枸杞多糖对小鼠胸腺细胞程序化死亡的影响

采用电镜、ＤＮＡ琼脂糖电泳和ＦＡＣＳ分析的方法，对枸杞多糖（ＬＢＰ）对小鼠胸腺细胞凋亡的效应进行了研究。结果发现１００μｇ／ｍｌ和４００μｇ／ｍｌＬＢＰ可明显抑制小鼠胸腺细胞培养７小时和２４小时自发出现的细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ），而对１０－７ｍｏｌ／Ｌ地塞米松诱导的细胞凋亡则没有影响。说明ＬＢＰ具有抑制小鼠胸腺细胞自发凋亡的作用，显示出枸杞多糖的一种新的免疫调节效应。     

人参抑制小鼠胸腺细胞凋亡的实验研究

用大肠杆菌脂多糖（ＬＰＳ）所致小鼠胸腺细胞凋亡模型和琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术及免疫组织化学等方法，研究不同浓度高丽人参水提取物体内对小鼠胸腺细胞的影响。结果表明，每只小鼠腹腔注射１０￣２０ｍｇ人参提取物可防止ＬＰＳ所致小鼠体重及胸腺减重，提高胸腺细胞存活力，抑制胸腺细胞ＤＮＡ降解和促凋亡蛋白Ｂａｘ的过量表达，免疫组织化学研究结果在蛋白水平上初步解释了人参抑制小鼠胸腺细胞凋亡的作用机制。     

Protection of growth hormone on apoptosis of murine thymocytes induced by dexamethasone

目的:研究生长激素(GH)对地塞米松(Dex)诱导小鼠胸腺细胞凋亡的作用及机制.方法:建立地塞米松诱导小鼠胸腺细胞凋亡模型,通过观察小鼠胸腺指数的变化、形态学改变,TdT缺口末端标记(TUNEL)及流式细胞仪检测,研究生长激素影响胸腺细胞凋亡情况,并运用免疫组织化学观察生长激素对小鼠胸腺凋亡蛋白Bax和Bcl-2表达的调节.结果:经生长激素处理后,电镜下观察小鼠胸腺细胞凋亡现象明显改善;TUNEL检测和流式细胞仪检测结果显示,胸腺细胞凋亡数量减少;图像分析系统测定光密度值显示,生长激素处理组小鼠胸腺细胞中Bax表达较模型组降低,Bcl-2表达增加.结论:生长激素对地塞米松诱导的小鼠胸腺细胞凋亡具有一定的抑制作用,这种作用可以通过调节凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达等途径实现.     

BAD和Bcl-X/L基因在小鼠胸腺细胞凋亡时的表达及其意义

目的检测BAD和Bcl-X/L基因在小鼠胸腺细胞凋亡的表达,探讨细胞凋亡调控基因在小鼠胸腺细胞凋亡时的作用。方法应用免疫组织化学染色法,观察不同剂量糖皮质激素诱导的小鼠胸腺细胞凋亡时BAD和Bcl-X/L基因的表达。结果免疫组织化学结果表明,正常对照组胸腺内BAD呈低表达,地塞米松组随剂量的增加BAD的表达成递增趋势,地塞米松各组与对照组比较差异有有统计学意义(P<0.05);正常对照组胸腺内Bcl-X/L呈高表达,地塞米松组随剂量的增加Bcl-X/L的表达成递减趋势,地塞米松各组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论促凋亡蛋白BAD和抗凋亡蛋白Bcl-X/L在糖皮质激素诱导引起的胸腺细胞凋亡调控中起重要作用。     

IL—2,IL—6对地塞米松诱导小鼠胸腺细胞凋亡的调节作用

目的：以Ｄｅｘ诱导小鼠胸腺细胞凋亡为模型，研究细胞因子（ＩＬ－２、ＩＬ－６）对小鼠胸腺细胞凋亡的调节作用。方法：应用ＰＩ法检测亚二倍体细胞，二苯胺法测定胸腺细胞片段化ＤＮＡ含量（％），ＤＮＡ凝胶电泳，流式细胞计分析胸腺细胞表型、测定高钙细胞百分比。结果：发现地塞米松（Ｄｅｘ）与小鼠胸腺细胞共同培养引起细胞凋亡，胸腺细胞减少以ＣＤ４^ ＣＤ８^ 细胞最明显。细胞凋亡具有时间效应并与Ｄｅｘ浓度有关。３～４     

白色念珠菌诱导小鼠胸腺细胞凋亡

目的　研究白色念珠菌（ 白念菌） 在体内对小鼠胸腺细胞凋亡的诱导作用。方法　小鼠经尾静脉注射白念菌后,以流式细胞仪（ＦＣＭ） 分析、ＤＮＡ 琼脂糖凝胶电泳分析及细胞形态学改变为指标检测细胞凋亡。静脉注射ＮＯＳ 抑制剂观察对白念菌诱导胸腺细胞凋亡的影响。结果　白念菌能诱导小鼠胸腺细胞产生特征性的细胞凋亡形态学改变;流式细胞仪分析显示特征性的凋亡峰;琼脂糖凝胶电泳显示胸腺细胞出现典型的ＤＮＡ“梯状带”;用荧光染色（ＡＯ＋ ＥＢ） 以及ＦＣＭ 检测凋亡细胞百分率,发现白念菌注射后２４ 小时,胸腺细胞凋亡百分率随白念菌剂量增加而增高;用４ ×１０６ 白念菌经尾静脉注射后,胸腺细胞凋亡百分率于６ 小时开始增高,２４ 小时达高峰,以后迅速降低;小鼠胸腺萎缩,胸腺重量于１２ 小时明显降低,且于７２ 小时达到最低水平;ＮＯＳ 抑制剂氨基胍仅能部分抑制白念菌诱导的小鼠胸腺细胞凋亡;热灭活的白念菌不能诱导胸腺细胞凋亡。结论　白念菌菌血症能诱导小鼠胸腺细胞凋亡,而且呈时间和剂量依赖性;白念菌诱导小鼠胸腺细胞凋亡有赖于真菌的代谢;白念菌诱导小鼠胸腺细胞凋亡的过程可能与ＮＯ 部分相关。     

IL—2,IL—6对地塞米松诱导小鼠胸腺细胞凋亡的调节作用

目的：以Ｄｅｘ诱导小鼠胸腺细胞凋亡为模型,研究细胞因子（ＩＬ－２、ＩＬ－６）对小鼠胸腺细胞凋亡的调节作用。方法：应用ＰＩ法检测亚二倍体细胞,二苯胺法测定胸腺细胞片段化ＤＮＡ含量（％）,ＤＮＡ凝胶电泳,流式细胞计分析胸腺细胞表型、测定高钙细胞百分比。结果：发现地塞米松（Ｄｅｘ）与小鼠胸腺细胞共同培养引起细胞凋亡,胸腺细胞减少以ＣＤ４^ ＣＤ８^ 细胞最明显。细胞凋亡具有时间效应并与Ｄｅｘ浓度有关。３～４     

TCR抗体诱导不成熟胸腺细胞亚群凋亡的敏感性研究

为比较小鼠不同胸腺细胞亚群对抗TCR抗体诱导凋亡的敏感性，用体外抗TCR抗体刺激分离胸腺细胞．BALB／c小鼠体内注射抗TCR抗体，FACS检测胸腺细胞。结果显示，CD4^ CD8^ DP胸腺细胞和CD4^-CD8^ CD3^-TCR-细胞对抗TCR抗体诱导的凋亡敏感，但CD4^-CD8^-CD3^-TCR-胸腺前体细胞自发凋亡率低，且抗TCR抗体诱导的凋亡．表明胸腺细胞对凋亡的敏感点产生于CD4^-CD8^ CD3^-TCR-细胞表达后，胸腺细胞的凋亡敏感性受发育调节。     

组织胺及地塞米松引胸腺细胞凋亡的研究

近来发现糖皮质激素在体内外均可诱导胸腺细胞凋亡，这就使Ｔ细胞在胸腺中成熟过程的细胞凋亡的调节机理变得复杂。为了发现其它因素对Ｔ细胞在胸腺成熟过程的影响及探讨其可能机理，本实验研究了组织胺与地塞米松诱导胸腺细胞凋亡。取Ｓｐａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠胸腺细胞，分别与组织胺、地塞米松、雷尼替丁及组织胺＋雷尼替丁体外培养。在０，６，２４及４８小时取培养细胞。用台盼蓝染色计死亡细胞，吖啶橙细胞核染色观察凋亡细胞形态。二苯胺法及ＤＮＡ电泳检测ＤＮＡ断裂片段。结果表明，６小时以前组织胺及地塞米松主要使细胞ＤＮ…     

大肠杆菌脂多糖和氢化考的松诱导胸腺细胞凋亡的实验研究

用琼脂糖凝胶电泳、电镜等方法研究大肠杆菌脂多糖（ＬＰＳ）和氢化考的松所致的小鼠胸腺细胞凋亡，以建立适于实验的细胞凋亡模型，并确定了凋亡模型的最佳用药剂量和时相。实验结果表明，ＬＰＳ和氢化考的松均可诱导小鼠胸腺细胞发生凋亡，ＬＰＳ腹腔注射量为２５μｇ／只时造模较为适宜，造模最佳时相为腹腔注射１８ｈ，氢化考的松模型经测定其最佳时相为肌肉注射２４ｈ。两种凋亡模型比较，ＬＰＳ模型造模时间短（仅需１８ｈ），     

FAS和FASL基因在大鼠胸腺细胞凋亡时的表达及其意义

目的检测FAS和FASL基因在Wistar大鼠胸腺细胞凋亡的表达,探讨细胞凋亡调控基因在大鼠胸腺细胞凋亡时的作用。方法采用原位标记(TUNEL)法检测DNA单链或双链的裂解;应用免疫组织化学染色法,观察不同剂量糖皮质激素诱导的大鼠胸腺细胞凋亡时FAS和FASL基因的表达。结果镜观察地塞米松组TUNEL阳性细胞较多并且分散在皮质各处。免疫组织化学结果表明,正常对照组胸腺内FAS呈低表达,随着地塞米松剂量的增加FAS的表达成递增趋势,地塞米松各组与对照组比较差异有统计学意义(P0.05);正常对照组胸腺内FASL呈高表达,随着地塞米松剂量的增加FASL的表达成递减趋势,地塞米松各组与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论促凋亡蛋白FAS和抗凋亡蛋白FASL在糖皮质激素诱导引起的胸腺细胞凋亡调控中起重要作用。     

参麦对地塞米松诱导胸腺细胞凋亡的保护作用

参麦对地塞米松诱导胸腺细胞凋亡的保护作用湖南医科大学病理生理教研室（长沙４１００７８）尢家马录阳剑波邓恭华罗正曜本文以地塞米松在体外诱导胸腺细胞凋亡为模型，观察参麦是否能防止地塞米松诱导的胸腺细胞凋亡。实验分四组：Ⅰ生理盐水对照组：胸腺细胞悬液（２×...     

参麦对小鼠烧伤后胸腺细胞凋亡的保护作用及机制探讨

参麦对小鼠烧伤后胸腺细胞凋亡的保护作用及机制探讨湖南医科大学病理生理教研室（长沙４１００７８）阳剑波邓恭华尢家马录罗正曜本文研究参麦是否具有防止小鼠烧伤后胸腺细胞凋亡的作用，并从ＢＣＬ－２蛋白含量（长寿基因蛋白产物）方面探讨其作用机制。成年昆明纯种健...     

广枣总黄酮对小鼠胸腺细胞凋亡及腺苷脱氨酶（ADA）？…

研究蒙药广枣总黄酮对地塞米松诱导的小鼠胸腺细胞凋亡及胸腺细胞内腺苷脱氨酸 活性降低的免疫调节作用。方法将不鼠分为ＤＥＸ组、ＴＦＣ组、ＴＦＣ＋ＤＥＸ组和正常对照组，采用光镜、电镜。     

糖皮质激素诱导小鼠胸腺细胞死亡的形态学改变

目的 探讨糖皮质激素诱导小鼠胸腺细胞死亡的形态学改变. 方法 4～6周龄雌性BALB/C小鼠腹腔注射地塞米松,采用末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测DNA单链或双链的裂解,TUNEL和酸性磷酸酶(ACP)双重染色法进行酸性磷酸酶的检测,观察细胞凋亡后吞噬细胞的活动,透射电子显微镜检测凋亡细胞和吞噬细胞的超微结构.结果 光镜观察地塞米松组,TUNEL阳性细胞较多并且分散在皮质各处,凋亡指数为0.460±0.012;正常对照组TUNEL阳性细胞数目较少,凋亡指数为0.020±0.001,与地塞米松组比较,差异有显著性(P<0.05).TUNEL和酸性磷酸酶双重染色法显示,所有TUNEL阳性胸腺细胞均被ACP阳性细胞吞噬.透射电子显微镜观察发现,大部分凋亡细胞均被吞噬细胞所吞噬,少量未被吞噬的胸腺细胞表现出大范围的染色质浓集,这些少量未被吞噬的胸腺细胞显然是死细胞. 结论 典型的细胞凋亡的特点是DNA裂解,但这不是糖皮质激素诱导胸腺细胞死亡的主要方式,死亡的胸腺细胞均是被ACP阳性细胞所吞噬;糖皮质激素对胸腺细胞的首要影响是可诱导无DNA裂解的细胞固缩.     

原位观察小鼠胸腺哺育细胞的简便方法

根据未成熟的胸腺细胞对可的松类激素敏感的特性,给BALB/C小鼠腹腔注射地塞米松(DX,125mg/kg)。注射后12、24小时取胸腺,光镜和电镜观察胸腺悬液及组织切片内的胸腺哺育细胞(TNC)。DX使未成熟的胸腺细胞变性和碎解,细胞密度降低,光镜和电镜下观察切片,均可明确辨认TNC的存在。证明动物应用DX注射后,光镜下可简便地确认胸腺内的TNC。     

小鼠胸腺上皮细胞系MTEC1诱导裸鼠骨髓细胞发生细胞凋亡

细胞凋亡（Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）发生在正常生理状态下的分化发育过程中，为胸腺内阴性选择的机制之一。本文报道分别将小鼠胸腺上皮细胞系ＭＴＥＣ１及其培养上清与裸鼠骨髓细胞进行共育，以染色体ＤＮＡ发生规律性断裂为指标，对共育后的裸鼠骨髓细胞的凋亡状况进行分析，结果显示与ＭＴＥＣ１细胞共育后８小时，裸鼠骨髓细胞已发生凋亡，经细胞表型分析，凋亡的细胞可能为粒细胞和Ｂ细胞；而于ＤＭＥＭ中培养８小时以及与ＭＴＥＣ１上清共育８小时的裸鼠骨髓细胞末发生凋亡。结果表明ＭＴＥＣ１可主要通过细胞。细胞间相互作用诱导裸鼠骨髓细胞发生细胞凋亡，凋亡细胞可能主要为粒细胞和Ｂ细胞。     

地塞米松诱导大鼠胸腺细胞凋亡

细胞凋亡是细胞受到特异刺激后启动内在“自杀”程序而引起的一种控制性死亡。为观察糖皮质激素对免疫器官──胸腺的调节作用,本文加地塞米松与大鼠胸腺细胞共同孵育,胸腺细胞是现了凋亡的典型形态学改变;提取该培养细胞的ＤＮＡ进行琼脂糖凝胶电泳可见典型“阶梯状”条带,提供了该细胞发生凋亡的生物化学依据。本研究结果表明糖质激素能诱导胸腺细胞凋亡。     

小鼠胸腺,肝,脾非粘附细胞的TNFmRNA的研究

本研究用小鼠ＴＮＦｃＤＮＡ探针，从ＢＡＬＢ／ｃ小鼠的胸腺、肝、脾非粘附细胞中检测到ＴＮＦｍＲＮＡ，表明ＴＮＦｍＲＮＡ可以一种细胞内库形式预先存在于体内。经Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分析，发现这些非粘附细胞中ＴＮＦｍＲＮＡ有４．７ｋｂ和１．９５ｋｂ两种杂交带，前者可能是后者的前体。又小鼠体内经地塞米松处理后，肝、脾非粘附细胞中ＴＮＦｍＲＮＡ可暂时减少，但胸腺中ＴＮＦｍＲＮＡ含量无明显变化。     

CD4单克隆抗体在体内诱导小鼠胸腺细胞凋亡

为研究抗ＣＤ４ ＭｃＡｂ引起胸腺细胞减少的机理，本课题探讨了ＣＤ４ ＭｃＡｂ诱导胸腺细胞发生凋亡的可能性。小鼠注射抗ＣＤ４ ＭｃＡｂ后，皮质胸腺细胞体积缩小，染色质凝聚；ＰＩ染色后经流式细胞计测定，显示大量的亚二倍体细胞（凋亡细胞，Ａｐｏｐｔｏｔｉｃ ｃｅｌｌｓ），与正常小鼠相比Ｐ〈０．００１；片断化ＤＮＡ的百分比也明显高于正常小鼠，Ｐ〈０．０１。片断化ＤＮＡ在凝胶电泳上呈现典型的阶梯现象。细胞内