白藜芦醇三甲醚乳胶体外经皮渗透研究

目的制备白藜芦醇三甲醚(BTM)乳胶,考察载药量、促渗剂及其组合对BTM经皮渗透性的影响,评价药物透皮给药的可行性。方法以卡波姆940为凝胶基质制备BTM乳胶,选用改良Franz扩散池,以离体乳猪腹部皮肤为屏障进行体外经皮渗透实验,用HPLC-UV法测定各时间点接收室中药物浓度,计算经皮渗透动力学参数。结果载药量由1%增加到2%时,BTM 24 h单位面积渗透量增加1倍,2%与4%乳胶渗透量没有统计学差异(P>0.1)。促渗剂均可显著促进BTM透皮吸收,其透皮速率为:2%香叶醇>2%肉豆蔻酸异丙酯>2%油酸>2%氮酮>2%橙花叔醇>无促渗剂;香叶醇的浓度大小对BTM的透皮吸收无明显影响(P>0.05);与单用2%香叶醇相比,促渗剂联用(2%香叶醇+2%丙二醇、2%香叶醇+2%肉豆蔻酸异丙酯)未显示出显著协同促渗作用(P>0.05),而2%香叶醇+2%异丙醇则显示弱拮抗促渗作用(P<0.05)。结论常用促渗剂均能不同程度促进BTM经皮渗透,载药量为2%、促渗剂为2%香叶醇时,BTM体外透皮可达最大吸收。但BTM体外透皮吸收具有饱和性,该结果为BTM经皮给药研究提供了基础。     

白藜芦醇苷的HPLC法分析及其在苗猪体内的药代动力学研究

目的 :建立血浆中白藜芦醇苷的反相高效液相色谱分析方法 ,并对其在苗猪体内的药代动力学进行研究。方法 :采用HypersilODS色谱柱 (10 0mm× 2 1mm ,5 μm) ,甲醇 -水 (2 5∶75 )为流动相 ,流速 1 0mL·min-1,检测波长 2 90nm。结果 :方法平均回收率为 93 3 %～ 98 1% ,RSD <6 0 % ,线性范围 0 39～ 12 5 0mg·L-1(r =0 9947) ,最低检测浓度为 0 2 0mg·L-1。结论 :本试验首次建立了白藜芦醇苷血药浓度的HPLC测定方法 ,操作方便 ,结果准确 ,可用于该药的进一步临床药动学研究     

RP-HPLC法测定大剂量化疗时人血浆中甲氨喋呤浓度

目的建立大剂量化疗时人血浆中甲氨喋呤浓度的测定方法。方法采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)。色谱柱:μBondapakC18(4.6×150mm),柱温:35℃,流动相为甲醇∶(pH7.2)磷酸缓冲液(17∶83,v/v),流速:1.0ml·min-1,检测波长306nm。结果线性范围0.08～100μg·ml-1,线性关系良好,r=0.9999,最低检测浓度0.01μg·ml-1,回收率102.0%,日内及日间RSD均<5%。结论该方法简单快捷、灵敏度高、结果准确,适用于大剂量化疗时甲氨喋呤血药浓度监测。     

高效液相色谱法测定人血浆中磺胺甲噁唑质量浓度

目的建立检测人血浆中磺胺甲唑（SMZ）质量浓度的高效液相色谱法。方法血浆以10%三氯乙酸作为沉淀剂,以Symmetry C18柱（150mm×46mm,5μm）为色谱柱,以醋酸溶液（取冰醋酸1.5mL,加水500mL,用氨水调pH至6.38）-甲醇（66：34）为流动相,流速1.0mL/min,柱温35℃,检测波长223nm。结果血浆中SMZ质量浓度在1～50μg/mL范围内与峰面积线性关系良好,回归方程为Y=43104.13X-45765.92,r=0.9991（n=6）;平均回收率为99.22%,RSD=0.78%（n=6）。结论所用方法简单、快捷、灵敏、准确,可作为临床药代动力学及药效学研究方法。     

反相高效液相色谱法测定小鼠血清及脏器中白藜芦醇浓度

目的:建立以反相高效液相色谱(RP-HPLC)法快速测定小鼠血清及部分脏器匀浆中白藜芦醇浓度的方法。方法:分析柱为Kromasil C18,流动相为甲醇-水(48∶52),流速为1ml/min,柱温为室温,柱压为12kPa,检测波长为303nm,进样量为20μl。结果:白藜芦醇检测浓度线性范围为0·25~25μg/ml,最低检测浓度为0·1μg/ml(S/N=3);各样品平均绝对回收率大于88%,方法回收率为96%~100%,相对标准差小于10%。结论:本方法经济、可靠、简单、快速,可为白藜芦醇血药浓度分析及动物体内分布研究提供参考。     

大鼠一次性灌服虎杖提取物后白藜芦醇血浓度测定方法的研究

目的 :研究大鼠血浆中白藜芦醇含量的测定方法。方法 :采用液 -液萃取反相高效液相色谱梯度洗脱法对大鼠血浆样品中的白藜芦醇含量进行测定。结果 :因为血浆中白藜芦醇在 0 .0 0 35～1.4 0 0mg·L-1线性范围内关系良好 (r =0 .9998) ,最低定量限为 0 .0 35mg·L-1;低、中、高三种浓度下的回收率、日内及日间精密度均符合方法学要求。故用本法测定大鼠一次性灌服虎杖提取物后白藜芦醇的血药浓度并计算药代动力学参数 ,半衰期t1 2 =11.5min ,达峰时间tmax=10 .0min ,达峰浓度Cmax=1.93mg·L-1。结论 :本法符合生物样品分析要求 ,可用于体内白藜芦醇浓度测定     

UPLC法测定人血清中雷公藤甲素浓度

目的:建立测定人血清中雷公藤甲素浓度的方法。方法:采用超高效液相色谱法,内标为艾司唑仑。色谱柱为Waters Acquity C18柱,流动相为乙腈-水(30:70,V/V),流速为0.2ml/min,柱温为室温,检测波长为220nm,进样量为5μl。结果:雷公藤甲素血药浓度在13.13～840.00ng/ml范围内同雷公藤甲素与内标物峰面积比值线性关系良好;日内、日间RSD均<15%,方法回收率为88.25%～99.33%。结论:该方法快速、灵敏、准确,可用于雷公藤甲素的血药浓度监测和药动学研究。     

反相高效液相色谱法测定格列甲嗪血浆浓度

应用反相高效液相色谱法测定格列甲嗪血浆浓度。色谱柱为ＯＤＳＣ１８柱，流动相为乙腈─甲醇─水（４０：２０：４０Ｖ／Ｖ），内含０．１％冰醋酸和０．０８％三乙胺。流速０．５ｍｌ／ｍｉｎ，柱温５０℃，检测波长２７５ｎｍ。线性范围在０．０２～１．００μｇ／ｍｌ（ｒ＝０．９９９９）。检测下限为０．０１μｇ／ｍｌ。平均回收率为９９．０±２．８％，ＲＳＤ＝２．８２％。日内及日间测定相对标准偏差均小于５％。     

反相高效液相色谱法测定人血浆中二甲双胍质量浓度

目的建立测定人血浆中二甲双胍质量浓度的方法方法反相高效液相色谱（RP—HPLC）法。色谱柱为EclipseXDB—C8柱（150mm×4．6mm，5μm），以乙腈-甲醇-0．02mol／LKH2PO4。缓冲液（10：34：56，KH2PO4。缓冲液用磷酸调节pH值至3．4）为流动相，流速为1．0mL／min，柱温为室温，检测波长233nm。结果二甲双胍与内标（西咪替丁）的保留时间分别为5．14min和6．46min，二甲双胍检测质量浓度线性范围为17．68～1767．58ng／mL（r=0．9999），方法平均回收率大于94．51％，日内和日间精密度RSD〈8．22％，最低定量限为17．68ng／mL。结论RP—HPLC法操作简便，结果准确、灵敏，适用于二甲双胍血药浓度的测定和药代动力学研究。     

药物流产后孕妇血浆中米非司酮浓度的监测

目的:建立米非司酮血药浓度的测定方法,监测药物流产后孕妇血浆中米非司酮浓度的变化情况。方法:选择停经<49d以内,米非司酮配伍米索前列醇行药物流产的早孕妇女28例,于胎囊排出后24、48、72h时抽肘静脉血。血浆样品中米非司酮以正己烷、二氯甲烷的混合液提取后,采用HypersilODS色谱柱分离,流动相为甲醇-乙腈-水(42:28:30),流速为1.0mL.min-1,紫外检测波长为302nm。结果:米非司酮血药浓度在20～5000μg.L-1范围内线性关系良好(r=0.9983),血浆中米非司酮最低检出限为10.0μg.L-1;相对回收率在95.69%～102.25%之间;日内、日间RSD分别为2.82%～3.39%、3.19%～4.76%。28例孕妇在胎囊排出后24、48、72h时血浆中米非司酮浓度分别为(606.68±123.61)、(243.86±50.16)、(92.70±34.21)μg.L-1。结论:本方法操作简单、灵敏度高、实用性强,适合基层计划生育部门监测妊娠流产后孕妇血浆中米非司酮的浓度情况。     

高效液相色谱法测定兔组织中羟基喜树碱的浓度

目的:建立以高效液相色谱-紫外检测法测定兔组织中羟基喜树碱浓度的方法。方法:组织样品制成匀浆后,加入内标喜树碱,用甲醇-乙腈(1:1)沉淀离心后取上清液进行色谱分析。色谱柱:Lichrospher C18柱(250mm×4.6mm,5μm),C18预柱(10mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-0.075mol/L醋酸铵缓冲液(30:70);流速:1.0ml/min;检测波长:384nm;柱温:30℃。结果:羟基喜树碱保留时间为4.5min,内标喜树碱保留时间为10.0min,定量线性范围为40-1 600ng/ml。组织中羟基喜树碱高、中、低3种浓度的回收率范围为95.54％～107.58％,日内精密度≤7.70％,日间精密度≤6.69％。 结论:本法简便实用,定量准确,可满足羟基喜树碱药动学研究的需要。     

干扰素α脂质体凝胶剂的透皮吸收作用研究

目的探讨基因重组人干扰素α-2b脂质体凝胶剂经家兔皮肤给药后的吸收作用。方法给家兔皮肤分别涂抹干扰素α-2b脂质体凝胶（试验组）和干扰素α-2b凝胶（对照组），用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA法）检测干扰素含量，测定给药后不同时间内血浆中干扰素含量及24h后皮肤层中的干扰素含量。结果与对照组比较，试验组干扰素在家兔皮肤层中有较多的滞留量（P〈0．01）；两组家兔不同时间血浆中干扰素的含量均极微少（P〉0．05）。结论脂质体作为干扰素皮肤局部给药的载体，能够提高干扰素在皮肤中的含量，但并不增加进入血液循环的干扰素量。     

比色法测定兔血浆中甘露醇浓度

目的：建立血浆中甘露醇浓度的测定方法。方法：用三氯醋酸沉淀含甘露醇的血浆样品蛋白，血浆上清液中加入高碘酸钠后用Nash试剂显色，在405 nm波长处测定吸收度。结果：甘露醇在0.188～6.00 mg·mL 1范围内有良好的线性关系，r＝0.999 7(n＝6)，平均回收率为98.30%，RSD为1.89%(n＝3)。结论：该方法快速、简便，适用于甘露醇血药浓度测定及临床药动学研究。     

HPLC法测定人血浆中比阿培南的浓度及其药动学研究

目的:建立一种简便、快速测定人血浆中比阿培南浓度的方法,并考察其药动学。方法:血浆样品加入5-羟基吲哚乙酸20μL,经7%硫酸锌蛋白沉淀后进样测定,其中色谱柱为AgilentZorbaxBonus-RP,流动相为甲醇-0.3%醋酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0mL·min~(-1),紫外检测波长为300nm,进样量20μL。结果:30名健康受试者随机分为低、中、高3个剂量组单次静脉滴注,血浆中比阿培南的药动学参数分别为:t_(1/2)(1.13±0.16)、(1.06±0.10)、(1.11±0.12)h,t_(max)(1.02±0.21)、(1.10±0.31)、(1.05±0.27)h,c_(max)(9.04±4.24)、(17.64±4.55)、(35.10±4.23)μg·mL~(-1),AUC_(0～12h)(18.17±3.86)、(36.44±7.68)、(70.24±8.91)mg·h·L~(-1),AUC_(0～∞)(20.42±4.69)、(37.21±7.63)、(72.40±9.03)mg·h·L~(-1);多次给药的t_(1/2)、t_(max)、c_(max)、AUC_(0～12h)、AUC_(0～∞)分别为(1.07±1.35)h、(1.04±0.60)h、(19.61±3.68)μg·h~(-1)、(32.47±3.90)mg·h·L~(-1)、(33.36±3.80)mg·h·L~(-1)。结论:3个剂量组的药动学参数呈线性相关,各剂量组内、间无显著性个体差异,不同年龄、性别、身高、体重之间也无显著性个体差异。     

HPLC法测定人血浆中拉莫三嗪的浓度及其影响因素研究

目的:建立测定人血浆中拉莫三嗪(LTG)浓度的方法,分析LTG血药浓度的相关影响因素。方法:血浆样品以甲醇处理后采用高效液相色谱(HPLC)法进行测定,其中内标为氯霉素,流动相为乙腈-磷酸盐缓冲液(30∶70),色谱柱为Luna C18,流速为1ml/min,检测波长为306 nm。对收集的病例进行分组,应用逐步回归法分析影响LTG血药浓度的各类因素;应用相关分析法分析不同组别中的影响因素。结果:拉莫三嗪的血药浓度在0.5²0.0μg/ml范围内线性关系良好(r=0.999 5),最低检测限为0.5μg/ml;低、中、高3种质量浓度的平均方法回收率分别为(94.39±1.57)%、(95.57±2.22)%、(91.81±2.11)%;LTG血药浓度与LTG给药剂量、联用丙戊酸(VPA)呈正相关(r分别为0.641 7、2.568 0,P<0.05),与联用苯巴比妥(PB)呈负相关(r=-2.048 2,P<0.05);性别、年龄及体质量与其不存在显著的相关关系(P>0.05)。结论:本试验建立的HPLC法操作简便、快捷、回收率高、精密度好,适用于临床上常规监测LTG的血药浓度;LTG血药浓度可受LTG给药剂量、联合应用VPA及PB等因素的影响,因此在临床有必要开展其血药浓度监测,实行个体化给药。     

高效液相色谱法测定人血浆中莫西沙星浓度

目的：建立以高效液相色谱法测定人血浆中莫西沙星浓度的方法。方法：以Kromasil C8柱为固定相,0．05mol·L^-1磷酸二氢钾缓冲液：甲醇：乙腈（65：15：20）为流动相,调节pH至3．0,流速1ml·min^-1,柱温30℃,紫外检测波长296nm,进样量20ul。沉淀剂选用8％高氯酸溶液,以峰面积外标法定量。结果：莫西沙星保留时间为6．2min,线性范围0．08—4．80mg·L^-1,最低定量限为0．08mg·L^-1;方法平均回收率为95．20％～100．85％,绝对回收率为79．98％～91．83％;高、中、低系列浓度日内RSD为4．69％-5．23％,日间RSD为6．08％～7．36％;样品在低温冷冻条件下至少可稳定保存28d。结论：本法简便、快速,灵敏度高,重复性好,适用于临床血药浓度测定及药动学研究。     

高效液相色谱法测定人血浆中莫西沙星浓度

目的：建立以高效液相色谱（HPLC）法测定人血浆中莫西沙星浓度的方法,并对样品进行测定。方法：色谱柱为KromasilC18（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为：1%三乙胺（磷酸调pH至4.8）-乙腈（80∶20,V∶V）,流速为1.0 mL.min-1,以环丙沙星为内标、紫外检测波长为296 nm进行测定。结果：莫西沙星浓度在0.025～5.0μm.mL-1范围内线性关系良好（r=0.999 7）;其低、中、高3种浓度（0.05、0.5、2.5μg.mL-1）的绝对回收率分别为67.11%、79.71%、78.04%,相对回收率分别为99.26%、96.88%、101.82%,日内精密度（RSD）值分别为4.06%、3.15%、1.33%,日间RSD值分别为7.24%、1.79%、3.32%。结论：本方法操作简单、快速、准确,灵敏度高,检测浓度低,试验成本低,可以用于盐酸莫西沙星的临床药动学研究及临床特殊人群的血药浓度测定。     

LC-MS/MS法测定人血浆中白藜芦醇的浓度

目的:建立液相色谱-串联质谱法测定人血浆中白藜芦醇浓度的方法。方法:血浆样品经四硼酸钠溶液碱化后,经甲基叔丁基醚提取处理。分析柱为RestekC1(82.1mm×150mm,5.0μm),保护柱为GminiC1(84mm×3.0mm,10.0μm),流动相为乙腈-水(85∶15,V/V,其中含0.2mmol·L-1乙酸铵),流速为0.3mL·min-1,进样量为5μL,内标为3,5-二羟基-4-异丙基二苯乙烯,使用电喷雾离子源,以负离子多重反应监测(MRM)方式进行检测。用于定量白藜芦醇和内标的MRM扫描离子通道分别为m/z227.0→143.0、253.2→211.0。每个样品的分析时间为5min。结果:白藜芦醇和内标的保留时间分别为1.43、2.55min。血浆中内源性物质对测定无干扰,白藜芦醇检测浓度在0.1～50.0ng·mL-1范围内同其与峰面积之比呈良好线性关系(r=0.9969),定量下限为0.1ng·mL-1。日内、日间RSD均低于11.25%,方法回收率为(91.70±3.81)%～(99.00±3.29)%。结论:本方法特异性强,灵敏度高,测定结果可靠,适用于白藜芦醇的血药浓度测定。     

改良HPLC法测定大鼠血浆芍药苷浓度

目的:改良高效液相色谱(HPLC)法测定大鼠血浆芍药苷浓度。方法:采用乙酸乙酯提取法处理血浆,选咖啡因为内标物进行测定;色谱柱为Hypersil ODS2RP-C18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(16∶84,V/V),紫外检测波长为231nm,流速为1mL·min-1。结果:采用乙酸乙酯提取比用沉淀法处理的血浆内源性干扰物质少,在HPLC系统条件下,芍药苷和内标咖啡因均不受血浆内源性物质干扰,保留时间分别为6.8min和4.1min左右,定量下限为0.08μg·mL-1,芍药苷检测浓度在0.08～5.12μg·mL-1(r=0.9994)范围内与峰面积积分值呈良好线性关系。分析一个样品只需要7min,平均回收率为69.09%,低、中、高浓度(0.16、0.64、2.56μg·mL-1)的日内精密度和日间精密度分别为12.77%、4.47%、1.10%和8.39%、3.82%、4.27%。结论:本法简便、快速,可用于大鼠血浆芍药苷浓度的分析。     

高效液相色谱荧光法测定家兔血浆中辣椒碱纳米乳的浓度及其药动学研究

目的:建立测定家兔血浆中辣椒碱纳米乳含量的方法,并考察其药动学参数。方法:采用双周期交叉试验设计,取6只家兔均分为2组,分别单剂量静脉注射辣椒碱纳米乳和辣椒碱溶液,剂量为1mg·kg-1,给药7d后交叉给药,分别于给药后3、6、9、12、15、25、40、60、90、120min时取血,以高效液相色谱荧光法测定其血药浓度,并计算药动学参数;色谱柱为Shimadzu VP-ODSC18,流动相为甲醇-水-磷酸(85∶15∶0.1),激发波长为280nm,检测波长为310nm。结果:辣椒碱检测浓度的线性范围为0.01974～4.934μg·mL-1(r=0.9995),最低检测限为4.9ng·mL-1,平均回收率为90.4%～113.8%(RSD≤10.1%);辣椒碱纳米乳和辣椒碱溶液的t1/2分别为(11.77±2.32)、(9.53±2.19)min,AUC0～∞分别为(5311±1324.6)、(4909.5±1110.4)ng·min·mL-1,cmax分别为315.7、300.8ng·mL-1,二者比较无显著性差异。结论:该法简便、准确、灵敏,适用于辣椒碱的血药浓度检测;辣椒碱制成纳米乳经静脉注射后基本上不影响其药动学参数。