共查询到20条相似文献,搜索用时 15 毫秒
1.
视网膜母细胞瘤细胞系HXO—Rb44抑癌基因的表达 总被引:3,自引:1,他引:2
目的检测视网膜母细胞瘤(RB)细胞系HXORb44中抑癌基因Rb的表达状况,为进一步研究RB的发病机制,利用抑癌基因Rb进行RB的基因治疗提供实验依据。方法用SP免疫组织化学(IHC)及流式细胞术(FCM)间接免疫荧光法对Rb基因的表达进行定性、形态学定位及定量检测。结果IHC法检测显示:正常视网膜组织中Rb蛋白呈阳性反应,位于细胞核呈棕黄色;HXORb44中Rb蛋白表达阴性。FCM检测显示:正常人淋巴细胞Rb蛋白表达量是HXORb44细胞的3.71倍,HXORb44中Rb蛋白表达量极低。结论RB细胞系HXORb44中存在野生型Rb基因的功能失活,Rb基因的突变失活与RB的发生密切相关。 相似文献
2.
3.
利用Rb基因CAD探针,采用Southern Blot方法,检测5例双眼视网膜母细胞瘤患者及家系中相关人员共19例外周血白细胞DNA。2例患者体细胞出现Rb基因半合缺失,其中1例Rb基因半合缺失来自亲代生殖细胞,另1例Rb基因半合缺失可能发生于配子形成期。这一结果为以分子水平为基因的“二次突变论”提供了依据,并表明此方法在临床上有推广应用价值。文中还讨论了第二恶性肿瘤问题。 相似文献
4.
视网膜母细胞瘤基因(Rb基因)的作用机制 总被引:1,自引:0,他引:1
陈大年 《国外医学:眼科学分册》1995,19(5):274-282
Rb基因是与视网膜母细胞瘤发生有关的基因,是人类克隆成功的第一个抗癌基因。Rb基因具有抑制肿瘤细胞的生长及肿瘤性的抗癌作用。Rb基因的这种抗癌性主要与Rb蛋白的蛋白结合功能、Rb蛋白对多种与细胞增殖有关的基因转录的影响,以及由此导致的细胞周期在G1期停滞有关。Rb基因的功能还受到各种细胞机制的调节,特别是Rb蛋白细胞周期性的磷酸化和脱磷酸化对Rb蛋白功能的调节最为重要。 相似文献
5.
6.
7.
297例视网膜母细胞瘤的临床病理研究 总被引:9,自引:0,他引:9
目的 探讨视网膜母细胞瘤脉络膜浸润的形态学分期标准,为在统一的上进一步对该肿瘤进行临床病理研究。方法 对摘除的297例原发性Rb患者的眼球组织标本,进行光镜观察。结果 肿瘤侵犯球壁组织在形态学上可分为4期(色素上皮-脉络膜分期)Ⅰ期,仅 色素上皮层受侵犯,Bruch膜结构完整,Ⅱ期,Bruch膜结构被各膜毛细血管层未被侵犯,Ⅲ期,肿瘤浸润深达脉络膜,靠近毛细血管层的中血管层内的小范围区域,Ⅳ期,大 相似文献
8.
9.
10.
在对视网膜母细胞瘤病人的Rb 基因存在状态进行检测时,发现一例患者体细胞Rb 基因有明显扩增改变。Rb 基因在视网膜母细胞瘤患者中的扩增改变,为首次报导,是否意味着Rb 基因扩增与肿瘤发生有着某种关联。 相似文献
11.
Rb基因诱导视网膜母细胞瘤移植瘤细胞凋亡的实验研究 总被引:3,自引:1,他引:2
目的观察外源性Rb基因对视网膜母细胞瘤(RB)细胞凋亡的影响。方法建立裸鼠眼玻璃体腔RB移植瘤模型及构建Rb基因的逆转录病毒表达载体Pbabe-Rb,用脂质体Dosper介导法将Rb基因导入裸鼠RB移植瘤,采用流式细胞术(FCM),光镜、电镜及TUNEL细胞凋亡原位末端标记法进行RB细胞凋亡的检测。结果Rb基因在RB移植瘤内表达至少持续7天。FCM检测发现在Rb基因转染后第4天,各实验组治疗眼RB中均可检测到凋亡细胞峰,凋亡细胞百分率高于对照眼;第20天,各实验组治疗眼细胞凋亡百分率与对照眼比无差异(P>0.05)。透射电镜下可见到典型的早期凋亡细胞及晚期凋亡小体形成。TUNEL方法可在荧光显微镜下见到发黄绿色荧光的凋亡细胞,光镜下可见到紫红色的被标记的凋亡细胞。结论Rb基因可诱导RB移植瘤细胞凋亡,这可能是Rb基因体内抗癌的又一作用机制。 相似文献
12.
目的:研究SO-Rb50细胞系瘤细胞Rb基因突变的动态变化。方法:1.用Southern blot杂交法分析SO-Rb50细胞系第327代瘤细胞DNA。2.用PCR-SSCP法对SO-Rb50细胞系第415代及第713代瘤细胞的Rb基因27个外显子和1个启动子逐个筛查。3.将SO-Rb50细胞系的第775代克隆出3个细胞株:MC2、MC3及MC4。用PCR-SSCP-HA法对MC2、MC3及MC4第11代细胞和MC3第138代细胞的Rb基因的27个外显子逐个筛查。结果:SO-Rb50细胞系第327代细胞DNA缺失3.5Kb、2.9Kb及1.0Kb的三条带,证明SO-Rb50细胞系瘤细胞Rb基因缺失。第415代瘤细胞Rb基因第23外显子少一条单链;第713代第25外显子发生新的突变。SO-Rb50细胞系第775代的3个克隆株MC2、MC3及MC4的第11代细胞,只有MC4第24外显子突变;而MC3第138代第24外显子突变,提示MC3经多次传代后第24外显子发生新突变。结论:SO-Rb50细胞系在长期培养传代过程中,瘤细胞的Rb基因突变有动态变化。 相似文献
13.
视网膜母细胞瘤易感基因(Rb基因)抑制人肝癌细胞的生长 总被引:3,自引:0,他引:3
利用流式细胞学检查及Southern、Western杂交技术对中国人肝癌细胞SMMC7721进行分析,发现该细胞DNA指数为0.8l,为亚倍体细胞。该细胞Rb基因的5′端存在内部缺失,Rb基因失活,没有Rb蛋白产生。将正常人RbcDNA正向插入逆转录病毒载体DOL,得到重组逆转录病毒载体DOLRB。用电穿孔转染技术把DOLRB转入SMMC7721细胞,发现Rb基因导致约75%的肝癌细胞死亡,另外25%的肝癌细胞则因外源性Rb基因突变失活而继续存活。 相似文献
14.
视网膜母细胞瘤p53基因存在状态的研究 总被引:7,自引:1,他引:6
目的 探讨P53基因突变与视网膜母细胞瘤的发病或病主煌关系。方法 应用单链构象多态性分析和DNA序列测定技术,检测52例Rb肿瘤患者DNAP53基因的整个编码区、mRNA剪接位点及其附近的内含子含序是否存在变异,并与正常对照的DNA序列比较,确定其变异的性质。结果 52例Rb肿瘤中除可见多态性、同义突变及内含子序列的变异外,未检出P53基因有真正的点突变。结论P53基因不是通过其结构的突变参与Rb 相似文献
15.
目的探讨变性高效液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)检测视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)Rb1基因外显子突变的情况。方法收集25例RB患者的肿瘤组织和3例健康者的外周血。提取其基因组,扩增Rb1基因的第3、7、9、12和26个外显子片段,再以DHPLC和DNA直接测序法分别检测其突变情况并进行比较。结果所有模板均扩增出5个外显子片段。DHPLC分析得第3、7、9、12和26个外显子的最优化检测柱温分别为54.4、55.2、53.4、53.4和55.2℃;第3、7、9和12个外显子中,25例患者和3例健康者均呈现同样峰形;而第26个外显子中,有2例患者呈现不同峰形。对所有片段进行测序,第3、7、9和12外显子的扩增片段中未发现突变。而外显子26的扩增片段中,DHPLC峰形和其他片段不同的2个样品也未出现突变。DHPLC和直接测序结果的差异无统计学意义(P〉0.05)。结论DHPLC能快速检测出Rb1基因外显子片段的突变位点,可以用于RB的检测。 相似文献
16.
进一步提高我国视网膜母细胞瘤的临床与基础研究水平 总被引:5,自引:0,他引:5
进一步提高我国视网膜母细胞瘤的临床与基础研究水平陈大年罗成仁视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)是婴幼儿最常见的眼内恶性肿瘤,严重危害患者的视力和生命,其预防、早期诊断和治疗一直是眼科医务工作者关注和探讨的难点和热点。据报道,在发达国... 相似文献
17.
18.
视网膜母细胞瘤(RB)是婴幼儿最常见的眼内恶性肿瘤,严重影响患儿的视力,甚至可危及生命.随着生物学技术的提高,RB的研究已取得一些突破.目前的研究主要集中于阐明其病因及发病机制,最终目的是用于指导临床预防、检测和治疗.基因治疗RB是近年来新型的治疗方法,为RB的治疗及预后的改善带来了契机,有望成为继手术、化学治疗、放射治疗之后一种全新的治疗模式.就RB肿瘤细胞的组织来源、Rb基因突变的检测、RB遗传易感性的研究及基因治疗实验研究的发展方向等进行系统综述. 相似文献
19.
Rb1基因在双眼视网膜母细胞瘤病人体细胞中杂合性突变的检测 总被引:1,自引:0,他引:1
目的对50例眼视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)病人进行外周血体细胞Rb1基因杂合性突变的检测工作。方法PCR-SSCP(单链构像多态分析)直接测序技术。结果改进的方法可以检测出Rb1基因1~10个碱基的多种类型的微小突变。结论可将此快速、敏感、有效的方法用于阐明Rb1基因突变机制并可以对此类病人及家系在分子水平上进行RB的产前诊断、产后早期诊断及遗传咨询。 相似文献
20.
视网膜母细胞瘤的组织培养 总被引:1,自引:0,他引:1
将临床诊断为RB 病人的眼球标本,取玻璃体肿瘤细胞和肿瘤组织块分别置199—1640混合培养液,37℃恒温培养。玻璃体肿瘤细胞呈单个悬浮生长,细胞单一,不易结成团块。肿瘤组织块培养的肿瘤细胞从组织块边上移行出来,脱落到培养液内呈团块状悬浮生长。二者的肿瘤细胞增殖均按延迟期、生长期和静止期这样一个周期生长,大约需3—4周。肿瘤组织块培养的瘤细胞增殖情况和细胞形态,较玻璃体肿瘤细胞为好。 相似文献