荷载紫杉醇介孔二氧化硅纳米粒的制备及体外性能

介孔二氧化硅纳米粒(mesoporous silica nanoparticle,MSN)作为药物载体已成为纳米给药系统研究的热点。以无序孔道的MSN为载体,以溶剂吸附法负载化疗药物紫杉醇(PTX),从而制备得到PTX@MSN。考察了PTX@MSN的理化性质、药物体外释放行为和体外抗肿瘤活性等特性。研究结果表明,PTX@MSN载药量为(23.76±1.14)%,在水性介质中分散良好,粒径约为250 nm,电位为-(8.01±1.81)mV。PTX@MSN具有药物缓释特性,24 h后PTX累积释放率为(23.62±2.15)%。细胞毒性结果显示,空白MSN生物安全性良好,而PTX@MSN组对人肝癌HepG2细胞的杀伤作用较市售Taxol组强。本研究为MSN递送抗肿瘤药物提供一定的理论与应用基础。     

壳聚糖-介孔二氧化硅复合材料的制备与止血性能研究

目的 研发一种具有快速且显著止血效果.优良生物相容性止血材料。方法 通过介孔二氧化硅对壳聚糖进行改性,利用壳聚糖带正电而介孔二氧化硅带负电的特性,用烷基化壳聚糖负载介孔二氧化硅,制备新型止血材料。并通过材料表征实验.细胞毒性实验.吸水性能评价和体内外凝血实验评估其性能。结果 新型止血材料在无细胞毒性的前提下有着更好的止血性能。结论 壳聚糖-介孔二氧化硅复合材料是一种有着较好止血性能的材料。     

介孔二氧化硅纳米粒对穿心莲内酯载药性能及药物释放的影响

目的 制备介孔二氧化硅纳米粒,并研究它对穿心莲内酯载药性能及药物释放的影响.方法 以介孔二氧化硅纳米粒负载穿心莲内酯,采用N2吸附、DSC、SEM、XRPD进行表征,并测定纳米粒的载药量和体外药物释放量.结果 投药量为10％、20％、25％、30％时,药物质量分数分别为6.89％、14.8％、19.6％、22.3％;载药后样品分散均匀,外观、大小与载药前相比均无显著变化;载药后比表面积、孔容量、孔径均比载药前降低.体外溶出度试验表明,穿心莲内酯介孔二氧化硅纳米粒(MSNs-AND)的体外溶出度均比穿心莲内酯原料药高,且差异具有统计学意义.结论 介孔二氧化硅纳米粒可实现穿心莲内酯的高负载,并可显著提高其溶出度.     

多西紫杉醇壳聚糖纳米粒制备及其特性研究

目的制备负载多西紫杉醇(DTX)的壳聚糖纳米粒(DTX-CTNPs),并研究其体外释药性能及细胞毒性。方法采用离子交联法制备DTX-CTNPs,扫描电镜观察其形态学特征,激光粒度分析仪测定纳米粒粒径大小及分布,在磷酸盐缓冲液(PBS)中对载药纳米粒进行体外释药试验。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测DTX-CTNPs对人肺腺癌细胞株A549的增殖抑制以评估其细胞毒性及抗瘤效应。结果壳聚糖和三聚磷酸钠投药比为5.3∶1.0时制备的壳聚糖纳米粒(CTNPs)形态规则,粒径分布较为均匀,平均粒径为175nm,载药率与包封率分别为(22.4±2.7)%、(59.2±8.6)%。对A549细胞株的体外增殖抑制作用具有浓度依赖性,半数抑制浓度(IC50)为(26.87±1.35)μg/mL,而同一实验体系下的普通注射用DTX的IC50则为(5.51±0.37)μg/mL(P<0.001),证明载药纳米粒的细胞毒性远低于普通注射用DTX。结论 DTX-CTNPs具有一定的控释性能,能明显降低普通注射用DTX的细胞毒性,可以成为一种理想的化疗药载体。     

多西紫杉醇对A549细胞的放射增敏作用

肺癌是世界范围内最为常见的恶性肿瘤之一,国内肺癌的发病率和病死率占城市恶性肿瘤之首.在非小细胞肺癌(NSCLC)的治疗中,64.3%的病例需要接受放射治疗[1].目前,单纯的放射治疗效果仍不能满意,原因与肿瘤细胞的放射敏感性有关.放射增敏剂因能够提高肿瘤细胞对放射线的敏感性而受到关注.多两紫杉醇是一种半合成的紫杉醇衍生物,抗瘤谱广,体外实验<'[2-4]>表明其可诱导多种肿瘤细胞凋亡,影响细胞周期分布.作者观察了多两紫杉醇对A549细胞株的体外放射增敏性,为临床应用提供实验依据.     

壳聚糖修饰的神经毒素纳米粒的制备及体外释放研究

目的:制备粒径小、形态均匀、包封率较高、带稳定正电荷的神经毒素纳米粒并研究其体外释放行为。方法:选用聚乳酸为载体,壳聚糖为修饰物,采用复乳法制备神经毒素纳米粒,在单因素试验的基础上结合正交试验优化纳米粒的制备工艺,并对其体外释药特性进行研究。结果:采用优化方法制备的纳米粒粒径较小(140.5nm),形态规则,大小均匀,包封率高(83.5%),Zeta电位为+30.5mV;体外释药行为符合Weibull方程。结论:建立的制备工艺可行,所得纳米粒包封率高,大小均匀,体外释药具有明显的缓释特征。     

叶酸修饰水飞蓟宾固体脂质纳米粒的制备及其对A549细胞抑制作用研究

目的 制备一种通过叶酸受体途径作用于肿瘤细胞的叶酸修饰水飞蓟宾固体脂质纳米粒（FA-SIL-SLN）,考察FA-SIL-SLN对A549细胞抑制作用。方法 酰化反应合成膜材（FA-PEG₃₃₅₀-DSPE）,采用乳化-超声分散法制备FA-SIL-SLN,并研究其理化性质。MTT法测定FA-SIL-SLN对A549细胞的抑制率;流式细胞分析仪分析其对细胞周期的影响。结果 合成了膜材FA-PEG₃₃₅₀-DSPE;制备的FA-SIL-SLN外观圆整、平均粒径为（103±21）nm,包封率为（90.73±0.33）%、载药量为（2.13±0.17）%,体外释药实验表明其具有良好的缓释特性;对A549细胞的抑制作用呈现明显的量效和时效关系;阻滞细胞增殖。结论 本实验为叶酸介导的抗肿瘤给药系统研究提供了依据。     

CsA与厄洛替尼共载壳聚糖纳米粒的制备及作用

目的 本课题是设计一个纳米传递系统,同时载入P-糖蛋白抑制剂环孢菌素A(cyclosporin A,CsA)和厄洛替尼(erlotinib,E),以实现抑制剂和抗肿瘤药物的共同传递,增强抗肿瘤药物的敏感性及逆转耐药.方法 采用离子交联法将erlotinib与CsA共载于壳聚糖(chitosan,Cs)中,制备成壳聚糖纳...     

羧甲基壳聚糖修饰阿霉素纳米脂质体的制备及体外细胞实验

以羧甲基壳聚糖（CMCT）为修饰剂,采用薄膜pH梯度法制备具有pH敏感性的阿霉素纳米脂质体（CMCTDOXNL）,以增加抗癌药物在肿瘤部位的蓄积,同时增强抗癌药物向肿瘤细胞内的传递。结果表明：制备的CMCTDOXNL粒子形貌圆整,粒径分布均匀为 （38±221）nm,药物包封率为8883%;相比传统的阿霉素纳米脂质体（DOXNL）, CMCTDOXNL与Hela细胞的结合和摄取均有所提高,对细胞的杀伤作用更强; CMCTDOXNL的体外药物释放具有明显的pH敏感性,比普通的阿霉素脂质体更能促进阿霉素（DOX）向肿瘤细胞内的传递。     

多西紫杉醇对人非小细胞肺癌细胞株A549生长的影响及机制的体外研究

目的:探讨多西紫杉醇诱导肺癌细胞株A549细胞的生长抑制作用及其对凋亡相关基因表达的影响.方法:采用MTT法测定细胞增殖抑制率,在显微镜下观察细胞凋亡的形态特点,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率,采用逆转录聚合酶连反应(RT-PCR)法测定整合素α5β1,bcl-2,bax等凋亡相关基因mRNA的表达.结果:(1)多西紫杉醇在1.33～108μ/ml浓度范围内可抑制A549细胞增殖,且此作用与药物浓度、作用时间呈明显相关关系(r=0.947、0.979,P=0.014、0.004).(2)4～36μg/ml多西紫杉醇作用12～48 h,A549细胞可见典型的凋亡形态学改变,且A549细胞凋亡率随药物浓度增加而升高,呈浓度依赖性(r=0.999,P=0.034).(3)RT-PCR结果显示,多西紫杉醇可明显抑制A549细胞中表达α5,整合素亚基基因,使其bcl2/bax比值明显降低,差异均有统计意义(t=10.147、4.583,P=0.01、0.044).但多西紫杉醇对A549细胞表达VEGF、bFGF、β1整合素亚基基因无明显影响(P＞0.05).结论:多西紫杉醇可抑制A549细胞增殖,诱导A549细胞凋亡,其机制是通过抑制Bcl-2/Bax表达比例诱导其凋亡,并可能抑制整合素α5β1表达而影响A549细胞的增殖、黏附,以及转移能力.     

A549肺腺癌始动细胞的富集和鉴定

目的利用紫杉醇联合无血清培养完成对A549肺腺癌始动细胞的富集并鉴定富集亚群的干细胞特性。方法对数生长期的A549细胞经胰酶消化,干细胞培养基重悬,得到成球状生长的细胞;传至第2代时加入紫杉醇作用48h,离心去除死细胞和紫杉醇,换新鲜干细胞培养基培养,至存活细胞恢复克隆生长后鉴定其干细胞相关特性。结果紫杉醇联合无血清培养方式成功从A549细胞中富集得到肿瘤干细胞,该群细胞高表达分化抗原簇蛋白133/人上皮细胞黏附分子(CD133/CD326),具有多向分化潜能、高表达干细胞相关基因及更强的致瘤能力,具备干细胞相关特性。结论紫杉醇联合无血清培养富集得到高表达CD133/CD326分子的细胞亚群,该亚群具备干细胞相关特性,可用于后续肺腺癌干细胞生物学特性的研究。     

甘草酸表面修饰阿霉素壳聚糖纳米粒的制备及特性研究

目的:制备具有肝细胞靶向的甘草酸表面修饰阿霉素壳聚糖纳米粒,并考察其理化特性。方法:采用离子凝胶法制备阿霉素壳聚糖纳米粒,再以高碘酸盐氧化法制备甘草酸表面修饰阿霉素壳聚糖纳米粒。激光透射电子显微镜观察纳米粒的形态,马尔文激光粒度仪测定其粒径。RP-HPLC法间接测定纳米粒中甘草酸结合率和阿霉素包封率,并初步研究体外甘草酸的结合稳定性和阿霉素释药特性。结果:电镜显示纳米粒呈类球形,平均粒径为179.5 nm,甘草酸结合率达到80%以上,在释放介质中,12 h的甘草酸结合率仍保持(65.2±3.4)%;纳米粒中阿霉素包封率达90%以上,体外释药缓慢,无明显的\     

pH敏感性叶酸修饰羧甲基壳聚糖纳米粒子作为紫杉醇载体的研究

将活化的叶酸分子连接到O-羧甲基壳聚糖(O-CMCS)上。以CaCl2为交联剂,通过离子交联法制备叶酸修饰的O-CMCS纳米粒子(FCC NPs),并开展了从FCC NPs作为抗癌药物紫杉醇(PTX)载体的研究。结果表明：FCC NPs呈球形,粒子大小约190 nm,对PTX的载药量和包封率均受PTX加入量的影响。该纳米粒子对药物的释放具有较好的pH敏感性,能够增强PTX在癌细胞处的富集。同时,该纳米粒子无细胞毒性,纳米粒子表面由于叶酸的存在使其具有较好的细胞靶向性,且载药纳米粒子对癌细胞生长具有良好的抑制作用。     

紫杉醇壳聚糖纳米微球的制备及体外释放性能

目的:优化试验条件,制备合适的壳聚糖纳米微球(CM),并负载紫杉醇(PTX),研究负载紫杉醇壳聚糖微球(PTX-CM)的体外释药性能。方法:采用离子凝聚法和透析法制备CM及PTX-CM,激光粒度分析仪测定微球粒径大小和分布,透射电镜观测微球形态学特征,并在磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7.4)中对PTX-CM进行体外释药研究。结果:制备CM的最佳条件是壳聚糖(CTS)与多聚磷酸钠(TPP)投量比在3∶1~6∶1间。制备的PTX-CM形态规则均质,无粘连,平均粒径179.3 nm,包封率80.0%,载药量20.6%,在8 d内累积释药率接近80.0%。结论:PTX-CM性能良好,制备工艺简单,有望成为理想的紫杉醇缓释系统。     

载基因壳聚糖纳米粒的制备和特征鉴定

目的制备载基因壳聚糖纳米粒（CS—pHEV23）,研究其特征及对DNA的保护作用。方法复凝聚沉淀法制备CS-pHEV23,对其粒径、Zeta电位、包封率进行考察;凝胶阻滞法分析CS和pHEV23聚合方式,DNaseⅠ保护性试验考察CS—pHEV23抵抗核酸酶的能力。结果制备的CS—pHEV23粒径在170—470nm范围内（分别为CS（L）-pHEV23 171．6nm,CS（M）-pHEV23 387．0nm,CS（H）-pHEV23 467．3nm）;Zeta电位（CS（L）-pHEV23）为＋22．9mV;包封率〉95％（分别为CS（L）-pHEV23 95．8％,CS（M）-pHEV23 96．7％,CS（H）-pHEV23 97．1％）。凝胶阻滞分析表明,CS和pHEV23之间通过静电作用完全结合,纳米粒带正电荷。DNaseⅠ保护试验表明,CS—pHEV23能有效抵抗DNaseⅠ酶降解,对pHEV23有保护作用。稳定性试验表明,4℃保存60天,纳米粒仍能较稳定地包裹pHEV23结论CS—pHEV23能高效装载外源DNA,稳定性良好,并保护其免受核酸酶的降解,作为基因载体具有较大的应用潜力。     

紫杉醇表面修饰脂质纳米粒的制备和性质

目的:以硬脂酸为载体材料制备紫杉醇的长循环脂质纳米粒.方法:用"乳化蒸发-低温固化"法制备纳米粒;用透射电镜考察了纳米粒的形态; 建立了于脂质纳米粒和血清中测定紫杉醇的HPLC方法;考察了纳米粒于30%(体积分数)乙醇溶液中的药物释放;以市售紫杉醇注射剂和自制的紫杉醇普通纳米粒为对照,测定了长循环纳米粒于小鼠体内的药物动力学参数.结果:紫杉醇长循环脂质纳米粒的体内半衰期为10.1 h,同时普通纳米粒的体内半衰期为2.3 h,注射剂的体内半衰期为1.3 h.结论:长循环脂质纳米粒可以延长紫杉醇的体内半衰期.     

胸腺五肽pH-敏感壳聚糖纳米粒的制备、体外释放及生物活性

目的 为了提高胸腺五肽口服的稳定性及生物利用度,制备胸腺五肽pH-敏感壳聚糖纳米粒并考察其理化性质、体外释放及生物活性.方法 采用离子胶凝法制备胸腺五肽壳聚糖纳米粒并用Eudragit S100包衣制备pH-敏感纳米粒;透射电镜和环境扫描电镜观察纳米粒形态;粒度及表面电位分析仪测量纳米粒的粒径及Zeta电位;超速离心法测定载药纳米粒的包封率;动态透析法研究载药纳米粒的体外释放特性;模拟人工消化液考察纳米粒中胸腺五肽的生物稳定性;淋巴细胞增殖反应评价制剂的生物活性.结果 pH-敏感胸腺五肽壳聚糖纳米粒的平均粒径为(175.6&#177;17)nm,Zeta电位为(28.44&#177;0.5)mV,包封率为(76.70&#177;2.6)%.胸腺五肽pH-敏感壳聚糖纳米粒具有良好的pH依赖性:在0.1 mol&#183;L-1 HCl溶液中累积释放24.65%,在pH 5.0 PBS溶液中累积释放41.01%,在pH 7.4 PBS溶液中累积释放81.44%.pH敏感壳聚糖纳米粒制剂中的胸腺五肽在人工胃液中稳定,在人工肠液中半衰期为15 min.淋巴细胞体外转化实验表明,胸腺五肽pH-敏感壳聚糖纳米粒保留了TP5的生物活性并且具有浓度依赖性.结论 pH-敏感壳聚糖纳米粒可能是口服胸腺五肽的良好载体.     

壳聚糖包裹紫杉醇纳米粒子的制备及性能研究

目的探讨壳聚糖-紫杉醇纳米粒子（CS-PTX-NP）的制备方法并研究其特性。方法采用溶剂挥发-乳化交联法制备壳聚糖-紫杉醇载药纳米粒子,借助红外光谱仪分析粒子结构,使用透射电子显微镜检测粒子的形态、粒径及分布,紫外分光光度计测定载药量和包封率,并考察粒子的体外释放性能,探讨影响制备该粒子的主要因素。结果粒子的平均粒径为（116±3.07）nm,成球性、分散性好,粒子的包封率最大可达94.04%,主要受Mptx∶Mcs、搅拌速度的影响。粒子在生理条件下具有明显的缓释作用。结论壳聚糖紫杉醇纳米粒子的制备为开发脂溶性药物缓释制剂提供了一条新的途径。     

紫杉醇甘草次酸修饰透明质酸纳米粒的制备及性能研究

优化紫杉醇甘草次酸修饰透明质酸（PTX/GA-HA）纳米粒的载药工艺,并系统评价其体内外特性。以载药量、包封率为评价指标,通过单因素考察优化甘草次酸修饰透明质酸纳米粒的载药工艺。制得的纳米粒粒径为（321.2±8.2）nm,荷负电;载药量和包封率分别为（31.2±0.8）%和（90.3±1.6）%。体外释放动力学研究显示,在偏酸性介质中,PTX/GA-HA纳米粒下具有更快的释药速度。同时,MTT实验显示其对多种肿瘤细胞具有杀伤作用,尤其对HepG2细胞的生长抑制作用最强。此外,细胞摄取实验表明,GA-HA纳米粒易被肿瘤细胞摄取。因此,PTX/GA-HA纳米粒具有优良的体内外特性,其成功制备将有助于提高抗肿瘤药物的肿瘤靶向治疗效果。