改良透明胶带法在丝状真菌形态观察中的应用

目的建立一种操作简单且显微成像效果较佳的丝状真菌制片技术。方法将玻片的非毛玻璃端粘贴一层透明胶带,其上垂直平贴粘有真菌的透明胶带,真菌刚好邻近两条胶带的交叉线,然后在胶带交叉处侧面滴加微量乳酸酚棉蓝,待染液浸染真菌后,镜下观察真菌的形态特征。结果改良透明胶带法制片观察可见,真菌孢子形态、特征及孢子间、菌丝间、孢子和菌丝间位置排列较清晰,镜检效果尚佳。结论改良透明胶带法与传统透明胶带法相比,乳酸酚棉蓝染色镜检背景清晰、丝状真菌完整的典型结构较易获得,但存在丝状真菌有时不在同一平面导致成像模糊的缺陷,仍需进一步研究。     

酵母样真菌孢子及菌丝检查的方法

酵母样真菌孢子及菌丝检查的方法卢廷山，张联璧，杨仁洪（苏州医学院附属一院，江苏苏州２１５００６）关键词酵母样真菌，孢子，菌丝，培养临床检验酵母样真菌时一般根据菌落、孢子、菌丝、色素、芽管等主要特点，即可报告一些种、属。目前实验室常用的检查孢子及菌丝的...     

改良龙胆紫快速染色法检测阴道分泌物真菌的研究应用

目的研究一种简易快速染色法,提高阴道真菌的检出率,为临床提供诊断依据。方法改良龙胆紫快速染色法:于白带常规的试管中加入生理盐水约0.3mL,龙胆紫(革兰Ⅰ液)1滴,室温染2min,1滴悬液均匀涂于玻片中镜检。结果孢子无色而夹膜则呈亮黄绿色,真菌菌丝着色不均匀呈紫色或无色,上皮细胞、白细胞、球菌、加德纳菌、线索细胞染成紫色,滴虫、乳酸杆菌不上色,红细胞呈暗红色。孢子检出率高于革兰快速染色法和生理盐水悬液湿片法。结论改良龙胆紫快速染色法,融合了传统生理盐水悬液湿片法和革兰快速染色法的优点,快速、简单,易掌握,涂片色差大,孢子易于辨认,检测准确性高,实用性强,有临床应用价值。     

特敏增强荧光染色法在浅部真菌病诊断中的应用

目的评价特敏增强荧光染色法在浅部真菌病诊断中的应用价值。方法对200例临床高度怀疑真菌感染的标本分别用特敏增强荧光染色法、钙白荧光染色法和传统的1.78 mol/L KOH湿片法对真菌进行镜下形态学观察,并比较真菌检出率。结果特敏增强荧光染色法视野背景干净,菌丝及孢子均为亮蓝色,真菌的形态结构清晰易辨。特敏增强荧光染色法检出率高于钙白荧光染色法和KOH湿片法(χ~2=17.984,P0.05;χ~2=32.063,P0.05)。结论荧光染色法是一种快速有效的真菌染色镜检技术,在临床实验室早期诊断真菌病中有推广价值。     

肺部真菌感染与相关疾病的临床分析

对我院 1997～ 2 0 0 2年资料完整 ,痰、血、支气管肺泡灌洗液和肺部组织学检查真菌阳性 5 6例进行分析如下。1　对象和方法本组男 32例 ,女 2 4例 ,年龄 2 2～ 70岁 ,均合并有基础疾病。诊断标准 :1痰和支气管肺泡灌洗液中找到真菌菌丝和孢子 ,或培养出同一菌种 3次以上阳性者 ;同时合并 :有胸部 X线渗出性改变及呼吸道症状加重 ;有长期使用广谱抗生素、皮质激素、免疫抑制剂等。 2血和肺部组织学检查 1次阳性者。本组全部符合条件 ,其中痰菌丝孢子阳性 18例 ,支气管肺泡灌洗液阳性 5例 ,血培养 2例 ,肺部组织学检查阳性 4例 ,痰培养 3次…     

痰真菌培养与涂片镜检在下呼吸道感染实验诊断中的应用

目的通过对呼吸道标本真菌培养与涂片镜检结果的比较分析,评价其在下呼吸道真菌感染实验诊断中的应用价值。方法常规收集临床送检呼吸道标本620例进行真菌培养及鉴定与涂片镜检,比较其结果并结合患者临床资料进行分析。结果620例呼吸道标本中,真菌培养阳性201例,阳性率为32．4％,其中白色念珠菌164例,占培养阳性的81．6％,其次是光滑念珠菌及热带念珠菌;曲霉菌4例,占培养阳性的2．2％。涂片镜检阳性133例,其中,查见真菌孢子及菌丝81例,占镜检阳性的60．9％,查见真菌孢子未见菌丝49例,占镜检阳性的36．8％,仅查见菌丝3例。结论真菌培养及鉴定有助于确定其种类,但耗时较长,且容易受到上呼吸道定植真菌的干扰。真菌涂片镜检操作简便、快速,尤其是查见大量孢子及菌丝时对临床快速确定下呼吸道真菌感染具有重要意义,提示临床送检呼吸道标本作真菌培养及鉴定时应同时作真菌涂片镜检。     

阴道分泌物中念珠菌带菌与致病状态的区分

目的对健康体检及符合念珠菌阴道炎临床表现的育龄妇女的阴道分泌物中念珠菌形态进行比较分析，了解其带菌状态与致病状态的区别。方法取阴道分泌物分别涂片革兰氏染色及真菌培养，并通过科玛嘉显色培养基及YBC卡把真菌鉴别到种。结果1472例健康对照组查到芽生孢子151例其阳性率为10．3％，无一例检出假菌丝。符合念珠菌阴道炎临床表现4162例标本检出芽生孢子3543例，其中3229例同时检出芽生孢子和假菌丝。结论阴道分泌物中检出的假菌丝可能是念珠菌处于带菌状态与致病状态区分的标志。     

两例孢子丝菌病的实验室结果分析

孢子丝菌病是皮肤型深部真菌,病原菌为孢子丝真菌。临床表现为皮肤损害,多呈化脓性肉芽肿病变。临床诊断在很大程度上依靠真菌检查,主要是直接镜检,培养和病理组织检查。现就1994年6月份本室连续检出2例孢子丝菌病作如下分析。 资料与方法 一、对象 两例就诊病人的皮肤损害部位从足部起,均为皮肤淋巴型,数个化脓性溃疡沿淋巴结向心性出现,排列成串,触之疼痛且易出血。 二、方法 1、直接镜检:挑取溃疡边缘坏死组织的脓液,10％氢氧化钾制成薄片观察,2例标本均查不到病原菌体。     

550例外阴阴道假丝酵母菌病检测结果分析

目的对550例外阴阴道假丝酵母菌病患者的阴道分泌物常规检测结果进行分析,区分带菌状态和致病状态,为临床医生合理治疗提供依据。方法采0.9%生理盐水湿片法和10%KOH溶液湿片法。结果550例假丝酵母菌阳性的标本中,同时查见芽生孢子和假菌丝的有331例(60.2%);仅见芽生孢子未见假菌丝的有219例(39.8%);在这219例中,小孢子有34例,清洁度正常的有108例;清洁度异常的有111例。结论60.2%的病例同时查见芽生孢子和假菌丝的要给予及时治疗,39.8%的病例只见孢子未见菌丝的要结合孢子的形状、数量及患者的症状体征结合分析是带菌状态还是致病状态。     

荚膜组织胞浆菌的培养特征及临床意义

目的 建立荚膜组织胞浆菌病的病原学诊断及鉴别方法。方法 患者骨髓制片镜检并与黑热病骨髓片比较;患者的骨髓等接种梅里埃双相培养基（MLI）,脑心浸液培养基（BHIA）,沙保罗培养基（SDA）,玉米培养基（CMA）,25℃和35℃培养。将骨髓,外周血及荚膜组织胞浆菌酵母相制成的菌液腹腔接种昆明种小鼠和裸鼠。用其酵母相接种尿素酶,明胶培养基35℃培养。采用组织胞浆菌素皮下注射患者。结果 荚膜组织胞浆菌的胞浆中无动基体,尿素酶阳性,不液化明胶;25℃为菌丝相齿轮状大分子生孢子只能在SDA,CMA上形成;35℃为酵母相,只能在BHIA,MLI上生长,镜下可见酵母样孢子。昆明种小鼠和裸鼠的脾组织可培养分离出该菌,其与马尔尼菲青霉菌等双相型真菌的培养特征及生化反应有不同特点。结论 诊断荚膜组织胞浆菌病的金标准是真菌培养及动物接种,对可疑病人应做组织胞浆菌素皮肤试验;治疗时首选两性霉素B。     

痰细胞学涂片检菌对ICU肺部真菌感染的诊断意义

目的：探索痰细胞学涂片检菌对ICU肺部真菌感染诊断意义。方法38例76份痰标本在常规痰培养后,对剩余标本应用4倍体积的0.4%二硫苏糖醇进行液化,再行密度梯度离心,分离出痰中的细胞成分,对其进行涂片和革兰染色,观察涂片中细胞周围黏附有真菌菌丝及孢子的标本,以患者G试验阳性同时痰培养培养出真菌为标准,与其进行比较,分析其对ICU肺部真菌感染定性诊断的准确性;并对同一患者两种方法连续2次结果的一致性进行统计学分析。结果76份痰标本中真菌培养阳性17份,其中15份G试验阳性,4例患者2次标本培养结果一致（8份）,单次标本真菌培养阳性9份,59份无真菌生长;细胞学涂片检菌结果：有19份标本（在8例患者和3份单一标本）涂片中发现较多真菌菌丝及孢子黏附于细胞的表现;与标准相比总准确率为86.67%,经一致性检验,kappa＝0.785,两者没有显著性差异;在同一患者2个标本的一致性方面,细胞学涂片检菌方法：19份标本,16份是一致的,而常规真菌培养方法17份标本只有8份相一致,经卡方检验χ2＝4.09,P＜0.05,有明显统计学意义。结论痰细胞学涂片检菌对ICU肺部真菌感染能够准确地做出早期定性诊断。     

少见暗色真菌Pleurostomophora richardsiae引起脚部真菌感染1例

<正>暗色真菌是一类菌丝和(或)孢子含有黑褐色色素的真菌,普遍存在于自然环境中,以往常常被认为是污染菌,严重者可引起免疫缺陷或免疫健全的宿主中的侵袭性、致命性感染,故其临床意义不容忽视。近年来,少见致病暗色真菌引起的感染也日益增多。下面报道1例老年男性患者的诊疗经过,以期为同行提供参考。该例患者以“反复右下肢皮肤结节4年”入院,     

TTC－玉米吐温琼脂培养基用于酵母菌的鉴定

ＴＴＣ－玉米吐温琼脂培养基用于酵母菌的鉴定钱小毛，李明全（绍兴市第二医院，浙江绍兴３１２０００）关键词酵母菌，培养基ＴＴＣ还原、厚膜孢子和假菌丝产生均为酵母样真菌的重要鉴定试验，传统的方法需分别配制ＴＴＣ－沙保弱琼脂和玉米吐温８０琼脂平板，成本较高，...     

革兰染色在真菌菌丝鉴别中的价值

目的探讨痰涂片革兰染色在真菌的真假菌丝鉴别中的价值。方法对2016年1月—2017年6月天津市宝坻区中医医院门诊及住院患者的1718例痰液标本进行痰涂片革兰染色,之后对痰涂片上发现真菌菌丝的370例痰液标本进行常规的真菌培养鉴定,观察和记录结果,并进行相关性分析。结果 1718例痰液标本中,有318例发现革兰阳性假菌丝,52例发现革兰阴性菌丝,其他标本未发现真菌菌丝;对370例痰液标本的培养鉴定结果显示,318例革兰阳性假菌丝痰液标本生长的菌落均为假丝酵母菌,52例革兰阴性菌丝痰液标本生长的菌落均为曲霉菌。结论痰涂片革兰染色可作为真菌的真假菌丝鉴别方法之一。     

蜂胶克癣液治疗足癣疗效观察

资料与方法本组 86例 ,男 47例 ,女 3 9例 ;年龄 5～ 68岁 (平均 2 6 2岁 ) ,病程 1个月至 16年。发病部位单侧 10例 ,双侧 76例。鳞屑型 46例 ,糜烂型 13例 ,水疱型 8例 ,混合型 19例。患者均表现局部瘙痒、红肿、皮疹形成 ,有的可见鳞屑、渗出、皲裂或水疱。采取标本制片在显微镜下进行直接检查均发现真菌菌丝或孢子。药物配制与治疗方法 :将枸杞子 15 0ｇ放入玻璃容器内加入 70 %乙醇 10 0 0ｍｌ,浸泡、密封 7天。然后将枸杞子滤出弃去。将蜂胶 10 0ｇ置冰箱内冷冻 2 4小时 ,取出后用刀切碎 ,再放入枸杞子滤液中浸泡 2天 ,充分搅拌使之…     

12例慢性化脓性中耳炎分离西弗射盾子囊霉的鉴定特征分析

目的分析自慢性化脓性中耳炎患者中耳分泌物分离的西弗射盾子囊霉的实验室检查特征,为少见真菌的诊治提供依据。方法纳入西弗射盾子囊霉相关慢性化脓性中耳炎患者12例。培养其中耳分泌物,观察真菌的菌落特征和镜下特征,采用Vitek 2 Compact全自动微生物分析系统进行菌种鉴定。结果西弗射盾子囊霉在血平板、巧克力平板和沙氏平板等临床常用培养基上均可生长,且在28℃和35℃均生长较好。培养1周后菌落呈奶油色、镶嵌生长,质地硬,周边呈花边样。该菌在科玛嘉念珠菌显色培养基上为中央蓝色、边缘白色的凸起小菌落。镜下特征为孢子和菌丝同时可见,小培养观察时可见菌丝有分隔,真菌孢子呈芽生型、形态卵圆、部分可沿菌丝排列。西弗射盾子囊霉可同化利用许多碳水化合物和常见氨基酸。用Vitek 2 Compact全自动微生物分析系统可鉴定该菌。结论西弗射盾子囊霉是一种非常少见的机会致病性真菌,临床实验室应重视中耳分泌物中此真菌的培养鉴定。     

耳真菌病真菌菌种分布

1998年 2月至 2 0 0 1年 1月 ,对我院耳鼻咽喉科就诊的12 7例耳真菌病患者进行真菌学检查 ,结果报告如下。1　材料与方法1 1　标本来源　用无菌棉拭子在患者外耳道内、鼓膜穿孔者的鼓室腔内和乳突术后根治腔内取分泌物及痂皮立即送检。共 183份标本。1 2　方法1 2 1　真菌学检查　 183份分泌物直接涂片镜检 ,寻找真菌菌丝及孢子。1 2 2　真菌培养鉴定　标本接种于氯霉素沙保罗培养基 ,3 0℃培养 4 8～ 72ｈ ,生长菌落经涂片革兰染色证实为真菌后 ,用生化反应鉴定菌种。2　结果12 7例患者 183份标本中 ,10 6例的 15 7份培养出致病真菌 ,阳…     

外阴阴道念珠菌病患者白念珠菌分离情况及ERG5基因位点突变分析

目的 了解外阴阴道念珠菌病(VVC)患者白念珠菌分离及ERG5基因突变情况.方法 收集无锡市妇幼保健院2018年6—12月妇产科门诊VVC患者阴道分泌物500例,通过镜下观察菌丝及孢子选取可疑标本,经沙保弱琼脂平板增菌后接种科玛嘉显色平板,进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)鉴定;用真菌快速...     

艾滋病合并马尔尼菲青霉菌败血症的实验室诊断

目的探讨艾滋病合并马尔尼菲青霉菌败血症的病原体,马尔尼菲菏霉菌的分离和鉴定。方法取患者外周血、骨髓直接涂片染色镜检,同时做真菌培养,分别置25℃和37℃孵育,观察菌落形态和特征性的菌丝,并对血涂片及培养物涂片进行PAS染色。结果外周血和骨髓的血细胞内、外均可发现圆形、椭圆形或腊肠状且大小不一的孢子,约3～6μm。25℃培养为青霉相,沙保罗培养48h后产生特征性的红色可溶性色素,镜下可见典型的扫帚状菌丝;37℃培养为酵母相,无色素产生,镜下可见形似腊肠的酵母样孢子。PAS染色可见菌体胞壁染红色,清晰连续,内容物不埸着色,呈腊肠状菌体内可见一明显的横隔。结论本致病菌为双相菌,根据分离出细菌典型的扫帚状菌丝、红色可溶性色素,PAS染色特点,可以排除夹膜组织胞浆菌,鉴定为马尔尼菲青霉菌。     

DiaSys FE-2粪便分析工作站粪便处理液对检验结果的影响

DiaSys FE-2操作是按FE-2工作站法，粪便浓缩液制备是加粪便处理液10％甲酶生理盐水27ml和0．8ml分析纯乙酸乙酯通过检测千余例标本，我们发现某些明显血便、粘液使经浓缩制备后，所有红白细胞都溶解了，阳性率反而比直接涂片镜检降低厂．我们取明显血便、粘液便．含有寄生虫卵和真菌菌丝孢子的大便经粪便处理液处理后用分析工作站稳测。同时直接涂片镜检并拍照抓图，检测结果进行对比分析．现报道如下：