缺血预处理改善骨骼肌缺血再灌注损伤的实验研究

缺血预处理改善骨骼肌缺血再灌注损伤的实验研究冯亚高闽坤山＊邓素雅＊＊汪功久骨骼肌缺血再灌注损伤是临床常见的病理过程。然而到目前为止仍没有一种十分有效的防治方法应用于临床。１９８６年Ｍｕｒｒｙ等〔１〕首次应用缺血预处理方法即短时间重复缺血、间断再灌注改...     

缺血后处理对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨缺血后处理对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤的影响以及应用缺血后处理的时机.方法 将32只大鼠随机分成四组,采用切断患肢全部皮肤、肌肉和神经,保留患肢股动静脉的动物模型,通过夹闭和开放股动静脉造成骨骼肌缺血和再灌注损伤.采用测定骨骼肌缺血4 h.再灌注1 h后血清丙二醛(MDA)、骨骼肌髓过氧化物酶(MPO),再灌注6 h后骨骼肌的死亡程度来观察缺血后处理对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤的影响,以及再灌注5 min后应用缺血后处理是否对骨骼肌缺血再灌注损伤有保护作用.结果 对骨骼肌缺血4 h再灌注6 h的损伤,再灌注开始后即刻应用30 s缺血、30 s再通,三次循环的缺血后处理对骨骼肌的缺血再灌注损伤即有保护作用,不仅减少了骨骼肌再灌注区域中性粒细胞浸润(MPO)和血清氧自由基水平(MDA)水平,而且减少了骨骼肌的死亡程度;再灌注5 min后应用缺血后处理并没有降低骨骼肌缺血再灌注区域的MPO和血清MDA水平,也没有降低骨骼肌缺血再灌注后的死亡程度,与直接缺血再灌注组相同,对骨骼肌缺血再灌注损伤并没有保护作用.结论 骨骼肌缺血后再灌注开始前立刻应用缺血后处理对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤有一定的保护效果,可以减少骨骼肌缺血再灌注损伤后的死亡程度;缺血后处理应用时机非常重要,再灌注5 min后应用缺血后处理则失去对骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用.     

缺血预处理减轻骨骼肌缺血再灌注损伤

目的 观察缺血预处理对骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法 选择２４只健康兔,随机等分为实验组和对照组。实验组先进行缺血预处理,再持续阻断后肢血流４ｈ;对照组直接阻断后肢血流４ｈ,制作骨骼肌缺血再灌注损伤模型。测定再灌注期血清中肌酸磷酸激酶（ＣＰＫ）和天门冬氨酸氨基转移酶（ＡＳＴ）,镜下观察骨骼肌变化。结果 实验组血清中ＣＰＫ和ＡＳＴ的含量均明显低于对照组（Ｐ〈０．０５）。实验组骨骼肌线粒体空泡变     

大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤的细胞凋亡及相关基因表达

目的研究缺血性损伤和缺血再灌注损伤的发生情况和病理改变，探讨细胞凋亡及相关基因p53、p21、Bax、Bcl-2的表达规律。方法建立大鼠后肢缺血和缺血再灌注实验模型，光镜下观察缺血和缺血再灌注早期的骨骼肌组织病理学变化，检测缺血和缺血再灌注过程中细胞凋亡现象的发生及相关基因p53、p21、Bax、Bcl-2的表达。结果缺血5h的大鼠骨骼肌全部存活，而缺血9h者未获存活。缺血和缺血再灌注损伤引起骨骼肌细胞水肿、坏死和细胞凋亡，并于再灌注过程观察到微循环障碍和中性粒细胞趋化浸润现象。缺血7h细胞凋亡率最高，相关基因p53、p21、Bax表达与缺血时间成正比，而Bcl-2表达与缺血时间成反比。结论细胞凋亡是缺血和缺血再灌注损伤的重要病理学改变。微循环障碍和中性粒细胞趋化浸润是缺血再灌注损伤的重要原因之一。相关基因表达与凋亡的发生关系密切。     

丹参改善骨骼肌缺血再灌注损伤的超微结构观察

目的:通过透射电镜观察骨骼肌缺血再灌注损伤过程的病理生理变化探讨丹参的干预作用及机制。方法:采用90只清洁级雄性SD大鼠,6只作为健康对照组,84只行左侧提睾肌主滋养动脉夹闭造模,在缺血2.5 h时,丹参组腹腔注射丹参(42只),对照组注射等剂量的生理盐水(42只),两组分别设缺血再灌注10、20、30、40、50、60、90 min观测点(每个观测点6只)。观测结束后,迅速切取提睾肌,放入电镜固定液。电镜下进行组织形态学观察。结果:健康对照组正常情况下,组成肌原纤维的粗、细2种肌丝沿其长轴排列,每条肌原纤维上均可见明暗相间的带,肌浆内见有较多糖原颗粒及少量内质网、线粒体等细胞器,肌浆网纵向分布于肌原纤维周围,线粒体膜及嵴清晰可见,基质着色深,无肿胀、空泡形成等改变,在肌丝之间分布有较多糖原颗粒;骨骼肌缺血再灌注后10、20、30、40、50、60、90 min的2组各观测点,其病理变化较相似,肌丝模糊、凌乱,部分溶解、消失,甚至完全消失,肌浆网不同程度扩张,线粒体变大变圆,基质变淡,嵴变短变少甚至消失,部分线粒体极度肿胀,呈空泡状。丹参组,其病理变化大体相似,肌纤维均有不同程度恢复。结论:骨骼肌缺血再灌注损伤导致线粒体极度肿胀,肌纤维紊乱。丹参能有效地消除线粒体的水肿,恢复肌纤维,减轻骨骼肌缺血再灌注损伤。     

缺血预处理研究现状及其在骨骼肌缺血再灌注损伤中的进展

骨骼肌缺血再灌注损伤临床上甚为常见。至今仍无十分有效的防治方法。最近 ,缺血预处理 (ｉｓ ｃｈｅｍｉｃｐｒｅｏｎｄｉｔｉｏｉｎｇ)提高组织缺血耐受性的现象颇受关注[1,2 ] 。本文就缺血预处理的进展及其在骨骼肌缺血再灌注损伤中的应用综述如下。缺血预处理的概念首先由Ｍｕｒｒｙ在心肌缺血再灌注损伤研究中提出。 1981年和 1986年Ｒｅｉｍｅｒ等[3 ,4 ] 发现短暂重复缺血并未引起组织ＡＴＰ相应减少 ,同时注意到连续 4次间断 10ｍｉｎ心肌缺血 ,7只试验狗中仅有 1例发生心肌坏死。 1986年Ｍｕｒｒｙ等[5]首次采用 4次间断 5ｍｉｎ…     

缺血预处理对骨骼肌缺血再灌物保护机制及其与腺苷关系研究

目的：探讨骨骼肌缺血预处理保护作用机制及其腺苷的关系。方法：采用兔右后肢缺血模型，将２８史兔随机分为４组，对照组：持续缺血４ｈ，再灌注１ｈ；缺血５ｍｉｎ再灌注５ｍｉｎ重复３次后，持续缺血４ｈ再灌注１ｈ。腺苷治疗组：于血再灌注前经股动脉注入０．５ｍｇ腺苷。腺苷受体拮抗剂８－ＰＴ处理组；在３次循环ＩＰＣ处理前，经股动脉注射３．０ｍｇ８－ＰＴ，再缺血４ｈ，再灌注１ｈ。通过高铲液相色谱法测定处理胶、缺血４     

姜黄素对骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究

目的:观察姜黄素对肢体骨骼肌缺血再灌注损伤中血浆肌酸磷酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)含量及骨骼肌99m锝亚甲基二磷酸钠(99mTcMDP)吸收量的影响,探讨姜黄素对肢体骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法:制作大鼠后肢缺血再灌注损伤模型,30只大鼠随机分为假手术组、对照组、干预组。分别于再灌注1 h后测定血浆CPK、LDH、MDA含量和腓肠肌99mTcMDP吸收量变化,透射电镜观察腓肠肌超微结构变化。结果:缺血再灌注对照组和姜黄素干预组与假手术组相比,血浆CPK(7296.18±1086.53,5168.49±975.39,3014.26±963.78)、LDH(1203.66±282.53,726.56±203.65,463.85±75.32)、MDA(10.36±2.65,6.78±2.12,3.54±1.89)含量明显增高(P<0.01),99mTcMDP吸收量(16.69±3.14,11.45±2.35,9.12±1.96)明显升高(P<0.01);腓肠肌超微结构损伤明显加重;姜黄素组血浆和骨骼肌的各项指标与缺血再灌注对照组相比显著降低(P<0.01),腓肠肌超微结构损伤明显减轻。结论:姜黄素能有效降低血浆CPK、LDH、MDA含量,减少骨骼肌99mTcMDP吸收量,减轻缺血再灌注骨骼肌坏死程度和坏死范围,改善骨骼肌再灌注损伤的超微结构,说明姜黄素对骨骼肌缺血再灌注损伤具有明显的保护作用。     

缺血后处理对骨骼肌缺血再灌注后肺损伤保护作用的机制

目的：探讨缺血后处理（I-postC）对大鼠双侧后肢骨骼肌缺血再灌注（I/R）后肺损伤的保护作用及机制。方法：阻断肾下腹主动脉建立大鼠双侧后肢骨骼肌I/R损伤模型。48只大鼠随机分为3组：I/R组、缺血预处理（IPC）组及I-postC组,每组16只。分别于再灌注后12、24h各处死8只,取肺组织标本,观察肺组织形态学、湿/干重比、丙二醛（MDA）及髓过氧化物酶（MPO）的变化。原位杂交和RT-PCR方法检测肺组织中细胞间黏附分子（ICAM）-1mRNA的表达,Western blot检测ICAM-1蛋白表达。结果：再灌注12或24h后I/R组有明显的弥散功能障碍,表现为间质浸润细胞增多并伴有明显水肿。IPC组和I-postC组的各项指标均较I/R组明显降低,差异有统计学意义（P〈0.01）,但2组之间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：I-postC可以减轻大鼠双侧后肢骨骼肌I/R后肺损伤,与IPC可能存在共同的作用机制。     

缺血预处理对肌皮瓣缺血再灌注损伤的保护作用

缺血预处理(Ischemicprecondition-ing,IP)对心肌保护作用的研究近年来取得较大的进展,其对骨骼肌的保护作用也已有实验证实,但其作用机制仍不清楚[1]。本研究以家猪岛状背阔肌肌皮瓣为实验模型,进一步验证缺血预处理对骨骼肌肌皮瓣的保护作用,并对其保护机制进行初步探讨。材料与方法一、实验动物模型及分组选用健康家猪16头,体重22.5～27kg,雌雄不拘,随机等分成2组,参照Mounsey[2]方法,设计切取以胸背动脉血管束为蒂的岛状背阔肌肌皮瓣(14cm×8cm),并将胸背神经及其分支切断以阻断其对肌肉反应的影响。将血管蒂向腋血管方向游离出足够的…     

骨骼肌缺血再灌注损伤血管机制及防治作用的研究进展

骨骼肌缺血再灌注损伤是由复杂的多因素引起的血液回流受阻导致组织功能障碍,是骨科临床常见的手术并发症。尽管造成此现象的原因尚未完全明了,但血管功能障碍起主要作用。H2O2是引起血管损伤的重要因素。本文主要针对骨骼肌缺血再灌注损伤的血管机制的研究及防治进展加以综述。     

Effects of systemic and regional taurine on skeletal muscle function following ischaemia-reperfusion injury.

INTRODUCTION: Tissues subjected to prolonged ischaemia are paradoxically further damaged when their perfusion is restored. The mechanisms underlying this ischaemia-reperfusion injury are complex, but oxidative attack is a central feature. Among the therapeutic agents used to attenuate ischaemia-reperfusion injury, endogenous agents such as taurine which form part of the native defence mechanism against oxidative damage are of particular interest. METHODS: Using a model of hindlimb ischaemia-reperfusion injury in the rat, taurine solution was administered either into the operated hindlimb, into the systemic circulation, or both. Contraction strengths of gastrocnemius biopsies from the operated and contralateral (control) hindlimbs of each animal were measured. RESULTS: Fast twitch strength was impaired significantly by ischaemia-reperfusion injury, and taurine injected into the operated limb conferred partial protection. A similar trend was observed for tetany, but protection by taurine was not statistically significant for tetanic contraction strength. CONCLUSION: Preservation of fast twitch strength following ischaemia-reperfusion injury by administration of taurine before ischaemia has clinical potential. However, delivery to the affected tissues during ischaemia presents technical difficulties.     

Histological, enzymohistochemical and biomechanical observation of skeletal muscle injury in rabbits

OBJECTIVE: To explore the pathophysiological and biomechanical features of skeletal muscular injury for providing a rational basis for its treatment, prevention and rehabilitation. METHODS: In 70 adult rabbits, the left tibialis anterior (TA) muscle was stretched to injury, while the right TA muscle served as control. Histological, enzymohistochemical and biomechanical changes were observed on days 0, 1, 2, 3, and 7 after injury. Cytochrome oxidase (CCO), acid phosphatase (ACP), ATPase, succinate dehydrogenase (SDH), malate dehydrogenase (MDH), NADH-diaphorase (NADHD), glutamatedehydrogenase (GDH), alpha-glycerophosphate dehydrogenase (alpha-GPD) and lactate dehydrogenase (LDH) were measured. The examined biomechanical parameters included maximal contractile force, ultimate load, length, energy absorption, tangent stiffness, and rupture site. RESULTS: Partial or complete rupture of TA muscle occurred near the muscle-tendon junction. There was an intense inflammatory reaction on day 1 and 2 after injury. Endomysium fibrosis and myotube formation were observed on day 3, and developed further on day 7. The activity of cell oxidases (CCO, ATPase, MDH, alpha-GPD, SDH, NADHD and GDH) showed a significant drop from day 0 to 2, and resumed with different levels on day 3. The increment of enzymatic activities continued on day 7 and the levels of NADHD and alpha-GPD reached to the levels of control muscle. Maximal contractile force was 70.17%+/-3.82% of controls immediately after injury, 54.82%+/-3.09% at 1 day, 66.41%+/-4.36% at 2 days, 78.39%+/-4.90% at 3 days and 93.64%+/-5.02% at 7 days. Ultimate load was 85.78%+/-7.54% of controls at the moment of injury, 61.44%+/-5.91% at 1 day, 49.17%+/-4.26% at 2 days, 64.43%+/-5.02% at 3 days, and 76.71%+/-6.46% at 7 days. CONCLUSIONS: Endomysium fibrosis and scar formation at the injured site are responsible for frequent recurrence of skeletal muscle injury. Recovery of tensile load slower than that of maximal contractile force may be another cause. Whether the injured muscle returns to normal exercise is mainly determined by the tensility on which the muscle-tendon can bear rather than the maximal contractile force.     

肿瘤坏死因子α介导骨骼肌缺血-再灌注损伤的实验研究

目的研究肿瘤坏死因子α(TNF α)介导骨骼肌缺血 再灌注损伤的作用机制。方法2 4只健康雄性SD大鼠 (2 5 0～ 30 0g)随机分成 3组。对照组 :仅行麻醉及颈外静脉插管术 ;损伤组 :左后肢缺血 4h ,再灌注 4h ;治疗组 :缺血 4h ,再灌注 4h ,再灌注即刻经静脉导管给与抗TNF α单克隆抗体。结果损伤组较对照组单核细胞TNF αmRNA转录增加 ,血浆丙二醛 (MDA) (9 9± 1 8)比(5 5± 0 4 )、肌酸激酶 (CK) (12 2± 2 4 )比 (49± 11)、一氧化氮 (NO) (2 70± 98)比 (12 8± 4 6 )、组织过氧化物酶 (MPO) (骨骼肌 4 2 7± 0 5 3)比 (1 2 8± 0 19,肺 2 6 1± 0 12 )比 (0 5 7± 0 0 2 )显著升高 (P <0 0 1) ,骨骼肌和肺组织超微结构发生病理改变。治疗组较损伤组MDA(6 2± 1 2 )比 (9 9± 1 8)、CK(5 8±12 )比 (12 2± 2 4 )、NO(15 4± 5 5 )比 (2 70± 98)、MPO(骨骼肌 2 13± 0 2 1)比 (4 2 7± 0 5 3肺 0 95± 0 0 1)比(2 6 1± 0 12 )水平明显降低 (P <0 0 5 ) ,骨骼肌和肺组织病理损伤减轻。结论骨骼肌缺血 再灌注激发TNF α的生成 ,在介导骨骼肌和肺的损伤中起重要作用     

自体筋膜作为骨骼肌再生支架的实验研究

目的　探讨自体筋膜作为支架材料在体内重建肌肉的可行性。　方法　采用28只新西兰兔的双后腿建立胫骨前肌中段缺损模型。随机选取一侧,植入用自体阔筋膜制成的支架和肌肉微粒(肌肉支架组);另一侧分为3部分: 10只腿缺损处植入筋膜支架(支架组), 10只腿缺损处植入肌肉微粒(肌肉组), 8只腿缺损不作处理(缺陷组)。术后2、3、4、6、9周分别解剖观察移植成活率,并切取标本行组织学及超微结构观察和结蛋白免疫组织化学鉴定。各时相点切取肌肉支架组和支架组移植物中段标本,用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)技术进行α肌动蛋白DNA相对定量分析。结果(1)术后第4周肌肉支架组缺损愈合处形态接近正常,移植成活率达93. 33%,其他组相对较差。(2)肌肉支架组术后2—3周细胞增生活跃,结蛋白阳性率较高,α肌动蛋白DNA相对丰度较大,与支架组比较,差异均有统计学意义(P<0. 05 ).　结论　以自体筋膜为支架促使肌肉组织再生具有可行性。