PCR技术对12例结核性胸膜炎胸水标本中结核菌DNA检出情况分析

对住院的12例结核性胸膜炎病人的胸水标本中结核菌DNA进行PCR检测,结合痰、胸水涂片镜检,痰结核菌DNA(PCR),结果是痰、胸水涂阳为0例,痰结核菌DNA(PCR)阳2例,阳性率16、67％,胸水标本结核菌DNA(PCR)阳6例,阳性率50％。证实:PCR检测对结核病的早期诊断,预防和指导治疗比痰、胸水涂片方法要敏感、快速、简便、特异性高,取样量少,此方法值得在临床中推广应用。     

介绍一种简易结核菌快速培养法

我们采用制造简易、取材容易而性能(作为结核菌生长之环境)优良的什可尔尼可娃(Е、А、ШКОЛВНИКОВА)氏溶血培养基与坡片培养相组合,经一年来实践,感到甚为满意。玻片培养法创用至今已有20余年,虽具有简易快速的优点,但多数学者认为不能用作诊断培养,因接种量较少而致阳性率较但从现代的观点来看,结核菌发育的强度并不完决于标本中菌量的多少;因此,接种量的增多仅高阳性率的一个因素,而标本的收集、挑选、良处理、营养条件也同等重要。当然,在不影响简易快速的条件下,增加接种量是有利的;为此,我们除特别注意标本的收集与挑选外,还采用厚涂片法以增加接种量,提高阳性率。北京结核病研究所阎邦首氏对厚涂片法、普遍涂片法、稀释浮游法作了阳性率的比     

结核菌可见不可育的由来和临床意义(续)

(三) 培养基有关用于分离抗酸菌的培养基对SPCN比率的影响很大,根据Satter和Youmans(1948)发现结核菌生长利用Tween80为碳源,有甘油存在可以抑制其生长。早在1979年束村道雄等制备无甘油的Tween80鸡卵培养基(含0.1％MgSO_4),痰标本结核菌分离培养证明阳性率高、菌落生长多而快。161份涂阳痰标本,在小川和Tween80鸡卵培基上均阳性或阴性者分别为141份与12份,只有1份在小川培养上阳性而且7份在Tween鸡卵培基上阳性,SPCN标本,前者是19,后者是13。     

吸入沐舒坦诱导痰对涂阴肺结核诊断价值的研究

目的 探讨沐舒坦超声雾化吸入诱导痰后,痰结核菌涂片及培养对涂阴肺结核的诊断价值.方法 对所有肺结核患者进行常规留痰做痰直接涂片及结核菌培养.符合诊断标准的150例涂阴肺结核患者以沐舒坦15 mg,生理盐水30 ml,进行雾化吸入20～ 30 min,留取痰液后进行痰直接涂片3次及结核菌培养.结果 150例病人常规留痰的标本中痰结核菌培养阳性34例(22.7％).沐舒坦雾化吸入后,150例患者中145例诱导出痰液,诱导痰操作中病人未发生不适.诱导痰直接涂片找抗酸杆菌阳性84例(56.0％).培养抗酸杆菌阳性44例(29.3％).结论 沐舒坦超声雾化吸入诱导痰,改善了痰标本的收集.可显著提高痰结核菌检查的阳性率.     

痰标本前处理后离心与不离心培养结核菌比较

本文对酸、碱前处理后的痰标本,分别作离心沉淀与不离心沉淀两种方法培养结核菌比较。实验结果,酸前处理的痰标本作离心沉淀,可提高结核菌的检出率。     

两种固体培养基培养结核杆菌的比较

为提高结核菌培养阳性率,缩短培养时间,我科在1978年对本院门诊和住院病人的300份临床标本同时接种两种固体培养基进行比较。自1979年即使用上述两种培养基作结核菌常规培养,至1982年3月共培养了临床标本1192份。现将结果报告如下: 材料和方法一、培养基 1. 罗～琴氏培养基; 2.加入0.1％丙酮酸钠、0.25％葡萄糖,去甘油的改良罗氏培养基(下简称丙酮酸钠培养基)。二、标本来源 1.300份标本来源:本院结核病人痰258份,尿9份,胸水2份,胆汁1份。 2.1192份常规标本来源:本院结核病人痰1131份,尿42份,胸水9份,脓4份,便4份,脑脊液2份。     

新洁尔灭用于结核分支杆菌培养前处理

本文采用0.1％新洁尔灭与2％硫酸对224份痰标本做结核菌培养前处理比较。结果新洁尔灭有减少对结核菌的杀伤力、提高阳性率、降低污染率等优点,对微量低活性菌更为明显。两法相比有显著性差异(P<0.05)。     

超声分散技术在分枝杆菌液体培养污染再处理中的应用效果分析

目的:评估超声分散技术在分枝杆菌液体培养污染标本再处理中的应用效果。方法:对山东省公共卫生临床中心门诊和住院收治的4490例疑似肺结核和795例确诊肺结核患者的痰标本进行液体培养,观察痰培养阳性率、污染率以及报告污染时间。将报告污染的MGIT培养管内容物充分混匀,并将其平均分为两份标本,一份纳入直接组(259例),另一份纳入超声组(259例),两组分别应用直接处理法和超声分散法进行污染标本的再处理。观察两组再处理后培养阳性率和污染率,并比较两组结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex, MTBC)与非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria, NTM)的检出率。结果:5285例患者痰标本培养阳性率为17.7%(935/5285),污染率为4.9%(259/5285)。157例(60.6%)患者的培养污染报告时间为1～3 d, 100例(38.6%)报告时间为4～10 d, 2例(0.8%)为11～20 d。直接组与超声组阳性率分别为7.3%(19/259)和13.9%(36/259);污染率分别为26.6%(6...     

噬菌体生物扩增法与其它方法在结核菌检测中的比较

目的通过三种方法的比较,研究噬菌体生物扩增法在结核菌检测中的意义和可行性。方法同一份标本分别做抗酸杆菌涂片法、BACTEC MGIT 960培养法和噬菌体生物扩增法。结果检测的243例标本中,噬菌体生物扩增法阳性104例,抗酸杆菌涂片法阳性44例,BACTEC MGIT 960培养法95例阳性。结论噬菌体生物扩增法检测结核菌阳性率远高于涂片法,略高于BACTEC MGIT 960培养法。噬菌体生物扩增法可以快速鉴定结核分枝杆菌,用其检测标本中的结核分枝杆菌具有很高的特异性和较高的敏感性。     

蛋白芯片技术与其他4种检测方法对结核病诊断价值的比较

目的通过比较分析,评估蛋白芯片技术对结核病的诊断价值。方法选择655例结核病患者按病变部位分为肺结核组、肺外结核组和肺结核并肺外结核组,以非结核患者作为对照。应用蛋白芯片技术、γ-干扰素释放试验(TB-IGRA)、TB DNA的PCR检测法(TB-PCR)、集菌涂片法、结核菌培养法5种检测方法对各组样本进行同步平行检测,并比较蛋白芯片技术与其他4种方法的检测阳性率、灵敏度、特异度等。结果上述5种检测方法在结核组的阳性率均显著高于非结核对照组,结核组和非结核对照组分别为66.26%、16.53%(蛋白芯片技术);91.30%、10.08%(TB-IGRA);67.02%、30.24%(TBPCR);25.04%、0.00%(集菌涂片法);25.65%、0.00%(结核菌培养法),差异均有统计学意义。蛋白芯片技术对结核的检出阳性率及灵敏度显著高于集菌涂片法和结核菌培养法,与TB-PCR检测阳性率类似,显著低于TB-IGRA。蛋白芯片技术的特异度及阳性预测值显著高于TB-PCR,显著低于集菌涂片法和结核菌培养;特异度与TB-IGRA类似,阳性预测值显著低于TB-IGRA;阴性预测值与TB-PCR阳性率类似,显著高于集菌涂片法和结核菌培养法,显著低于TB-IGRA,差异均有统计学意义(P0.05)。结论蛋白芯片技术和TB-IGRA作为诊断结核敏感度及特异度均较高的检测技术,二者取长补短,优势互补,具有良好的临床应用价值。     

痰培养标本贮存时间探讨

痰培养标本贮存时间对结核菌分离检出的影响,彭祝宪等曾有报道,冰箱贮存3、10、16天培养阳性率均为64.2％,与当天培阳率67.8％无显著差异。究竟痰标本能贮存多长时间而检出率不受影响,本文以门诊肺结核病人的50份痰培养标本,根据不同贮存时间与当日接种的检出结果做一比较,现报告如下:     

分支干菌干燥培养基用于结核杆菌分离培养的研究

本文报道上海地区17所结核病院、所,应用分支杆菌干燥培养基作结核菌分离培养,统计临床标本8247例,与改良罗氏、丙酮酸钠培养基比较,其阳性率相当而生长速度优于两种传统的培养基,结果报告时间为40天左右,可提前2周(6周).     

痰标本前处理加活性炭对抗酸菌培养的观察

我们采用活性炭加入处理后的痰标本,使抗酸菌得以集中,因而提高了培养阳性率,现将实验结果初报如下.在改良罗氏培养基培养76例痰标本中,抗酸菌培养阳性34例,阳性率44.7%.其中2%H_2SO_4加活性炭(5mg/ml)法阳性32例(42.1%);直接法(2%H_2SO_4)27例(35.5%).     

二种不同方法对结核菌培养和药敏的优势互补

目的：探讨二种不同方法对结核菌培养及药敏的优势互补。方法：收集称院临床痰标本300份用BACTEC法与改良罗氏法（简称L－J法）分别对结核菌作初代培养，并收集BA CTEC法培养阳性菌75株分别进行BACETEC法和L－J法的四种药敏（INH SM RFP EMB）试验。结果：初代培养BACTEC法较L－J法阳性率提高17．3％，阳性生长时间提前23天。结论：结核菌初代培养可选择BACTEC法，药敏试验选择L－J法较好。     

荧光定量PCR测定支气管肺泡灌洗液中TbDNA诊断肺结核的临床价值

目的探讨纤支镜肺泡灌洗液中结核分枝杆菌DNA在肺结核诊断中的价值。方法对187例初治肺结核患者及41例肺炎患者分别应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测结核分枝杆菌DNA、肺泡灌洗液结核菌培养、纤维支气管镜刷片抗酸染色。结果肺结核患者肺泡灌洗液结核分枝杆菌DNA阳性率为:78.6%、肺泡灌洗液结核菌培养阳性率为28.8%、刷片抗酸染色阳性率为21.9%。肺炎患者肺泡灌洗液结核分枝杆菌DNA、肺泡灌洗液结核菌培养、刷片抗酸染色均阴性。结论荧光定量聚合酶链反应检测肺泡灌洗液结核分枝杆菌DNA,特异性高,用于肺结核诊断可提高肺结核诊断的敏感性和准确性,明显优于纤维支气管镜刷片抗酸染色,亦较肺泡灌洗液结核菌培养诊断灵敏、快速,可作为肺结核诊断较可靠指标。     

实时荧光核酸恒温扩增技术在肺结核诊断中的价值分析

目的评价实时荧光核酸恒温扩增技术(SAT-TB)在肺结核诊断中的价值。方法纳入1121例非相同患者痰标本,其中26例为非结核分枝杆菌。570例肺结核为观察组,525例其他肺部疾病患者为对照组。对治疗前的痰标本分别进行抗酸杆菌涂片、培养及鉴定和SAT法检测。阳性检出率的比较使用卡方检验。结果临床诊断肺结核570例,痰培养结核菌阳性率46.5%(265/570),SAT法检测阳性率46.7%(266/570),痰涂片阳性率34.4%(196/570),SAT与涂片法阳性率的差异有统计学意义(χ2=17.83,P0.01)。在涂阴肺结核中,SAT阳性率达19.5%。以培养阳性作为金标准,SAT法诊断结核病的灵敏度为89.4%,特异度96.3%,阳性似然比为24.2,阴性似然比为0.11,一致率是94.6%,阳性预测值是88.4%,阴性预测值为96.6%。在非结核分枝杆菌肺病中SAT检测阳性率为零。结论 SAT-TB法在肺结核的早期诊断中是一种快速、准确、敏感的方法,值得推广。     

骨关节结核病灶结核菌L型状况的观察

目的探讨骨关节结核病灶中，结核菌L型的存在状况。方法样本均采白骨科住院病人的脓液、肉芽、干酪物等，经碱液处理后，分别进行直接涂片，并接种在罗氏培养基上、Bactec培养液及结核菌L型培养液中，以查找结核杆菌及结核菌L型。结果在60例中，查到结核菌L型11例(18．3％)，涂片阳性9例(15％)，罗氏培养阳性3例(5％)，快速培养阳性12例(20％)。结论对骨关节结核病灶进行结核菌培养的同时，加做结核菌L型检查是十分必要的。     

溴化十六烷基吡啶在保存痰标本中结核菌的应用研究

目的研究加有溴化十六烷基吡啶(cetylpyridiumbromide,CPB)的痰标本的存放时间?温度及洗涤方式对结核菌分离率的影响?方法加入CPB的痰标本置于不同温度恒温箱内以及在25℃恒温箱不同时间后,采用二种不同的方法洗涤后接种于培养基,分别统计阳性率?结果痰标本存放于18℃以上较可靠,与18℃以下相比,分离率有显著差异(P<0.05),存放1～3周分离率较高,4周后分离率明显下降,二者有显著差异(P<0.05)?结论加入CPB的痰标本的结核菌分离率与保存温度及时间有关。     

分支干菌干燥培养基用于结核杆菌分离培养的研究

本文报道上海地区１７所结核病院，所，应用分支杆菌干燥培养基作结核菌分离培养，统计临床标本８２４７例，与改良罗氏，丙酮酸钠培养基比较，其阳性率相当而生长速度优于两种传统的培养基，结果报告时间为４０天左右，可提前２周。     

冷冻离心处理痰标本未提高结核菌分离率

在耐药性调查和述及耐药病例的初始治疗中，从生物学标本分离结核菌非常重要，在大多数发展中国家和发达国家试验室，痰标本处理用非冷冻离心机分离结核菌。以固定向离心机3000g，15min处理痰标本，发现能减轻热对结核菌的有害作用，然而，迄今仍无