RNA干扰逆转白血病细胞耐药性的研究

目的 用RNA干扰技术下调白血病耐药细胞系K562/A02多药耐药基因mdr1的表达以逆转白血病对化学药物的耐药性.方法 针对mdr1基因已知mRNA序列不同位点,选择两条靶序列,构建靶向mdr1 shRNA真核表达载体,脂质体介导转染白血病耐药细胞株K562/A02.实时荧光定量RT-PCR检测mRNA表达,Western blot检测细胞膜P-gp表达,柔红霉素泵出试验检测P-gp外排泵功能,MTT法检测细胞对阿霉素的敏感性.结果 构建了二条针对mdr1基因的shRNA真核表达载体,分别下调mdr1 mRNA的表达89.74%和87.18%,降低细胞膜P-gp表达,使膜外泵功能明显下降,柔红霉素在细胞内贮留明显增多,60min 时柔红泵出率为13.16%、22.02%,对照组为40.44%、45.31%,对阿霉素药物敏感性的相对逆转率为84.36%和76.69%.结论 RNA干扰技术可有效逆转mdr1所致耐药.     

ADAM17-shRNA在缺氧条件下对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响

目的：研究在缺氧环境下靶向针对解聚素-金属蛋白酶17（ADAM17）的短发夹状 RNA（shRNA）对人乳腺癌 MCF-7细胞增殖的影响。方法针对 ADAM17设计4个特异性的 ADAM17-shRNA,经电穿孔法转染 MCF-7细胞。缺氧条件下培养细胞。试验分为：对照组（空白磷酸盐缓冲液）、无义序列组（转染无义序列 ADAM17-shRNA）和 shRNA 转染组（转染 ADAM17-shRNA,选择沉默 ADAM17基因效率最高的 shRNA 用于后续试验）。分别采用实时荧光定量 PCR、iCELLigence、流式细胞仪检测细胞 ADAM17 mRNA 的表达水平、细胞增殖活性和细胞周期变化。结果4个 shRNA 转染组对 MCF-7细胞的 ADAM17基因表达均有沉默作用,与对照组及无义序列组相比,差异具有统计学意义（P ＜0．05）,尤以 shRNA1219抑制率最高（F ＝5．11, P ＜0．01）。shRNA 转染组的细胞生长速度和增殖活性较对照组和无义序列组显著降低,差异有统计学意义（P ＜0．05）。shRNA转染组的绝大多数细胞停留在 G0／G1期（73．35±2．45）,与对照组（62．56±2．35）、无义序列组（62．68±1．20）相比较,差异有统计学意义（P ＜0．05）,细胞周期进展明显延缓。结论 ADAM17-shRNA 在缺氧条件下抑制乳腺癌细胞 MCF-7的增殖。     

IMPROVING P-gp EXPRESSION IN HUMAN MONONUCLEAR CELLS IN VITRO TRANSFECTED BY MULTIDRUG RESISTANCE-1 mRNA

CHEMOTHERAPY playsa greatrolein the treat- ment of malignanttumors,especiallyingynecolo- gicalones.But inanticancerchemotherapy,leuko-cytopeniaisfrequentlytheprimarydose-limitingsideeffect factor.Moreover,cancersarefrequentlychemoresistantbe-causeof overexpressionof P-glycoprotein(P-gp), which isencodedby multidrugresistancegene (MDR1 ) and detectableinup to50% ofhuman cancersand renderscellsresistancetoanticancerdrugs.The safetyand potentialtherapeuticbenefitof mdr1 gene transferredto h…     

短发夹RNA干扰表达质粒逆转人乳腺癌细胞MCF-7/ADR多药耐药的研究

目的构建靶向多药耐药基因（MDR-1）的短发夹RNA（short hairpin loop RNA shRNA）干扰表达质粒,并探讨其逆转人乳腺癌细胞MCF-7/ADR多药耐药的作用效果。方法根据MDR-1基因表达序列设计有效的RNA干扰片断,构建并获得MDR-1基因特异的shRNA质粒表达载体pRNAT-U6.1/Neo－mdr1,采用lipofectin2000分别转染人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADR,利用G418筛选稳定表达的细胞克隆。利用RT-PCR检测MDR-1-RNA的表达,Western Blotting检测MDR-1蛋白质的表达,MTT法检测耐药逆转效果,罗丹明123外排实验检测p-gp的转运功能。结果成功构建表达siRNA的质粒载体pRNAT-U6.1/Neo－mdr1,转染人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADR后48h及G418筛选后1、2月,mdr1-RNA及蛋白质表达均呈明显下降,p-gp的转运功能明显提高,对阿霉素的敏感性增强,与耐药细胞及转入空白载体的细胞比较,差异有统计学意义（P均＜0.05）。筛选后1、2月与转入48h比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论shRNA干扰表达质粒pRNAT-U6.1/Neo-mdr1能够稳定、持久的抑制MDR-1基因,逆转乳腺癌细胞MCF-7/ADR对阿霉素的耐药性。     

反义寡核苷酸阻断乳腺癌细胞中葡萄糖神经酰胺合成酶的表达和意义

目的探讨靶向葡萄糖神经酰胺合成酶（glucosylceramide synthase,GCS）的基因试剂MBO－asGCS逆转乳腺癌多药耐药的作用机制及其意义。方法MBO-asGCS处理体外培养的人乳腺癌细胞MCF-7及其耐药型MCF-7／AdrR,采用细胞毒性分析测定MBO—asGCS对MCF-7-AdrR存活率的影响,RT—PCR和Western印迹分析对耐药型细胞GCS的表达变化,检测对caspase3／7的活性影响及流式细胞仪测定MBO-asGCS对耐药型细胞的凋亡情况。结果MBO-asGCS转染人耐药型乳腺癌细胞MCF-7／AdrR后,与未转染组细胞的Ic50分别是0．18μmol／L和12．50μmol／L,药物敏感性提高了69倍;MBO—asGCS抑制GCS的mRNA表达70％,减少GCS蛋白表达39％（P〈0．01）;转染MBO．asGCS后耐药型细胞的caspase3／7活性上升53％（P〈0．05）,细胞凋亡率上升5．6倍（P〈0．01）。结论GCS过表达是耐药型乳腺癌细胞的特征,靶向人GCS的反义寡核苷酸可直接抑制GCS的过表达,诱导耐药细胞凋亡,有效逆转其耐药性,GCS可能是治疗耐药型乳腺癌的一个潜在靶点。     

RNA干扰沉默缺氧诱导因子-1α对人乳腺癌细胞功能的影响

目的研究靶向针对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的短发夹RNA(shRNA)对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞功能的影响。方法氯化钴模拟低氧环境。采用RNA干扰技术,构建针对HIF-1α的shRNA真核表达载体,转染MCF-7细胞。RT-PCR检测RNA干扰后MCF-7中血管内皮生长因子(VEGF)表达的变化。实时定量PCR和Westernblot技术分别检测HIF-1αmRNA和蛋白质水平。Sub-G1测定、AnnexinⅤ荧光标记和DNAladder检测细胞凋亡。流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果缺氧后,MCF-7中的HIF-1α表达增加(P<0.01),而凋亡率较常氧降低(P<0.05)。shRNA转染MCF-7后,HIF-1α的表达下调91.63%(P<0.01)。阿糖胞苷诱导或无凋亡诱导剂时,干扰组凋亡率比未转染组分别增高1.75倍(P<0.01)和61.31倍(P<0.01)。与未转染组相比,干扰组中的VEGF下调66.8%(P<0.05)。干扰组细胞周期进程也较未转染组减缓。结论HIF-1α在MCF-7中发挥抗细胞凋亡的作用。本室构建的针对HIF-1α的shRNA能够促进MCF-7凋亡,下调VEGF表达,推迟细胞周期。     

miR-99b-5p通过靶向TRIB1基因调控乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的研究

目的探讨miR-99b-5p靶向Tribbles同源蛋白1(Tribbles pseudokinase 1,TRIB1)基因调控人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡。方法采用RT-PCR检测人乳腺上皮细胞HBL-100和乳腺癌MCF-7细胞中miR-99b-5p的表达水平,采用Western blotting检测人乳腺上皮细胞HBL-100和乳腺癌MCF-7细胞中TRIB1蛋白表达量。在MCF-7细胞中转染miR-99b-5p mimics或mimics对照,分别记为miR-99b-5p组和miR-NC组,RT-PCR检测细胞中miR-99b-5p表达变化,Western blotting检测TRIB1蛋白表达量,MTT法检测细胞增殖能力,AnnexinV-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡水平,双荧光素酶报告基因实验检测miR-99b-5p和TRIB1的靶向关系。结果与人乳腺上皮细胞HBL-100比较,乳腺癌MCF-7细胞中miR-99b-5p的表达量明显降低(P < 0.01),而TRIB1蛋白的表达明显升高(P < 0.01)。与miR-NC组比较,miR-99b-5p组MCF-7细胞中miR-99b-5p的表达量升高(P < 0.05),TRIB1蛋白表达水平降低(P < 0.05),细胞增殖能力减弱(P < 0.05),细胞凋亡率升高(P < 0.05)。双荧光素酶报告基因检测实验结果显示,miR-99b-5p能够明显降低TRIB1-Wt MCF-7细胞相对荧光素酶活性(P < 0.01),而对TRIB1-Mut MCF-7细胞相对荧光素酶活性无明显影响(P>0.05)。结论miR-99b-5p在乳腺癌MCF-7细胞中呈低表达,TRIB1蛋白呈高表达,过表达miR-99b-5p能够靶向抑制TRIB1阻碍MCF-7细胞增殖并促进细胞凋亡。     

五味子乙素对转染多药耐药1基因的MCF-7细胞的多药耐药逆转作用

目的 探讨五味子乙素(SchB)对转染多药耐药1基因(MDR1)的人乳腺癌细胞MCF-7的多药耐药逆转作用及相关机制。方法 将人MDR1基因导入MCF-7细胞,形成耐药细胞株MCF-7／MDR1;用该细胞株为模型评价SchB的体外逆转多药耐药作用,用MTT法进行化疗药物单独或与SchB联合作用时对耐药细胞的IC50比较,计算逆转倍数。结果 转染细胞MCF-7／MDR表现为P糖蛋白高表达,对阿霉素、长春新碱、紫杉醇、高三尖杉酯的抗药性均增加;SchB(25μmol／L)显著减少阿霉素、长春新碱、紫杉醇和高三尖杉酯对MCF-7／MDR细胞的IC50,逆转倍数达6．03-23．94倍;SchB(25μmol／L)使MCF-7／MDR细胞对若丹明123的胞内积聚增加约5倍。效果与维拉帕米10μmol／L浓度时相当;但SchB(25μmol／L)不影响MCF-7／MDR细胞的P-糖蛋白表达。结论 SchB能有效逆转转染MDR1的MCF-7细胞的多药耐药,其机制可能是抑制了P-糖蛋白的药物外排生物学活性。     

长链非编码RNA LINC00173在紫杉醇耐药乳腺癌细胞中的作用

目的探讨长链非编码RNA LINC00173对紫杉醇耐药乳腺癌细胞增殖、侵袭及迁移的影响,并探讨其可能的作用机制。方法利用qRT-PCR方法检测LINC00173在乳腺癌细胞株（MCF-7、MDA-MB-231和SKBR-3）和正常乳腺癌上皮细胞系（MCF-10A）的表达水平;构建LINC00173过表达载体和干扰片段,各自转染到乳腺癌细胞株中,利用qRT-PCR方法检测转染后LINC00173的表达水平;采用CCK8实验检测乳腺癌细胞的增殖能力;Transwell侵袭和划痕实验,检测细胞的侵袭和迁移能力;Western blotting方法检测CyclinD1、β-catenin、P-gp蛋白的表达。结果与MCF-10A细胞相比,LINC00173在乳腺癌细胞株中低表达;MCF-7细胞转染干扰片段及MCF-7/PR耐药细胞株转染过表达LINC00173载体后,与阴性对照（si-NC）组相比,si-LINC00173的表达降低;而与LV-NC组相比,过表达LV-LINC00173后的表达增加,且差异有统计学意义（P < 0.01）;干扰LINC00173的表达后,MCF-7细胞的增殖及迁移能力增强（P < 0.01）;过表达LINC00173后,MCF-7/PR细胞的增殖、侵袭及迁移能力减弱（P < 0.01）;干扰LINC00173后,MCF-7细胞CyclinD1、β-catenin、P-gp蛋白的表达水平明显增加（P < 0.01）;过表达LINC00173后,MCF-7/PR的CyclinD1、β-catenin、P-gp蛋白表达水平明显下降（P < 0.01）。结论LINC00173在乳腺癌细胞中表达降低并可能通过调控β-catenin表达参与紫杉醇耐药过程且与其发生、发展及侵袭有关,是涉及到乳腺癌发展的一种新的分子,可为临床诊断、治疗乳腺癌提供新的理论依据。     

Reversal of Adriamycin Resistance in Human Mammary Cancer Cells by Small Interfering RNA of MDR1 and MDR3 Genes

Resistance to antineoplastics is still the major cause of the failure of chemotherapy in cancer patients[1]. RNA interference (RNAi) is a conserved cellular mechanism in which double-stranded RNA silences the correspond-ing homologous cellular gene effectively and specificity. RNAi has a great potential of application in the reversal of drug resistance of tumor[2]. MDR1 and MDR3 are the two ATP binding cassette transporter genes. MDR3 is the second member of the human p-gp family next …     

Galectin-3 shRNA载体的构建表达及其对大肠癌细胞lovo增殖率的影响

目的: 构建galectin-3 shRNA真核表达载体,观察该基因的抑制对大肠癌细胞系lovo细胞增殖率的影响. 方法: 以未转染lovo细胞作为阳性对照组,转染空质粒的lovo细胞作为阴性对照组,将针对人galectin-3基因的不同部位设计的长度约140 bp的shRNA,插入到真核表达载体PRNAT-U6.1并转染人大肠癌细胞lovo,双酶切鉴定重组载体,免疫荧光检测转染效果, RT-PCR和Western-Blot检测其对该基因mRNA和蛋白水平的抑制,MTT测定干扰后对lovo细胞增殖率的影响. 结果: 双酶切出一条约120 bp的DNA片断,与插入片断长度相符. PRNAT-U6.1/Galectin-3 shRNA表达载体顺势转染lovo细胞72 h后检测转染效率及Galectin-3在mRNA和蛋白水平的表达情况, 免疫荧光检测转染效率为62%. 转染PRNAT-U6.1/Galectin-3 shRNA的lovo细胞Galectin-3的表达在mRNA和蛋白水平均明显下降,各组间比较F=2.214,148.566, P=0.000, 0.000,阴性组和阳性对照组相比,P=0.448,0.263. 干扰后细胞继续生长,与干扰前相比,生长明显减慢,F=20.830, P=0.000, 组间比较F=149.710, P=0.000,shRNA干扰组与阴性组和阳性组比较,P=0.000, 0.000. 结论: 成功构建Galectin-3 shRNA表达载体,干扰后Galectin-3在mRNA和蛋白水平的表达明显降低,Galectin-3表达的抑制可能会导致大肠癌细胞lovo增殖率的降低.     

缺氧诱导因子-1α基因沉默逆转卵巢癌细胞SKOV3/DDP耐药性的机制

目的：观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)沉默后人卵巢癌细胞顺铂耐药株SKOV3/DDP 的HIF-1α、多药耐药基因1 （MDR1）和B细胞淋巴瘤/白血病-2基因（Bcl-2）mRNA及蛋白产物的表达,探讨HIF-1α逆转SKOV3/DDP耐药性的机制。方法：体外培养卵巢癌细胞株SKOV3（敏感组）及其顺铂耐药株SKOV3/DDP（耐药组）,部分耐药株转染HIF-1α干扰质粒 pshRNA-HIF（转染组）及对照质粒pshRNA-Control（对照组）。RT-PCR法检测各组细胞HIF-1α、MDR1和Bcl-2 mRNA表达量;Western blotting和免疫组织化学法测定HIF-1α、P-gp（MDR1基因编码蛋白）和Bcl-2蛋白的表达量。结果：RT-PCR检测,敏感组和转染组HIF-1α、MDR1和Bcl-2 mRNA表达量明显低于耐药组（P<0.05)。Western blotting检测,敏感组和转染组HIF-1α、MDR1和Bcl-2蛋白表达量明显低于耐药组(P<0.05) ;免疫组织化学法,敏感组和转染组HIF-1α、MDR1和Bcl-2蛋白表达量明显低于耐药组(P<0.05);MDR1、Bcl-2 mRNA及蛋白在敏感组与转染组的表达量差异无统计学意义（P>0.05）。HIF-1α表达与MDR1、Bcl-2 mRNA表达量均呈正相关关系（r=0.908,P=0;r=0.916,P=0);HIF-1α表达与P-gp、Bcl-2蛋白表达呈正相关关系(r=0.773,P=0.003;r=0.862,P=0）。结论：HIF-1α沉默逆转人卵巢癌细胞顺铂耐药株SOV3/DDP耐药性可能与MDR1和Bcl-2表达降低有关联。
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不同方式加热联合甲基莲心碱对耐药乳腺癌MCF-7/Adr细胞γH2AX及mdr-1/P-gp表达的影响

目的:检测不同模式加热联合甲基莲心碱(neferine,Nef)对耐药乳腺癌MCF-7/Adr细胞的增殖抑制及γH2AX和mdr-1/P-gp表达的影响.方法:采用MTT法检测金属模块加热、培养基加热、烤箱加热及水浴加热等不同模式加热联合10μg/mL Nef对经阿霉素培养的MCF-7/Adr细胞的增殖抑制,实时定量P...     

Ras反义寡核苷酸对胰腺癌Pc-2细胞多药耐药的影响

目的探讨Ras反义寡核苷酸(ASODN)对胰腺癌Pc-2细胞多药耐药的影响.方法应用Ras ASODN抑制Pc-2细胞中Ras和P-糖蛋白(P-glyoprotein,P-gp)表达,采用MTT法测定Pc-2细胞化疗敏感性,荧光定量RT-PCR法检测细胞内MDR-1基因水平,流式细胞仪检测细胞内阿霉素(ADR)浓度的改变.结果Ras ASODN能明显抑制胰腺癌Pc-2细胞中Ras和P-gp蛋白的表达(P＜0.05),提高Pc-2细胞的化疗敏感性(P＜0.05),降低Pc-2细胞中MDR-1基因水平(P＜0.05),增加Pc-2细胞中的ADR摄入量(P＜0.05).结论Ras ASODN可能通过调控MDR-1基因水平,增加多药耐药胰腺癌Pc-2细胞对化疗药物的敏感性.     

小分子干扰RNA片段逆转KBv200细胞多药耐药的实验研究

目的：研究小分子干扰RNA片段（siRNA）对舌癌多药耐药（MDR）细胞系KBv200细胞的MDR1基因表达及其功能的影响，探讨siRNA作为未来化疗增敏剂的可能性。方法：运用针对MDR1基因序列的siRNA（MDR1-siRNA）在脂质体的介导下转染KBv200细胞；用RT—PCR分析MDR1 mRNA的表达水平；流式细胞术检测P-糖蛋白（P-gP）的表达；荧光分光光度法检测细胞内多柔比星（Dox）的积蓄；MTT法检测KBv200细胞对长春新碱（VCR）和Dox的敏感性变化。结果：MDR1-siRNA作用24和48h能抑制MDR1基因的表达（P〈0．05），其mRNA水平和P-gP水平均明显下降，同时使KBv200细胞对VCR和Dox的敏感性显著增加（P〈0．01），并显著增加细胞内Dox的蓄积（P〈0．01）。结论：MDR1-siRNA能显著抑制KBv200细胞内MDR1基因介导的MDR。     

苦参碱调控结肠癌奥沙利铂耐药性及机制研究

目的 探讨苦参碱（Ma）对人结肠癌耐奥沙利铂（Oxa）细胞株（SW480/Oxa）的逆转耐药作用及 其机制是否与抑制c-Jun 氨基末端激酶（JNK/SAPK）信号通路有关。方法 采用MTT 法检测Ma 对SW480/ Oxa 细胞增殖的影响,采用流式细胞术检测Ma 对SW480/Oxa 细胞凋亡的影响,qRT-PCR 检测Ma 对SW480/ Oxa 细胞P- 糖蛋白（P-gp）、MDR1 mRNA 表达的变化,Western blot 检测Ma 对SW480/Oxa 细胞P-gp、 磷酸化c-Jun 氨基末端激酶(p-JNK) 蛋白表达的变化。结果 不同组细胞增殖活性的比较,Oxa 组细胞增殖活 性低于NC 组,Ma+Oxa 组细胞增殖活性低于Oxa 组（P<0.05）。Oxa 组细胞总凋亡率高于NC 组（P <0.05）, Ma+Oxa 组细胞总凋亡率高于Oxa 组（P <0.05）。与PPARy+Oxa 组比较,PPARy+Ma+Oxa 组中P-gp、 MDR1 mRNA 水平均下调,差异有统计学意义（P <0.05）。与SP600125+Oxa 组比较,SP600125+Ma+Oxa 组 中P-gp、MDR1 mRNA 水平均下调,差异有统计学意义（P <0.05）。与PPARy+Oxa 组比较,PPARy+Ma+ Oxa 组中P-gp、p-JNK 蛋白水平均下调,差异有统计学意义（P <0.05）。与SP600125+Oxa 组比较,SP600125+ Ma+Oxa 组中P-gp,p-JNK 蛋白水平均下调,差异有统计学意义（P <0.05）。结论 Ma 具有调控人结肠癌耐 药细胞株耐药性的作用,可能与抑制JNK/SAPK 信号通路,降低P-pg 表达有关。     

不同方式加热联合甲基莲心碱对耐药乳腺癌MCF一7／Adr细胞r／H2AX及mdr一1／P—gP表达的影响

目的：检测不同模式加热联合甲基莲心碱（neferine,Nef）对耐药乳腺癌MCF一7／Adr细胞的增殖抑制及3,H2AX和mdr一1／P—gp表达的影响。方法：采用MTT法检测金属模块加热、培养基加热、烤箱加热及水浴加热等不同模式加热联合10仙g／mLNef对经阿霉素培养的MCF-7／Adr细胞的增殖抑制,实时定量PCR检测mdr一,mRNA的表达,Western印迹法检测rH2AX及P糖蛋白（P—glycoprotein,P—gP）的表达。结果：42℃及450C不同模式加热组较37℃培养组MCF一7／Adr细胞吸光度值明显下降,mdr一1／P—gP表达下降,rH2AX表达上调（均P〈0．01）。加热联合10μg／mLNef组较单纯热疗组及单纯10斗∥mLNef组MCF~／Adr细胞吸光度值明显下降（均P〈0．01）,mdr一1／P—gP表达下降,rH2AX表达上调（均P〈0．05）。42℃及45℃不同模式加热组比较,水浴加热组P—gp表达下降及rH2AX表达上调最为明显（P〈0．05）。结论：加热能增加阿霉素对MCF一7／Adr细胞的细胞毒性反应,能明显增加McF-7／Adr细胞DNA损伤且随温度升高而加剧：MCF-7／Adr细胞对不同模式的加热反应可能不同;热疗联合Nef能增敏阿霉素的化学治疗效果。     

化痰散结方对 MCF-7／ADM裸鼠移植瘤逆转耐药机理研究

目的：探究化痰散结方对乳腺癌MCF-7/ADM移植瘤的逆转耐药机制。方法制备荷瘤小鼠模型;设立生理盐水空白对照组、阿霉素组、阿霉素＋维拉帕米组、阿霉素＋中药低中高剂量组,观察肿瘤组织内阿霉素蓄积情况,用流式细胞仪（ FCM ）检测各组移植瘤耐药细胞P糖蛋白（ P-gp）表达情况。结果中药组及维拉帕米组均能减轻瘤重,提高抑瘤率,与生理盐水组及阿霉素组比较均有统计学意义（P＜0．05）,中药组及维拉帕米组均能够降低P-gp含量、提高细胞内阿霉素浓度,其中高剂量中药组对细胞内阿霉素、P-gp的影响较维拉帕米组差异有显著性（ P＜0．05）。结论化痰散结方能逆转阿霉素耐药,增减肿瘤组织中阿霉素含量,并呈剂量依赖性,同时降低P-gp的表达。     

腺病毒介导p53基因逆转乳腺癌耐药的实验研究

目的探讨腺病毒介导p53基因（Ad-p53）对人乳腺癌阿霉素（ADM）耐药细胞株MCF-7／ADM的耐药性及多药耐药基因1（MDR1）的影响。方法以Ad-p53转染MCF-7／ADM细胞株,流式细胞术检测p53蛋白变化;锥虫蓝活细胞拒染法观察细胞生长情况;MTT法观察MCF-7／ADM细胞对阿霉素耐药性的变化,实时荧光RT—PCR法检测MDR1 mRNA变化。结果流式细胞术观察到MCF-7／ADM细胞经MOI50的Ad-p53作用48h后,p53蛋白表达率由10．24％升高到36．20％;细胞抑制率为7．4％（P=0．003）;逆转MCF-7／ADM对ADM的耐药倍数11．6倍（P=0．001）;实时荧光RT-PCR检测结果显示MDR1 mRNA相对表达量由1．25±0．01下降至0．91±0．01（P=0．011）。结论腺病毒介导p53基因能抑制MCF-7／ADM细胞MDR1基因的表达,并能部分逆转MCF-7／ADM的耐药性,增加阿霉素化疗敏感性。