雌二醇通过雌激素受体α介导调控Cyclin D1在小鼠前列腺平滑肌细胞中的表达

目的 观察雌激素受体α(ERα)在17β-雌二醇(E2)促进小鼠前列腺平滑肌细胞(PSMC)增殖中的作用,探讨E2对PSMC的作用机制.方法 构建pGSadeno-ERα腺病毒载体,体外转染原代培养的小鼠前列腺平滑肌细胞(PSMC),将实验细胞分组:实验组;ERα基因下调组,细胞转染ERα干扰序列腺病毒;阴性对照组,细胞转染无义序列腺病毒;正常对照组,正常的小鼠PSMC.各组分别加入1×10-8mol/L E2,72 h后流式细胞仪检测细胞增殖,Western blot检测细胞内Cyclin D1基因表达.结果 E2作用细胞72 h后,实验组细胞G0/G1期的比率(71.76±1.78)%显著高于阴性对照组(51.73±1.86)%和正常对照组(47.90±0.79)%,差异有统计学意义(P＜0.05);相对应的PI值:实验组(28.24±1.78)显著低于阴性对照组(47.27±1.86)和正常对照组(52.10±0.79)比较,差异有统计学意义(P＜0.05);实验组细胞内Cyclin D1基因表达水平显著低于对照组.结论 雌激素在对前列腺平滑肌细胞的生物学效应中,通过雌激素受体α的介导调控了细胞周期素Cyclin D1的表达,从而促进细胞的增殖.

Abstract：

Objective To investigate the role of estrogen receptor alpha (Erα) in estradiol-induced proliferation of mouse prostatic smooth muscle cells (PSMCs) and explore a new target for benign prostazic hyperplasia (BPH). Methods Adenoviral vectors with Erα-shRNA or Ctrl-shRNA were transfected into mouse PSMCs. The cells were divided into 3 groups: experimental group ( cells transfected with pGSadeno-Erα), negative control group (cells transfected with pGSadeno-Ctrl) and normal control group (normal mouse PSMCs). The expression of Cyclin DI was detecrted by Western blotting. Cell cycle was analyzed by using flow cytometry. Results After treatment in the presence of 1 10-8 mol/L 17β-estradiol (E2) for 72 h, the percentage of cells in the G0/G1 phase was (71.76 1.78)％ in experimental group, which was significantly higher than in negative control group (51.73 ± 1.86)％ and normal control group (47.90±0.79)％, and PI in experimental group (28.24±1.78) was prominently lower than in negative control group (47.27±1.86) and normal control group (52.10±0.79). The expression level of Cyclin D1 in experimental group was conspicuously lower than in control groups. Conclusion E2 regulates the expression of Cyclin D1 via Erα in PSMCs, which promotes cell proliferation.     

雌激素受体β1上调p53基因表达促进乳腺癌细胞的凋亡

目的观察外源性雌激素受体β1(estrogen receptor β1,ERβ1)基因转染乳腺癌MDA-MB-231细胞后对p53基因表达和细胞凋亡的影响,探讨ERβ1在乳腺癌中的生物学作用。方法应用脂质体法将ERβ1真核表达质粒转染至乳腺癌MDA-MB-231细胞中,分别用荧光实时定量PCR法、Western blot法检测转染前、后细胞中ERβ1与p53 mRNA和蛋白表达的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率。细胞生长曲线显示转染前、后细胞增殖能力的改变。结果转染外源性ERβ1真核表达质粒后,MDA-MB-231细胞中ERβ1及p53 mRNA和蛋白表达明显增强(P0.01);细胞凋亡率明显增加(P0.01),增殖能力明显减弱(P0.01)。结论在乳腺癌中,ERβ1可以通过上调p53基因表达促进乳腺癌细胞凋亡,从而抑制乳腺癌细胞的增殖。     

雌激素受体β1下调人端粒酶逆转录酶基因表达抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的研究

目的观察外源性雌激素受体β1(ERβ1)基因转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞后对人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达和细胞增殖能力的影响。方法应用脂质体法将ERβ1真核表达质粒转染至乳腺癌MDA-MB-231细胞中(pcDNA3.1-ERβ1转染组),另分别设空载体组和未转染组作为对照,分别用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测各组细胞中ERβ1h、TERT mRNA和蛋白表达的变化;流式细胞仪观察细胞凋亡率的变化;细胞生长曲线观察转染后细胞增殖能力的改变。结果 pcDNA3.1-ERβ1转染组MDA-MB-231细胞中ERβ1 mRNA表达量为0.449±0.077,明显高于未转染组的0.153±0.035(P=0.001)或空载体组的0.160±0.020(P=0.000);相应的ERβ1蛋白表达量为0.847±0.065,亦明显高于未转染组的0.356±0.050(P=0.001)或空载体组的0.390±0.030(P=0.000)。pcDNA3.1-ERβ1转染组MDA-MB-231细胞中hTERT mRNA表达量为0.127±0.020,明显低于未转染组的0.283±0.025(P=0.001)或空载体组的0.283±0.049(P=0.002);相应的hTERT蛋白表达量为0.147±0.023,也明显低于未转染组的0.783±0.025(P=0.001)或空载体组的0.802±0.019(P=0.002)。细胞生长曲线提示,从第3天开始pcDNA3.1-ERβ1转染组细胞的增殖能力较未转染组明显减弱(P<0.05);流式细胞仪结果显示,pcDNA3.1-ERβ1转染组的细胞凋亡率为(6.15±0.94)%,明显高于未转染组的(1.41±0.42)%(P=0.001)。结论 ERβ1可能通过下调hTERT基因表达抑制乳腺癌细胞的增殖。     

ERα和ERβ及GPR30在MCA-38细胞中的表达及对细胞增殖的影响

目的：检测雌激素受体ERα、ERβ和GPR30在小鼠结肠腺癌细胞系MCA-38中的表达,研究雌激素影响MCA-38细胞增殖的作用机制。方法：采用RT-PCR和Western blot检测MCA-38细胞ERα、ERβ、GPR30 mRNA及蛋白表达情况,经不同浓度E2和E2-BSA（空白对照、0.01、0.1、1、10和100 nmol/L）作用于MCA-38细胞24 h后应用MTT法检测细胞增殖情况,比较E2组和E2-BSA组细胞增殖差异。结果：MCA-38细胞表达ERα、ERβ和GPR30,其中ERβ表达量最高;生理浓度的E2（0.1～10 nmol/L）促MCA-38细胞增殖作用最为明显（P〈0.05）,而E2-BSA组与空白对照组比较,无明显促增殖作用（P〉0.05）。结论：ERα是MCA-38细胞所表达的主要雌激素受体,一定浓度的E2对MCA-38细胞有明显的促增殖作用,该作用为E2通过核受体途径实现,而与雌激素膜受体无关。     

低剂量壬基酚促进DU-145细胞增殖及雌激素膜受体GPR30表达的研究

目的:观察低剂量外源性雌激素壬基酚(NP)对人前列腺癌细胞株DU-145增殖和雌激素膜受体GPR30表达的影响。方法:DU-145细胞暴露于不同浓度的NP,通过细胞增殖实验测定DU-145细胞的半数抑制率(IC50),确定低剂量NP的暴露浓度范围;CCK-8实验测定低剂量NP对细胞增殖的影响;RT-PCR法观察DU-145细胞中3种雌激素受体(ER),ER-α、ER-β和雌激素膜受体GPR30的表达水平以及低剂量NP暴露后,雌激素膜受体GPR30表达的变化。结果:NP抑制细胞增殖的IC50为46μmol/l,确定本实验中使用的低剂量NP浓度分别为0.01、0.1、1μmol/l;CCK-8的结果发现,低剂量NP对DU-145细胞具有促增殖作用。RT-PCR的结果发现,DU-145细胞中有3种ER的表达,与前列腺上皮细胞表达类似,低剂量NP具有促GPR30表达的作用。结论:雌激素膜受体GPR30可能在介导低剂量NP促前列腺癌细胞DU-145增殖的过程中起到一定作用。     

雌激素受体α对膀胱癌细胞增殖和转移影响的实验研究

目的 探讨雌激素受体α(ERα)对膀胱癌细胞增殖和侵袭力的影响机制. 方法 建立ERα过表达的膀胱癌细胞T24ERα模型,对照组为膀胱癌细胞株T24V空质粒组.应用四甲基偶氮唑比色法检测细胞生长情况,流式细胞技术检测细胞凋亡情况,Transwell和细胞划痕实验检测膀胱癌细胞的侵袭能力,蛋白质印迹法检测ERα调节膀胱癌细胞增殖和侵袭能力的信号通路. 结果 与空质粒对照组相比,实验组在96 h和144 h细胞抑制率分别为18.85％、37.21％,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).实验组细胞凋亡率为(18.93±1.41)％,对照组为(9.91±1.08)％,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).实验组穿越基质胶的细胞比例为(10.00±2.00)％,显著低于对照组(26.00±3.61)％,差异有统计学意义(P＜0.05).免疫印迹显示与对照组相比,T24ERα细胞内整合素β1、磷酸化FAK、磷酸化Src和Src蛋白表达明显减低. 结论 ERα通过下调整合素β1-FAK/Src信号通路抑制膀胱癌细胞的生长和转移,同时促进膀胱癌细胞的凋亡.     

雌激素受体a介导小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化

目的通过研究17β-雌二醇干预小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)体外成骨分化,揭示雌激素预防和治疗绝经后骨质疏松症(PMO)的机制。方法贴壁法分离培养小鼠的MSCs,并通过流式细胞仪鉴定其细胞表面标志物,同时体外诱导分化,鉴定MSCs多向分化潜能;免疫荧光、RT-PCR和Western Blot检测MSCs表达雌激素受体α和β(ERα和ERβ);在雌激素干预MSCs成骨诱导分化过程中,添加10-11~10-7M的17β雌二醇和/或ER拮抗剂ICI182,780和ERα选择性拮抗剂MPP,采用冯·科萨染色和定量钙离子测定方法,检测矿化结节数量及钙离子浓度。结果体外培养的小鼠MSCs表达ERα和ERβ。与对照组相比,17β雌二醇干预能显著增加矿化结节数量增加及钙离子浓度,ER拮抗剂ICI182,780和ERα选择拮抗剂MPP能逆转17β雌二醇的成骨诱导效应。结论 17β雌二醇主要通过ERα能提高MSCs体外成骨诱导分化,可能是雌激素替代治疗PMO的实验依据。     

pAdxsi-ERβ腺病毒转染对ERβKO小鼠阴茎海绵体血管内皮的影响

目的:探讨ERβ基因过表达对ERβKO小鼠阴茎血管内皮的影响及相关分子机制。方法:选取ERβKO雄性小鼠12只,随机分为两组:ERβKO+TNFα+pAdxsi-ERβ组和ERβKO+TNFα+空病毒组。ERβKO+TNFα+pAdxsi-ERβ组给予ERβ基因重组腺病毒转染处理14 d,ERβKO+TNFα+空病毒组转染空病毒作对照,同时两组均给予TNFα6μg/(kg·d)腹腔注射,连续14 d。采用APO法观察小鼠的阴茎勃起功能;免疫组化检测内皮标志物CD34、vWF的变化情况;RT-PCR、Western印迹和免疫组化检测eNOS-NO通路相关分子表达情况。结果:与ERβKO+TNFα+空病毒组相比,ERβKO+TNFα+pAdxsi-ERβ组小鼠的变化情况如下:①勃起次数增多(2.17±0.41 vs 0.50±0.55,P<0.05),勃起潜伏期缩短[(24.0±1.27)min vs(28.83±1.33)min,P<0.05];②内皮标志物CD34、vWF表达更丰富[(1.50±0.55;1.33±0.52)vs(0.67±0.52;0.50±0.55),P<0.05];③eNOS、Cam表达减少,小窝蛋白-1表达上调(P均<0.05),RT-PCR与Western印迹结果相符合。结论:ERβ基因对阴茎血管内皮具有保护作用,eNOS-NO通路是其发挥作用的机制之一。     

雌激素受体β1在MDA-MB-231人乳腺癌细胞中高表达对雷诺昔芬抗肿瘤作用的影响

目的探究雷诺昔芬（RAL）对乳腺癌中过表达雌激素受体（ER）β1的MDA-MB-231细胞的抑制作用。 方法用含ERβ1基因的HIV慢病毒转染乳腺癌MDA-MB-231细胞,获得稳定表达ERβ1的乳腺癌细胞株。采用RT-PCR法检测转染细胞中ERβ1 mRNA的表达水平,Western blotting法检测细胞中ERβ1蛋白的表达水平;各细胞亚型分别于0、1、10 μmol/L的RAL共培养48 h,观察RAL对ERβ1高表达细胞株及对照细胞株治疗作用的差异。 结果HIV慢病毒转染后细胞绿色荧光表达效率达到90%以上;RT-PCR检测显示阳性转染组MDA-MB-231/ERβ1细胞中ERβ1 mRNA水平较阴性转染组提高了12.9倍（P<0.05）;阳性转染组细胞中ERβ1蛋白水平也相应提高;细胞实验表明高浓度（10 μmol/L）的RAL对MDA-MB-231细胞有明显的增殖抑制作用,特别是对ERβ1高表达细胞株的抑制作用更加明显（F=9.273,P=0.015）。 结论在乳腺癌MDA-MB-231细胞中,ERβ1高表达可以使细胞对RAL更加敏感。     

LC 促进人成骨样 MG-63 细胞增殖及相关机制的研究

目的探讨大黄酸哌嗪雌酚酮(rhein-piperizinyl-estrone,LC)对人成骨样MG-63细胞增殖活性的影响及其相关分子机制。方法在原工作基础上,以兼有两种雌激素受体(estrogen receptor,ER)亚型表达的人成骨样MG-63细胞为研究对象,分别应用MTT法和流式细胞术,观察LC对MG-63细胞的增殖活性和细胞周期分布的影响。利用前期构建的ERα或ERβ稳定高抑制表达的MG-63细胞株,应用免疫印迹技术,对LC的作用机制和可能的信号通路进行研究。结果与对照组相比,LC可明显促进MG-63细胞的增殖活性,该作用具有剂量依赖性;可调节细胞周期分布,使G1期细胞比例减少、G2+S期细胞比例增加,进而促进细胞生长。进一步研究发现,ER阻断剂ICI 182,780可完全阻断LC的促增殖作用,提示LC是经ER途径对MG-63的增殖活性发挥作用的;利用ERα或ERβ高抑制表达的稳定细胞株,证实LC的促增殖作用是由ERα和ERβ共同介导的;该作用与Ras/MEK/ERK、PI3K/Akt信号通路的激活密切相关。结论 LC可经ERα和ERβ共同介导对人成骨细胞的促增殖作用,有望成为治疗绝经后骨质疏松症的新型骨靶向雌激素类药物。     

口服和经皮肤途径雌激素替代治疗对手术绝经妇女围绝经症状和T淋巴细胞雌激素受体亚型表达的影响

目的研究口服和经皮肤途径的雌激素替代治疗（ERT）对手术绝经妇女围绝经症状和T淋巴细胞雌激素受体（ER）亚型表达的影响。方法手术绝经妇女随机分为使用雌二醇口服片1mg／d（口服组）和雌二醇贴片1．5mg／w（皮贴组）,用药3个月。评估用药前后围绝经症状、血雌二醇（E2）和卵泡刺激素（FSH）水平,实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测T淋巴细胞ERα、ERβmRNA表达,免疫荧光法和免疫印迹法检测ERα、ERβ蛋白质表达。结果口服组和皮贴组用药后围绝经症状均明显改善,血清E2水平明显升高,FSH水平明显降低,两组间无明显差异。两组用药后T淋巴细胞ERαmRNA和蛋白质表达均明显高于用药前,ERβmRNA和蛋白质表达有增加趋势,两组间无明显差异。结论口服和经皮肤途径的ERT均能改善手术绝经妇女的围绝经症状,推测雌激素是通过与人T淋巴细胞ERα结合后影响绝经后的T淋巴细胞功能。     

视黄醇类核内受体-α基因慢病毒载体的构建及其对肝星状细胞的影响

目的:通过视黄醇类核内受体-α(retinoid X receptor-alpha,RXR-α)基因慢病毒表达载体的构建,及其对肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)活化、增殖影响的研究,探讨RXR-α基因在肝纤维化中的作用。方法:①构建RXR-α基因慢病毒表达载体;②分离和体外培养大鼠HSC;③将自发活化的HSC分成3组,即正常对照组、阴性对照组和RXR-α载体组;分别将空白慢病毒载体和RXR-α慢病毒载体转染自体活化的HSC,采用Western印迹法检测各组细胞中RXR-α、α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白表达变化,用MTT法检测各组HSC培养24、48、72及96 h后的增殖情况。结果:正常对照组及阴性对照组HSC中几乎没有RXR-α蛋白的表达,而RXR-α载体转染组的HSC中出现RXR-α蛋白的明显表达。与正常对照组及阴性对照组相比,RXR-α载体组转染的HSC中α-SMA蛋白表达量显著下降(t=3.767,P0.01和t=8.491,P0.05),Ⅰ型胶原蛋白表达也显著降低(t分别为10.449和10.756,P值均0.01),同时HSC的增殖能力也显著下降(t分别为4.381和1.778,P值均0.05)。而阴性对照组与正常对照组相比,α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白表达量和HSC增殖能力无明显变化(P0.05)。结论:RXR-α基因在HSC内的增强表达能显著抑制HSC的活化和增殖,具有潜在的抑制肝纤维化的作用。     

ERΔE5在乳腺癌组织中的表达及临床意义探讨

目的：通过检测乳腺癌和癌旁乳腺组织（乳腺癌标本边缘外5cm）中雌激素受体α（Estrogen Receptor,ERα）剪切变异体ERΔE5表达水平的差异,探讨ERΔE5在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法：培养乳腺癌细胞株ZR-75-1,采用RT-PCR检测目的基因ERΔE5,建立阳性对照体系。以液氮冷冻储存的59例乳腺癌组织和59例癌旁乳腺组织提取目的基因,进行对照实验,检测ERΔE5在乳腺癌组织和癌旁乳腺组织中的表达状况,分析二者的表达差异及其临床意义。结果：在ER阳性乳腺癌标本中,ERΔE5阳性20例（20/44）,ER阴性的乳腺癌标本中,ERΔE5阳性6例（6/15）,两者差异无统计学意义（P=0.7170）;在人表皮生长因子受体2（human epidermal growth factor receptor,HER-2）阳性的乳腺癌标本中,ERΔE5阳性20例（20/22）,HER-2阴性的乳腺癌标本中,ERΔE5阳性6例（6/37）。采用单因素分析,发现乳腺癌标本中ERΔE5的阳性表达与HER-2的阳性表达呈正相关（P〈0.0001）。在乳腺癌标本中ERΔE5的阳性表达率为44.07%（26/59）;在癌旁乳腺组织中未见ERΔE5的表达,两者比较差异有统计学意义（P〈0.0001）。在乳腺癌标本中ERΔE5的表达与临床分期无相关性（P=0.9084）。结论：在乳腺癌标本中ERΔE5的表达显著高于癌旁乳腺组织,而且与HER-2表达呈正相关,提示ERΔE5可能是一种新的临床预后的指标。     

精子发生阻滞不育患者睾丸雌激素受体α的表达

目的:探讨雌激素受体α(ERα)在睾丸的表达与精子发生阻滞的关系。方法:用HE染色技术检查120例不育症患者睾丸活检标本,其中精子发生阻滞患者标本应用免疫组化法检查ERα的表达,并以10例健康人睾丸组织作为对照。结果:120例标本中符合精子发生阻滞病理诊断标准者有31例(占25.8%)。正常健康人睾丸组织中,ERα在睾丸支持细胞、类肌细胞和间质细胞的细胞核内表达,生精上皮细胞不表达;而在精子发生阻滞的睾丸组织中,ERα也在睾丸支持细胞、类肌细胞和间质细胞的细胞核内表达,但表达较弱,生精上皮细胞不表达。两者表达强度存在显著性差异(P<0.05)。结论:雄激素与雌激素通过各自的受体发挥协调作用而共同促进精子发生。精子发生阻滞可能与包括雄激素受体、ERα及热休克蛋白90在内的一系列复杂的细胞信号转导障碍有关。     

缺氧诱导因子1α诱导人前列腺癌细胞上皮间质化改变的研究

目的:研究人前列腺癌细胞在缺氧诱导因子1α(HIF-1α)诱导下能否发生上皮细胞间质转化态(EMT)改变,进而致侵袭能力增强,并初步分析其分子机制。方法:应用RT-PCR技术检测LNCaP细胞及其亚细胞系C4、C4-2、C4-2B这4种EMT阴性的人前列腺癌细胞中波形蛋白(vimentin)mRNA表达情况,并凭此筛选出适合于进一步作转染诱导试验的细胞。用脂质体Lipofectamine2000包装重组真核表达载体pCDNA3.1(-)/HIF-1α和pCD-NA3.1(-)空质粒后,分别转染上步试验所挑选出的人前列腺癌细胞LNCaP,600μg/mLG418筛选抗性克隆。免疫荧光及Western印迹法鉴定HIF-1α表达,Western印迹法检测EMT标志蛋白——上皮型钙粘素(E-cadherin)和vimentin的表达,Transwell验证转染后LNCaP细胞侵袭能力的改变。结果:RT-PCR证实4种EMT阴性的细胞中,仅LNCaP表达有vimentin编码基因,适合作转染诱导试验。免疫荧光也观察到HIF-1α转染细胞胞质中荧光亮度较空质粒转染细胞和未转染细胞明显增强。Western印迹法证实HIF-1α转染细胞发生了EMT转化,其E-cad-herin表达缺失,而vimentin表达增加。同时,Transwell体外侵袭试验也发现,LNCaP/HIF1α细胞的体外侵袭能力显著高于LNCaP细胞和LNCaP/pCDNA3.1(-)细胞。结论:HIF-1α过表达可以通过调节两种EMT相关蛋白诱导人前列腺癌细胞LNCaP发生EMT改变并致其侵袭能力增强。     

乳腺癌组织中HER2、ERα、ERβ、PR的表达及其相关性分析

目的探讨雌激素受体α（ERα）、雌激素受体β（ERβ）、孕激素受体（PR）、人类表皮生长因子受体2（HER2）在乳腺癌组织中的表达及其与TNM分期和腋窝淋巴结状况的关系。方法随机选择我院在2004年12月至2007年12月收治的HER2高表达（＋＋＋）51例与无表达（-）53例乳腺浸润性导管癌病例，分别检测乳腺癌组织的ERα、ERβ、PR的表达水平，分析其与TNM分期、腋窝淋巴结转移等临床指标的相关性。结果104例乳腺癌患者，TNM分期为I期的占14．42％，Ⅱ期占62．50％，Ⅲ期占19．23％，Ⅳ期占3．85％；HER2阳性的淋巴结转移率为41．18％，HER2阴性的转移率为47．5％；ERα、ERβ、PR的阳性表达率分别为52．88％、63．46％、73．08％。ERβ与ERα、PR的表达呈正相关（P〈0．01），与HER2的表达负相关（P〈0．01）；ERα与PR的表达正相关（P〈0．01），与HER2负相关（P〈0．01），PR与HER2的表达负相关（P〈0．05）；ERα、ERβ、PR、HER2的表达与淋巴结转移情况及TNM分期无显著相关性。结论HER2作为乳腺癌预后不良的重要指标与作为乳腺癌预后良好的重要指标ERα、ERβ、PR的表达呈负相关，与TNM分期及腋窝淋巴结转移状态未显示明显相关性。     

绿茶提取物对人卵巢癌SKOV3细胞生长抑制作用及作用途径的探讨

目的 探讨绿茶提取物（green tea extract,GTE）对人卵巢癌SKOV3细胞生长抑制作用及其作用途径.方法 SKOV3细胞的培养液内添加GTE,培养后,应用甲基噻唑基四唑（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）比色法检测SKOV3细胞的生长曲线;免疫细胞化学法检测细胞抗凋亡蛋白酶（Bcl-xl）、细胞凋亡蛋白酶（Caspase-3）等凋亡相关蛋白的表达;蛋白免疫印迹法（Western blotting）检测雌激素受体α（ERα）、雌激素受体β（ERβ）、芳香化酶（aromatase）等蛋白的表达水平.结果 MTT法显示,培养液内添加不同浓度GTE均能明显抑制SKOV3细胞生长（P〈0.05）,且呈明显的浓度依赖性;免疫细胞化学法显示,培养液内添加GTE 80 μg/L作用24 h后,SKOV3细胞中Bcl-xl蛋白的平均吸光度（A）值为（0.228±0.032）,与对照组（0.303±0.014）相比显著下调（P〈0.01）,Caspase-3蛋白平均A值为（0.193±0.043）,与对照组（0.135±0.030）相比明显上调（P〈0.05）;Western blotting法显示,经GTE（40、80 μg/L）作用24 h后,SKOV3细胞中ERα、aromatase的蛋白表达明显下调,ERα与内参β-肌动蛋白（β-actin）的比值分别为（0.665±0.042）、（0.208±0.020）,与对照组（0.846±0.046）相比均显著降低（P〈0.01）,aromatase与β-actin的比值分别为（0.251±0.030）、（0.129±0.054）,与对照组（0.728±0.026）相比亦均显著降低（P〈0.01）;ERβ蛋白的表达明显上调,其与β-actin的比值为（0.322±0.081）、（0.735±0 032）,与对照组（0.098±0.039）相比显著升高（P〈0.01）.结论 GTE在体外能有效抑制SKOV3细胞的生长与增值,其作用机制可能与诱导SKOV3细胞凋亡,并可下调ERα、aromatase蛋白的表达水平,上调ERβ蛋白的表达水平有关.