日本血吸虫成虫培养细胞糖细胞化学的研究

目的 :研究日本血吸虫成虫培养细胞内的糖类物质。方法 :将 32d虫龄的日本血吸虫成虫制成细胞悬液 ,接种在小盖玻片上 ,置含 2 0 %小牛血清附加常量抗生素的RPMI 16 4 0培养基中培养 ;至培养第 6d ,用高碘酸雪夫 (PAS)法显示培养细胞中的糖类物质 ;阿新蓝 PAS法显示培养细胞中的酸性粘多糖 ;用淀粉酶处理后的PAS染色以鉴定细胞内的糖原。在Olympus BH2 显微镜下观察 ,统计细胞类型 ,拍照 ;HPIAS 2 0 0 0图像分析仪测定含量 ,统计分析不同细胞类型间的差异。结果 :日本血吸虫成虫培养细胞的类型不同 ,所含的糖类成分有所不同 ,有较多培养细胞内既有糖原 ,也有酸性粘多糖 ,以及中性粘多糖、粘蛋白、糖蛋白、糖脂等其它糖类物质 ;大多数细胞几乎不含糖原和酸性粘多糖 ;另有少数细胞仅含糖原和酸性粘多糖 ,以糖原为主 ,极少数细胞以酸性粘多糖为主。结论 :日本血吸虫成虫培养细胞内既含糖原 ,也含酸性粘多糖 ,以及中性粘多糖、粘蛋白、糖蛋白、糖脂等其它糖类物质     

日本血吸虫细胞体外培养研究

寄生于人体的血吸虫主要有 3种 :分布于我国及东南亚等地的日本血吸虫 ,分布于非洲、南美洲等地的曼氏血吸虫和分布于中非等地的埃及血吸虫。由于血吸虫细胞“不增殖、不传代”的特性 ,血吸虫细胞培养一直是困扰国内外学者的一个难题。自 1982年以来Ｗｅｌｌｅｒ等人对曼氏血吸虫成虫进行了 190 0次以上的实验培养 ,历时近 2 0年 ,使成虫细胞在体外存活了 2 8ｄ ;1995年以来董慧芬等对日本血吸虫成虫和童虫细胞进行了体外培养 ,使这两种细胞分别在体外存活了 184ｄ和 2 13ｄ。学者们感叹 :“经过多年的努力 ,血吸虫的细胞培养目前仍是一道未…     

雷公藤对小鼠睾丸影响的酶组织化学观察

本实验用酶组织化学方法,观察服用雷公藤82糖浆和正常对照组小鼠睾丸组织中几种酶的变化。结果显示:给药6个月,曲精小管上皮的各级生精细胞中琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、三磷酸腺苷酶(ATPase)活性减弱;支持细胞中酸性磷酸酶(ACP)活性增强;碱性磷酸酶(AKP)活性,在给药组与对照组间无明显差别;睾丸间质细胞中SDH、ACP、AKP、ATPase等酶活性变化均不明显,但LDH活性增强。提示:雷公藤可抑制生精细胞中主要酶系的活性,进而导致精子发生和成熟的障碍。本文还就支持细胞中ACP活性增强做了讨论。     

日本血吸虫成虫脲溶42 kD蛋白的分离及其初步诊断应用

目的 :分离日本血吸虫成虫脲溶抗原中有免疫学活性的抗原分子 ,探讨其诊断血吸虫病的效果。方法 :利用SDS PAGE及免疫印迹法分析日本血吸虫成虫脲溶抗原 ,采用电泳层析法分离有免疫活性的 4 2kD蛋白 ,ELISA分析 4 2kD蛋白诊断血吸虫病的灵敏度和特异性。结果 :电泳层析获得了具有免疫学活性的 4 2kD蛋白 ;分离的 4 2kD蛋白诊断血吸虫病的灵敏度和特异性分别为 88.0 9%和 97.0 6 %。结论 :日本血吸虫成虫脲溶 4 2kD蛋白是一种日本血吸虫的血清学抗原 ,可用于血吸虫病诊断     

兔腰神经根持续压迫时脊髓前角运动细胞的酶学变化

目的 :探讨脊神经根持续性受压损伤后相应脊髓前角运动细胞的酶学变化。方法 :健康雄性日本大耳白兔 30只 ,随机分成实验组与对照组 ,各 15只。实验组行L7椎板切除术后以微血管夹钳夹右侧L7神经根制成神经根机械压迫动物模型 ,对照组仅行L7椎板切除术。分别于术后 3,7,14d切取L7脊髓节段 ,定量分析脊髓前角运动细胞内乙酰胆碱脂酶 (AChE)和酸性磷酸酶 (ACP)的活性变化。结果 :术后 3,7,14d脊髓前角运动细胞AChE活性以灰度值表示分别为 180 .88± 11.2 2、2 0 7.30± 9.12、2 15 .0 3± 7.92 ,ACP活性分别为 15 5 .31± 16 .2 4、133.0 8± 7.6 9、10 7.4 1± 7.88,与对照组比较差异十分显著 (P <0 .0 1)。结论 :脊神经根持续受压可导致其相应脊髓节段前角运动细胞功能受损、兴奋性降低     

实验动物巨噬细胞内及无细胞灌洗液内生化成分正常值的测定

作者测定了实验动物巨噬细胞和无细胞灌洗液内生化成分正常值。结果表明巨噬细胞内乳酸脱氢酶(LDH)和酸性磷酸酶(ACP)活性较高,碱性磷酸酶(AKP)和N-乙酰神经氨酸(NA)含量很低,而无细胞灌洗液中LDH、ACP活性较低、AKP和NA含量很高。巨噬细胞内生化成分的正常值可以作为体外细胞培养评价环境毒物毒性作用的定量参比标准。     

炔诺酮肟对假孕家兔卵巢黄体的组织学、组织化学及超微结构变化的观察

家兔从假孕当天按每天2mg/kg或4mg/kg灌服炔诺酮肟,共3天,观察卵巢黄体组织学、组织化学及超微结构的改变。结果表明,给药两组家兔黄体细胞空泡变性,3β-羟基甾体脱氢酶(3β-HSD)活性减弱。2mg/kg剂量组黄体细胞高碘酸-Schiff氏PAS反应(PAS)、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)及琥珀酸脱氢酶(SDH)活性无变化。4mg/kg剂量组AKP活性减弱,ACP活性增强,黄体细胞胞浆内光面内质网减少,脂滴大小不等,脂滴聚集及排空等变化。并讨论了药物引起黄体细胞形态学变化与卵巢孕酮生物合成受阻的关系。     

McAb-ELISA检测血吸虫循环抗原——Ⅰ.McAb的制备、筛选及初步试验

将感染日本血吸虫或曼氏血吸虫尾蚴的BALB/c小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞融合,制备了30余株分泌单克隆抗体(McAb)的杂交瘤,其靶抗原分别为血吸虫成虫表面膜、肠道、体细胞和虫卵。预试验结果表明,抗血吸虫成虫肠道多糖抗原McAb活性最强,将其用于夹心ELISA检测血吸虫成虫三氯醋酸可溶性抗原,敏感度达1ng/ml。用夹心ELISA测定正常兔血清呈阴性反应;测定感染兔血清呈阳性反应,且抗原水平与感染度呈正相关;8只感染兔治疗后3个月,除2份兔血清外,其余血清均转为阴性。提示本方法优于一般抗体测定法,是一种有潜力的免疫诊断方法。     

梗阻性黄疸大鼠肾脏的组织学及组织化学观察

用光镜及组织化学方法观察结扎大鼠胆管1、2、3、4周后其肾脏的病理及组织化学改变,并以正常大鼠做对照,结果表明:胆道梗阻一周肾脏已出现病理改变,并随梗阻时间延长而加重;AKP、ATPase 活性减弱,而 ACP、LDH活性明显增强。     

高温对小白鼠腎上腺磷酸酶分布的影响

1.本实验采用48只普通成年小白鼠,雌雄各半,分为6组(每组8只),其中1组作对照,另5组于37—40℃温室内,经2、4、8、12、24小时后杀死,取肾上腺用Gomori氏钙鈷法及硫化铅法显示碱性和酸性磷酸酶。 2.在高温2、4小时AKP及ACP活动均较正常为弱,8小时后活动增强超过对照粗。ACP活动的增强一直持续到24小时。AKP则在12小时活动又减低,24小时再度增强超过对照粗。这种肾上腺磷酸酶活动性的变化可能与应激反应有关。 3.小白鼠肾上腺的AKP主要分布在束状带,ACP分布于皮质各带及髓质。高温对肾上腺磷酸酶的分布部位无影响。 4.正常成年小白鼠肾上腺磷酸酶的分布以雄性为多,雌性较少,在高温实验下亦以雄性小白鼠肾上腺磷酸酶的分布较多。     

Experimental study on therapy of ultraviolet blood irradiation and oxygenation in acute soman intoxication in rabbits

Objective： To study the therapy effect of ultraviolet blood irradiation and oxygenation （UBIO） on blood AChe activity and lung injury due to acute soman intoxication in rabbits. Methods ：Forty rabbits were randomly divided into 4 groups： normal control group, intoxication group, routine therapy group and UBIO therapy group. Blood AChe activity and artery blood gas were analyzed 2 h after intoxication. ACP and AKP activities in BALF were determined respectively. Results： Blood AChe activity in intoxication group was lower than that in normal control group （P〈0.05）. BALF ACP and AKP activities in intoxication group were higher than that in normal control group. Blood AChe activities in UBIO therapy group increased and were higher than that in intoxication and routine therapy groups. Compared with intoxication group, BALF ACP and AKP activities were decreased （P〈0. 05） in UBIO therapy group, while artery blood pH, PaO2 and SaO2 increased （P〈0. 05）. Conclusion.. UBIO therapy can elevate blood AChe activity and alleviate lung injury induced by soman intoxication. So it may be a new way to treat acute soman intoxication.     

辛基二茂铁对小鼠肝脏毒性作用的实验研究

目的 :探讨辛基二茂铁对小鼠肝脏的毒性作用。方法 :选用昆明种小鼠 ,随机分成四个组 ,以不同浓度的辛基二茂铁溶液隔日灌胃 ,染毒 30d后 ,用原子吸收光谱法测定肝脏中铁的含量 ,并作肝脏病理组织学检查 ,计算肝脏器系数 ,测定血清丙氨酸转氨酶 (ALT)、碱性磷酸酶 (AKP)、酸性磷酸酶 (ACP)活性 ,测定肝匀浆中的丙二醛 (MDA)、谷胱甘肽 (GSH)的含量。结果 :各染毒组肝脏中铁的含量和肝脏器系数明显升高 (P <0 .0 1) ,且都随剂量的增加而升高。病理组织学检查 ,光镜下可见水样变性及小块坏死灶。铁染色后镜下见低剂量组有少量铁均匀分布 ,中、高剂量组则有铁大量存在 ,且在汇管区处最多。血清ALT活性较对照组明显升高 (P <0 .0 1) ,且有剂量效应关系。肝匀浆MDA的含量较对照组明显升高 (P <0 .0 1) ,GSH的含量则明显下降 (中、高剂量组P <0 .0 5 )。结论 :较大剂量的辛基二茂铁能对肝脏造成损害 ,其机制可能是与辛基二茂铁在肝脏内代谢释放出铁离子 ,游离的铁离子介导脂质过氧化而造成肝脏损害等有关     

两种破骨细胞培养方法的比较及其吸收骨质的动态观察

目的:比较分析破骨细胞(osteoclast, OC)体外分离培养的方法,并动态观察其形态、分化及功能,为进一步探讨药物对OC性骨吸收的作用奠定基础.方法:采用两种OC的培养方法,即从新生24 h的兔长干骨骨髓腔内壁机械分离成熟OC和1,25(OH)2维生素D3诱导鼠骨髓细胞形成破骨样细胞(osteoclast-like cell, OLC)的方法,对获得的OC进行形态学和功能观察.结果: 倒置显微镜下观察,OC是一种多核巨细胞,有伪足并借助伪足的凹凸伸缩而变化形态、运动行走;HE染色均可见OC多核、胞浆有空泡;特异性抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色可见OC胞浆阳性,呈酒红色,多核.体外OC与骨片共同培养形成骨吸收陷窝,且在培养的7 d内陷窝数目和面积逐渐增大.1,25(OH)2维生素D3诱导鼠骨髓细胞形成OLC,其形态结构特征与成熟OC相同,诱导出的破骨样细胞数目多于机械分离的方法,但每个细胞胞核数目总体上少于机械分离的方法,而且胞核多位于细胞周边,在骨片上形成的陷窝也较小而浅;培养液上清中的钙离子含量和酸性磷酸酶(acid phosphatase ,ACP)含量在培养的1～12 d内随时间逐渐增加.结论: 针对不同实验目的可以采用不同的分离培养OC方法.从骨髓腔内壁机械分离培养的方法可获得骨吸收功能较活跃的OC.1,25(OH)2维生素D3诱导鼠骨髓细胞形成的OLC数量较多,适于对OC分化过程的研究.     

睫状神经营养因子对损伤脊髓神经元酶学的影响

目的：研究脊髓损伤后脊髓神经元的酶学变化,并探索睫状神经营养因子（CNTF）对脊髓神经元的保护作用。方法：用改良Allen打击法致SD大鼠T8脊髓损伤,分别于术术前术后第3、7、14天测定脊髓组织内乙酰胆碱酯酶（AChE)和酸性磷酸酶（ACP）的含量。结果：AChE于手术持续下降,ACP在术后3天开始上升,第7天升至最高,以后逐渐下降,经CNTF治疗后上述峡谷种酶变化的幅度较小,且整个过程比较平衡,结论：CNTF对脊髓损伤的神经元具有一定的保护作用。     

家兔玻璃体液AKPγ—GT活性变化与PMI的相关性

目的研究死后家兔玻璃体碱性磷酸酶（AKP）和γ一谷氨酰转肽酶（γ一GT）活性与死后经过时间（PMI）的相关性,寻找一种推断PMI的新方法。方法应用酶动力学比色法检测在25~30℃和10~15℃下死后即刻至54h之间玻璃体液AKP和γ一GT活性变化情况。结果从死后即刻至54h之间发现,死后一定时间内,两种酶活性降解均存在平台期,平台期后AKP、γ一GT活性迅速下降,并逐步降解趋于零。经统计学分析,家兔死后两种酶活性与PMI之间有显著的负相关性（P〈0．01）。结论在0h~54h内两种酶活性的降解规律可作为推断PMI的参考指标。     

三氟化硼三乙醇胺对家兔肾损害的研究

3个实验组家兔按等比级数为2的不同剂量喂饲三氟化硼三乙醇胺(TFA),隔日1次,共3个月,可引起血清尿素氮和Mg~++含量增高,肾小管上皮细胞浊肿,水变性,细胞内酸性磷酸酶活性增高,碱性磷酸酶及琥珀酸脱氢酶活性明显降低。肾小管上皮细胞基底膜增厚,其皱褶间隙扩张,细胞内粗面内质网扩张,线粒体肿胀,次级溶酶体增加。结果提示TFA对肾小管上皮细胞的代谢有干扰作用。     

Influence of vasectomy on cholesterol level and activities of CPK, GPT, AKP in serum of rabbits

采用动物模型对输精管结扎引起的血清胆固醇水平及一些血清酶活性的改变进行了研究，结果表明：①增龄可使血清胆固醇含量增高；②血清中肌酸磷酸激酶（CPK）、乳酸脱氢酶（LDH）、谷草转氨酶（GOT）、α-羟丁酸脱氢酶（HBDH）水平随年龄增长略有增高，但结扎组（VG）和假手术组（SOG）比较无差异；③血清酸性磷酸酶（ACP）水平，25月组明显高于6月组（P＜0．05），VG与SOG比较无明显差异（P＞0．05）；血清碱性磷酸酶（AKP），25月组明显低于6月组，VG与SOG无明显差异；血清谷丙转氨酶（GPT）与γ-谷氨酰转肽酶（γ-GD）的活性各组间无显著差异。提示：血清酶水平与衰老有关，输精管结扎对其无影响。     

放置不同类型宫内节育器的家兔子宫内膜组织化学观察

通过放置惰性宫内节育器(IUD)及3种不同类型活性IUD后,家兔子宫内膜酸性磷酸酶(ACP)及碱性磷酸酶(AKP)的组织化学观察,发现各置器组兔子宫内膜ACP活性均较自身对照子宫有所增高,以Cu-IUD组最为明显,且Cu-IUD置器组子宫ACP活性显著高于LNG-Cu-IUD置器组,提示LNG与Cu~(++)有一定的拮抗效应,为发展LNG-Cu-IUD提供了理论依据。在Cu-IUD及LNG-Cu-IUD置器组中,AKP活性虽有降低趋势,但无显著意义(P>0.05)。