血清TGF-β、IL-17水平与乙型肝炎纤维化进展关系的研究

目的探讨乙型肝炎患者外周血清中TGF-β、IL-17的表达与乙型肝炎病变进展的关系。方法收集2010年6月至2012年12月本院感染科确诊为乙型病毒性肝炎且同期进行肝组织活检病例89例,同时采集外周血利用ELISA进行TGF-β、IL-17检测对比分析炎症活动度、纤维化程度与TGF-β、IL-17表达水平间的关系。结果 TGF-β、IL-17在不同炎症活动程度的血清水平经Bonferroni法组间比较,差异有统计学意义(P=0.010、0.001);Spearman等级相关分析结果显示两者血清水平与不同炎症分级间均存在正相关(r=0.517,P=0.004;r=0.747,P=0.002)。经Bonferroni法两两比较,TGF-β、IL-17在不同纤维化程度组别间血清值差异有统计学意义(P=0.030、0.004);Spearman等级相关分析结果显示TGF-β与不同纤维化程度呈正相关(r=0.677,P=0.010)。本组慢性乙型病毒性肝炎患者外周血清TGF-β、IL-17的表达存在明显的相关性(r=0.683,P=0.010)。结论乙型肝炎患者外周血中TGF-β、IL-17表达升高,共同参与炎症活动度反应和纤维化,TGF-β在肝纤维化中发挥重要作用。     

BFGF及TGF-β1与260例乙肝患者肝脏纤维化及炎症关系研究

目的观察碱性成纤维细胞生长因子（BFGF）及转化生长因子β1（TGF-β1）在慢性乙型肝炎肝纤维化不同进展阶段的表达和定位情况,探讨其与肝纤维化及炎症的关系。方法对260例乙肝患者肝组织BFGF、TGF-β1行免疫组化定量分析,并与肝脏纤维化分期及炎症分级进行统计学分析。结果肝组织BFGF、TGF-β1随肝脏纤维化加重而表达增加,各组与对照组比较及组间两两比较差异均具有统计学意义（P〈0．05）;且二者与炎症比较,各组与对照组之间差异有统计学意义（P〈0．05）,但组间两两比较无差异（P〉0．05）;肝脏BFGF、TGF-β1之间呈正相关,r=0．895（P〈0．05）。结论肝组织BFGF、TGF-β1与肝纤维化程度呈正相关,与炎症无确切相关性,BFGF及TGF-β1可作为评价肝纤维化严重程度的重要指标。     

CHB患者不同分级、分期肝组织中TGF-β1的表达研究

目的 观察慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者,不同G、S分级、分期的肝穿刺组织中,细胞转化生长因子β1(TGF-β1)的表达,及与Knodell评分系统的相关性。方法 采用免疫组化技术,观察107例不同程度CHB患者肝穿刺组织中TGF-β1的蛋白表达定位,并行半定量评分,半定量结果分别与现行病理诊断标准慢性肝炎分级、分期及Knodell评分系统进行统计学分析。结果 随着患者病变程度的加重,肝组织中TGF-β1的表达定位,由肝小叶内窦周隙表达为主趋向于汇管区和纤维隔表达为主;且这种肝组织内阳性表达量与Knodell评分呈显著正相关。结论TGF-β1是肝纤维化发生的重要致病因子之一,炎症可诱发TGF-β1的表达。     

转化生长因子β1和结缔组织生长因子在肝纤维化中的表达

目的:观察肝纤维化不同阶段转化生长因子β1 (TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)在肝组织内表达的相关性．方法:41例行肝组织活检慢性病毒性肝炎患者,免疫组织化学检测TGF-β1和CTGF,并用多媒体彩色图像分析仪对上述二指标进行图像分析定量．结果:按肝纤维化分组,除S1,S2期无统计学差别意义外,TGF-β1和CTGF均随纤维化分期加重而表达增加(F=49．56,23．01,P<0．05)．按炎症活动度分组G1,G2,G3,G4组间TGF-β1两两比较无显著性差异．G1,G2,G3组CTGF两两比较无显著性差异,而G4组则有统计学意义．肝组织中TGF-β1,与CTGF呈正相关(r=0．855, P<0．05)．TGF-B1和CTGF与血清PCⅢ,LN, HA,ⅣC均呈正相关(TGF-β1:r=0．744,0．815, 0．756,0．741,P<0．05;r=0．663,0．690,0．686, 0．640．P<0．05)．结论:肝脏TGF-β1和CTGF表达水平与肝组织纤维化程度密切相关,在早期肝硬化阶段CTGF表达更可靠．     

TGF-β1和smad4mRNA在慢性肝炎、肝硬化、肝癌癌旁组织的表达及意义

目的:转化生长因子TGF-β1信号转导通路具有重要的细胞调节功能,包括细胞的生长、分化、黏附、转移、细胞外基质的形成及免疫调节等.通过检测慢性病毒性肝炎、肝硬化、肝癌癌旁病理组织TGF-β1和smad4mRNA的表达,探讨TGF-β/smad通路在肝纤维化形成、发展中的关系及作用机制.方法:应用免疫组化和原位杂交方法,对照肝组织10例,肝癌癌旁肝组织17例,慢性病毒性肝炎肝硬化肝穿组织70例的TGF-β1蛋白和smad4mRNA表达进行检测.结果:TGF-β1和smad4mRNA在慢性病毒性肝炎中度及肝硬化组织中的表达明显增强,阳性率分别为83.3%,87.0%和87.5%,87.0%,明显高于对照组(20.0%,20.0%),差异均有显著性(b3P＜0.01,X2=12.3 980;t4P＜0.01,X2=14.0 609;和b1p＜0.01,X2=14.6 953;b2P＜0.01,X2=14.0 609);而癌旁肝组织二者的表达均低下,与对照组无明显差异;随着肝纤维化的发展TGF-β1和smad4mRNA的表达呈逐渐增强趋势,S3期达高峰,S4期有所回落;二者表达呈正相关(X2=4.5 064,P=0.0 336,r=0.2 668);肝组织病理可见TGF-β1和smad4mRNA的阳性细胞在肝组织切片上的分布基本一致,大多集中于汇管区、肝窦及纤维条索周边.结论:TGF-β/smsd信号传导通路在肝纤维化的形成和发展中具有重要的促进作用,TGF-β1和smad4mRNA的组织定位检测能准确的评价肝纤维化形成状况及发展趋势.     

TGF-β1和smad 4mRNA在慢性病毒性肝炎、肝硬化组织中的表达及意义

应用免疫组化和原位杂交方法，对10例对照肝组织，70例慢性病毒性肝炎、肝硬化肝组织TGF-β1和smad4mRNA的表达进行检测，结果TGF-β1和smad4mRNA在慢性病毒性肝炎肝硬化中的表达明显增强，smad4mRNA阳性率分别为87．5％、82．6％，TGF-β1阳性率分别为83．33％、86．96％；TGF-β1和smad4mRNA阳性表达细胞在肝组织切片中的分布多集中在扩大的汇管区、中央静脉及窦周周围(间质细胞及肝细胞内均见有表达)，提示TGF-β1与smad4mRNA的表达与肝纤维化活动状态密切相关，TGF-β/smad通路在肝纤维化的形成和发展中具有重要意义。     

PD-1表达与慢性乙型肝炎病毒感染病理的相关性分析

目的研究程序性死亡因子-1(programmed death1,PD-1)与慢性乙型病毒性肝炎病理的相关性,探讨PD-1在慢性HBV感染病情进展中的作用。方法对84例慢性乙型病毒性肝炎患者行肝组织活检,肝组织标本经10%福尔马林液固定、石蜡包埋切片后,以HE染色评判肝组织炎症活动度(G)和肝纤维化程度(S)。采用免疫组织化学染色SP法检测肝组织中PD-1的表达,以红色为阳性表达区域,每张切片在高倍镜下(400×)选取5个不连续视野进行图像采集,采用Image-Pro Plus6.0图像分析系统进行测量分析,以积分光密度(integral optical density,IOD)值表示PD-1在肝组织中的表达水平。结果 PD-1表达强度与肝组织炎症活动度及纤维化程度均呈正相关,相关系数分别为0.898(P0.001)、0.700(P0.001)。肝组织炎症活动度G0～G4级组间,PD-1的表达差异均有统计学意义(P0.05)。肝组织纤维化S2期与S3期、S3期与S4期间PD-1的表达,差异无统计学意义(P0.05),其余各纤维化分期之间PD-1的表达,差异均有统计学意义(P0.05)。结论肝组织内的PD-1表达水平与CHB患者肝脏炎症及纤维化发生、进展呈正相关。测定PD-1的IOD值有助于辅助评判肝组织炎症活动度及肝纤维化程度,可以作为评判肝炎病理情况的参考指标。     

肝组织转化生长因子β_1与肝纤维化的关系研究

目的观察转化生长因子β1（TGF-β1）在160例慢性乙型肝炎患者肝纤维化的表达情况,探讨其与肝纤维化的关系。方法对160例乙型肝炎患者肝组织TGF-β1行免疫组化定量分析,并与肝脏纤维化分期进行统计学分析。结果肝组织TGF-β1随肝脏纤维化加重而表达增加,其差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论肝组织TGF-β1与肝纤维化呈正相关,在一定程度上可利于判断预后,同时也为今后以其为靶点的肝纤维化治疗提供理论依据。     

TGFβ_1及TGFβ_1 mRNA在病毒性肝炎肝组织中的表达

为了解慢性病毒性肝炎肝组织中转化生长因子β_1(TGFβ_1)及TGFβ_1mRNA的表达情况及其与肝脏病理改变的关系,本文用免疫组织化学法检测了45例慢性病毒性肝炎患者肝脏TGFβ_1表达,并做其中21例TGFβ_1mRNA原位杂交。结果TGFβ_1肝组织表达阳性率为88.89％,主要为间质细胞、汇管区及纤维化发生活跃部位阳性,且随肝纤维化程度加重而表达增强(r=0.73,P<0.05);TGFβ_1mRNA表达阳性率为57.14％,不仅定位于单核细胞、窦细胞,某些肝细胞也有表达。结果表明TGFβ_1与肝纤维化密切相关,不仅间质细胞能够产生TGFβ_1促进肝纤维化,肝细胞本身可能也参与TGFβ_1分泌环路,在肝纤维化发病机制中起一定作用。     

慢性乙型肝炎患者白细胞介素-18、转化生长因子-β1、HBV DNA与肝脏损伤的关系

目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血IL-18、转化生长因子(TGF)-β1、HBVDNA与肝功能损伤及肝纤维化发生发展的关系.方法 67例慢性乙型肝炎患者作为实验组,20例健康体检者作为健康对照组.双抗体夹心ELISA法及荧光定量PCR法检测外周血IL-18、TGF-β1和HBV DNA.48例患者行肝穿刺组织学检查.统计学处理采用方差分析,对方差不齐者采用秩和检验;各指标相关性采用偏相关分析.结果 乙型肝炎轻、中、重度及肝炎肝硬化组血清TGF-β1、IL-18及ALT、Tbil水平均不同程度高于健康对照组(P<0.01),IL-18、TGF-β1水平随CHB程度加重逐渐升高,TGF-β1各组间差异均有统计学意义(P<0.01),尤以肝硬化组升高显著.高病毒量组与低病毒量组ALT、Tbil比较差异无统计学意义.但与对照组比较差异均有统计学意义(F=10.970,F=7.528;F=14.698,F=13.395;均P<0.05);TGF-β1水平随纤维化分期SO～4逐步升高,除S3与S4比较无差异外,其余两两比较差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05).IL-18仅S1期与其他各期有差异,HBV DNA在各期间均差异无统计学意义;偏相关性分析显示IL-18与ALT、Tbil呈正相关(r=0.480 6,r=0.5047,P<0.01),HBV DNA与lL-18、TGF-β1、ALT、Tbil无相关性.结论 血清IL-18、TGF-β1水平可作为判断肝脏损伤严重程度的指标.血清TGF-β1与肝炎肝硬化的程度密切相关.HBV DNA与肝脏损伤及纤维化关系不大.     

慢性乙型肝炎患者血清TGF-β_1水平与肝纤维化的关系

目的探讨慢性乙型肝炎患者血清中转化生长因子β1（TGF-β1）水平与肝纤维化的关系。方法分别采用ELISA、R IA法对慢性乙型肝炎（CHB）、乙肝肝硬化（LC）共73例患者血清中TGF-β1、透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原蛋白（PCⅢ）、层粘连蛋白（LN）水平进行检测,并对其中42例CHB患者行肝穿刺病理活检,观察不同肝纤维化分期患者以上指标的变化。结果 CHB患者血清中TGF-β1、HA、PCⅢ、LN水平随病情发展逐渐增高（P均〈0.05）;TGF-β1与HA、PCⅢ水平均呈正相关（r=0.457、0.363,P均〈0.05）。肝纤维化分期S1~2、S3~4期血清中TGF-β1、HA水平明显高于S0期（P均〈0.05）,且S3~4期明显高于S1~2期（P〈0.05）。结论血清TGF-β1水平与肝纤维化有密切相关性,血清HA及PCⅢ是判断肝纤维化程度的良好指标。     

代谢综合征与慢性乙型病毒性肝炎及非酒精性脂肪性肝病患者肝纤维化程度的相关性研究

目的 比较慢性乙型病毒性肝炎患者和非酒精性脂肪性肝病患者代谢综合征患病率,以及代谢综合征对慢性乙型病毒性肝炎患者和非酒精性脂肪性肝病患者肝纤维化进展的影响.方法 对2008年1月至2009年6月在我院就诊的136例慢性乙型病毒性肝炎患者和110例非酒精性脂肪性肝病患者进行回顾性分析,调查其代谢综合征的患病率,测定肝功能及病毒学指标,进行肝脏病理学检查.采用t检验和X~2检验进行统计学分析.结果 代谢综合征总的患病率为28.5%,非酒精性脂肪性肝病患者代谢综合征患病率显著高于慢性乙型病毒性肝炎患者(分别为49.1%和11.8%).肝纤维化分期为S_(0～1)、S_(2～4)的慢性乙型病毒性肝炎患者代谢综合征的患病率分别为3.1%和19.7%(P＜0.01),代谢综合征、体重指数、天门冬氨酸转氨酶、γ-谷氨酰转肽酶及炎症程度均与其肝纤维化程度相关.在非酒精性脂肪性肝病患者中,非酒精性脂肪性肝炎患者代谢综合征患者率高于非酒精性脂肪肝(分别为55.4%和40.0%);纤维化分期为S_(0～1)、S_(2～4)的患者代谢综合征的患病率分别为36.2%和70.7%(P＜0.01);代谢综合征、丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸转氨酶、γ-谷氨酰转肽酶及明显炎症均与其肝纤维化严重程度相关.结论 非酒精性脂肪性肝病患者代谢综合征的患病率高于慢性乙型病毒性肝炎患者,这两类患者代谢综合征与肝纤维化程度相关.     

人肝纤维化组织中TGF-β/Smads家族细胞转导信号通路的研究

目的 研究慢性乙型肝炎肝纤维化组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad2、Smad4、Smad7的表达,探讨Smads在肝纤维化发生、发展过程中的作用机制.方法 对32例慢性乙型肝炎患者肝穿刺标本进行病理分期,应用实时荧光定量PCR方法检测肝纤维化组织中TGF-β1、Smad2、Smad4、Smad7 mRNA表达及变化规律.结果 随着肝纤维化程度加重,TGF-β1、Smad2、Smad4 mRNA的表达逐渐增加,在S4期增加最明显(P<0.01).Smad7 mRNA在肝纤维化初期表达增加,随着肝纤维化程度加重,表达呈下降趋势,各期之间比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 TGF-β1和Smads分子均参与肝纤维化的发生、发展,不同类型的Smads分子作用各异.     

纤维化肝组织转化生长因子β1表达水平与肝纤维化程度的关系

在众多的细胞因子中，转化生长因子β1(TGF-β1)在肝纤维化的形成中起着关键作用。国内外关于TGF-β1的基础研究大多为细胞培养及动物实验；临床研究主要集中在血清的TGF-β1。测定，但肝组织内TGF-β1的分布及其临床意义研究较少。我们以慢性病毒性肝炎患者肝组织TGF-β1为研究对象，观察肝纤维化不同阶段TGF-β1在肝组织内表达情况，进一步比较肝脏TGF—β1与血清TGF-β1及血清纤维化指标Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(CⅣ)反映肝纤维化情况的优劣，深入探讨TGF—β1与肝纤维化发生发展的关系。     

双环醇对慢性乙型病毒性肝炎肝组织转化生长因子β1和Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响

乙型肝炎病毒感染是引起肝纤维化的最常见病因之一,目前对肝纤维化的发病机制研究已深入到分子水平,但临床治疗手段仍相对滞后。研究表明,双环醇可以清除实验动物肝细胞内的自由基,保护肝细胞膜和线粒体,减轻肝脏炎症损伤,防止肝纤维化[1]。我们将双环醇应用于慢性乙型病毒性肝炎肝纤维化的治疗,观察其对慢性乙型病毒性肝炎患者肝组织内转化生长因子β1(transforming growthfactor-β1,TGF-β1)和Ⅰ、Ⅲ型胶原水平的影响。1资料和方法1.1病例选择及治疗20例慢性乙型病毒性肝炎患者均为2003年3月至2005年4月华中科技大学同济医学院附属协和…     

260例乙肝患者肝组织转化生长因子β1与肝纤维化及肝功能的关系

目的观察转化生长因子β1（TGF—β1）在慢性乙型肝炎肝纤维化不同进展阶段的表达和定位情况,探讨其与肝纤维化及丙氨酸转氨酶（ALT）、天门冬氨酸转氨酶（AST）、总胆红素（TBil）、白蛋白（ALB）、胆碱酯酶（ChE）的关系。方法对260例乙型肝炎患者肝组织TGF—β1行免疫组化定量分析,并与肝脏纤维化分期及肝功能检测指标进行统计学分析。结果肝组织TGF—β1随肝脏纤维化加重而表达增加,其差异具有显著性（P〈0．05）,肝组织TGF—β1与ALT、AST之间无相关性（P值（P〉0．05）,与TBil之间呈弱正相关,相关系数为0．496（P〈0．05）,与ALB、ChE均呈负相关,相关系数分别为-0．743、-0．758（P值均〈0．05）。结论肝组织TGF—β1与肝纤维化呈正相关,在一定程度上可了解慢性肝炎患者的肝脏合成储备功能,以利于判断预后,同时也为今后以其为靶点的肝纤维化治疗提供理论依据。     

AAR和API评估慢性乙型病毒性肝炎肝纤维化临床价值的比较

目的比较谷草转氨酶-谷丙转氨酶的比值（AAR）和年龄-血小板指数（API）对慢性乙型病毒性肝炎肝纤维化的临床价值。方法172例慢性乙型病毒性肝炎患者均接受肝组织病理检查，并同时检测肝功能和血常规，用ROC曲线评价AAR和API诊断慢性乙型病毒性肝炎肝纤维化的能力。结果肝纤维化S0、S1、S2、S3和S4的AAR无显著差异（P〉0．05），肝纤维化分期与AAR的相关系数（rs）=0．107（P〉0．05），ROC曲线分析显示AAR诊断显著肝纤维化和肝硬化的AUC均〈0．7；肝纤维化S4的API高于S0、S1、S2和s3（P〈0．01），肝纤维化分期与API的rs=0．314（P〈0．01），ROC曲线分析显示API诊断显著肝纤维化的AUC〈0．7（P〉0．05），但诊断肝硬化的AUC达到0．773（P〈0．01），敏感度（SN）达到70．83％，特异度（sP）达到72．18％。结论AAR对于评估慢性乙型病毒性肝炎肝纤维化的临床价值不大；API与肝纤维化分期有一定的相关性，可以用于肝纤维化S4的诊断，但对肝纤维化s1、s2和s3的区分能力有限。     

激光共聚焦显微镜对肝组织TGF-β1的荧光定量分析

目的 探索一种能够准确定量反映肝组织转化生长因子-β1(TGF-β1)表达变化的新方法.方法 以间接免疫荧光组织化学染色配合激光共聚焦显微镜扫描,对 21例慢性乙型肝炎、乙肝后肝硬化患者肝组织TGF-β1的表达进行荧光定量分析,并与肝组织G-S分期半定量记分以及血清肝纤维化指标透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)等进行相关分析.结果 发现肝组织TGF-β1的荧光定量分析与肝组织G-S分期半定量记分、血清肝纤维化指标等均显著相关(P<0.05),可以准确的定量反映肝组织TGF-β1的变化,反映肝纤维化的程度.结论 应用间接免疫荧光配合激光共聚焦显微镜扫描是一种较为理想的定量反映肝组织TGF-β1表达及肝纤维化程度的新方法.     

乙型肝炎病毒复制状态对轻度慢性乙型肝炎患者肝组织中转化生长因子β1表达影响的研究

慢性乙型病毒性肝炎（CHD）在我国发病率较高，危害较大，CHB患者体内病毒复制状况以及肝纤维化进程在临床倍受重视。目前认为，转化生长因子β1（TGF-β1）对细胞的增殖和发育、转化和分化有一定的调节作用，同时也是重要的肝纤维化递质，在肝硬化的形成中占有重要地位，细胞外基质（ECM）的合成和降解主要由TGF-β1调控。本实验研究的目的，在于了解轻度CHB体内HBV DNA不同复制状况时，肝组织中TGF-β1表达所受影响。     

乙型肝炎病毒促进CTGF和TGF-β1在肝星状细胞中的表达

目的:研究转染乙型肝炎病毒(HBV)的HepG2.2.15细胞株在体外促进肝星状细胞中CTGF和TGF-β1的表达,进而探讨HBV促肝细胞纤维化的机制.方法:将HepG2和H印G2.2.15细胞株分别在体外与肝星状细胞(Lx-2)共培养,以单独培养的肝星状细胞为对照组.培养24,48,72 h后,以Real-time PCR定量检测肝星状细胞中CTGF和TGF-β1 mRNA的表达,以Western blot定量检测其蛋白表达.结果:与对照组比较,在24、48、72 h时点,CTGF和TGF-β1 mRNA分别增高约1.7、4.2、9.6倍(P＜0.01)和2.2、6.1、8.1倍(P＜0.01),以72 h差异最为显著;而与HepG2细胞共培养实验组LX-2细胞CTGF和TGF-β1 mRNA在三个时间点分别增高约1.7、1.2、1.3倍(P＜0.05)和2.7、1.9、2.1倍(P＜0.05).CTGF和TGF-β1蛋白表达量分别增高约2.1、2.6、2.5倍(P＜0.01)和1.7、3.3、3.1倍(P＜0.01),以48 h差异最为显著;而与HepG2细胞共培养实验组LX-2细胞CTGF和TGF-β1蛋白表达量在三个时间点分别增高约1.6、1.1、0.9倍(p＜0.05)和1.1、1.4、2.5倍(P＜0.05).结论:与HepG2.2.15细胞株共培养后,肝星状细胞中肝纤维化相关因子的表达明显增强.体外实验证明HBV具有诱导肝细胞纤维化的重要作用.