粉防己碱和氯丙嗪对人胚肺成纤维细胞胶原和透明质酸合成的影响(英文)

目的：研究粉防己碱(Tet)和氯丙嗪(Chl)对人胚肺成纤维细胞胶原与透明质酸(HA)合成的影响,为应用钙拮抗剂防治器官纤维化提供依据.方法:采用[~3H]脯氨酸掺入和放射免疫法分别测定胶原与HA合成.结果:Tet 5—80 μmol L~(-1)和Chl 10—40 μmol L~(-1)均以浓度依赖方式抑制胶原与HA合成.Tet 5—20μmol L~(-1))对细胞无明显毒性却显著抑制胶原与HA合成(P<0.01).结论:Tet在低浓度(5—20μmol L~(-1))时对细胞无明显毒性作用而显著抑制成纤维细胞胶原与HA合成,可望成为治疗器官纤维化的有效药物.     

维拉帕米、硝苯地平对人成纤维细胞增殖、胶原和透明质酸合成的抑制作用

研究维拉帕米（Ｖｅｒ）和硝苯地平（Ｎｉｆ）对人胚肺成纤维细胞（ＨＬＦ）增殖、胶原与透明质酸（ＨＡ）合成的作用，为应用钙通道阻滞剂防治器官纤维化提供实验依据。分别采用四氮唑蓝（ＭＴＴ）比色法、３Ｈ－脯氨酸参入和放射免疫法测定细胞增殖、胶原和ＨＡ合成。Ｖｅｒ和Ｎｉｆ在２０～４０μｍｏｌ·Ｌ－１浓度范围内均以浓度依赖方式抑制ＨＬＦ增殖及胶原和ＨＡ合成。Ｖｅｒ和Ｎｉｆ具有抗纤维化作用。     

粉防己碱抑制血管平滑肌细胞胶原合成

目的　观察粉防己碱(Tet)对血管壁胶原沉积和血管平滑肌细胞胶原蛋白合成的影响。方法　用羟脯氨酸含量反映主动脉胶原沉积状况,用[³H]-脯氨酸参入反映细胞胶原蛋白合成。结果　与伪手术组相比,肾血管性高血压大鼠主动脉壁羟脯氨酸含量明显增加;粉防己碱可有效降低主动脉壁胶原含量,并呈浓度依赖性抑制[³H]-脯氨酸参入AngII或NE诱导的血管平滑肌细胞。结论　粉防己碱抑制血管平滑肌细胞胶原合成和动脉壁胶原沉积是其逆转血管重构作用的重要机制之一     

粉防己碱对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响

［摘要］目的观察粉防己碱（tetrandrine, Tet）对增生性瘢痕成纤维细胞增殖及MEK/ERK、MKP 1信号通路的影响。方法培养增生性瘢痕成纤维细胞，四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法、［3H］ TdR掺入率测定不同浓度Tet对细胞增殖的抑制作用；免疫沉淀法纯化蛋白并细胞外信号调节激酶（ERK）试剂盒测定ERK活性；Western blot测定p MEK1/2、p ERK1/2及蛋白激酶磷酸酶 1（MKP 1）表达。结果MTT实验、［3H］ TdR掺入率均显示Tet明显抑制细胞增殖，同时Tet明显抑制ERK活性，Western blot显示Tet明显抑制p MEK1/2及p ERK1/2表达，同时提高MKP 1表达。结论粉防己碱明显抑制增生性瘢痕成纤维细胞增殖，机制与下调ERK活性，抑制MEK/ERK通路及上调MKP 1表达有关。     

依他酸和卡西霉素对人胚肺成纤维细胞脱氧核糖核酸和胶原合成的影响(英文)

目的:研究依他酸(EA)和卡西霉素(Cal)对人胚肺成纤维细胞脱氧核糖核酸和胶原合成的影响。方法:采用[~3H]TdR与[~3H]脯氨酸掺入分别测定脱氧核糖核酸和胶原合成。结果:给药24h后,EA0.05—4mmol·L~(-1)和Cal0.25—20μmol·L~(-1)组胶原合成均显著增加,脱氧核糖核酸合成无明显改变。给药36和48h,EA 1—4mmol·L~(-1)组胶原与脱氧核糖核酸合成降低:Cal0.25—20μmol·L~(-1)组脱氧核糖核酸合成亦下降,胶原合成仅10和20μmol·L~(-1)组降低。结论:细胞外液Ca~(2 )内流促进胶原合成,细胞内Ca~(2 )浓度过高或过低均抑制脱氧核糖核酸合成。     

TGF—β1对人牙周膜成纤维细胞合成胶原的影响

目的：观察不同浓度的转化生长因子β1对体外培养的人牙周膜成纤维细胞合成胶原的影响。方法：采用组织块培养技术进行人牙周膜成纤维细胞的体外培养,采用羟脯氨酸试剂盒来观察细胞合成胶原的情况。结果：0．1、1．0、10．0、50．0ng／ml的转化生成因子β1可以促进牙周膜成纤维细胞合成胶原,其中10ng／ml的TGF—β1在48h促胶原合成作用最明显,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：转化生长因子β1有促进人牙周膜成纤维细胞合成胶原的作用。     

丹参对培养的人瘢痕成纤维细胞生长和胶原形成的影响

目的 :探讨丹参对增生性瘢痕成纤维细胞 (FB)及胶原形成的影响。方法 :通过体外培养正常皮肤和瘢痕组织的FB ,以丹参 1 5mg·mL-1和 3 0mg·mL-1培养液培养后 ,检测FB的生长情况及其羟脯氨酸含量。结果 :与空白对照组比较 ,丹参 2个剂量组对正常皮肤FB生长及其羟脯氨酸含量无显著影响 (P均 >0 0 5 ) ;而对增生性瘢痕组织FB生长具有显著抑制作用 ,并使其羟脯氨酸含量降低 ,对于前者 ,丹参 2个剂量组比较无显著差别 ,对于后者含量 ,丹参 2个剂量组之间有极显著差别 (P<0 0 1)。结论 :丹参能抑制瘢痕的增生     

外源性透明质酸对创面肌成纤维细胞表达的影响

为探讨透明质酸（HA）抑制创面愈合，减轻瘢痕增生的作用机制，观察外源性HA对创面肌成纤维细胞的影响。用成年日本大耳白兔18只建立兔耳创伤愈合模型。随机分成2%HA治疗组（A组），1%HA治疗组（B组），磷酸盐缓冲液（PBS）对照组（C组），观察大体形态及组织学变化。平均愈合时间，创面收缩情况及残余创面面积，成纤维细胞α-平滑肌肌动蛋白 表达及超微结构观察。结果表明：（1）A、B、C三组平均愈合时间为11.7&;#177;0.6、11.3&;#177;0.6和10.8&;#177;1.0天，A、B两组与C组之间差异有显著意义（P&;lt;0.05),A、B组与C组比较创面收缩速率及残余面积差异也有显著意义（P&;lt;0.05)；（2）组织学观察；A、B两组胶原纤维较细，排列整齐，C组胶原纤维较粗大，排列紊乱；（3）A、B组α-平滑肌肌动蛋白的表达少于C组（P&;lt;0.01)。结论：HA通过抑制成纤维细胞向肌成纤维细胞转化而抑制创面收缩，是延迟创面愈合的原因之一。     

聚合胶原对小鼠成纤维细胞表型转化的影响及其机制探讨

目的 探讨聚合胶原对肌成纤维细胞表型转化的促进作用及其可能机制.方法 用聚合胶原培养小鼠成纤维细胞,观察聚合胶原对成纤维细胞形态学及生长曲线影响.蛋白印迹法分析PTEN及Akt Ser473及p42/44磷酸化水平的情况.结果 在聚合胶原中培养的成纤维细胞可以向肌成纤维细胞转化.在聚合胶原的诱导下,成纤维细胞内PTEN含量减少,磷酸化Akt增多,同时细胞内磷酸化p42/44MAPK含量增多.结论 聚合胶原可以诱导成纤维细胞向肌成纤维细胞转化.其机制可能与PTEN和p42/44MAPK信号通路相关.     

高氧对体外培养的人胚肺成纤维细胞的毒性作用

目的研究高氧对体外培养的人胚肺成纤维细胞(HELF)的毒性作用。方法将生长良好的HELF传代后,用无血清培养基培养24h,分别置于空气及体积分数90%O2的细胞培养箱中培养5d,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,化学比色法检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)及超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果与空气对照组相比,在给予体积分数90%O22d时细胞上清液中LDH含量明显升高,SOD含量则明显减低(P<0.05),且随高氧暴露时间延长,呈现出明显的时间依赖关系(3～5d,P<0.01),细胞大量凋亡。结论体积分数90%O2对体外培养的HELF具有明显的细胞毒性作用,直接引起细胞损伤,加速其凋亡。     

粉防己碱复合膜的研制及其对大鼠切割伤的疗效观察

目的：研究粉防己碱复合膜的制备方法,并观察其对大鼠切割伤疗效。方法：将粉防己碱与胶原制成复合膜并固定于聚乙烯醇外衬膜上,贴敷大鼠切割伤创面,观察创面愈合率,并测定创面肉芽组织中蛋白、ＤＮＡ、羟脯氨酸的含量。结果与结论：本制备方法可靠,含粉防己碱０．２５％～０．５０％的复合膜可有效促进创面愈合。     

西红花酸对心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

目的:探讨西红花酸(crocetin)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFB)增殖和胶原合成的影响及其作用机制。方法:体外培养新生SD大鼠CFB,建立AngⅡ诱导新生大鼠CFB纤维化模型;MTT法检测CFB的增殖;羟脯氨酸测定检测CFB胶原含量;流式细胞分析仪测定细胞周期;实时荧光定量PCR(Q-PCR)检测Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白、间质胶原酶(MMP-2)、组织金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)的基因表达;蛋白免疫印迹(Western Blot)检测细胞P27^kip1(P27)蛋白的表达。结果:(1)在一定浓度范围里,crocetin能抑制AngⅡ引起的CFB增殖和胶原合成,并呈剂量依赖;(2)CFBG0/G1期百分率随crocetin浓度增加而增加,S期、G2/M期百分率和增殖指数随crocetin浓度增加而减少,与AngⅡ组相比差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);(3)Crocetin能明显降低Ⅰ型、Ⅲ型胶原、TIMP1、TGF-β1的表达,提高MMP-2的表达;(4)Crocetin能增加P27蛋白表达。结论:Crocetin通过抑制AngⅡ诱导的CFB增殖和胶原合成起到抗心肌纤维化作用,其机制可能与细胞因子分泌和对基质金属蛋白酶的调节有关。     

氧化苦参碱对成纤维细胞增殖及Ⅰ型胶原合成的影响

目的：研究氧化苦参碱对成纤维细胞增殖及Ⅰ型胶原合成的影响,阐明其抗肝纤雏化的作用机制．方法：用甲基噻哇基四哇MTT(metyl thiazolyl tetronzolium)色法和免疫细胞化学染色技术分剐检潮小鼠皮肤成纤雏细胞(NIH3T3)增殖和Ⅰ型胶原的合成。结果：氧化苦参碱能明显抑制成纤雏细胞的增殖及Ⅰ型胶原的合成,并呈剂量依赖性．结论;氧化苦参碱可通过抑制成纤维细胞增殖及Ⅰ型肢原合成而起到抗肝纤雏化作用。     

一氧化氮对成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

在参与肝纤维化形成的细胞中，成纤维细胞能大量合成和分泌胶原蛋白。其质和量决定了组织器官的纤维化过程。我们研究发现，一氧化氮(nitric oxide，NO)具有抗肝纤维化作用。本文在此基础上，观察NO对体外培养的成纤维细胞增殖及胶原合成的影响，进一步阐明NO的抗肝纤维化作用。     

核酸和胶原合成的影响

研究依他酸和卡西霉素对人胚肺成纤维细胞脱氧核糖核酸和胶原合成的影响。采用［＾３Ｈ］ＴｄＲ与［＾３Ｈ］脯氨酸掺入分别测定脱氧核糖核酸和胶原合成。给药２４ｈ后，ＥＡ０．０５－４ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１和Ｃａｌ０．２５－２０μｍｏｌ．Ｌ＾－１组胶原合成均显著增加，脱氧核糖核酸合成无明显改变。     

粉防己碱对兔实验性动脉粥样硬化形成的影响

目的观察粉防己碱对兔实验性动脉粥样硬化形成的影响。方法健康♂新西兰幼年兔60只,随机分为3组,对照组以普通饲料喂养,高脂模型组和粉防己碱组以高脂饲料喂养,粉防己碱组同时静注粉防己碱5mg.kg-1.d-1。观察各组实验前、喂养6和12 wk时的体重和血脂的变化,及12 wk结束时主动脉壁和心肌小动脉的变化。结果各组相同时间的体重、对照组实验前、喂养6和12 wk后的血脂水平均差异无显著意义(P>0.05);模型组12 wk TG、TC、LDL、HDL分别为(1.97±0.83)、(19.22±3.10)(、17.50±2.64)(、0.25±0.09)mmol.L-1,与对照组[分别为(0.86±0.93)、(0.82±0.16)、(1.77±1.78)、(0.40±0.14)mmol.L-1]相比差异有显著性意义(P<0.01),与粉防己碱组[分别为(2.35±0.28)、(20.39±2.94)、(18.52±1.80)、(0.25±0.11)mmol.L-1]相比差异无显著性意义(P>0.05)。12 wk末,对照组主动脉内膜光滑,表面无纤维斑块形成,模型组动脉壁内膜表面有较多大小不同呈黄色粥样的纤维斑块形成,粉防己碱组内膜表面有奶油色或乳白色变化,但无凸出于表面的纤维斑块。结论粉防己碱不能降血脂,但可抑制动脉粥样硬化的形成和进展。     

粉防己碱对大鼠脑细胞内游离钙的影响

利用荧光钙指示剂Ｆｕｒａ－２／ＡＭ，测定脑细胞内游离钙的浓度，细胞内静息钙浓度为２２１±１８ｎｍｏｌ·Ｌ＾－１。Ｔｅｔ３０μｍｏｌ·Ｌ＾－１对细胞内静息钙无影响。Ｔｅｔ（１－１００μｍｏｌ·Ｌ＾－１）能抑制胞外高钾引起的胞内钙升高，其ＩＣ５０为８．２（９５％可信限为１．８９－３２．９０μｍｏｌ·Ｌ＾－１）。Ｔｅｔ３０μｍｏｌ·Ｌ＾－１可抑制去甲肾上腺素１０μｍｏｌ·Ｌ＾－１引起细胞内钙升高，其幅…