信号转导与转录因子3在宫颈癌组织中的表达及外周血表皮生长因子受体测定的意义

目的:探讨信号转导与转录因子3(STAT3)及其上游基因表皮生长因子受体(EGFR)在宫颈癌中的表达及两者在宫颈癌发生发展中的作用和关系.方法:采用蛋白印记法(Western Blot)检测15例正常宫颈组织(健康对照组)、40例宫颈癌组织(宫颈癌组)中STAT3的表达及其磷酸化STAT3(p-STAT3)情况.双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测宫颈癌组患者治疗前后和健康对照组血清EGFR的含量.结果:①宫颈癌组织中STAT3表达水平和磷酸化水平明显高于健康对照组正常宫颈(P＜0.05);②早期宫颈癌患者术前、术后血清中EGFR含量与健康对照组比较,差异无统计学意义(P=0.835;P=0.586;P=0.277);③中晚期宫颈癌患者术前、术后血清EGFR含量显著高于健康对照组(P=0.011;P=0.022;P=0.039).治疗后EGFR含量稍有下降,治疗后14天与治疗前1天、治疗后7天比较明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:STAT3高表达和激活能促进宫颈癌的发生、发展,晚期宫颈癌血清中EGFR测定可能成为宫颈癌的疗效评价及远期预后的指标.     

卵巢癌化疗前后Th1和Th2类细胞因子的表达及意义

目的观察化疗前后卵巢癌患者体内辅助性T淋巴细胞1(Th1)和辅助性T淋巴细胞2(Th2)类细胞因子的表达及意义.方法采用流式细胞微球芯片捕获技术检测30例卵巢癌患者化疗前、后和15例健康妇女血浆中Th1类细胞因子(白介素2、干扰素γ、肿瘤坏死因子)和Th2类细胞因子(白介素4、白介素6、白介素10)表达水平.结果卵巢癌患者外周血在化疗前较健康妇女Th1表达降低,而Th2表达明显升高(其中IL-10升高无统计学意义);卵巢癌患者化疗后,Th1、Th2类细胞因子表达均有降低,但Th2类细胞因子较治疗前差异有显著性(P＜0.05).结论①卵巢癌患者化疗前后外周血中Th1类细胞因子均呈低表达,细胞免疫受抑制.②化疗后Th2类细胞因子强势表达明显降低.     

新生儿IL-18对Th1/Th2类细胞免疫平衡的作用与HBV宫内感染相关性研究

目的:探讨新生儿IL-18对Th1/Th2类细胞免疫平衡的作用与HBV宫内感染的相关性。方法:选择HBsAg、HBeAg双阳性但肝功能正常孕产妇分娩的新生儿157例,以其中胎儿宫内感染21例为研究组,无宫内感染136例为对照组。用流式细胞仪检测两组脐血白细胞介素-18(IL-18)、γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)的表达水平。结果:(1)研究组IL-18及IFN-γ表达水平明显低于对照组,差异有显著性(P<0.05;P<0.05);研究组IL-4表达水平百分数高于对照组,但差异无显著性(P>0.05);研究组IFN-γ/IL-4高于对照组,差异有显著性(P<0.05);(2)研究组IL-18与IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4均呈显著正相关(P均<0.05)。结论:IL-18是Th1/Th2网络平衡的更高层次的调控者;IL-18水平下调,导致新生儿Th1/Th2细胞因子比例下降,以致不利于HBV的清除,IL-18水平下调可能是HBV宫内感染的危险因素之一。     

乙型肝炎病毒感染孕妇IL-18对Th1/Th2细胞免疫平衡的作用与胎儿宫内感染相关性研究

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染孕妇外周血白细胞介素-18(IL-18)水平对Th1/Th2细胞免疫的平衡作用与胎儿宫内感染的相关性。方法:选择2006年1月至2006年10月在本院分娩孕产妇101例,合并HBV感染、肝功能正常,单胎、足月妊娠。检测新生儿脐血HBV-DNA及HBsAg,诊断胎儿宫内感染21例为研究组,无宫内感染80例为对照组。用双抗夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA)检测孕妇外周血清IL-18、IFN-γ(γ-干扰素)、IL-4的水平。结果:(1)研究组孕妇外周血IL-18及IFN-γ明显低于对照组,而IL-4水平明显高于对照组,两组差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01,P<0.05);研究组IFN-γ/IL-4比值较对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)两组孕妇外周血IL-18与IFN-γ均呈显著正相关、与IL-4水平均呈显著负相关、与IFN-γ/IL-4比值均呈显著正相关。结论:HBV宫内感染与孕妇Thl型特异性反应降低以及Th2型特异性反应增强有关,Th1/Th2免疫平衡失调可能是胎儿HBV宫内感染的机制之一;HBV宫内感染与孕妇外周血IL-18分泌下降有关,IL-18水平下调可能是HBV宫内感染的危险因素之一。     

甘露聚糖结合凝集素在复发性流产患者血清中表达水平及意义

目的:了解甘露聚糖结合凝集素(MBL)在不明原因复发性流产患者血清中的表达水平,探讨MBL与复发性流产免疫感染的关系.方法:应用酶联免疫吸附实验对比检测MBL在55例不明原因复发性流产患者(研究组)及22例正常早孕妇女(对照组)血清中的表达水平,分析MBL血清水平与患者免疫抗体表达、病原体感染的相关性.结果:血清MBL水平在复发性流产患者及正常早期妊娠妇女中呈非正态分布.研究组中,血清MBL水平下降(<550 ng/ml)者占70.9%(39/55),明显高于对照组45.5%(10/22),差异有统计学意义(P<0.05).研究组中免疫抗体阳性患者血清MBL水平下降(<550 ng/ml)率68.8%,与抗体阴性患者相比差异无统计学意义(P>0.05).研究组中亚临床感染患者血清MBL水平下降(<550 ng/ml)率80.8%略高于非感染患者的MBL水平下降率62.1%(18/29),但两组相比较差异无统计学意义(P>0.05);亚临床感染组患者MBL缺陷率(<200 ng/ml)23.1%,显著高于非感染组患者的MBL水平缺陷率3.45%(P<0.05).结论:①血清MBL水平在正常早孕妇女及复发性流产患者中均变化范围较大,复发性流产患者血清MBL水平表达偏低.②复发性流产患者血清MBL下降率显著高于正常早孕妇女,血清MBL水平缺陷导致病原体易感性增加,可能是复发性流产的危险因素之一.     

信号转导和转录激活因子4与原因不明复发性流产

信号转导和转录激活因子4(STAT4)信号转导途径是人体生理与病理反应的共同通路之一,与细胞生长、增殖、分化密切相关.复发性自然流产(RSA)的病因复杂,但近50%RSA原因不明.辅助性T细胞l型(1111)和,1112失衡是RSA的重要特征,近年通过对小鼠研究发现,STAT4缺陷小鼠表现1112免疫应答优势,STAT6缺陷小鼠表现Th1免疫优势,认为STAT4途径是细胞因子调节免疫细胞向Th1分化的最主要的信号转导通路.白细胞介素12(IL-12)是维持Th1/Th2平衡的中心环节,与RSA密切相关.研究发现,STAT4是IL-12调节的关键媒介,其介导的IL-12信号通路可能是RSA的发病机制之一.     

诱骗受体3(DcR3)在复发性流产患者血清及蜕膜组织中的表达

目的:初步探讨诱骗受体3(Dc R3)在复发性流产(RSA)中可能的作用机制。方法:ELISA方法检测55例复发性流产(RSA)患者(研究组)及35例非意愿妊娠正常妊娠、自愿要求人工流产孕妇(对照组)血清中Dc R3、白介素(IL)-2、IL-10水平;免疫组织化学方法检测19例研究组及16例对照组患者流产蜕膜组织中Dc R3的表达。结果:研究组血清中Dc R3、IL-10水平显著低于对照组(P0.05);IL-2水平显著高于对照组(P0.05)。蜕膜中Dc R3免疫阳性产物定位于细胞质和细胞膜,Dc R3在研究组中的表达显著低于对照组(P0.05)。结论:Dc R3在RSA患者中低表达,可能是打破母-胎免疫耐受平衡的原因之一。     

复发性流产患者外周血T细胞亚群变化及相关转录因子的表达

目的:检测复发性流产患者外周血中Th1、Th2和Th17细胞的变化情况及相关转录因子T-bet、GATA-3和STAT-3mRNA的表达水平。方法:对30例复发性流产(RSA)非孕期患者和30例正常非孕(NNP)妇女抽取抗凝静脉血5ml,Ficoll分离外周血单个核细胞(PBMC),采用流式细胞术检测Th1、Th2和Th17细胞的比例,PBMC培养5小时后采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清中IFN-γ、IL-4和IL-17的水平,同时检测T-bet、GATA-3和STAT-3mRNA的表达水平。结果:RSA患者Th1细胞的百分比和Th17细胞的百分比均高于NNP组(P<0.05),Th2细胞的百分比低于NNP组(P<0.05)。RSA组PBMC培养上清中IL-4水平低于NNP组(P<0.05),而IFN-γ和IL-17水平明显高于NNP组(P<0.05)。RSA患者GATA-3mRNA表达较NNP组减少(P<0.05),而T-bet和STAT-3mRNA明显高于NNP组(P<0.01)。结论:RSA患者PBMC合成IFN-γ和IL-17的水平明显增高,合成IL-4的水平明显降低,表明存在T细胞亚群的分化失衡状态。这种失衡状态可能受到相应的核转录因子T-bet、GATA-3和STAT-3的调控。     

匹多莫德对哮喘患儿血清中Th1/Th2细胞因子表达的影响

目的探讨匹多莫德对哮喘患儿血清中Th1/Th2细胞因子表达量的影响。方法将90例初发哮喘患儿随机分为观察组和对照组各45例。对照组给予常规治疗,观察组在对照组基础上加用匹多莫德800mg/d,观察两组治疗前及治疗3个月后临床疗效及血清中Th1/Th2细胞因子浓度的变化情况。结果两组治疗3个月后血清白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素5(IL-5)浓度明显低于治疗前,差异有统计学意义(P0.05),治疗3个月后观察组血清IL-4、IL-5浓度明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。两组治疗3个月后血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素12(IL-12)浓度明显高于治疗前,差异有统计学意义(P0.05),治疗3个月后观察组血清TNF-α、IL-12浓度明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论匹多莫德能通过升高哮喘患儿血清中TNF-α、IL-12浓度并能降低哮喘患儿血清中IL-4、IL-5浓度来提升临床疗效。     

Th1/Th2类细胞因子与葡萄胎恶变的相关性研究

目的:通过对妊娠滋养细胞疾病患者外周血血清中Th1/Th2类细胞因子的测定,从免疫学角度探讨Th1/Th2类细胞因子预测葡萄胎恶变的价值。方法:收集1997至2001年首次以葡萄胎诊断进行清宫和手术的患者的外周血血清,采用酶联免疫吸附法检测血清中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10的水平来确定Th1/Th2的活性。结果:与侵葡+绒癌组相比,葡萄胎组IFN-γ含量明显增加(P<0.001),IL-10含量明显降低(P<0.001)。葡萄胎患者中,与非恶变组相比,恶变组Th1类细胞因子(IFN-γ,IL-2)含量呈下降趋势,而Th2类细胞因子(IL-4,IL-10)含量呈增加趋势,4种细胞因子变化均具有统计学差异(P<0.0001)。随着滋养细胞增生程度的增加,4种细胞因子的变化均具有统计学差异,除外IL-4的变化在轻、中度增生组中无统计学意义(P>0.05)。结论:Th1/Th2细胞因子向Th2漂移时,葡萄胎恶变倾向增高。     

复发性流产患者血浆白细胞介素-37含量检测及其临床意义

目的:探讨复发性流产(RSA)患者血浆中白细胞介素-37(IL-37)的含量检测及其临床意义。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测30例RSA患者(RSA组)、30例正常妊娠者(NP组)和10例健康对照者(HC组)的血浆IL-37含量,同时检测RSA组和NP组血浆中β-人绒毛膜促性腺激素(β-hCG)和孕酮(P)的含量以及外周血免疫细胞含量。结果:①RSA组血浆IL-37含量明显高于NP和HC组(P<0.05),RSA组曲线下面积AUC值达到0.7967。②RSA患者血浆IL-37含量与血β-hCG含量呈负相关关系(R=-0.3858,P=0.0387),RSA患者血浆IL-37含量与P含量呈负相关关系(R=-0.3759,P=0.0407);NP组血浆IL-37含量与血β-hCG和P含量均无相关性(P>0.05)。③RSA患者血浆IL-37含量与外周单核细胞比例呈负相关(R=-0.4750,P=0.0080),而NP组血浆IL-37含量与外周单核细胞比例呈正相关(R=0.4782,P=0.0447),两组中IL-37血浆含量与淋巴细胞、中性粒细胞及白细胞均无相关性(P>0.05)。结论:IL-37可能参与了RSA的免疫调节,具有作为诊断标志物的前景。     

Expression and significance of dendritic cells and Th17/Treg in serum and placental tissues of patients with intrahepatic cholestasis of pregnancy

Purpose: Dendritic cells (DCs) are involved in immune system, which can also regulate the differentiation of T helper 17 (Th17) and regulatory T cells (Treg). DCs and Th17/Treg participate in preeclampsia and recurrent spontaneous abortion (RSA), but there is still lack of research in intrahepatic cholestasis of pregnancy (ICP). The aim was to evaluate the expression and significance of CD83⁺DCs, CD1a⁺DCs, interleukin-17 (IL-17) and IL-35 in serum and placental tissues of patients with ICP.

Methods: Thirty cases of mild ICP, 25 cases of severe ICP were selected, and 30 cases of normal pregnant women were selected as control group. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and immunohistochemistry (IHC) were used to detect the expression of CD83⁺DCs, CD1a⁺DCs, IL-17 and IL-35 in serum and placenta tissues, respectively.

Results: There were more CD83⁺DCs, IL-17 expressed in placenta from women with ICP than in normal pregnancies, while the number of decidual CD1a⁺DCs, IL-35 was significantly lower in ICP than in normal pregnant women. The comparison within three groups had statistical difference (p?+DCs and CD1a⁺DCs levels had no significance. IL-17 was higher in ICP, while IL-35 was lower.

Conclusions: DCs are involved in damaging the maternal–fetal immune tolerance by changing the phenotype and mature state, which may affect the differentiation of Th17/Treg to cause ICP.     

正常妊娠和子痫前期患者外周血树突细胞亚群的变化

目的:探讨树突细胞(DCs)及其亚群在正常妊娠和子痫前期患者间的变化,及与Th1/Th2型反应的关系。方法:选取正常妊娠孕妇25例、子痫前期患者17例和正常未孕妇女15例,用流式细胞术检测3组外周血树突细胞及其髓样(MDC)和淋巴样(PDC)亚群,比较其数量和比值在妊娠前后及子痫前期患者的变化,并与Th1/Th2型细胞因子的含量比较。结果:与正常妊娠早期和晚期相比,妊娠中期MDC和PDC数量减少,MDC/PDC比值升高,妊娠早、晚期相比无显著差异。与正常晚期妊娠妇女比较,子痫前期患者PDC数量减少,MDC数量改变不明显,MDC/PDC比值升高,两组相比差异显著。与正常晚期妊娠妇女相比较,子痫前期患者Th1型细胞因子IL-2含量增加,IFN-γ无显著差异,Th2型细胞因子IL-10减少,IL-2/IL-10、IFN-γ/IL-10比值升高。结论:DCs在正常妊娠的不同阶段其数量和亚群发生变化,子痫前期患者出现PDC减少和MDC/PDC比值升高现象,并与Th1/Th2型细胞因子的变化趋势一致。     

晚期糖基化终产物水平及其受体的表达与妊娠期糖尿病围生儿结局关系的研究

目的:探讨妊娠期糖尿病(GDM)孕妇血清晚期糖基化终产物(AGEs)水平与围生儿结局间的关系,并观察晚期糖基化终产物受体(RAGE)蛋白在胎盘组织中的蛋白表达。方法:选择孕24～28周来我院产前检查被诊断患有GDM的孕妇100例为研究对象(GDM组),另选择同孕期、相应年龄的正常妊娠妇女50例作为正常对照组。检测GDM组孕妇治疗前、后和同孕期正常对照组孕妇的空腹血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)和AGEs水平。分娩后立即收集两组胎盘低温保存,用于分析组织中RAGE蛋白的表达。并收集母婴临床信息,根据GDM组围生儿结局分为GDM围生儿正常组和GDM围生儿异常组。结果:①GDM组治疗前孕妇血清AGEs水平、HbA1c和空腹血糖值均明显高于同孕期正常对照组(P<0.05,P<0.01)。②GDM组经干预治疗后其空腹血糖和HbA1c水平与同孕期正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);但血清AGEs水平仍然高于正常对照组(P<0.01)。③GDM围生儿异常组孕妇血清AGEs水平高于GDM围生儿正常组(P<0.05)。④Logistic回归分析显示AGEs是GDM围生儿结局异常的危险因子(OR=6.197,P<0.01,95%CI2.514～15.453)。⑤Western印迹法测定胎盘组织中RAGE蛋白表达水平,GDM围生儿异常组高于GDM围生儿正常组和正常对照组(P<0.01)。结论:高AGEs血症是GDM围生儿结局的一个不利因素,高AGEs水平可作为GDM围生儿结局异常的预测指标。     

深部浸润型与表浅型子宫内膜异位症者腹腔液Th1、Th2细胞因子变化

目的:研究深部浸润型与表浅型子宫内膜异位症(EMs)临床特征以及腹腔液Th1、Th2细胞因子的表达差异。方法:收集术后病理证实诊断为EMs患者的临床资料及其腹腔液,根据术中诊断分为:表浅型(腹膜型,n=30)、深部浸润型(n=16);以同期因输卵管因素不孕症行腹腔镜探查的妇女(n=16)为对照组。用ELISA法测定3组腹腔液中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ的表达差异性。结果:表浅型EMs患者年龄较轻、不孕率高、腹水发生率高,而性交痛则是深部浸润型EMs患者的典型临床特征。与对照组相比,EMs组腹腔液中IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α表达均升高,IFN-γ在EMs组表达均降低。IL-2仅在深部浸润型EMs组升高;深部浸润型EMs组与表浅型EMs组之间对比,IL-6在表浅型EMs的升高明显(P<0.01),IL-10与TNF-α则在深部浸润型EMs组升高明显(P<0.01),IFN-γ在深部浸润型EMs组下降更为明显(P<0.01),IL-4在2个EMs组间表达无差异。结论:在表浅型与深部浸润型EMs的发病机制中,两者具有不同的免疫学改变。     

Treg和Th17在原因不明性复发性流产发病中作用的探讨

目的:探讨原因不明性复发性流产(URSA)患者和正常孕妇间Treg和Th17细胞因子的表达差异。方法:选择URSA患者20例为研究组,正常早孕妇女20例为正常对照组,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测两组蜕膜组织及外周血中Foxp3、ROR-γt、IL-17A及EBi3 mRNA的表达,酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清中IL-17A及IL-35的含量。结果:URSA组蜕膜及外周血中Th17因子(ROR-γt、IL-17A)的表达均显著高于正常对照组(P=0.000),而Treg因子(Foxp3、EBi3)的表达均显著低于正常对照组(P=0.000)。两组蜕膜中各因子表达量均显著高于外周血(P<0.05)。正常孕妇组蜕膜中Foxp3、ROR-γt、EBi3 mRNA的表达与外周血中的表达显著相关(P=0.000、0.007、0.000,r=0.901、0.612、0.943);URSA组仅ROR-γt mRNA在蜕膜及外周血的表达存在相关性(P=0.012),且相关系数不佳(r=0.548<0.75)。URSA组、正常对照组血清中IL-17A含量分别为(16.120±4.155)pg/ml、(5.460±2.036)pg/ml,IL-35含量分别为(11.525±2.262)pg/ml、(31.515±3.473)pg/ml,差异显著。结论:Treg和Th17细胞因子在URSA患者和正常孕妇间存在显著差异,表明Treg和Th17细胞比例失调可能在原因不明性复发性流产的发病中起一定作用。     

STAT3、cyclinD1、cyclinB1在卵巢上皮性癌的表达及意义

目的:研究STAT3及其下游基因cyclinD1、cyclinB1在卵巢上皮性癌的表达及意义。方法:用Westernblot和RT-PCR方法检测32例卵巢上皮性癌组织和12例正常卵巢组织中STAT3及其下游基因cyclinD1、cyclinB1的表达。结果:STAT3在卵巢癌和正常卵巢组织的蛋白表达阳性率分别为90.6%(29/32)和16.7%(2/12)。卵巢癌组STAT3表达明显高于正常卵巢组,差异有统计学意义(P<0.01);STAT3及其下游基因cyclinD1、cyclinB1mRNA在卵巢癌组织的阳性表达率分别为93.75%、87.5%、71.88%,与正常卵巢组阳性率的差异有统计学意义(P<0.05)。结论:卵巢上皮性癌中STAT3表达升高及活化可能促进了抗凋亡基因cyclinD1、cyclinB1表达,刺激细胞持续异常增殖,导致肿瘤发生。     

反复自然流产患者衰变催化因子的表达变化

目的:探讨补体系统在反复自然流产发病机理中的作用。方法:采用免疫组化法,观察12例反复自然流产患者(流产组)和与之配对的12例正常孕妇(对照组)子宫蜕膜组织中衰变催化因子(DAF)的表达变化,并检测其血清补体水平和抗心磷脂抗体(ACA)。结果:DAF表达半定量结果为:流产组弱阳性3例,阳性8例,强阳性1例;对照组阳性4例,强阳性8例,两组有显著差异(P<0.05)。流产组ACA阳性者(6例)明显高于对照组(1例),有显著差异(P<0.05)。流产组C3、C4水平分别为0.797±0.156g/L和0.148±0.032g/L,低于对照组的0.973±0.229g/L和0.175±0.026g/L,有显著差异(P<0.05);流产组ACA阳性者C3、C4水平分别为0.702±0.147g/L和0.128±0.028g/L,明显低于阴性者的0.893±0.099g/L和0.167±0.025g/L(P<0.05);ACA阳性者C3、C4水平流产组与对照组无显著差异(P>0.05)。ACA阴性者C3、C4水平流产组与对照组无显著差异(P>0.05)。结论:反复自然流产患者DAF表达不足;ACA可引起补体的过度激活,补体激活可能是ACA导致自然流产的重要机制;自然流产原因与ACA过度表达、导致补体激活过度而DAF不能控制有关。     

iNOS和caspase 3在胚胎停育绒毛和蜕膜组织中的表达

目的：探讨胚胎停育绒毛组织和蜕膜组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase 3）和诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）的表达和临床意义。方法：选择2013年3月-2014年5月就诊于武警后勤学院附属医院妇产科计划生育门诊的30例不明原因早期胚胎停育的患者（病例组）和30例正常早期妊娠妇女（对照组）为研究对象,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测2组绒毛组织和蜕膜组织中caspase 3和iNOS mRNA的表达水平,采用免疫印迹法检测2组绒毛组织和蜕膜组织中caspase 3蛋白的表达水平。结果：①病例组绒毛组织和蜕膜组织中caspase 3 mRNA、总的caspase 3蛋白和活化的caspase 3蛋白的表达水平均高于对照组（P＜0.01）。②病例组绒毛组织和蜕膜组织中iNOS mRNA表达水平低于对照组（P＜0.01）。结论：正常早孕和胚胎停育患者绒毛组织和蜕膜组织中均有iNOS和caspase 3的表达,iNOS和caspase 3可能参与凋亡的增加进而引起胚胎停育的发生。