Haemontics215型血液处理机与手工处理的效果比较200051上海市血液中心

目的观察手工法和全自动机器制备冰冻、解冻红细胞在冰冻、融化、洗涤后的质控指标,比较两种方法对红细胞保存效果的差异。方法各取12例保养液为输血用复方枸橼酸钠注射液(ACD-B)的全血,于采血后6d内离心制成红细胞制剂,使用手工和全自动机器直接滴入红细胞低温保护剂,-80℃冰冻保存数日后取出融化,再分别使用手工和全自动机器进行洗涤。于融化后即刻以及洗涤后即刻分别取样测定红细胞回收率、游离血红蛋白。结果与手工法相比,使用全自动机器保存、洗涤的冰冻红细胞,其红细胞回收率明显升高,游离血红蛋白明显减少。结论使用全自动机器保存、洗涤红细胞的效果好、保存时间长、洗涤时间短,完全可以替代手工方法。     

Haemontics215型血液处理机与手工处理的效果比较

目的观察手工法和全自动机器制备冰冻、解冻红细胞在冰冻、融化、洗涤后的质控指标,比较两种方法对红细胞保存效果的差异。方法各取12例保养液为输血用复方枸橼酸钠注射液（ACD—B）的全血,于采血后6d内离心制成红细胞制剂,使用手工和全自动机器直接滴入红细胞低温保护剂,-80℃冰冻保存数日后取出融化,再分别使用手工和全自动机器进行洗涤。于融化后即刻以及洗涤后即刻分别取样测定红细胞回收率、游离血红蛋白。结果与手工法相比,使用全自动机器保存、洗涤的冰冻红细胞,其红细胞回收率明显升高,游离血红蛋白明显减少。结论使用全自动机器保存、洗涤红细胞的效果好、保存时间长、洗涤时间短,完全可以替代手工方法。     

冰冻保存Rh阴性稀有血液方法的建立

目的探索一种甘油化冰冻保存Rh阴性红细胞制备、融化及洗涤等环节的可行性方法。方法取22袋(1U/袋)Rh阴性全血,在制备甘油化红细胞时,采用电子摇摆秤和输血器自动控制法代替手工摇摆法控制甘油流速和流量;37℃～42℃水浴融化后,在洗涤Rh阴性冰冻红细胞时,采用9%氯化钠(NaCl)高渗溶液平衡后,再用0.9%NaCl等渗溶液洗涤二次,并计算红细胞的回收率及其相关指控指标。结果冰冻红细胞的回收率为(87.52±2.31)%,而甘油残余量、上清液游离血红蛋白(Hb)含量及体外溶血率分别为(6.76±2.38)g/L、(0.73±0.05)g/L及(9.78±1.85)%。结论采用上述简化方法制备、融化及洗涤冰冻红细胞,不仅缩短了时间,而且获得较满意的红细胞回收率,其他相关质控指标也均符合国家标准。     

全自动血液处理机洗涤低温保存1年的红细胞的质量跟踪

目的 观察经Haemontics 215型全自动机器洗涤低温保存1年的红细胞在冰冻、融化、洗涤后的各项质控指标,以评价全自动血液处理机在红细胞保存、洗涤中的作用以及红细胞较长时间低温保存的可行性。方 法取6例保养液为输血用复方枸橼酸钠注射液（ACD-B）的全血,于采血后6d内离心压去血浆制成浓缩红细胞,用215型血液处理机滴入低温保护剂,于室温静置20～30min后轻离心压去上清多余甘油后快速冰冻,再移入65℃冰箱冰冻保存。1年后取出融化,使用Haemontics215型全自动血液处理机进行梯度洗涤。于融化后以及洗涤后分别取样浏定有关质控指标,并于3、6、12、24、48和72h测定游离血红蛋白值和体外溶血值。结果 使用Haemonfics215型全自动血液处理机洗涤低温保存1年的红细胞,其各项指标直至72h全部符合国家规定,无菌实验为阴性。结论 使用Haemontlcs215型全自动血液处理机器保存、洗涤红细胞的效果好、保存时间长,洗涤时间短,完全可以在日常工作中使用。     

温度对冰冻红细胞保存的影响

目的观察不同温度条件下红细胞在冰冻、融化、洗涤后的质控指标,分析不同的保存、融化温度对红细胞的影响.方法各取20袋保养液为输血用复方枸橼酸钠抗凝剂(ACD-B)的全血,于采血后6 d内离心制成红细胞悬液,直接滴入(红细胞表面温度在5℃～10℃)红细胞低温保护剂或将红细胞和保护剂在37℃水浴后(红细胞表面温度20℃～22℃)再保存,-80℃冰冻保存数日后取出融化、洗涤.分别于融化后以及洗涤后立即取样测定红细胞回收率、游离血红蛋白.结果与未经加温而直接保存的红细胞相比,37℃水浴后的冰冻红细胞,融化洗涤后的红细胞回收率明显升高,游离血红蛋白明显减少.结论红细胞及低温保护剂经过37℃水浴后能更好地冰冻保存红细胞.但由于操作条件的限制,红细胞融化、洗涤后必须24 h内输注.     

MAP保存液对冻融红细胞的保护作用

低温生物学原理应用于血液(红细胞)保存,可大幅度延长红细胞体外存活时间和存活率。用甘油作为低温保护剂冰冻保存红细胞可以追溯到1950年,自20世纪70年代Meryman将甘油保存红细胞用于人体输血首获成功以来,冷冻血液逐渐在临床输血治疗学中得到推广。由于甘油保存及洗涤过程中会导致溶血,保存过程中也会发生溶血。本血液中心研究改进了冰冻解冻红细胞制备技术,同时对不同红细胞悬液保存红细胞的质量进行初步比较,现报告如下。     

MAP洗涤红细胞再冰冻的实验研究

目的对红细胞洗涤后冰冻保存的安全性探讨。方法选择20袋(2u/袋)悬浮红细胞,每袋分成2份(1u/份)为实验组和对照组,实验组制备成M AP洗涤红细胞后再冰冻保存;对照组直接制备成冰冻红细胞,一周后实验组和对照组用同等方法进行去甘油解冻,并计算红细胞的回收率及其相关质控指标。结果实验组和对照组冰冻红细胞回收率,甘油残余量,上清液游离血红蛋白含量及体外溶血率比较无显著性差异(P>0.05),两组成品无菌试验均阴性。结论M AP洗涤红细胞制备成冰冻红细胞,各项质量指标符合国家标准,能应用于临床,因而有效解决临床备用洗涤红细胞剩余而造成的血液浪费。     

红细胞深低温长期保存效果的探讨

目的对红细胞在深低温(-70±5)℃下保存7年的效果评估。方法采用ACD-B抗凝全血制备浓缩红细胞,加入冷冻保护剂(-70±5)℃保存;快速解冻后,用Haemontics215型全自动血液处理机洗涤去甘油;检测洗涤后的红细胞制剂的红细胞回收率、残余白细胞、血小板、游离血红蛋白、体外溶血情况以及甘油残留含量。结果各项指标均能符合国家规定的质量标准。结论用甘油深低温长期保存红细胞是一种安全、有效的方法。     

深低温长期保存红细胞的效果评价

目的 对红细胞在深低温(-70±5)℃下保存12年的效果进行评价.方法 采用ACD-B抗凝全血制备浓缩红细胞,加入冰冻保护剂于(-70±5)℃保存12年.快速解冻后,用Haemonetics215型全自动血液处理机洗涤去甘油.洗涤后制备成红细胞悬液,检测其中的红细胞回收率、残余白细胞、残余血小板、甘油残留含量、游离血红蛋白含量,并进行ATP、2,3-DPG的检测.结果 红细胞在深低温保存12年复苏去甘油后除红细胞回收率(71.40％)略低外,其它各项指标均符合中华人民共和国国家标准.深低温保存12年后的红细胞与新鲜红细胞相比,2,3-DPG含量没有显著性差异,ATP含量下降为新鲜红细胞67.2％.结论 用含甘油的冰冻保护剂深低温长期保存红细胞是一种安全、有效的方法.     

不同程度乳糜血制备洗涤红细胞的保存期中溶血率的初步分析

目的探讨不同程度乳糜血制备的红细胞保存液(MAP)混悬洗涤红细胞在保存期内的溶血率。方法将MAP混悬洗涤红细胞分对照、轻、中、重度乳糜血在2—6℃保存后测定其储存期末溶血率,并分别在储存期的d2、d7、d14、d21、d28、d30、d35取样检测红细胞的溶血率。结果 MAP混悬洗涤红细胞对照组、轻、中、重度乳糜组的储存期末溶血率分别为:(0. 156±0. 027)%、(0. 174±0. 049)%、(0. 271±0. 066)%、(0. 463±0. 127)%。MAP混悬洗涤红细胞乳糜程度不同,不同储存期红细胞溶血率均差异显著(P<0. 05)。结论在保存期内,使用轻中度乳糜血制备的MAP混悬洗涤红细胞质量控制指标符合国家标准要求。     

深低温长期保存方法延缓红细胞衰老的研究

目的 探讨红细胞在深低温(-70±5)℃下保存对延缓红细胞老化的影响.方法 采用ACD-B抗凝全血制备浓缩红细胞,加入冰冻保护剂于(-70土5)℃保存12年.快速解冻后,用Haemontics215型全自动血液处理机洗涤去甘油.洗涤后制备成红细胞悬液,检测红细胞表面CD47、磷脂酰丝氨酸(PS)含量和红细胞表面抗原,并在扫描电镜下观测红细胞形态.结果 各项指标显示,红细胞保存效果良好,深低温保存可延缓红细胞的衰老速率.结论 用含甘油的冰冻保护剂深低温长期保存红细胞是一种安全、有效的方法.     

全自动快速密闭洗涤法在红细胞血型改造中的应用

目的：探讨用全自动密闭洗涤系统对血型改造的红细胞（改型红细胞）进行洗涤,以延长改型红细胞的保存期并提高其制品质量的可行性。方法：用美国血液技术公司生产的Haemonetics全自动血细胞洗涤系统洗涤改型红细胞,考察洗涤后和保存不同时间细胞膜的结构和功能。检测项目包括溶血指标、K^＋、Na^＋、乙酰胆碱酯酶、胆固醇、ATP、红细胞的回收率和细菌培养等。结果：与常规洗涤法相比,全自动密闭洗涤法在红细胞的回收率、细菌培养结果和红细胞的长期保存指标上有明显的优势（P〈0．05）。结论：全自动快速密闭洗涤法用于改型红细胞洗涤比常规洗涤法更安全、快速、有效,并可延长改型后的红细胞保存期。     

冰冻红细胞制备过程中若干问题探讨

目的　为简化冰冻红细胞的制备程序 ,保证临床及时用血。方法　比较不同条件制备的成品冰冻红细胞的红细胞回收率、溶血率、上清游离血红蛋白及体外溶血试验。结果　红细胞冰冻前在 4℃贮存 1～ 6d与 7～1 2d、甘油化红细胞先冰冻待解冻后再去甘油与先去甘油再冰冻、洗涤时加不同量的 9%氯化钠溶液所制备的成品冰冻红细胞的红细胞回收率、溶血率、上清游离血红蛋白及体外溶血试验均无显著性差异 ,缓慢匀速加甘油与快速加甘油中间静置平衡使红细胞甘油化后甘油中血红蛋白含量有显著性差异 ,前者高于后者。结论　上述条件的改变可简化冰冻红细胞的制备程序且不影响冰冻红细胞的质量     

ACP215处理机制备冰冻解冻去甘油红细胞与手工制备的对比研究

目的观察ACP215血细胞处理机洗涤制备冰冻解冻去甘油红细胞与手工洗涤制备的效果,并对其检测结果进行初步分析。方法采用48袋Rh（D）阴性全血,先甘油化冰冻保存,后解冻将其随机等分成2组,实验组采用ACP215血细胞处理机洗涤制备冰冻解冻去甘油红细胞,对照组采用手工开放式洗涤法进行制备。按照相关标准分别对实验组和对照组的红细胞回收率、游离血红蛋白含量、甘油含量、残留白细胞、体外溶血试验进行检测分析。结果实验组的红细胞回收率明显高于对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）,实验组的甘油含量、残留白细胞均低于对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）。但是两种方法制备产品中游离血红蛋白含量、体外溶血试验的差异无统计学意义（P〉0.05）。结论用ACP215血细胞处理机洗涤制备冰冻解冻去甘油红细胞操作简单易行,安全可靠,省时、省力,且产品质量均符合国家标准,有实际应用价值,值得推广。     

深低温保存Rh阴性血液的质量控制

目的　确保深低温保存Rh阴性红细胞解冻后的质量。方法取ACD抗凝 ,4℃保存 6d内Rh阴性红细胞悬液或全血离心除去添加剂或血浆的浓缩红细胞 ,将红细胞经 (4 0 % )浓度甘油处理后 ,置 - 80℃冰冻保存。临床需要时 37℃水浴解冻复苏红细胞 ,依次用 9%NaCl羟乙基淀粉溶液 ,0 .9%NaCl羟乙基淀粉溶液 ,0 .9%NaCl各洗涤 1次。用生理盐水羟乙基淀粉溶液悬浮红细胞。结果 35袋冰冻解冻红细胞去甘油后红细胞回收率为(81 .1 7± 1 8.5 ) % ,游离血红蛋白为 (0 .6 3± 0 .1 6 ) g/L ,甘油残留量平均为 5 .3g/L ,体外溶血试验血红蛋白增加率为2 5 .1 9%。结论冰冻解冻去甘油红细胞各项指标均达到了国家规定的质量标准 ,临床输用效果良好     

深低温保存血小板的功能变化及新特性的研究

目的明确血小板冰冻保存后功能指标的变化并对冰冻血小板新亚群的产生和其新特性进行初步探讨。方法对冰冻保存前后的单采血小板进行回收率、黏附率、聚集强度和血小板第3因子(PF3)活性进行检测,同时采用流式细胞术比较分析不同保存条件下单采血小板膜表面功能分子表达变化的差异。结果冰冻保存后的回收率(%)为70.94±15.48,黏附率(%)为34.03±10.07,聚集强度(%)为53.82±12.73,PF3活性为(17.81±1.68)s。冰冻血小板CD62p再表达率(%)为51.8±7.7,根据表达和再表达CD62p能力不同可分为三个亚群,新鲜血小板CD62p再表达率(%)为98.4±0.6。结论冰冻保存后的单采血小板仍具有良好的功能活性,且血小板通过冰冻保存后产生了新亚群。新亚群膜表面功能分子的变化可能与即刻止血功能增强有关。     

四氢嘧啶对人冰冻红细胞质量影响的初步研究

目的通过在红细胞深低温冰冻的冻存液中添加渗透压调节物-四氢嘧啶(ectoine),检测红细胞冰冻前后的质量,探讨ectoine用于深低温冰冻红细胞的可能性,为ectoine可用于红细胞深低温冰冻的研究提供实验依据。方法取悬浮红细胞样品8袋,每袋分为对照组(复方甘油组、甘油组)和实验组(1.5%ectoine甘油组、3%ectoine甘油组和4.5%ectoine甘油组)共5组。实验组:ectoine起始浓度为1.5%、3%与4.5%(W/V)(加红细胞后终浓度为1.05%、2.10%与3.15%)。将5组(2组对照组与3组实验组)冻存液分别加入红细胞,红细胞冰冻后解冻并洗涤。测定冰冻前(未加冻存液)及解冻洗涤后红细胞数、血红蛋白量、红细胞变形性、渗透脆性,并用电镜扫描,观察红细胞显微形态。结果与2组对照组相比,3%ectoine甘油组红细胞回收率最高(89.26±2.60)%(P0.05);3%ectoine甘油组解冻洗涤的红细胞与冰冻前红细胞,在50~(-1)、100~(-1)、200~(-1)和1 000~(-1)的剪切率值上相比P0.05,差异无统计学意义;1.5%ectoine甘油组解冻洗涤的红细胞,50%溶血率时氯化钠浓度为(4.57±0.08)g/L,3%ectoine甘油组(4.80±0.17)g/L,2组分别与复方甘油组(4.98±0.26)g/L相比P0.05,差异具有统计学意义;电镜扫描显示3组实验组红细胞与复方甘油组红细胞解冻洗涤后,均无棘状和球形红细胞,甘油组可见破膜、皱缩的红细胞。结论3%Ectoine作为渗透压调节物用于冰冻红细胞,可用于高浓度甘油冰冻红细胞时作为渗透压调节物,相对于3%乳酸钠的复方甘油(商品化复方甘油),可提高解冻洗涤的红细胞回收率,改善解冻洗涤的红细胞质量,具有在深低温冰冻红细胞的潜力。     

2组洗涤溶液制备冰冻解冻去甘油红细胞的效果比较

目的观察2组洗涤溶液制备冰冻解冻去甘油红细胞的结果,比较洗涤溶液组合中是否加入羟乙基淀粉20氯化钠溶液对洗涤结果的影响。方法取44份全血,应用ACP215血液处理仪制备成冰冻红细胞,分A组:9%NaCl溶液、羟乙基淀粉20氯化钠注射液、0.9%NaCl溶液;B组:9%NaCl溶液、0.9%NaCl溶液2种洗涤溶液进行解冻去甘油。对2组红细胞回收率、残留白细胞、残留血小板、甘油含量、游离血红蛋白含量、体外溶血等指标进行检测分析。结果 A组解冻红细胞的红细胞回收率(86.0±3.4)%、残留白细胞(0.57±0.18)%、残留血小板0、甘油含量(3.4±0.8)g/L、游离血红蛋白含量(0.55±0.14)g/L、体外溶血试验(12±5)%均符合国家标准,B组红细胞回收率(87.0±2.3)%、残留白细胞(0.51±0.24)%、残留血小板0、甘油含量(3.5±0.7)g/L、游离血红蛋白含量(0.47±0.10)g/L、体外溶血试验(10±4)%也符合国家标准,2组解冻红细胞制品也均符合AABB标准和欧洲标准中对于红细胞回收率的要求,2组结果差异无统计学意义,P>0.05。结论羟乙基淀粉20氯化钠注射液对使用ACP215血液处理仪制备冰冻解冻去甘油红细胞的洗涤效果无影响,但洗涤液中不加入羟乙基淀粉20氯化钠溶液,其制品质量符合国家标准、AABB标准和欧洲标准,更加经济、省时。     

洗涤红细胞保存期延长效果研究

目的探讨用红细胞保存液(MAP)保存洗涤红细胞,观察洗涤红细胞的保存期能否延长。方法去白细胞悬浮红细胞400ml(2U)20袋用0.9%Nacl生理盐水洗涤后,终产品分别用0.9%Nacl生理盐水和红细胞保存液(MAP)4℃保存。在不同时间段分别无菌留样,检测血红蛋白、上清蛋白质、溶血率、无菌试验。结果用红细胞保存液(MAP)保存洗涤红细胞,分别对制备后9、18、23、27d的血液样品进行检测,检测盐水组和MAP组血红蛋白含量的差异无统计学意义,结果上清蛋白质含量和溶血明显增加,无菌试验均(-),检测结果均符合国家要求,达到满意效果,可用于临床。结论在闭合无菌环境中制备且最后以红细胞保存液(MAP)混悬保存,洗涤红细胞保存期可适当延长。     

梯度浓度添加甘油提高冻融红细胞回收率的研究

目的针对传统冰冻红细胞技术的缺点进行改良,建立一种快速、简便、高回收率的红细胞冰冻方法并形成由低到高的浓度。方法采用从低到高的浓度顺序快速添加法,将甘油保护剂分成3份,总体积不变。比较改良方法与传统方法冷冻前及解冻后的红细胞回收率、游离血红蛋白和甘油残留量等指标。结果改良方法的红细胞回收率(87.44±3.4)%,游离血红蛋白(0.65±0.31)g/L,甘油残留量(4.20±0.75)g/L;传统方法的检测结果相应为(81.77±3.2)%,(0.58±0.23)g/L和(2.50±0.34)g/L。两种方法红细胞回收率的差异具有统计学意义(P0.05)。结论改良方法制备的红细胞,其各项指标均符合国家标准,且红细胞回收率比传统方法更高,红细胞质量得到进一步提高,对于保障输血安全、改善输血效果具有重要意义。