγ基因重排,试图在基因水平上观察和分析其重排模式。     

鼻腔及咽淋巴环恶性淋巴瘤的免疫组化与基因重排检测

对４３例鼻腔及咽淋巴环非何杰金淋巴瘤（Ｎｏｎ－Ｈｏｄｇｋｉｎ＇ｓＬｙｍｐｈｏｍａ，ＮＨＬ）重点进行了免疫表型和基因重排检测，其中鼻腔２５例、咽淋巴环１８例。免疫表型检查结果４３例ＮＨＬ中，ＵＣＨＬ－１和Ｌ２６表达阳性各为２６和７例，１０例无确切免疫表型表达，常有ＵＣＨＬ－１和Ｌ２６阳性细胞同时存在于组织中；ＴＣＲβ和ＩｇＨ基因重排检测：４１例中２８例出现特异性基因重排扩增单带，其中２１例ＴＣＲβ基因重排检测阳性，７例ＩｇＨ阳性，包括１２例ＵＣＨＬ－１和６例Ｌ２６阳性表达者和１０例无确切免疫表型表达者；１例高度反应性增生病例ＴＣＲβ基因重排检测阳性，２例低分化癌和２例淋巴组织高度反应性增生均为阴性。结果表明，免疫表型和基因重排检测有一定互补性；同时讨论了用常规石蜡切片的刮取组织进行基因重排检测的意义。     

MLL基因重排阳性的儿童急性淋巴细胞白血病的融合基因及免疫表型特点

为了探讨混合谱系白血病（mixed linage leukemia,MLL）基因重排阳性的儿童急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia,ALL）融合基因与免疫表型的特征,利用多重巢式聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）方法检测601例ALL患儿中MLL基因重排的发生率,通过对PCR产物的测序,分析融合基因的亚型及特点;比较分析重排阳性的22例患儿与同期未检出任何融合基因的随机抽取的30例ALL患儿及43例pro—B—ALL患儿初诊时免疫表型特点。结果表明：MLL基因重排阳性的ALL患儿检出率为3．66％,占pro—B—ALL的29．9％。20例MLL基因重排阳性的B—ALL患者全部为CD10^-,表达CD13、CD33和CD34的例数较pro—B—ALL对照组低,CD20、CD22、CD2、CD5、CD7的表达则无差异。共检出4种MLL基因的伙伴基因AF4、AF9、AF10和ENL。MLL基因融合位点主要位于第6、7、8外显子,同一患者可同时存在多种MLL基因融合位点;而其伙伴基因的融合位点相对单一。1例患儿MLL—AF10融合转录本存在随机插入序列。结论：MLL基因重排的发生率低,重排形式多样,阳性ALL患儿在免疫表型及融合转录本的表达方面具有独特的生物学特征。     

急性淋巴细胞白血病基因重排及其用于微量残留白血病检测的研究

应用多种分子生物学技术，对急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）患儿６５例进行抗原受体（ＴＣＲγ、ＴＣＲδ、ＩｇＨ）基因重排和肿瘤融合基因（ＳＩＬ－ＴＡＬ－１、ｂｃｒ／ａｂｌ、ＨＲＸ）转录本的研究，发现９６％的患者存在至少一种上述基因标记，对其中２３例具有连续３次以上送检骨髓标本的患者进行微量残留病（ＭＲＤ）检测。杂交试验显示，ＭＲＤ可检出的敏感度在以肿瘤融合基因为标记的患者为１０－４～１０－６，在以抗原受体Ｖ－（Ｄ）－Ｊ结合部顺序为探针的患者为１０－２～１０－５。文中就选用多种基因标记，对ＡＬＬ患儿进行有步骤、多方位筛查特异标记基因，并对同一患儿采用不同基因标记作ＭＲＤ跟踪检测的方法学评价和临床意义予以讨论。     

IgH、TCRδ基因重排与急性非淋巴细胞白血病的相关性

目的 探讨初诊急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）患中免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）和Ｔ细胞受体δ链（ＴＣＲδ）基因重排情况。方法 用聚合酶链反应方法检测ＩｇＨ及ＴＣＲδ基因重排。结果 ３０例患中９例（３０％）发生ＩｇＨ基因重排,５例出现ＴＣＲδ基因重排。结论 ＡＮＬＬ中确定存在系列不保真现象,不仅具有较高的ＩｇＨ重排发生率,还具有ＴＣＲδ重排发生。     

急性淋巴细胞白血病基因重排及其用于微量残留白血病检测的…

应用多种分子生物学技术，对急性淋巴细胞白血病患儿６５例进行抗原受体基因重和肿瘤融合基因转录本的研究，发现９６％的患者存在至少一种上述基因标记，对其中２３例具有连续３次以上送检骨髓标本的患者进行微量残留病检测。     

急性淋巴细胞白血病T细胞受体δ基因不完全重排的研究

应用ＤＮＡ多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术对急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）进行了Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）δ基因重排的研究，并获得了３个ＡＬＬ患者ＴＣＲδ基因的Ｖ－（Ｄ）－Ｄ结合部顺序（Ｎ顺序）。证明ＡＬＬ，特别是Ｂ细胞ＡＬＬ中，ＴＣＲδ基因不完全重排的发生率比较高，最常见的两种重排类型为Ｖδ２－（Ｄ）－Ｄδ３和Ｄδ１／２－Ｄδ３。δ基因的不完全重排是早期淋巴分化调控中一个重要的内容。δ基因Ｖ－（Ｄ）－Ｊ结合部     

急性淋巴细胞白血病TCR/IgH基因重排的联合检测及临床意义

目的探讨T细胞受体γ（T　cell　receptor．γ，TCRγ）、T细胞受体δ（T cell receptor δ，TCRδ）、免疫球蛋白重链（Immunoglobulin heavy chain H，IgH）基因重排的联合检测方法及其在监测急性淋巴细胞白血病（Acute Lymphoblastic Leukemia，ALL）微小残留病（Minimal Residual Disease，MRD）中的临床意义。方法应用PCR／SSP的方法对104例急性淋巴细胞白血病患者（83例儿童、21例成人）进行TCRγ、TCRδ、IgH三种基因重排的联合检测，并通过动态监测来了解它们与临床MPD的关系。结果三种基因重排联合检测在ALL患者的检出率较高（儿童前B-ALL为89．2％，T-ALL为94．4％；成人PreB-ALL为84．6％，T-ALL为87．5％），远高于单一基因重排的检出率；联合检测持续阳性患者的复发率远高与阴性患者（Χ^2=9．07，P〈0．01）。结论TCRγ、TCRγ、IgH基因重排的联合检测方法简便、敏感性高，对于急性淋巴细胞白血病的诊断以及MRD的监测具有非常重要的临床意义。