约氏疟原虫可溶性抗原对鼠疟红内期保护性免疫调节作用的研究

用约氏疟原虫(简称P.y)可溶性抗原免疫小鼠,观察原虫攻击后保护作用及鼠脾细胞ConA诱导的IFN-γ分泌水平,并设佐剂对照组和空白组.结果显示:免疫组血中原虫推迟出现,感染率明显低于其它2组(P<0.01),感染时间明显缩短,佐剂对照组原虫率也低于空白组;且与空白组比较,免疫组和佐剂对照组IFN-γ高峰出现早,说明IFN-γ对抑制血中原虫起一定作用.     

树突状细胞在疟疾红内期免疫应答中功能的研究进展

树突状细胞(dendritic cells,DC)在免疫系统中桥接固有免疫和适应性免疫,起着核心的作用。作为最有力的抗原递呈细胞树突状细胞是最早发起免疫响应和免疫调节的细胞之一,通过对病原体产生合适的免疫应答以及产生免疫记忆,保护机体抵御后续的病原体入侵。     

红内期疟疾疫苗的研究进展

目前发展疟疾疫苗仍然是防治和消灭疟疾感染的重要手段,红内期是疟原虫致病并引起临床症状的主要时期,发展有效的红内期疫苗不仅能减轻临床症状,还可降低血中配子体数量从而起到阻断传播作用.本文就目前红内期亚单位疫苗候选抗原及全虫疫苗的研究现状作一综述.     

一种钩端螺旋体DNA疫苗的免疫原性和免疫保护性研究

为了研究赖型钩体内鞭毛蛋白基因在动物体内的表达及其免疫保护性。采用ＰＣＲ扩增内鞭毛蛋白编码基因,以表达质粒ＶＰ１０１２为载体,构建了合有钩体的内鞭毛基因的重组质粒,在新西兰大白兔四头肌内注射该重组质粒ＤＮＡ５００μｇ／只,重复３次,每次间隔３周,于每次注射前和末次注射后３周,检测血清抗赖型钩体抗体效价,结果显示,在第１次加强免疫注射后３周,试验组血清抗体效价显著增高,豚鼠免疫保护试验表明,该ＤＮＡ     

恶性疟BCG多价疫苗及DNA疫苗的实验研制

本项目在恶性疟疫苗候选分子裂殖子表面蛋白-2（MSA2）及环子孢子蛋白（CSP）的分子生物学特征和免疫原性研究的基础上,构建了CSP、MSA2之DNA疫苗,同时率先在国内外构建CSP、MSA2之重组BCG活疫苗,并对疫苗的免疫保护机制、免疫应答及疫苗     

日本血吸虫Calpain的DNA疫苗诱导小鼠免疫保护性研究

目的　研究日本血吸虫中国大陆株Calpain的DNA疫苗对Balb/c小鼠的免疫保护性作用。方法　大量制备pVAC质粒DNA和pVAC -CalpainDNA疫苗 ,Balb/c小鼠 5 0只 ,随机均分为对照组和实验组 ,对照组每只小鼠的股四头肌注射接种 10 μgpVAC质粒DNA ,实验组以同样方式注射 10 μgpVAC -CalpainDNA疫苗 ,第 3周加强免疫一次。第 4周每只小鼠经腹部皮肤感染 ( 2 5± 1)条尾蚴 ,感染 6周后剖杀 ,从门静脉灌流收集计成虫数、碎脾计T淋巴细胞总数、从各鼠肝脏的同一部位切下小块肝组织 ,置 5 %KOH溶液消化后 ,计算每克肝组织虫卵数 ,比较减虫率、减雌率和减卵率。于免疫前、第一次免疫后 2周和感染后 2周分别从尾静脉采血 ,用ELISA测定抗体水平。结果　与对照组相比 ,实验组获得 36.84%的减虫率、36.36%的减雌率和 43.31%的减卵率 ,感染后实验组小鼠IgG抗体水平升高幅度大于对照组 ,对照组T淋巴细胞数显著多于实验组。结论　CalpainDNA疫苗可诱导小鼠产生较好的免疫保护作用 ,具有较大的发展潜力     

树突状细胞疫苗与肿瘤免疫

抗原脉冲的树突状细胞（ｄｅｎｄｒｉｔｉｃｃｅｌ，ＤＣ）的潜能和新颖的肿瘤靶的鉴定，重新激起对恶性肿瘤治疗型疫苗的研究兴趣，已成为许多研究课题的热点。本文综述ＤＣ在肿瘤免疫治疗中的开发应用。１引言人体免疫系统具有抵御恶性细胞失控制性生长的能力，其核心是...     

日本血吸虫尾蚴细胞对小鼠免疫保护性的初步研究

多年来,人们一直试图建立血吸虫病主要致病原的持续分裂细胞系,即体外培养血吸虫细胞,但未获得满意的结果。血吸虫细胞在体外难以传代及分类培养,到目前为止尚未找到一种有效的裂变剂。1997年,李靓如等以细胞工程学技术完成了猪囊尾蚴细胞系的建立及其生物学性质的研究,并产生了一个寄生蠕虫系。用相同技术,我室成功地对日本血吸虫尾蚴细胞进行体外培养研究。目前,尾蚴细胞已培养至第五代,用其作抗原检测31例血吸虫病人的阳性率为90．3％,检测30例正常人血清的假阳性率为6．7％在此基础上,本研究用第五代尾蚴细胞作免疫原,观察了在小鼠体内抗日本血吸虫的免疫保护效果。     

抗鼠疟iRNA体外传递疟原虫抗原特异性白细胞粘附抑制反应

疟疾免疫是一个复杂而重要的问题,其中细胞免疫的作用正受到越来越多的重视。免疫核糖核酸(iRNA)能够传递特异性免疫反应,并己开始用于某些疾病的预防和治疗。故本实验制备了抗约氏疟原虫(Plasmodium yoelii yoelii)iRNA,通过白细胞粘附抑制(LAI)试验,观察其体外传递特异性细胞免疫反应的效应,以期将iRNA用于疟疾免疫机理的探讨和实际应用。     

猪囊尾蚴抗原DNA疫苗诱导的免疫保护效应

观察猪囊尾保护性原ｃＣ１ ＤＮＡ疫苗诱导的小鼠免疫应答,及对仔猪的免疫保护作用。方法：将全长ｃＣ１ ｃＤＮＡ插入真核表达质粒载体ｐｃＤＮＡ３,构建了重组质粒ｐ３－ｃＣ１,肌注小鼠,ＥＬＩＳＡ检测小鼠血清抗ｃＣ１抗体ＩｇＧ及ＩｇＧ２ａ水平,并进行仔猪的免疫保护实验。结果：免疫小鼠第３周出现特异性ＩｇＧ应答,第８周ＩｇＧ水平达到最高;小鼠血清的ＩｇＧ２ａ检测显示,第２周ＩｇＧ２ａ应答即为阳性,且长时间     

Protective immunity induced by the anti-idiotypic monoclonal antibody NP30 of Schistosoma japonicum

Objective To investigate the protective immunity induced by the anti-idiotypic monoclonal antibody NP30 of Schistosoma japonicum in mice.Methods An orthogonal table L(16)(4×2(12)? was selected as the experimental de sign.Eight-week-old Kunming outbred mice (male and female) were randomly div ided into 16 experimental groups and 2 control groups.Control groups were i njected with SP2/0 ascites intraperitoneally. Mice from each group were infe cted with 100±2 cercariae of Schistosoma japonicum in the abdominal skin and were sacrificed on the thirtieth day postchallenge. Adult worms were r ecovered and counted by perfusion of the left ventricle-portal vein.The SP2 /0 ascites injected mice were used as controls and the percentage of protection was calculated.Results Active immunization of mice with NP30 could produce protection levels ranging f rom 22.36% to 50.46% depending on the different immunity protocols. The be st immunization protocol was established from the results.Conclusions Active immunization with NP30 can induce a degree of protection to infection wi th Schistosoma japonicum cercariae and NP30 is a potential vaccine ca ndidate against Schistosoma japonicum.     

同种抗鼠疟iRNA对感染约氏疟小鼠体内细胞免疫状态的影响

作者用感染约氏疟阴转的小鼠提取同种抗鼠疟iRNA,以3H-亮氨酸标记的白细胞粘附抑制试验和~3H-TdR掺入的淋巴细胞增殖试验为指标,观察了iRNA对感染约氏疟小鼠体内细胞免疫状态的影响.结果表明,小鼠感染疟疾后仅在第1日脾细胞的粘附抑制指数增高,iRNA可使该作用持续到第10日;此外,iRNA在小鼠感染后第3日脾细胞对Con A的增殖反应增强,在第5日脾细胞对PHA的增殖反应增强.本实验提示,iRNA能延缓机体感染疟疾后的免疫抑制现象.     

C5a/C5aR通路对约氏疟原虫增殖和小鼠生存的影响

目的观察C5a/C5aR通路对约氏疟原虫17XL(P.y17XL)的增殖及其对BALB/c小鼠致死率的影响。结论将实验小鼠分为正常BALB/c组和C5aR-/-BALB/c组,每组5只,相同剂量的P.y17XL(2×105)分别感染正常BALB/c组小鼠和C5aR-/-BALB/c组小鼠,于感染后0、2、4和6d观察两组小鼠原虫血症和存活率的变化,并且采用ELISA检测感染P.y17XLBALB/c小鼠血清中C5a的水平。结果与正常组小鼠相比,C5aR-/-组小鼠生存期缩短,P.y17XL在C5aR-/-组小鼠的原虫血症较野生株小鼠高(P<0.05),而P.y17XL感染小鼠的血清中C5a含量低于未感染的小鼠。结论 C5a/C5aR能够抑制P.y17XL的增殖,并能延长感染小鼠的生存期。     

基因转染Sp2/0细胞作为检测乙肝病毒基因疫苗细胞免疫效应的靶细胞的研究

目的研究乙型肝炎病毒(HBV)S基因转染的Sp2/0细胞作为检测HBV基因疫苗细胞免疫效应的靶细胞的可行性.方法以脂质体介导基因转染,含G418的培养基筛选,获得HBV基因S转染的Sp2/0细胞;构建编码HBV抗原蛋白S的重组真核表达质粒pCR3.1-S作为HBV基因疫苗;采用51Cr 4 h释放法体外检测HBV基因疫苗免疫接种小鼠的淋巴细胞杀伤功能.结果与空载体对照组相比较,HBV基因疫苗诱发Balb/c小鼠产生较好的HBV特异的细胞免疫应答(P＜0.05).结论以Sp2/0基因转染细胞作为靶细胞检测免疫BALB/c小鼠的淋巴细胞杀伤功能是可行的.     

寡核苷酸CpG-ODN增强HBV疫苗接种的细胞免疫反应

目的研究寡核苷酸CpG-ODN对小鼠接种基因重组乙型肝炎病毒(HBV)疫苗产生的细胞免疫的影响。方法 BALB/c(H-2d)小鼠腹腔分别接种基因重组HBV疫苗(rHBs)或50μg CpG-ODN+rHBs,rHBs分为0.65、1.25、2.50、5.00μg剂量组。4周后分离小鼠脾淋巴细胞,体外分别用rHBs刺激,3H掺入实验检测特异性淋巴细胞增殖反应的液闪计数值(cpm)。结果 (1)接种0.65、1.25、2.50、5.00μg rHBs的小鼠脾淋巴细胞,体外用rHBs刺激,cpm值(x±s)分别为3 830.24±1 496.12、2 736.19±1 238.06、4 100.37±1 723.74、1 246.18±1 088.88,均高于体外未用rHBs刺激的对照组cpm值:1 607.00±182.6、1 677.5±358.32、255.5±227.3、753.8±206.8,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)接种0.65μg rHBs+50.00μg CpG-ODN、1.25μg rHBs+50.00μg CpG-ODN、2.50μg rHBs+50.00μg CpG-ODN、5...     

利用体内电脉冲增强治疗型HBV DNA疫苗细胞免疫反应的研究

目的：研究在初次免疫和加强免疫阶段分别使用不同的免疫模式能否增强HBV DNA疫苗的细胞免疫反应。方法：肌内注射10μg HBV DNA疫苗的Balb/c小鼠根据电脉冲实施时间的不同选择两种免疫模式,DNA＋EP或EP＋3d＋DNA,按在初次免疫和加强免疫阶段免疫模式的不同组合次序进行分组。各组小鼠在实施加强免疫后第14天取脾细胞做抗原特异的IFN-γ ELISPOT检测和FACS分析。结果：在初次免疫和加强免疫阶段使用不同免疫模式的实验组与采用相同免疫模式的实验组相比,诱导的特异性IFN-γT细胞频数和IFN-γ的CD8＋T细胞百分比均增加了4倍以上,差异有高度统计学意义（P〈0.01）,而分别在初次免疫和加强免疫阶段实施的两种免疫模式的不同次序产生的细胞免疫效果之间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：在初次免疫和加强免疫阶段利用体内电脉冲实施不同的免疫模式能显著增强HBV DNA疫苗在动物体内的细胞免疫效果。     

新型呼肠病毒S基因DNA疫苗在小鼠体内的免疫原性

目的 探讨新型呼肠病毒R4株S片段免疫小鼠后引发的免疫应答。方法 构建4个不同S基因节段的重组真核表达质粒,并免疫小鼠;ELISA检测血清以研究R4特异性抗体升高水平,并对其抗体亚型进行鉴定;ELISPOT检测小鼠淋巴细胞INF-γ的表达情况。结果 与对照组相比,4个重组质粒免疫的小鼠血清都有明显的R4特异性抗体升高,尤其以S1和S3基因免疫后抗体水平较高,且均以IgG2a占绝对优势;S1基因免疫组小鼠的细胞免疫应答最强。结论 S1基因重组质粒免疫小鼠后可同时引发较强的体液免疫和细胞免疫应答,是较为理想的疫苗备选基因片段。