原花青素对高脂饮食诱导大鼠脂肪肝的防治研究

目的 探讨原花青素对高脂饮食诱导的大鼠脂肪肝的预防及治疗作用。方法 雄性Wistar大鼠60只,随机分为空白对照组、模型组、花青素低剂量治疗组(低剂量组)和花青素高剂量治疗组(高剂量组)各15只。空白对照组大鼠喂食普通饲料,模型组和低、高剂量组给予高脂饲料,低、高剂量组分别给予50、200mg/(kg·d)花青素灌胃,对照组和模型组给予质量分数0.9%氯化钠溶液灌胃。喂养8周后,禁食12h处死大鼠,收集血清和肝脏组织。观察各组肝组织病理学改变,检测血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平及血清超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛含量。结果 对照组大鼠肝组织结构正常,模型组大鼠肝组织出现大面积小叶内肝细胞脂肪变性、气球样变性和炎性细胞浸润,低剂量组和高剂量组肝脏脂肪变性明显减轻、无明显气球样变、无炎性细胞浸润;模型组血清总胆固醇[(3.98±0.29)mmol/L]、三酰甘油[(0.85±0.14)mmol/L]、低密度脂蛋白胆固醇[(1.41±0.19)mmol/L]、谷丙转氨酶[(13.84±1.92)u/L]、谷草转氨酶[(22.93±2.35)u/L]、丙二醛[(3.63±0.23)μmol/L]水平高于对照组[(1.45±0.21)mmol/L、(0.57±0.07)mmol/L、(0.98±0.20)mmol/L、(8.91±2.13)u/L、(16.90±0.87)u/L、(1.51±0.32)μmol/L]和高剂量组[(1.57±0.28)mmol/L、(0.60±0.08)mmol/L、(1.02±0.11)mmol/L、(9.57±1.81)u/L、(17.86±1.75)u/L、(2.34±0.15)μmol/L](P0.05),低剂量组血清谷丙转氨酶[(10.50±1.23)u/L]低于模型组(P0.05);模型组超氧化物歧化酶[(199.62±18.25)u/mL]、谷胱甘肽过氧化物酶[(326.75±27.90)u/mL]活性低于对照组[(313.87±12.98)、(448.23±35.89)u/mL]、高剂量组[(283.54±10.92)、(442.44±32.87)u/mL]和低剂量组[(269.53±20.38)、(397.25±27.56)u/mL](P0.05),高、低剂量组与对照组两两比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 原花青素可能通过抗氧化机制实现对高脂饮食大鼠脂肪肝的保护作用。     

利拉鲁肽通过上调肝组织沉默信息调节因子1表达改善糖尿病大鼠肝脏脂质沉积

目的探讨利拉鲁肽(Lira)对高脂联合链脲佐菌素(STZ)诱导的SD大鼠肝组织沉默信息调节因子(SIRT)表达的影响。方法健康雄性8周龄SD大鼠45只,随机分为正常对照(NC)组15只,造模组30只,造模组应用高糖高脂饮食8周,后加30 mg/kg STZ诱发2型糖尿病并脂肪肝模型,成模大鼠随机分成非药物干预组(DM组,n=15)和Lira干预组(Lira组,0.4 mg·kg~(-1)·d~(-1),n=15),干预4周。干预结束后留取动物血清和肝脏组织,行生化及组织形态学检测,并应用Western blot测定大鼠SIRT1的表达。试验数据应用SPSS 17.0软件进行统计学分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果 DM组大鼠血清空腹血糖(FBG)[(18.91±1.83)mmol/L]、胰岛素(FINS)[(20.19±4.56)m U/L]、甘油三酯(TG)[(1.64±0.69)mmol/L]、总胆固醇(TC)[(3.14±1.1)mmol/L]、低密度脂蛋白(LDL)[(3.6±0.52)mmol/L]、丙氨酸氨基转移酶(ALT)[(86.36±12.43)U/L]、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)[(195.53±15.82)U/L]、肝脏TG[(6.81±1.08)mmol/L]及HOMA-IR均明显升高,高密度脂蛋白(HDL)[(1.03±0.34)mmol/L]显著下降,与正常组比较,差异有统计学意义(P<0.01);Lira组与DM组相比,血清的FBG[(7.92±2.23)mmol/L]、ALT[(46.25±4.3)U/L]、AST[(105.71±10.18)U/L]、TG[(0.69±0.13)mmol/L]、TC[(2.07±1.11)mmol/L]、肝脏TG[(4.21±1.13)mmol/L]、FINS[(13.56±2.21)m U/L]及HOMA-IR(3.46±0.62)均下降,差异有统计学意义(P<0.05)。DM组肝组织SIRT1表达水平较NC组显著减低(P<0.01);Lira组较DM组SIRT1的表达显著增强(P<0.05)。结论 Lira改善胰岛素抵抗,减少肝脏TG沉积可能与上调肝组织SIRT1表达有关。     

谷氨酸转运体mRNA在糖尿病大鼠脑损伤中的表达

目的探讨谷氨酸转运体(EAAT)在糖尿病脑损伤时表达情况及作用机制。方法 Wistar大鼠28只,随机分成2组(每组14只):对照组(常规饲料喂养)、模型组(高糖高脂饲料喂养+STZ注射诱导胰岛素抵抗),均自由进食进水,12h光照周期。饲养1个月后,测定血糖。6个月后以RT-PCR检测大鼠脑皮质EAAT-1、EAAT-2、EAAT-3的mRNA表达情况。结果糖尿病模型组血糖[(20.016±1.984)mmol/L]明显高于正常值(P<0.01)及对照组[(3.82±0.123)mmol/L,P<0.01]。对照组胰腺组织中可见大量胰岛细胞,而糖尿病模型组胰腺组织中胰岛细胞显著减少。模型组EAAT-3mRNA表达与对照组相比明显增加(P<0.01)。结论 EAAT-3高表达可能是糖尿病脑细胞损伤的主要机制。     

肠淋巴途径在大鼠重症急性胰腺炎致全身炎症反应中的作用

目的 通过肠系膜淋巴管结扎(MLDL)阻断肠淋巴液回流,观察肠淋巴途径在大鼠重症急性胰腺炎(SAP)致全身炎症反应中的作用.方法 将24只雄性SD大鼠按随机数字表法分为模型组、结扎组和假手术组,每组8只.采用胰胆管逆行注入牛黄胆酸钠溶液制备SAP合并多器官损伤模型;MLDL于制模前进行.术后24 h测定血中二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和内毒素水平及胰腺、肺脏、肝脏组织髓过氧化物酶(MPO)活性.处死大鼠取材,光镜下观察小肠组织形态学变化;培养肠系膜淋巴结细菌并计算细菌移位率.结果 与假手术组比较,模型组血中DA0、D-乳酸、TNF-α、IL-6和内毒素水平均显著升高[DAO:(0.64±0.17)kU/L比(0.37±0.07)kU/L,D-乳酸:(8.16±1.79)ng/L比(3.24±1.00)ng/L,TNF-α:(65.21±13.38)ng/L比(22.16±5.04)ng/L,IL-6:(7.95±1.83)ng/L比(4.26±1.23)ng/L,内毒素:(0.068±0.019)kEU/L比(0.033±0.009)kEU/L],肠系膜淋巴结细菌移位率显著提高(75.0%比0),胰腺、肺脏、肝脏MPO活性显著升高[胰腺:(5.14±1.24)U/g比(2.88±0.75)U/g,肺脏:(9.07±2.52)U/g比(4.38±1.29)U/g,肝脏:(6.36±1.63)U/g比(3.19±0.96)U/g,均P<0.01];与模型组比较,结扎组血中DA0((0.50±0.13)kU/L3、D-乳酸[(6.23±1.25)ng/L]、TNF-α[(48.50±13.23)ng/L3、IL-6((6.06±1.64)ng/L]和内毒素[(0.048±0.014)kEU/L]均显著降低,肠系膜淋巴结细菌移位率(12.5%)显著减少,胰腺、肺脏、肝脏MPO活性(胰腺:(4.01±1.05)U/g,肺脏:(6.58±1.96)U/g,肝脏:(4.64±1.34)U/g]显著下降(P<0.05或P<0.01).结论 MLDL可以降低SAP大鼠肠道细菌和内毒素移位,减轻胰腺、肺脏、肝脏组织炎症损伤,保护肠屏障功能.     

马齿苋对高脂血症大鼠血脂水平的影响

目的:研究马齿苋降血脂成分对高脂血症大鼠血脂的影响。方法:将大鼠分为4组:正常饲料组,正常饲料加马齿苋组,高脂饲料组,高脂饲料加马齿苋组,每组10只,喂养3周。于实验前后采血测大鼠血清总胆固醇)、高密度脂蛋白胆固醇(highdensitylipoprotein-C,HDL-C)并且根据公式计算低密度脂蛋白胆固醇(lowdensitylipoprotein-C,LDL-C)、动脉硬化指数。结果:实验前后正常饲料组大鼠血清总胆固醇(1.62±0.28)mmol/L、三酰甘油(0.39±0.24)mmol/L,HDL-C(1.30±0.18)mmol/L无变化;正常饲料加马齿苋组三酰甘油(1.40±0.26)mmol/L、总胆固醇(0.28±0.16)mmol/L降低,HDL-C(1.49±0.27)mmol/L升高;高脂饲料组总胆固醇(9.89±1.58)mmol/L、三酰甘油(3.12±0.35)mmol/L升高,HDL-C(1.05±0.29)mmol/L降低;高脂饲料加马齿苋组三酰甘油(4.10±1.45)mmol/L、三酰甘油(1.78±0.39)mmol/L比高脂饲料组低(P<0.01),HDL-C(1.59±0.36)mmol/L比高脂饲料组高(P<0.01)。结论:马齿苋对大鼠高脂血症有明显的预防作用。     

α-硫辛酸对肥胖模型大鼠血清脂肪因子的影响

目的探讨α-硫辛酸(ALA)对饮食诱导肥胖大鼠脂肪因子的影响。方法选取清洁级8周龄雄性Wistar大鼠50只,随机选其中10只,以普通饲料喂养作为对照组(NC);高脂饮食成功诱导肥胖大鼠模型32只,随机分为高脂饲料(HFD)组(16只)和HFD+ALA组[16只,腹腔注射ALA(30 mg/kg)2周]。测定各组大鼠血清氧化应激、脂肪因子等指标并进行统计学分析。结果 HFD组血清丙二醛(MDA)、瘦素、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分别为(8.8±0.7)μmol/L、(9.8±0.8)ng/m L、(11.6±1.2)ng/L,明显高于HFD+ALA组[(6.1±0.6)μmol/L、(7.6±0.7)ng/m L、(9.7±2.3)ng/L]和NC组[(7.9±0.4)μmol/L、(4.6±0.6)ng/m L、(8.8±3.5)ng/L](P均0.05);而超氧化物歧化酶(SOD)[(73.9±5.1)U/m L]、总抗氧化能力(T-AOC)[(18.0±3.6)U/m L]、脂联素[(8.7±1.5)mg/L]明显低于HFD+ALA组[(80.9±1.8)U/m L、(25.8±5.4)U/m L、(12.6±2.1)mg/L]和NC组[(81.0±3.2)U/m L、(20.9±2.3)U/m L、(14.0±3.4)mg/L](P均0.05)。与NC组比较,HFD+ALA组血清T-AOC、瘦素明显升高(P均0.05),MDA明显下降(P0.05),SOD、脂联素、TNF-α差异无统计学意义(P均0.05)。相关性分析显示血清MDA与瘦素、TNF-α呈明显正相关[相关系数(r)值分别为0.716、0.502,P均0.01];T-AOC与脂联素呈负相关(r=-0.485,P0.05)。结论 ALA可改善肥胖大鼠的氧化应激状态并影响脂肪因子的分泌。     

可溶性鸟苷酸环化酶激活剂Cinaciguat对2型糖尿病大鼠血管并发症的作用

目的探讨可溶性鸟苷酸环化酶激活剂Cinaciguat对2型糖尿病大鼠血管并发症的干预作用。方法雄性SD大鼠28只,8只采用普通饲料喂养者为对照组,20只高脂饲料喂养4周后给予小剂量链脲佐菌素腹腔注射制备2型糖尿病大鼠模型,16只大鼠造模成功并随机分为模型组和干预组各8只。继续饲养12周,干预组给予Cinaciguat7μg/(kg·d)腹腔注射,模型组和对照组大鼠给予等量质量分数0.1%DMSO腹腔注射,疗程均为2周。测定各组大鼠血清空腹血糖、糖化血红蛋白、碱性磷酸酶、钙、磷、一氧化氮和一氧化氮合酶水平,并对胸主动脉行组织病理学检查。结果模型组大鼠血清碱性磷酸酶活性[(886.63±527.08)u/L]明显高于干预组[(564.17±475.89)u/L]和对照组[(139.00±32.29)u/L],干预组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);模型组一氧化氮水平[(43.20±7.49)μmol/L]、一氧化氮合酶活性(12.23±2.32)u/mL]明显低于干预组[(49.18±8.38)μmol/L、(17.43±4.27)u/mL]和对照组[(62.23±10.04)μmol/L、(24.90±5.39)u/mL](P<0.05),干预组低于对照组(P<0.05);干预组和模型组空腹血糖[(24.89±4.79)、(24.60±4.42)mmol/L]及糖化血红蛋白[(11.38±0.61)%、(12.13±0.78)%]水平明显高于对照组[(5.02±0.65)mmol/L、(4.60±0.51)%](P<0.01),模型组与干预组比较差异无统计学意义(P>0.05);对照组、模型组与干预组大鼠血清钙[(1.75±0.17)、(1.89±0.50)、(1.97±0.52)mmol/L]和磷[(2.48±0.12)、(2.85±0.19)、(2.62±0.09)mmol/L]水平比较差异均无统计学意义(P>0.05);组织病理检查结果显示对照组大鼠胸主动脉内膜连续、光滑,中膜平滑肌细胞走行清晰、无增生;模型组大鼠胸主动脉血管壁增厚,中膜平滑肌细胞增生且排列不规则;干预组大鼠胸主动脉壁较为完整、连续,中膜平滑肌细胞稍有增生,排列较规则,走行无明显异常。结论 Cinaciguat能有效改善2型糖尿病大鼠的抗氧化能力,为2型糖尿病血管并发症干预治疗提供了新思路和依据。     

孕期高血脂性急性胰腺炎大鼠血浆肿瘤坏死因子-α水平变化及意义

目的探讨孕期高血脂性急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)大鼠血浆肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平变化及与胰腺组织病理评分的关系。方法 48只受孕SD大鼠随机分为对照组和观察组各24只,均高脂饮食喂养。孕第7天,观察组制备AP模型,对照组仅开腹不制备AP模型。分别于孕第1、7、14天检测2组血浆三酰甘油(triacylglycerol,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、TNF-α水平,并于孕第14天处死大鼠行胰腺组织评分;Pearson相关法分析血浆TNF-α水平与TG、TC及胰腺组织病理评分的相关性。结果观察组孕第7、14天血浆TG[(1.82±0.44)、(1.83±0.64)mmol/L]、TC[(2.23±0.64)、(2.18±0.54)mmol/L]、TNF-α[(252.49±31.83)、(248.20±44.22)ng/L]高于孕第1天[(0.55±0.21)mmol/L、(0.82±0.52)mmol/L、(78.22±24.10)ng/L](P0.05);对照组孕第7、14天血浆TG[(1.82±0.56)、(1.79±0.61)mmol/L]、TC[(2.19±0.72)、(2.21±0.71)mmol/L]高于孕第1天[(0.59±0.19)、(0.84±0.51)mmol/L](P0.05),孕第1、7、14天血浆TNF-α[(78.02±19.44)、(82.11±10.22)、(81.00±18.33)ng/L]比较差异无统计学意义(P0.05);观察组各时间点血浆TG、TC水平与对照组比较差异均无统计学意义(P0.05),孕第7、14天血浆TNF-α水平高于对照组(P0.05);观察组孕第14天胰腺组织病理评分[(9.22±1.29)分]高于对照组[(2.87±0.83)分](P0.05);Pearson相关分析结果显示,孕第14天,观察组血浆TNF-α水平与TG(r=0.102,P=0.183)、TC(r=0.098,P=0.221)无线性相关,与胰腺组织病理评分(r=0.562,P0.001)呈正相关。结论孕期高血脂性AP大鼠血浆TNF-α呈高表达,且与胰腺组织病理评分相关,可用于高血脂性AP病情严重程度的评估。     

高脂饮食对大鼠胰腺腺泡细胞三磷酸肌醇表达及淀粉酶释放影响的体外研究

目的 探讨高脂饮食对胰腺腺泡细胞内三磷酸肌醇( IP3)表达及淀粉酶释放的影响.方法 雄性Wistar大鼠分为高脂饮食组和正常饮食组,分别喂养4周,全自动生化仪检测血液甘油三酯、胆固醇、淀粉酶和葡萄糖浓度,并观察胰腺病理组织学变化.两组大鼠分离并培养胰腺腺泡细胞,应用[3H]-IP3检测试剂盒检测细胞内IP3浓度;并应用胆囊收缩素(CCK)-8对腺泡细胞刺激培养,检测两组大鼠腺泡细胞淀粉酶释放率.结果 高脂饮食大鼠出现高脂血症,其胰腺组织病理染色发现腺泡细胞空泡化,腺泡细胞周围淋巴细胞浸润.高脂饮食大鼠的腺泡细胞IP3含量明显高于正常大鼠[(31.807±3.448) pmol/106 cells与(24.632±3.649) pmol/106 cells,t=7.479,P＜0.001];且高脂饮食大鼠较正常组大鼠的腺泡细胞在不同浓度CCK-8(0.01 nmol/L和1 nmol/L)刺激下的淀粉酶释放率均明显增高[(11.056±3.369)％与(7.354±2.181)％;t=3.912,P＜0.001;(13.854±4.087)％与(9.432±2.477)％,t=3.939,P＜0.001).高脂饮食组大鼠的腺泡细胞IP3含量和CCK-8(1 nmol/L)刺激下的淀粉酶释放率呈正相关性(r=0.896,P＜0.001).结论 长期高脂血症引起大鼠腺泡细胞对CCK刺激的外分泌敏感性增加,IP3作为信号分子具有重要作用.     

肥胖大鼠合并急性坏死性胰腺炎肝脏损伤评价

目的:建立肥胖大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)模型并观察肝脏损伤特点。方法:40只雄性SD大鼠随机分为普通饲料组(N组)和高脂饲料组(H组),每组20只,分别采用普通饲料和高脂饲料喂养8周并监测体重。然后分别将N组和H组大鼠随机分为对照组(N-control组,H-control组,n=10)和ANP组(N-ANP组,HANP组,n=10)。ANP组大鼠通过胰胆管逆行注射牛磺胆酸钠方法建立ANP模型,术后6h剖杀取材。全自动生化仪测量血清淀粉酶(AMY)、脂肪酶(LIPA),血清甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC),谷丙转氨酶(ALT)、和谷草转氨酶(AST)水平,苏木精-伊红切片观察肝脏和胰腺组织病理变化。结果:高脂饲料喂养8周后大鼠体重明显增加(P<0.05),腹腔脂肪组织增多,同时并发脂肪肝和高脂血症。联合胰胆管逆行注射牛磺胆酸钠方法建立ANP模型后肥胖大鼠腹腔可见明显皂化斑及肝脏坏死灶,血清转氨酶水平以及肝脏病理评级较非肥胖大鼠明显增高(P<0.05)。结论:高脂饲料喂养联合胰胆管逆行注射法可建立肥胖大鼠ANP模型,肥胖大鼠发生ANP时肝脏损伤程度更重。