HCV基因型和病毒量干扰素疗效的关系

用α１型基因工程干扰素（ＩＦＮ－α１）治疗２６例慢性丙型肝炎（丙肝），观察丙肝炎病毒（ＨＣＶ）基因型和ＨＣＶＲＮＡ量和疗效的关系。其中２０例作ＨＣＶ的基因型，结果表明ＨＣＶＩ型中病毒清除反应属Ａ级（完全清除）为４／６，Ⅱ型为０／６，Ⅲ型为５／７，提示Ⅰ、Ⅲ型较Ⅱ型易于清除病毒（Ｐ〈０．０５）；基因型和ＡＬＴ反应关系不明显。２６例作ＨＣＶＲＮＡ，半定量结果表明病毒含量低者，病毒清除反应佳（Ｐ〈０．０     

慢性HCV感染者IFN治疗前后血清HCV RNA水平

目的评价ＩＦＮ对丙肝患者病毒血症水平的作用．方法竞争性逆转录聚合酶链反应（ＣＲＴＰＣＲ）法定量检测１２例慢性ＨＣＶ感染者（男８例，女４例，ＨＣＶＲＮＡ阳性，ＡＬＴ异常持续６个月以上）ＩＦＮ治疗（ＩＦＮａ２ｂ３ＭＵ，肌注，３次／周，疗程３个月）前后（随访６个月）血清ＨＣＶＲＮＡ水平．结果慢性ＨＣＶ感染者１２例，３例呈完全反应，６例呈部分反应，另外３例无反应．９例有反应者中４例复发，有反应者治疗结束时血清ＨＣＶＲＮＡ水平明显下降（５１７±０４０８ｖｓ２０６±１５５，１０ｃｏｐｉｅｓ／５０μｌｓｅｒｕｍ，ｘ±ｓ，Ｐ＜００５），无反应者血清ＨＣＶＲＮＡ水平未见明显下降（５６７±０５８ｖｓ４５±０８７，ｘ±ｓ，Ｐ＞００５）．３例完全反应者仅１例血清ＨＣＶＲＮＡ持续阴性，３例无反应者２例血清ＨＣＶＲＮＡ水平略有下降．结论ＩＦＮ治疗丙肝有效，但ＩＦＮ不能有效清除病毒，仅抑制病毒复制，未见治疗前血清ＨＣＶＲＮＡ水平与复发与否有关．     

HCV不同编码区抗体在慢性丙型肝炎干扰素治疗中的变化

采用含ＨＣＶ不同编码区三种重组抗原（Ｃ２２，Ｃ３３ｃ，Ｃ１００－３）的重组免疫印迹试验，对２０例接受干扰素（ＩＦＮ）治疗的慢性丙型肝炎患者血清相应的三种抗体进行动态监测，同时观察ＨＣＶＲＮＡ及ＡＬＴ的变化，并进行对比分析。结果表明：ＨＣＶＲＮＡ持续清除与Ｃ３３ｃ及Ｃ１００－３抗体滴度的持续下降及转阴有关（Ｐ值分别＜０．０１及＜０．００５），与Ｃ２２抗体变化无关（Ｐ＞０．０５）；ＩＦＮ治疗后ＡＬＩ稳定正常与ＨＣＶ病毒血症清除之间无相关性（Ｐ＞０．０５）。提示动态观察抗－Ｃ１００－３及抗－Ｃ３３ｃ可预测ＣＨＣ病人ＩＦＮ治疗后病毒血症的变化，而ＩＦＮ治疗后ＡＬＴ转为稳定正常不一定预示病毒血症消失。     

丙型肝炎病毒核酸定量分析的临床意义

目的探讨慢性丙型肝炎患者血清丙型肝炎病毒核酸（ＨＣＶＲＮＡ）与病情及治疗的关系。方法应用美国ＡｃｕＧｅｎ公司提供的定量ＰＣＲ试剂盒，通过荧光检测仪对５０例丙型肝炎患者的血清ＨＣＶＲＮＡ作定量检测。结果５０例患者血清ＨＣＶＲＮＡ均值为（１０００５±３３１６）×１０７拷贝／Ｌ，ＨＣＶＲＮＡ水平与ＡＬＴ呈正相关（ｒ＝０６８６７，Ｐ＜００５）。有输血史的患者ＨＣＶＲＮＡ水平明显高于无输血史者。ＨＣＶＲＮＡ血清水平低者对ＩＦＮ－α反应较好。结论ＨＣＶＲＮＡ定量检测在一定程度上反映肝脏炎症活动度及肝损害程度，有助于指导抗病毒治疗。     

两种剂量重组干扰素-α2a治疗慢性丙型肝炎随机对照研究

目的比较两种剂量的重组干扰素－α２ａ（ｒＩＦＮ－α２ａ）对慢性丙型肝炎的疗效。方法６８例经血清学和肝组织学证实的慢性丙型肝炎病人，随机分成两组，其中６３例完成全疗程，５例中途退出。Ａ组３０例，用ｒＩＦＮ－α２ａ注射，６００万单位每周３次，１２周，继之为３００万单位每周３次，１２周。Ｂ组３３例，ＩＦＮ－α２ａ３００万单位每周３次，共２４周。结果治疗结束时，Ａ组的ＡＬＴ复常率为６０．０％，丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ的阴转率为５３．３％。Ｂ组的ＡＬＴ复常率和ＨＣＶＲＮＡ阴转率分别为７２．７％和６１．３％。停药６个月后，Ａ组的ＡＬＴ复常率和ＨＣＶＲＮＡ阴转率分别为５６．７％和６３．３％；Ｂ组分别为６９．７％和５４．８％。６例病人在治疗过程中出现干扰素中和抗体，４例显效，２例无效。ｒＩＦＮ－α２ａ的不良反应与文献报告相同，但绝大多数病人能耐受。本组中，１例因疗程中病情加重，１例白细胞明显降低，１例持续发热而中止治疗。结论两种剂量的疗效差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。ＨＣＶ基因型和疗效关系不大，肝组织学病变较轻者疗效较好。     

急性丙型肝炎基因分型的临床分析

目的探讨丙型肝炎病毒基因分型与感染方式、肝功能损伤程度的关系及干扰素疗效与基因型关系。方法采用５′－末端非编码区酶切基因分型技术检测血清ＨＣＶＲＮＡ基因型。结果有受血史患者以Ⅱ型ＨＣＶ感染为主，Ⅲ型多见于散发病例，Ｐ＜０．０５；Ⅱ型肝功能损伤重，Ｐ＜０．０５；Ⅲ型ＨＣＶＲＮＡ干扰素疗效好于Ⅱ型。结论肝功能损伤程度与基因分型有关，输血机会的增加使感染Ⅱ型ＨＣＶＲＮＡ机会增加，急性期干扰素抗病毒治疗有效     

重组干扰素治疗慢性丙型肝炎疗效评价

本文报道了２９例慢性丙型肝炎（ＣＨＣ）患者采用重组α－干扰素（α－ＩＦＮ）每日６００万单位，疗程８周，于治疗前，治疗后即刻、３个月、６个月或１年，２年采集血清，测定丙型肝炎病毒核酸（ＨＣＶＲＮＡ）并动态观察其丙氦酸转氨酶（ＡＬＴ）的变化。结果表明：１２例（４１．４％）呈持续应答，ＨＣＶＲＮＡ持续阴转２年以上，ＡＬＴ亦持续正常；９例（３１．ｏ％）呈暂时应答；８例（２７．６％）为无应答反应。并提示血液中含有高滴度ＨＣＶＲＮＡ的ＣＨＣ患者可能对干扰素治疗较为敏感。     

α干扰素对慢性丙型肝炎血清中HCVRNA水平的影响

目的：了解ＨＣＶ不同基因型对α干扰素治疗的反应。方法：采取干扰素不同治疗量和不同疗程治疗病人。血清用逆转录酶一聚台酶链反应扩增ＨＣＶＲＮＡ５－非编码区，再用Ｓｌｏｔ－ｂｌｏｔ杂交鉴定。结果：ＨＣＶＲＮＡ阴转，丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）降至正常（完全反应）占４０．０％；３ｘ１０￣６Ｕ治疗一月无反应，增量６ｘ１０￣６Ｕ出现前述结果（部分反应Ｉ）占３６．７％：增量６ｘ１０￣６Ｕ治疗一月无反应，再增量９ｘ１０￣６Ｕ出现前述完全反应结果（部分反应Ⅱ）占１５．０％；增量９×１０￣６Ｕ治疗一月无反应（无反应）占８．３％。３８．６％ＨＣＶ基因１型、４４．４％Ⅱ型、４２．９％Ⅲ型是完全反应。２４例完全反应病人中１５例治疗前ＨＣＶＲＮＡ拷贝数低于１０／ｍｌ。结论：各基因型对于扰索的治疗反应无显著性差异，肝损害轻、血清ＨＣＶＲＮＡ拷贝数低者对干扰素治疗反应较好。     

慢性丙肝病毒感染中病毒血症水平与肝病的关系

目的探讨丙肝病毒（ＨＣＶ）感染中病毒血症水平与慢性肝病的关系。方法本文采用竞争性逆转录多聚酶链反应（ＣＲＴ＿ＰＣＲ）定量分析２７例慢性ＨＣＶ感染血清ＨＣＶＲＮＡ。结果慢性ＨＣＶ感染时病毒血症水平低（１０２＿１０６拷贝／５０μｌ血清）。慢性活动性肝炎（１０５．７３９±０．２５拷贝／５０μｌ血清）和肝硬变（１０５．８０３±０．７６）患者血清ＨＣＶＲＮＡ水平明显高于慢性迁延型肝炎（１０５．０６８±１．０４），Ｐ＜００５。慢性ＨＣＶ感染患者血清ＨＣＶＲＮＡ与ＡＬＴ水平呈正相关（ｒ＝０．４９９７），Ｐ＜００５。结论慢性ＨＣＶ感染时病毒血症水平低，ＨＣＶ复制在慢性肝病进展中起重要作用，与肝损伤有关。     

周围血白细胞的复制型丙型肝炎病毒RNA的检测及临床意义

用简并引物作套式反转录。聚合酶链反应检测正、负链丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ。显示３０例急、慢性丙型肝炎患者的血清及血浆中，７例无症状抗－ＨＣＶ阳性者的血清、血浆及周围血白细胞（ＰＢＬ／Ｃ）中，均未检出负链ＨＣＶＲＮＡ。慢性丙型肝炎者ＰＢＩ（中正、负链ＨＣＶＲＮＡ的检出率高于急性丙型肝炎及无症状抗－ＨＣＶ阳性者（Ｐ＜０．０５～０．００１）。１７例经肝组织学检查的患者中，急性肝炎（ＡＨ）者ＰＢＬ／Ｃ的正、负链ＨＣＶＲＮＡ检出率低于慢性活动性肝炎（ＣＡＨ）者（Ｐ＜０．０５）。１例ＡＨ及６例ＣＡＨ患者肝组织内正、负链ＨＣＶＲＮＡ全部阳性。证实丙型肝炎患者的ＰＢＬ／Ｃ确可被ＨＣＶ感染，病程越长，被ＨＣＶ感染的可能性越大；病情活动者，ＰＢＬ／Ｃ中负链ＨＣＶＲＮＡ的检出率越高。提示ＨＣＶ不仅可以感染ＰＢＬＣ，而且可在其中复制；负链ＨＣＶＲＮＡ的出现与病情活动有关。     

Effectiveness of glycyrrhizin for oral lichen planus in patients with chronic HCV infection

Oral lichen planus (OLP), an intractable inflammatory disease characterized by a band-like lymphocytic invasion under the oral mucosa, is frequently associated with hepatitis C virus (HCV) infection. We investigated the effects of glycyrrhizin, which is used to treat chronic liver dysfunction, in nine patients with OLP who were positive for HCV antibody and HCV RNA. A control group, eight patients with OLP who were also positive for HCV antibody and HCV RNA, was given only dental cleaning. Glycyrrhizin (GL) was given intravenously, at a dose of 40ml (0.2% solution) daily, for 4 consecutive weeks. Six (66.7%) of the nine patients given GL improved clinically (P=0.0141 vs non-GL group), suggesting that GL is useful in treating OLP.     

HBV and HCV therapy

One year of interferon therapy inhibits HBV replication in one third of the patients whereas long-term administration of oral nucleos(t)ide analogues is efficient in most of them, as long as early treatment adaptation in patients with partial virological response and resistance is provided. Following the demonstration of a more potent antiviral effect in terms of sustained virological response (SVR) rates, Pegylated-IFN coupled with Ribavirin has become the standard treatment for chronic hepatitis C, with nearly 65% of all treated patients achieving a SVR. Long-term suppression of HBV and eradication of HCV would halt the progression of chronic hepatitis to cirrhosis, hepatocellular carcinoma and liver decompensation.     

中国东北丙型肝炎病毒感染基因特征及人群易感性分析

采用微板核酸杂交-ELISA法及基因芯片技术对5 79例HCV感染者的HCV基因型以及30例HCV感染者以及30例健康人HLA -DRB1等位基因分布情况进行分析,探讨中国东北丙型肝炎病毒(HCV)感染基因型特征及丙型肝炎病毒感染的人群易感性。5. 79例患者中Ⅳ/ 2b型HCV感染率最高,为5 1 .12 % ;约34 .72 %的HCV感染者ALT持续正常;Ⅱ/ 1b型和混合型HCV感染在ALT反复升高组中的感染率明显高于ALT持续正常组(P <0 .0 5 )。Ⅰ型和Ⅲ型HCV合并HBV感染的发生率较高,混合型HCV合并HBV感染的发生率较低,与单独感染比较差异显著(P <0 .0 5 ) ;混合型HCV感染主要见于有2次或2次以上输血史者。HLA -DRB1 0 4和DRB1 13在HCV感染者中的出现频率较高,与健康对照组相比差异显著(P <0. 0 5 )。因此,中国东北地区HCV感染以Ⅳ/ 2b型为主,约34 72 %的HCV感染者不表现出肝炎的症状,可能成为重要的传染源。Ⅱ/ 1b型和混合型HCV感染更容易导致肝细胞损伤。Ⅰ/ 1a型和Ⅲ/ 2a型HCV可能更易于同HBV共存,两种或两种以上基因型共存的HCV则不易于同HBV合并感染。反复接受血液或血制品可能是出现混合型HCV感染的主要原因。HLA -DRB1 0 4和DRB1 13等位基因可能与HCV的人群易感性有关。     

HCV不同功能区抗体与HCVRNA的关系探讨

探讨HCV不同功能区抗体(抗-C、抗-NS3、抗-NS4及抗-NS5)与HCVRNA的关系。HCV不同功能区抗体测定采用ELISA法,用RT-PCR进行HCV RNA检测。结果显示55例抗HCV阳性血清中有7种抗体阳性组合。抗-NS3、抗-C、抗-NS5及抗-NS4在7种阳性组合中的检出率分别为96．4%、89．1%、58．2%、56．4%。HCVRNA阳性血清中抗-NS3、抗-C、抗-NS5及抗NS4的检出率分别为96．2%,88．5%,57．7%,57．7%。HCV不同功能区抗体ELISA法有很高的敏感性和特异性,与RT-PCR法基本一致。抗-NS3、抗-C在HCV的诊断中有重要的意义,抗-NS5和抗-NS4有诊断的互补作用。     

HCV感染引起的HCV感染相关性肾炎1例报道

患者因输血而感染HCV,在应用泼尼松治疗肾病同时,HCV复制激活,引起肾功能损害,肾病理检查提示膜型肾小球肾炎、系膜增生性病变伴肾小球硬化、肾小管-间质慢性病变及血管壁内膜增厚、肾组织有HCV抗体;给予IFNα300万U隔日1次,皮下注射,联合利巴韦林0．3mg,3次／d,疗程12个月,尿蛋白降低,肾功能改善,浮肿消退。     

丙型肝炎病毒NS5B的体外表达、纯化和RNA多聚酶活性鉴定

目的 研究丙型肝炎病毒NS5B蛋白的表达及其生物学功能。方法 构建长度为1676bp(7261-9036bp,编码558aa)的HCV NS5B编码区cDNA,定向克隆到表达质粒pET16b中,并在大肠杆菌BL21中表达。应用合成的多聚A或寡聚U为模板进行~3H-UTP掺入实验分析纯化蛋白的活性。结果 表达的NS5B蛋白分子量为65KD,以包涵体形式存在细胞内,改变部分表达条件未能减少包涵体的形成及可溶性蛋白的增加,该包涵体蛋白在6M尿素浓度、pH:10及500mM NaCl的溶液中完全溶解。~3H-UTP掺入实验表明纯化的蛋白具有RNA多聚酶活性并依赖多聚A的存在。结论 对NS5B蛋白生物学活性的研究,有助于了解HCV的复制及抗病毒药物的开发。     

Fluctations in viral load (HCV RNA) are relatively insignificant in untreated patients with chronic HCV infection

SUMMARY. A recently available assay to quantify serum viral load in hepatitis C virus (HCV) infection has been used to evaluate the effects of anti-viral therapies. However, variability in HCV RNA levels in untreated patients with HCV infection has not yet been established. We therefore prospectively measured the biological fluctuations of HCV RNA in sera from untreated patients with chronic HCV infection. Sera were collected from seven patients at 8 am and 4 pm on the same day to assess the effect of diurnal variation, daily for 5 days in a further 10 patients, biweekly for 6 weeks in nine patients and monthly for 3 months in 11 patients. All patients had biopsy-proven chronic liver disease with elevated alanine aminotransferase (ALT) values and had not received anti-viral treatment. HCV RNA was measured blinded, in duplicate, using the quantitative branched (bDNA) amplification assay (Quantiplex™ HCV RNA. Chiron Co. Erneryville. CA) 36 of the 37 patients studied had measurable HCV RNA throughout the study. There was no significant correlation between HCV RNA levels and ALT values or histological activity. HCV RNA levels did not appear to vary significantly within any of the groups studied and there did not appear to be a change associated with diurnal variation. All individual patients demonstrated less than a threefold fluctuation in HCV RNA throughout the study period. Hence HCV RNA levels remain relatively stable in untreated individuals with chronic HCV infection. Changes of a magnitude of threefold (0.5 log) or greater in HCV RNA levels were not observed in untreated patients.     

竞争性逆转录聚合酶链反应定量检测对HCV RNA

为了解感染丙型肝炎病素（ＨＣＶ）后的（ＨＣＶＲＮＡ）含量与丙型肝炎病情轻重，预后，治疗反应的关系，采用竞争性逆转录聚合酶链反应（ＣＲＴ－ＰＣＲ）的方法，对９例感染了ＨＣＶ患者的血清进行了ＨＣＶＲＮＡ的定量检测。结果：６．６×１０３拷贝１毫升占８８．９％，６．６×１０４拷贝／毫升占１１．１％。结果提示：急慢性丙型肝炎及无症状ＨＣＶ感染者体内均含有较高的病毒滴度，且滴度低预后好，抗病毒疗效好。     

反转录环介导等温扩增技术对丙型肝炎病毒可视化分型检测

目的 应用反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP)可视化检测丙型肝炎病毒(HCV)1b和2a基因型,为RT-LAMP技术应用于现场或基层医院提供初步探索经验。方法 首先,收集临床阳性样本并用荧光定量PCR分型检测,把样本基本分为1型和非1型。然后分别根据HCV 1b和2a基因型设计RT-LAMP引物并优化反应条件,通过互换模板实验验证这2套引物的特异性,并通过检测稀释的模板以验证引物的灵敏度。同时用钙黄绿素进行产物显色,使HCV分型检测可视化。最后用RT-LAMP方法检测临床样本,并计算阳性率,应用配对卡方检验比较RT-LAMP和荧光定量PCR的统计学差异。结果 优化好的RT-LAMP体系的特异性好,对HCV 1b型的检测灵敏度为10³ IU/mL,2a型的检测灵敏度为10⁴ IU/mL。另外,利用钙黄绿素进行产物检测的效果和电泳结果相当。通过对临床样本分型检测,HCV 1b型样本的RT-LAMP检测结果和荧光定量PCR差异无统计学意义(P>0.05),HCV 2a型样本的RT-LAMP检测结果和荧光定量PCR差异有统计学意义(P<0.05),但是未检出的样本中有2例为HCV 2b型。结论 RT-LAMP对HCV的可视化分型检测具有较好的特异性和灵敏度,操作简便,具有在现场或基层医院的应用前景。