建立大鼠肝移植模型

目的 研究大鼠原位肝移植模型的手术技巧及术后并发症的预防及处理。方法 通过Kamada“二袖套法”,并作了相应的改进,施行大鼠原位肝移植。结果 总共施行大鼠原位肝移植160对。前期手术120对,48 h存活率46.7%。后期手术40对,48 h存活率95%。结论 熟练的显微外科技术和细心轻柔的操作是模型成功与否的关键。     

"二袖套法"制备大鼠原位肝移植模型的方法改进

目的在Kamada "二袖套法"的基础上对大鼠肝移植手术方法进行改进,提高大鼠肝移植模型的稳定性和动物存活率.方法在Kamada"二袖套法"大鼠肝移植基础上对供肝切取、受体手术及术中管理进行改进行大鼠肝移植60例,Kamada"二袖套法"行大鼠肝移植20例.比较两组大鼠肝移植术后并发症的发生率和1周生存率.结果在Kamada"二袖套法"基础上改进的肝移植大鼠并发症发生率较少,1周存活率91.7%,经典Kamada"二袖套法"肝移植大鼠1周存活率70%.结论改进的大鼠原位肝移植术操作简便,手术成功率高,模型稳定性好.     

大鼠肝移植模型的建立及排斥品系的选择

目的探讨大鼠原位肝移植手术技巧及排斥反应品系的选择。方法封闭群SD、Wistar大鼠各30只,近交系Lewis,BN大鼠各30只。通过改良双袖套法行原位肝移植,分别于术后第7 d、30 d取肝组织行病理检查,观察手术成功率、并发症和术后生存率。结果封闭群SD→Wistar大鼠48 h、1个月存活率为93.3%和89.2%;近交系Lewis→BN大鼠48 h存活率为90.0%,并于术后11 d内全部死亡。病理组织学结果示封闭群肝组织排斥反应明显轻于近交系。结论熟练的显微外科技术是模型成功的关键。SD→Wistar大鼠出现自然耐受;Lewis→BN是较理想的大鼠肝移植急性排斥反应模型。     

大鼠原位肝移植模型不同术式改进的研究

目的比较两种改进后大鼠原位肝移植模型建立的优缺点.方法对三套袖法的修肝技术及套管制作进行改进,实施大鼠原位肝移植30例,采用改进的缝合法实施大鼠原位肝移植70例.结果三袖套法手术成功率80%,1周存活率8%,缝合法手术成功率90%,1周存活率72%.结论改进后的三袖套法虽然明显缩短手术时间及无肝期,但手术后并发症多,缺乏实际应用价值,改进后的缝合法是建立稳定大鼠肝移植模型的有效方法.     

经门静脉灌注法大鼠自体原位肝移植模型的建立

目的 为降低大鼠自体肝移植的手术难度,寻找一种既能体现肝移植过程又具有高存活率的大鼠自体原位肝移植模型.方法 采用30只SD大鼠建立此模型,经门静脉灌注法灌肝,观察其灌注效果、手术时间及术后存活情况,并于术后24 h取移植肝行光镜观察.结果 本模型灌注方法简单,手术操作时间(48±3.0) min,手术成功率为96.7%(29/30),术后24 h光镜下见肝组织细胞结构多无明显变化,少数肝细胞发生水肿变性,小叶间动脉偶见红细胞残留.结论 经门静脉灌注法大鼠自体原位肝移植的阻断方式专一,术后存活率高,并且避免了免疫排斥的干扰,可以较独立地反映肝脏缺血再灌注过程; 但由于肝动脉未予充分灌注,此模型更适合于非吻合肝动脉和与肝动脉作用无关的肝移植研究.     

改良单人操作"双袖套法"建立大鼠原位肝移植模型

目的 探讨单人操作高效、稳定地建立大鼠原位肝移植模型的技术改进.方法 参照Kamada"二袖套"法,主要对供肝的灌注、切取、修整和受体缝合等进行改良,分别用传统方法(简称对照组)与改良后的方法(简称为实验组)行大鼠原位肝移植80例,比较两组间成功率及1周、1月的存活率.结果 实验组与对照组比较,实验组在供体手术时间、受体手术时间、无肝期时间均较对照组明显缩短(P<0.05),其在1周存活率、1月存活率均较对照组明显提高(P<0.05).结论 该方法能有效的缩短供、受体手术时间,提高了供肝质量,明显提高了受体存活率,是一种稳定、可靠、有效的建立大鼠肝移植动物模型的方法.     

二袖套法大鼠原位肝移植手术方法的改进

目的：通过对二袖套法大鼠原位肝移植手术方法进行改进，提高大鼠肝移植动物模型的稳定性。方法：采用改良的二袖套法施行大鼠原位肝移植动物实验110例，观察术后并发症及24h、一周存活率。结果：袖套准备时间5—9min，24h存活率91．8％(101／110)，一周存活率为87．3％(96／110)。结论:改进的大鼠原位肝移植术操作简便，手术成功率高，重复性好，提高了大鼠肝移植动物模型的稳定性。     

大鼠原位肝移植的手术技巧

目的总结大鼠肝移植的手术技巧,提高大鼠肝移植模型的稳定性。方法施行改良的两套管法大鼠肝移植90例．分析手术技巧对大鼠肝移植术后并发症。术后48h和术后1周生存率的影响。结果供体手术时间25min,套管准备时间10min．供肝与4C的乳酸林格式液中保存6h,受体手术时间40min;48小时存活率为94．4％,1周存活率90．3％。结论对现有的大鼠肝移植模型进行有效的改良,能很好提高模型的成功率和稳定性。     

改良"二袖套法"制备大鼠原位肝移植动物模型

目的：介绍改进的“二袖套法”法大鼠原位肝移植动物模型。方法：采用改进的“二袖套”法进行110只大鼠原位肝移植。结果：切取供肝时间平均37min，修肝时间平均13min，无肝期平均14min，术中和术后4h内死亡8只，手术成功率达93%。术后1周死亡11只，1周存活率为89%，主要死亡原因为感染和胆道梗阻。结论：改进的“二袖套”法大鼠原位肝移植具有无肝期短、手术成功率高，大鼠术后存活时间长的优点，是大鼠原位肝移植的理想术式。     

不同术式大鼠原位肝移植模型的比较

目的比较二种不同术式大鼠原位肝移植模型的优劣,建立一种稳定的大鼠肝移植模型。方法采用二袖套法完成大鼠原位肝移植40例,采用三袖套法施行大鼠原位肝移植20例。结果二袖套法手术成功率为92．5％（37／40）,1周存活率为89．2％（33／37）。三袖套法手术成功率为85％（17／20）,1周存活率为11．8％（2／17）。结论大鼠原位肝移植二袖套法较三袖套法远期存活率高,并发症少,是一种稳定可靠的大鼠肝移植模型。     

20%小体积的大鼠肝脏移植模型

目的 应用显微外科技术建立20%小体积移植物的大鼠原位肝脏移植模型.方法 原位移植建立20%小体积大鼠肝脏移植模型.雄性Lewis大鼠40只,供体20只,受体20只.供肝经门静脉用4℃ UW液灌注.肝上下腔静脉用端端吻合连续缝合的方法.肝下下腔静脉和门静脉分别用套管方法固定.套叠缝合法重建肝动脉.胆管重建采用内支架管端端连接的方法.观察移植物的存活率.免疫组化检测肝细胞摄取溴脱氧尿核苷的情况.结果 共施行肝脏移植手术20例,移植手术成功率为100%.20%小体积肝脏移植物的存活率为93.8%(＞14 d).组织学检查移植后的肝脏组织结构良好.移植术后72 h溴脱氧尿核苷染色阳性的肝细胞计数明显增多.结论 20%小体积大鼠肝脏移植物可启动完成移植后的肝脏再生.显微外科技术是移植模型成功的关键.该模型稳定性强,适合于部分肝脏移植领域的基础研究.     

大鼠原位肝移植制作过程中常见失败原因分析及处理策略

目的：分析大鼠位肝移植制作过程中常见失败原因及总结相应的处理策略。
方法：历时10个月,采用改良Kamada二袖套法制作大鼠原位肝移植模型150例。将每完成50例作为1个实验阶段,分早、中、后期3个阶段对失败原因进行分析,总结经验。
结果：大鼠原位肝移植常见失败原因在早期阶段主要以气胸（5.8%）,术中出血（10.6%）,无肝期过长（50.4%）为主;中、后期主要以肝上下腔静脉吻合失败（21.0%）,无肝期过长（20.6%）,门静脉及肝下下腔静脉袖套吻合失败（17.6%）,胆管重建失败（5.6%）为主。
结论：导致大鼠原位肝移植模型制作失败的原因较多,无肝期是影响成功与否的关键,及时地对失败原因进行分析总结并寻找合理的解决办法,有助于初学者熟练地掌握该技术。     

大鼠心脏停搏供体肝移植的实验研究

目的 探讨大鼠原位肝移植过程中,供肝可能耐受心脏停搏热缺血损伤的时间极限,方法 雄性SD大鼠,以供肝获取前供体大鼠经历心脏停搏时间0、15、30、45、60min分为5组（HB组、N-15组、N-30组、N-45组和N-60组）,而后行大鼠原位肝移植,比较各组的术后肝功能、肝脏病理和存活率。结果 HB、N-15、N-30、N-45和N-60的大鼠肝移植术后1周存活率分别为：100%（8/8）、75%（6/8）、62.5%(5/8)、25%（2/8）和0%（0/8）。其中HB、N-15、N-30组和N-45组的大鼠肝移植最长存活时间超过30d。结论 大鼠供肝对于热缺血损伤的时间应越短越好,但耐受30min心脏停搏热缺血损伤时,仍可使1周存活率达62.5%,极限时间为45min。     

大鼠原位肝移植模型手术并发症的分析

目的分析大鼠原位肝移植模型建立中手术并发症的发生原因,以制订防治措施,提高移植成功率。方法用SD大鼠作为供、受鼠,在Kamada等的袖套法大鼠肝移植模型的基础上改进,施行原位肝移植70例,对预实验中并发症的发生情况进行统计,统计在实验中的并发症发生率,并进行对比分析。结果预实验30只大鼠并发症发生率为70％,显著高于正式实验（12．5％）（P〈0．05）。结论实验中发现并及时总结并发症的发生情况,通过改进手术方法和技巧,可显著提高正式实验的手术成功率及大鼠存活率。     

Development of an orthotopic hepatic transplantation technique in rats: what should the researcher's objectives be?

The development of liver transplantation in man emphasises the need for more work in the field of experimental liver transplantation. For this purpose the model of orthotopic liver transplantation in the rat is very useful but difficult to establish as a safe and reproducible technique. The aim of this study concerning acquisition of the orthotopic liver transplantation model in the rat was to define precise objectives for future investigators. Two investigators without experience in microsurgery each performed 75 orthotopic liver transplantations, which were divided into five consecutive series. In each series survival times of the recipients after transplantation were analysed according to the mean duration of the operative procedure and the mean portal vein clamping time. For each investigator, mean duration of the operative procedure progressively decreased to reach a minimum at the 45th graft. From that time on, the portal vein clamping time became less than 17 minutes and a significant increase in the post operative survival time of the recipient was observed. However it was only from the sixtieth transplantation on, with stable portal vein clamping time but technical mistakes fewer that a high success rate was observed.     

大鼠心跳停搏供肝在原位肝移植术中损伤的预防

目的：探讨预防和减轻大鼠心跳停搏供肝在原位肝移植术中的损伤，以提高手术成功率。方法：雄性SD大鼠随机分为心跳停搏热缺血30min(N-30)和45min(N-45)两组;，每组分别行原位肝移植术30只次。同时，根据是否对供体手术方法进行改进又分为常规组和改良组。结果：(1)常规组和改良组的冷缺血时间分别为(70.04±1.48)和(70.36±1.42)min(P>0.05)，无肝期均为(16.40±0.73)min，肝下下腔静脉阻断时间均为(22.75±1.16)min，受体手术时间均为(90.58±3.76)min。(2)N-30和N-45常规组分别有5和9只受体术后死于原发性移植肝无功能，而改良组仅为1和2只(40%∶12%,P<0.05);(3)N-30和N-45组因术中分别出现供肝损伤致再灌注后供肝大量渗血、无肝期过长、切除受体肝脏时麻醉过深，而各有5和7，2和1，2和2只受体术后死亡。(4)N-30和N-45组术后1周存活率分别为50%和30%(P<0.05)。结论：预防心跳停搏供肝游离时损伤、供肝再灌注后渗血、无肝期过长和切除受体肝脏时麻醉过深是大鼠心跳停搏供肝原位肝移植手术成功的关键。     

经升主动脉灌注的无心跳供体大鼠原位肝移植模型的建立

目的 探讨建立一个能灌注更彻底、更易操作、热缺血时间容易控制的原位肝移植动物模型。方法 在Kamada两袖套法的基础上进行改良，供体经升主动脉进行冷灌注，肝上下腔静脉用缝合法吻合，门静脉和肝下下腔静脉用袖套法吻合，胆总管采用胆管内支架端端吻合的方法。建立无心跳供体的大鼠原位肝移植模型。结果 40例移植后1d大鼠存活率为95．0％(38／40)，1周存活率为85．5％(35／40)。结论 经升主动脉灌注的供肝灌注更彻底、均匀，更易操作，热缺血时间控制更精准，行肝移植后1周存活率较文献报道高。     

猪原位肝移植术中体外静脉转流途径的实验研究

目的　探讨猪原位肝移植手术中体外静脉转流的应用及不同转流途径对血流动力学的影响。方法　选择50只健康家猪按体重接近原则配对分为供体组与受体组进行 2 5例原位肝移植手术 ,受体组无肝期采用不同体外静脉转流途径 ,其中A组 (1 6只 )经门静脉插管 ,B组 (9只 )经脾静脉插管。术中连续监测A、B两组动物的血流动力学变化。结果　术后 2 4h ,A组存活 1 4只 ,B组 9只全部存活。A组血流动力学在无肝期开始及结束时均出现明显波动 ,平均动脉压和中心静脉压下降 ,心率上升 ;B组在整个无肝期内血流动力学保持平稳 ,两组间比较差异有显著性意义 (P<0 .0 5)。结论　猪原位肝移植术中应用体外静脉转流 ,有利于维持血流动力学稳定 ,而经脾静脉插管转流较经门静脉插管转流具有更大的优越性