FTY720对大鼠心脏移植急性排斥反应的影响

目的观察FTY720对大鼠心脏移植急性排斥反应(AR)的影响并探讨其相关机制。方法利用Cuff技术建立颈部异位心脏移植模型,受体大鼠随机分为对照组和FTY720组,每组12只。FTY720组自术前3 d至术后11 d管饲FTY720(3 mg·kg~(-1)),对照组管饲等量生理盐水。2组均于术后第5天随机选6只动物抽取外周血后留取标本,其余6只观察存活期。苏木素-伊红染色光镜下观察排斥反应级别;流式细胞仪检测外周血CD4~+T淋巴细胞和CD8~+T淋巴细胞。结果FTY720组心脏移植物平均存活时间长于对照组,排斥反应级别低于对照组,CD4~+T淋巴细胞和CD8~+T淋巴细胞阳性率低于对照组,差别均有统计学意义(P<0.05)。结论FTY720能明显减轻大鼠心脏移植AR。     

异种心脏移植急性血管排斥反应期动物模型的建立

为建立异种心脏移植急性血管排斥反应期动物模型,选择豚鼠和SD大鼠分别作为供体和受体。豚鼠升主动脉与大鼠腹主动脉端侧吻合,豚鼠主肺动脉与大鼠下腔静脉端侧吻合,受体鼠术前静脉注射眼睛蛇毒因子(CVF)60U/kg,术后腹腔注射CVF60U·kg-1·8h-1,抑制超急性排斥反应,另腹腔注射细胞免疫排斥反应抑制剂(FK506)0.25mg·kg-1·6h-1。结果显示:移植成功率88.9%(16/18),平均存活时间24.00±3.05h,病理学检查发现排斥心脏内广泛血栓形成,间质出血及炎症细胞浸润,部分心肌有局灶梗塞和凝固性坏死,符合急性血管排斥反应期的表现。该模型手术操作简单,不需显微镜,稳定可靠,是研究异种心脏移植急性血管排斥反应期较理想的动物模型。     

脂肪源性干细胞输注剂量对抑制大鼠心脏移植急性排斥反应的影响

目的 观察供体同系脂肪源性干细胞（ADSCs）对大鼠心脏移植急性排斥反应的抑制作用,并探讨其输注剂量对其抑制作用的影响。方法 以Wistar、SD大鼠为供受体建立心脏颈部异位移植模型,术毕静脉输注不同剂量ADSCs。实验分组：①对照组,注射等体积3ml 0.9% NaCl;②输注ADSCs,0.1×10⁶/只组;③输注ADSCs,1×10⁶/只组;④输注ADSCs,10×10⁶/只组;每组12只。比较各组移植心脏存活时间和组织病理学改变,及检测血清中IL-2和IL-10的表达。结果 对照组移植心脏平均存活6.2±1.2天,输注不同剂量ADSCs （0.1×10⁶/只,1×10⁶/只,10×10⁶/只）各组移植心脏平均存活分别为10.0±1.3天,13.3±2.2天,21.0±4.9天。与对照组比较,输注各组移植心脏存活均得到显著延长（P<0.05）。病理学检查发现ADSCs输注组淋巴细胞浸润、心肌间质水肿、心肌细胞损害均较对照组减轻。与对照组比较,ADSCs输注组大鼠血清中IL-2浓度随着ADSCs浓度增加而逐步降低,且ADSCs 10×10⁶/只组差异有统计学意义（P=0.021）;IL-10浓度呈剂量相关性逐渐增高,各组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论 静脉输注供体同系ADSCs,可以延长大鼠颈部移植心脏的存活时间,减轻急性排斥反应的程度,并具有一定剂量依懒性;其中以10×10⁶/只剂量的抗排斥作用最显著。     

同种异体心脏移植急性排斥反应的无创监测

目的:观察同种异体心脏移植术后血清C-反应蛋白(CRP)的动态变化,探讨监测其血清浓度水平在评价移植成活质量及判断心脏排斥反应的作用. 并研究体外单项混合淋巴细胞培养作为无创心脏移植排斥反应监测方法及意义.方法:26例原位心脏移植患者手术前后及心内膜心肌活检(EMB)时同期监测受体血清CRP浓度水平,依术后30 d内受体是否成活分为成活组(n=24)与死亡组(n=2);依EMB标本(n=32)病理等级(ISHLT)分为阴性组(0,1a,n=24)和排斥组(1b,>1b,n=8). 通过改良的单向混合淋巴细胞培养与心肌内膜活检(EMB)相对照,测定淋巴细胞活性与心肌活检病理等级的相关性.结果:CRP值在移植早期随着手术创伤的恢复而降低,成活组与死亡组在后期CRP水平差别明显. 阴性组与排斥组两组间CRP水平有明显的差异(P<0.05),心脏排斥反应发生时血浆中CRP浓度水平升高. 改良的体外单项混合淋巴细胞培养结果与心肌内膜活检病理等级有很好的相似性.结论:CRP可作为判断心脏移植早期成活质量的标志,对监测心脏移植术后有否可能的排斥反应有一定的提示意义. 改良的体外单向混合淋巴细胞培养方法可作为无创监测心脏移植排斥反应的有效手段之一.     

大鼠心脏移植急性排斥反应期基因表达变化的研究

目的　研究同种异基因大鼠心脏移植急性排斥反应期相关基因表达的改变。方法　采用近交系Lewis和SD大鼠 ,分别建立Lewis(供体 )→SD(受体 )大鼠心脏移植模型为实验组 (n =2 4 ) ;Lewis→Lewis大鼠心脏移植模型为同期对照组 (n =2 4 )。术后 1、3、5d各时点分别处死 ,取移植心脏进行普通病理检查 ;应用基因芯片技术对术后5d移植心脏进行mRNA检测。结果　实验组移植心脏术后 3d开始发生急性排斥反应 ,术后 5d全部发生严重的急性排斥反应 ;而对照组未发生急性排斥反应。共发现差异表达基因总数为 2 1 0条 (下调 96条 ,上调 1 1 4条 ) ;其中已知基因有 33条 (下调 1 3条 ,上调 2 0条 ) ;未知基因 1 77条 (下调 83条 ,上调 94条 )。结论　心脏移植急性排斥反应涉及多基因表达改变 ,分析差异表达的基因 ,有助于进一步了解心脏移植急性排斥反应的发生机制。     

常山酮对大鼠心脏移植急性排斥反应的抑制作用

目的:研究常山酮(HF)对大鼠异基因心脏移植急性排斥反应的影响及相关机制。方法:SPF级近交系Wistar雌性大鼠30只,SD雌性大鼠60只,随机分为3组行颈部心脏移植手术:同系对照组15对(供、受体均为SD大鼠,术前第1天及术后均用生理盐水灌胃),排斥组15对(供体为Wistar大鼠,受体为SD大鼠,术前第1天及术后均用生理盐水灌胃)及HF治疗组15对(供、受体同排斥组,术前第1天及术后均用HF溶液灌胃)。移植后第3,5,7天每组各处死5只受体大鼠,留取移植心行组织病理学及分子生物学检测。结果:与排斥组相比,HF治疗组移植心存活时间延长,免疫排斥反应减轻,血清中白细胞介素-17(IL-17)呈低水平,供心心肌组织中相关细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)呈低表达,具有统计学差异。结论:常山酮可以有效抑制大鼠心脏移植模型体内由于急性排斥反应引起的多种促炎性细胞因子的异常升高,具有抗急性移植排斥反应的潜能,其机制可能与抑制了Th17分泌IL-17减少相关。     

心脏移植急性排斥反应的免疫学检测

心脏移植是终末期心脏病唯一有效的治疗手段,但排斥反应仍然是心脏移植后影响心脏功能正常发挥和受者长期存活的主要因素之一.国际心脏与肺移植协会(ISHLT)1999年报告,急性排斥反应在心脏移植中的发生率约50%,在心脏移植第1年死亡率中占20%.1981年Billingham提倡利用心内膜、心肌活检(EMB)作为急性排斥反应分级标准.目前,EMB已成为诊断心脏移植排斥反应的"金标准".ISHLT根据EMB形态学改变,将心脏移植的排斥反应分为0～4级.心脏移植是EMB公认的适应证.但EMB是一种有创性检查,有时可导致心脏传导系统损伤,并发心律失常,偶尔可并发心脏穿孔.心脏移植后3个月为排斥高峰期,要求作频繁的检查,而EMB由于上述原因受到限制.Kuhn等[1]随访1108例长期生存的心脏移植患者,发现10年后仍有8%～10%的患者存在中度排斥反应.为此寻找无创伤性的监测心脏移植后急性排斥反应的检查指标已受到临床的高度关注.排斥反应是细胞免疫和体液免疫共同介导的一种复杂的免疫病理损伤.因此,免疫学检查指标就成为关注的焦点.     

心肌细胞凋亡与急性心脏移植排斥的关系

目的：探讨心肌细胞凋亡,Fas蛋白,FasL蛋白表达与心脏移植急性排斥的关系。方法：利用大鼠腹腔异位心脏移植模型。实验组为异基因心脏移植,供体为Wistar大鼠,受体为SD大鼠。对照组为同基因心脏移植,供体与受体均为SD大鼠,设立4个观察点,分别为术后第1,3,5,9天,每个观察点7只动物,应用免疫组化法检测心肌组织Fas蛋白,FasL蛋白的表达,应用3－原位末端标记法（TUNEL法）检测凋亡心肌细胞。结果：（1）实验组移植心肌术后第3天即有一定量TUNEL阳性心肌细胞,术后第5天TUNEL阳性心肌细胞数达高峰,持续至术后第9天,对照组心肌检测到极少量的TUNEL阳性细胞。（2）术后第5,9天标本,实验组检测到大量FasL阳性心肌浸润细胞。（3）实验组与对照组心肌都检测到大量Fas阳性信号。结论：（1）心肌细胞凋亡是心脏移植排斥心肌细胞死亡的一种方式。（2）心脏移植排斥时同时检测到了Fas蛋白,FasL蛋白,TUNEL（＋）心肌细胞,可能是表达FasL的心肌浸润细胞诱导Fas阳性心肌细胞凋亡,介导移植排斥。     

血清血管内皮细胞生长因子和大鼠心脏移植急性排斥反应的关系

目的观察血管内皮细胞生长因子在大鼠心脏移植急性排斥期中的血清表达及与排斥反应的关系。方法实验分为对照组和CSA组(n=14)。采用颈部心脏移植术式建立模型,手术后分别经胃管给予生理盐水及CSA干预。常规监测排斥反应发生情况。每组7只用于观察移植物存活时间,7只用于动态抽取血液标本,样本采用双抗体夹心法检测血清VEGF表达水平。结果CSA组移植心存活时间(21.1±2.9)d长于对照组(12.4±2.3)d(P<0.01)。对照组血清VEGF表达强度强于CSA组(P<0.05)。结论VEGF的表达和移植心的炎性浸润以及急性排斥有密切关系。     

肾移植急排期间红细胞免疫功能与SOD、MDA关系的探讨

目的　对肾移植急排期间红细胞免疫功能和超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA)关系进行探讨。方法　建立大鼠原位肾移植模型 ,测定 2 0只术后急排期大鼠的红细胞C3b受体花环率 (C3bRR) ,免疫复合物花环率(ICR) ,免黏附促进因子 (RFER) ,免疫黏附抑制因子 (RFIR)及血清SOD酶活性、MDA浓度。并取 2 0只正常大鼠作对照组同步测定。结果　与对照组相比 ,急排组C3bRR、RFER显著降低 ,ICR、RFIR显著升高 ,且SOD酶活性降低、MDA浓度升高 ,并与红细胞免疫功能有相关性 (P值均 <0 .0 1 )。结论　肾移植急排期间红细胞免疫功能下降 ,SOD酶活性降低 ,MDA浓度升高且呈密切相关     

肾移植急排期间红细胞免疫功能与SOD、MDA关系的探讨

目的对肾移植急排期间红细胞免疫功能和超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)关系进行探讨.方法通过建立大鼠原位肾移植模型,测定20只术后急排期大鼠的红细胞C3b受体花环率(C3bRR),免疫复合物花环率(ICR),免疫黏附促进因子(RFER),免疫黏附抑制因子(RFIR)及血清SOD酶活性、MDA浓度.并取20只正常大鼠作对照组同步测定.结果与对照组相比,急排组C3bRR、RFER显著降低,ICR、RFIR显著升高,且SOD酶活性降低、MDA浓度升高,并与红细胞免疫功能有相关性.结论肾移植急排期间红细胞免疫功能下降,SOD酶活性降低,MDA浓度升高且呈密切相关.     

外周血单个核细胞CXCR3 mRNA表达与大鼠心移植急性排斥的关系

目的探讨外周血单个核细胞(PBMC)趋化因子受体CXCR3mRNA动态变化与大鼠心移植急性排斥的关系及其在早期诊断中的价值。方法以Wistar和SD大鼠作为供体,SD大鼠作为受体,建立腹部异位心脏移植模型,按移植前后处理方法不同随机分3组:A组为SD大鼠同基因移植对照组,移植前后未作处理;B组为Wistar-SD急性排斥组,移植前后未作处理;C组为Wistar-SD异基因移植治疗组,移植日开始给予环胞素A(CsA)5mg/kg/d腹腔注射×14d。术后第1、3、5、7d分批处死,采用实时定量PCR检测PBMC的CXCR3mR-NA表达,并对心肌进行病理组织学检查,每组留5只用于观察生存期。结果A组大鼠移植心存活时间均大于100d,B、C组分别为(7.40±1.14)d、(24.00±2.35)d,C组较B组存活时间明显延长(P<0.01),A组较B、C组存活时间更长(P<0.01)。A组各时间点均未发生排斥反应,PBMC的CXCR3mRNA呈低水平表达;B组术后PBMC的CXCR3mRNA动态变化与急性排斥反应的进程呈正相关,术后5d PBMC的CXCR3mRNA表达上调至峰值4.30±0.82;C组经环胞素A治疗后排斥反应发生率明显下降,各时间点PBMC的CXCR3mRNA表达明显低于B组,术后7d达到峰值1.50±0.76,与B组相比差异具有显著性(t=7.08,P<0.01)。结论PBMC的CXCR3mRNA表达与排斥反应密切相关,提示可作为诊断急性排斥反应或者观察抗排斥反应疗效的指标。     

应用彩色多谱勒超声心动图监测心脏移植术后排斥反应

目的 评价超声心动图在监测心脏移植术后急性排斥反应中的作用。方法 采用Accuson型彩色多谱勒超声心动图诊断仪,应用M型超声观察室壁厚度及活动度、有无心包积液;应用B型超声观察各房室腔大小;用脉冲多谱勒频谱测E峰峰值流速、A峰峰值流速及E/A值,连续观察120 d后行心内膜心肌活检（EMB）。结果 超声心动图连续监测4个半月未发现排斥反应征象,心脏结构、功能正常。结论 动态应用超声心动图监测心脏移植后早期急性排斥反应的发生具有安全、迅速、无创、无并发症的优点,同EMB相比有明显优越性。     

氨基胍对大鼠心脏移植急性排斥期细胞凋亡与诱导型一氧化氮合酶的影响祆

目的:探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂氨基胍(AG)对大鼠心脏移植后急性排斥反应期细胞凋亡的影响。方法:分3组建立大鼠腹腔异位心脏移植模型:同系移植组、同种移植组、同种移植后AG治疗(应用AG(600mg/(kg·d))皮下注射)组。各组分别在术后第3d,5d,7d采集移植心肌的心室组织,观察移植心脏排斥反应情况,细胞凋亡情况及心肌组织中iNOS活性的变化。结果:①同种移植组和同种移植后AG治疗组排斥反应差异有统计学意义(χ2分别为11.98,12.70,P<0.05);②心脏移植后各级排斥反应中均可见细胞凋亡的存在,且随着心脏移植排斥反应的加重,心肌细胞凋亡的量也在增加;③同种移植后AG治疗组与同种移植组相比各时间段iNOS活性均明显升高,而与同系移植组相比,差异无统计学意义。结论:AG可以通过抑制心脏移植术后急性排斥期的iNOS活性,从而抑制细胞凋亡,保护移植心脏的功能。     

致敏大鼠心脏移植后红细胞免疫功能变化

目的考察红细胞免疫在大鼠皮肤及心脏移植后的变化情况及与其它细胞免疫指标变化的相关关系。方法在心脏移植前，Ａ组先用供体皮肤致敏，Ｂ组再于致敏前作供体抗原经胸腺耐受诱导，Ｃ组单纯作心脏移植，并于心脏移植围手术期动态测定红细胞免疫，在移植排斥高峰心脏停跳时测定迟发型超敏反应（ＤＴＨ）、淋巴细胞转化率变化。结果供体皮肤或心脏移植后，随时间推移，红细胞免疫花环率也上升，在排斥终点时达最高峰，而免疫耐受组升高不明显，其变化与ＤＴＨ及淋转率呈明显正相关关系。结论红细胞免疫能够间接反映皮肤及心脏移植后机体免疫状态，对预测移植后急性排斥有一定意义。     

单剂半量赛尼哌预防移植肾急性排斥的临床观察

目的观察单剂半量赛尼哌对肾移植急性排斥(AR)的预防作用及安全性评估。方法选择同期肾移植病人187例,根据术后肾功能恢复情况及术前是否使用赛尼哌分为A/90例、B/73例、C/11例、D/13例4组,其中A、B组移植后肾功能恢复良好,即术后1周血肌酐<176.6μmol/L,C、D组术后出现移植肾功能延迟恢复,术后1周血血肌酐>353μmol/L。A、C两组术前2h静滴赛尼哌25mg(0.5mg/kg)和口服霉酚酸酯0.75g,B、D组仅口服霉酚酸酯0.75g;术后四组病人均予甲基强的松龙500mg×3d冲击,常规强的松、环孢霉素A和霉酚酸酯三联抗排斥治疗。观察术后6个月内AR发生率、发生时间、强度及排斥逆转率,同时观察胃肠道反应、感染及血液系统损害等副作用。结果A组13例(14.4%)发生AR,B组18例(24.6%),C组6例(54.5%),D组7例(53.8%),A组AR发生率明显低于B、C、D三组(P均<0.01);B组AR发生率显著低于C、D组(P<0.01),C、D组差异不显著(P>0.05),A组排斥开始时间3-9d(6.2±3.2d)较B组2-8d(4.5±3.1d)、C组2-7d(4.3±4.2d)、D组2-9d(3.9±3.5d)明显延迟(P均<0.05)。但B、C、D三组排斥开始时间无明显差异(P>0.05)。A组AR经强化治疗均逆转,B组16例逆转,另2例失败,C组5例逆转,1例因移植肾排斥破裂出血切除,D组5例逆转,2例失败;C、D组各2例于术后13-32d再次排斥,经甲基强的松龙强化治疗逆转。感染、胃肠道反应及血液系统损害四组差异不显著(P均>0.05)。结论移植后肾功能恢复良好病人,术前25mg赛尼哌可显著降低AR发生率,且安全性好。但对于移植肾功能延迟恢复病人,术前25mg赛尼哌并不能有效预防排斥发生。     

心脏移植术后急性排异反应的监测

目的 总结原位心脏移植术后急性排异反应的监测。方法 2000－01／2002－04施行11例原位心脏移植手术，结合临床表现、心电图、超声心动图、化验检查及心内膜活栓等检查，对心脏移植术后急性排异反应的监测进行分析。结果 采用临床症状＋心电图＋超声心电图＋心肌血清学检测综合判断有6次急性排异反应，行心内膜活检证实Ⅰb级2次，Ⅲa级3次；术后常规行心内膜活检21次，仅发现急性排异反应Ⅰa或Ⅰb级5次。结论 急性排异反应是关系到心脏移植术后患者康复及愈后的重要因素，因此要及时、有效地进行监测；心内膜心肌活检是诊断急性排异反应敏感可靠的方法，但为有创性检查，有一定的并发症风险，其他多项无创性检查可作辅助指标，因此急性排异反应监测应把无创性检查与心内膜心肌活检有机地结合起来。