儿茶提取物抗甲型流感病毒作用的实验研究

目的　研究从中药儿茶中提取的药物成分抗甲型流感病毒的作用。方法　用狗肾传代MDCK细胞培养法观察儿茶提取物抑制甲型流感病毒的致细胞病变作用;用鸡胚培养法观察儿茶提取物抑制甲型流感病毒增生的作用;用红细胞凝集试验观察儿茶提取物体外直接抑制甲型流感病毒的作用。结果　1)儿茶提取物的细胞毒性较低,可有效抑制甲型流感病毒感染细胞(P<0.05);2)儿茶提取物在一定范围内可明显抑制甲型流感病毒在鸡胚内的增生,经红细胞凝集试验测定抑制病毒效价为8倍或8倍以上;3)儿茶提取物直接与甲型流感病毒作用后可抑制病毒血凝效价达16 倍以上。结论　儿茶提取物具有很好的抗甲型流感病毒的作用。     

金银花提取物抗病毒的作用研究

目的:探讨金银花提取物的抗病毒作用.方法:采用甲型流感病毒(A/PR/8/34)感染小鼠,观察肺指数抑制率和保护率.结果:金银花提取物20g/kg和40g/kg剂量组对甲型流感病毒(A/PR/8/34)感染小鼠具有明显的保护作用,保护率分别为58.7%和69.0%,能明显降低甲型流感病毒感染小鼠的肺指数值,肺指数抑制率分别为14.6%和18.7%.与病毒对照组比较具显著性差异(P<0.05,P<0.01),组织病理学检查结果显示小鼠病毒性肺炎,主要表现为化脓性支气管炎.小叶性肺炎和间质性肺炎.金银花提取物各剂量组可明显减轻肺部病变.结论:金银花提取物具有抗甲型流感病毒感染的作用.     

绵马贯众提取物抗甲型流感病毒FM1株实验研究

文章采用鸡胚体外抗病毒实验方法对绵马贯众3种提取物进行了实验研究。结果：绵马贯众3种提取物的预防作用从强到弱的顺序为水提取物、乙醚提取物和乙醇提取物;绵马贯众3种提取物的治疗作用从强到弱的顺序为乙醇提取物、水提取物和乙醚提取物。     

黄芪和秦艽提取物抗甲型流感病毒研究

目的:评价中药黄芪和秦艽提取物混合液抗甲型流感病毒的作用。方法:⑴复制小鼠肺部甲型流感病毒感染模型56只,随机分为病毒对照组(NS,n=9)、利巴韦林组(0.1g/kg,n=11)、黄芪组(0.5g/kg,n=12)、秦艽组(0.5g/kg,n=12)及混合提取物组(0.5g/kg,n=12),给药4d后处死计算肺指数和抑制率;⑵另40只模型,随机均分为病毒对照组、黄芪组、秦艽组及混合提取物组,给药14d后计算各组死亡保护率和延长生命率。结果:⑴利巴韦林组、黄芪组、秦艽组及混合提取物组肺指数抑制率均显著高于正常对照组和病毒对照组(P<0.05或P<0.01);⑵黄芪组和混合提取物组小鼠平均存活天数明显高于病毒对照组(P<0.05或P<0.01)。两项实验中均是混合提取物组效果最为明显。结论:黄芪和秦艽混合提取物具有明显的抗甲型流感病毒作用,效果优于单独的黄芪和秦艽。     

银翘感冒颗粒体外抗甲型流感病毒作用的药效学实验

目的通过实验观察银翘感冒颗粒的体外抗甲型流感病毒作用。方法采用鸡胚接种和血凝试验测定病毒效价。结果药物的直接灭活作用(A组)和药物抑制病毒在鸡胚内的增殖作用(B组)的血凝滴度(GMT)分别为13.61和18.52(P<0.01)。结论银翘感冒颗粒在对甲型流感病毒的直接灭活作用和抑制病毒在鸡胚内的增殖作用方面均有效。     

板蓝根不同提取物抗甲型流感病毒的实验研究

目的:观察板蓝根不同提取物抗甲型流感病毒的作用.方法:采用用血凝滴度640以上的甲型流感病毒A/PR/8/34的尿囊液30μ1滴鼻感染小鼠,观察小鼠感染甲型流感病毒后发病及死亡情况.结果:板蓝根提取物2号1.0 g/kg剂量组和板蓝根提取物3号1.67g/kg剂量组可明显延长甲型流感病毒感染小鼠存活天数和降低死亡率,与病毒对照组比较具有显著性差异(P<0.05,P<0.01).板蓝根提取物1号0.67g/kg剂量组和板蓝根提取物4号1.12g/kg剂量组可显延长甲型流感病毒感染小鼠存活天数,与病毒对照组比较具有显著性差异(P<0.05).结论:板蓝根提取物2号组和板蓝根提取物3号组具有较好的抗甲型流感病毒的作用.     

四种板兰根提取物抗流感病毒作用实验研究

【目的】研究板蓝根中性、酸性、碱性和两性提取物抗流感病毒作用及其对机体免疫力的影响。【方法】用鸡胚培养法观察板蓝根提取物对流感病毒接种鸡胚的毒性抑制作用;以病毒滴鼻感染小鼠,建立病毒感染小鼠的模型,观察4种提取物对模型小鼠死亡率及脾T细胞、B淋巴细胞增殖的影响。【结果】鸡胚实验显示,板蓝根酸性提取物能显著阻滞病毒感染鸡胚。动物实验表明,经过酸性提取物治疗的小鼠死亡率明显降低,鼠脾T细胞、B淋巴细胞刺激指数增高,免疫功能增强,其它3种提取物均无上述作用。【结论】板蓝根酸性提取物具有较强的直接抑制流感病毒的作用。     

不同连翘制剂对甲型流感病毒NP基因转染后表达的影响

目的：观察连翘苷、连翘醇提液、连翘水煎剂等3种连翘制剂对甲型流感病毒甲1型流感病毒核蛋白（ nucleoprotein,NP）基因转染后表达的影响。方法：将甲型流感病毒NP基因转染Hela细胞,用甲型流感病毒胶体金检测3种连翘制剂对转染后细胞内和上清核蛋白表达情况,用RT_PCR检测转染后Hela细胞内NP基因的拷贝数。结果：NP重组质粒组上清胶体金检测为阳性,连翘苷组上清为阴性、细胞内为弱阳性;连翘水煎剂及连翘醇提物组上清均为弱阳性。连翘苷组NP基因表达量较NP重组质粒组减少（ P<0.05）。结论：连翘苷抑制甲型流感病毒NP基因转染后表达作用最强。     

连翘苷对甲型流感病毒核蛋白基因表达的影响研究

目的探讨连翘苷对甲型流感病毒核蛋白(NP)基因转染后表达的影响。方法将甲型流感病毒NP基因转染Hela细胞,用甲型流感病毒胶体金法检测连翘苷对转染后细胞内和上清核蛋白表达情况,用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Hela细胞内NP基因的拷贝数。结果 NP重组质粒组甲型流感病毒核蛋白含量高。空质粒组、脂质体组、Hela细胞组基本不含甲型流感病毒核蛋白。连翘苷组上清无或可能含有微量核蛋白。连翘苷组胞内甲型流感病毒含量不高。RT-PCR校正曲线相关性为0.998,效率为97.4%。重复4次转染后48 h连翘苷组NP基因表达量为(2.1±0.3)×105拷贝数/μl,NP重组质粒组NP基因表达量为(61.5±15.0)×105拷贝数/μl,连翘苷组NP基因表达量低于NP重组质粒组,差异有统计学意义(t=7.672,P<0.05)。结论连翘苷可以抑制甲型流感病毒NP基因转染后表达。     

大青叶水提物抗甲型流感病毒活性研究

目的观察大青叶水提物的抗甲型流感病毒(IAV)活性。方法用热回流法提取大青叶水提物;用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测大青叶水提物对狗肾传代细胞(MDCK)的毒性作用;将流感病毒反向遗传八质粒病毒包装系统共转染进混养的人类胚胎肾细胞(293T)和MDCK细胞中制备IAV,并测定IAV的半数细胞培养物感染量(TCID50)。分3组进行大青叶水提物抗IAV活性检测:第1组先分别用0.25、0.50、0.75、1.00、1.25 g·L~(-1)的水提物作用细胞4 h,再分别加10×TCID50病毒吸附细胞2 h;第2组用0.25、0.50、0.75、1.00、1.25 g·L~(-1)的水提物和10×TCID50病毒同时作用细胞4 h;第3组先用10×TCID50病毒吸附细胞2 h,再分别加0.25、0.50、0.75、1.00、1.25 g·L~(-1)的水提物作用细胞4 h;然后用CCK-8法测定大青叶水提物对IAV的增殖抑制率。结果大青叶水提物的细胞对照组、0.50、0.75、1.00、1.25、1.50、1.75、2.00、3.00、4.00、5.00 g·L~(-1)组的细胞存活率分别为(100.00±0.00)%、(99.97±1.08)%、(99.95±4.34)%、(98.62±1.45)%、(98.81±2.04)%、(74.65±6.29)%、(49.71±2.14)%、(39.86±4.31)%、(19.75±2.26)%、(7.86±3.74)%、(2.77±1.76)%,大青叶水提物对MDCK细胞的半数细胞毒性浓度为1.75 g·L~(-1),大青叶水提物对MDCK细胞的最大无毒浓度为1.25 g·L~(-1);第1、2、3组大青叶水提物各浓度亚组的病毒增殖抑制率均高于病毒对照组(P<0.01)。第2、3组大青叶水提物各浓度亚组的病毒增殖抑制率均显著低于第1组对应的大青叶水提物亚组(P<0.05)。第3组大青叶水提物各浓度亚组的病毒增殖抑制率显著高于第2组对应的大青叶水提物亚组(P<0.05)。第1、2、3组对IAV的半数抑制浓度分别为0.75、>1.25、1.25 g·L~(-1)。3组不同干预方法的抗病毒活性排序为:第1组>第3组>第2组。结论大青叶水提物有较好的抗IAV活性,其作用机制可能与增强机体免疫力相关。     

绿原酸提取及分析测定方法研究进展

绿原酸为金银花的主要抗菌有效成分,它具有抗菌、抗病毒、解热、升高白细胞、保肝利胆、免疫调节、抗肿瘤、降血压、降血脂、清除自由基等作用.将绿原酸的提取及分析测定方法的研究近况综述.     

山银花黄酮类提取物对人肝L-02细胞甘油三酯蓄积及SREBP-1c表达的影响

目的观察山银花黄酮类提取物对人肝L-02细胞甘油三酯蓄积的影响,并初步探讨SREBP-1c蛋白及基因表达在其中的作用。方法油红O染色初步观察山银花黄酮类提取物对脂变人肝L-02细胞中脂滴形成的影响。然后以脂变人肝L-02细胞为模型,不同浓度(0、5、10、20 mg/L)山银花黄酮类提取物作用于细胞24 h以及10 mg/L山银花黄酮类提取物作用于细胞不同时间(0、12、24、48、72 h),生化试剂盒测定细胞内甘油三酯(TG)的含量,Western印迹法检测细胞内SREBP-1c蛋白表达变化,实时荧光定量PCR检测细胞内SREBP-1c mRNA表达变化。结果山银花黄酮类提取物显著降低人肝L-02细胞中脂滴含量,细胞内TG水平下降,SREBP-1c蛋白及基因表达下调,且呈现一定的剂量和时间依赖性。结论山银花中黄酮类提取物能引起人肝L-02细胞TG含量下降,且这种作用与SREBP-1c蛋白及基因表达下调有一定关系。     

金银花体外抗流感病毒细胞代谢成分研究

目的考察金银花药物成分经正常细胞及感染流感病毒细胞代谢后,金银花主要成分的变化情况。方法应用中药指纹图谱技术,将得到的色谱图导入指纹图谱相似度评价系统进行分析,比较各组间的标准指纹图谱主要特征色谱峰,找出与金银花抗流感作用相关的差异色谱峰。结果以培养基空白组为对照,正常细胞给药组、病毒细胞给药组各主要特征峰的峰面积表现出整体下降趋势。8号峰面积明显下降,2号峰、7号峰与c号峰与培养基空白组及金银花对照药材比较,相对峰面积成倍增加。结论 2、7、8、c号峰对应的化合物可能与金银花抗流感病毒活性密切相关。     

全球甲型流感病毒H5A1序列的分子进化研究

目的应用生物信息学数据库和工具,对现有的H5亚型甲型流感病毒全球分离株的H5A1抗原序列进化规律进行研究。方法下载NCBI Genbank和美国洛斯阿莫斯国家实验室流感病毒数据库中全部的甲型流感病毒H5A1序列,采用快速极大似然法绘制进化树,并用SRDT模型估计各分枝的进化速度与出现时间。结果H5A1序列的进化树可被分为两个各自独立进化的世系:美洲世系和欧/亚世系,它们在地域分布、序列位点等方面区别明显,且可被进一步细分为几大进化枝,野生禽类分枝和家禽株系分枝的进化速度存在明显差异,所有的人及其他哺乳动物感染株系则均来自于欧/亚世系的亚洲禽/人分枝。结论H5A1序列在野生禽类中已达到相对稳定的状态,其自然变异速度为(1.990~2.535)×10-3/位点/年,而家禽中的高毒力变异株进化速度明显加快。目前威胁人类的主要是1996年之后出现的亚洲变异株,且进化树结构提示该株系出现过多次禽/人跨宿主传播事件,值得对其位点特征进行深入研究。     

清肺注射液不同配伍体外对流感病毒增殖的影响

[目的]观察复方清肺注射液经正交设计确定的16组不同配伍制剂对流感病毒亚甲型鼠肺适应株[A/FM/1/47(H₁N₁)]增殖的影响。[方法]采用结晶紫染色法观察清肺注射液16组不同配伍制剂对流感病毒FM1株的体外抑制作用,同时以利巴韦林和双黄连粉针为阳性对照药。[结果]清肺注射液的16种不同制剂中第9、13、14、15和16组制剂对流感病毒FM1株具有综合抑制作用,能阻止病毒吸附于狗肾细胞株(MDCK),具有直接杀病毒作用,且具有抑制细胞内病毒复制的作用。制剂1无抗病毒作用,制剂2～制剂4不能直接杀病毒,其余各组制剂仅在高浓度(2^-1～2^-2)时抑制病毒。[结论]清肺注射液的第9、13、14、15和16组制剂具有明确的抗流感病毒作用。     

五加皮体外抗甲型流感病毒的作用

目的筛选出五加皮最佳的给药方式并找出五加皮水浸液体外抗流感病毒的最大无毒浓度。方法采用流感病毒H1N1鸡胚传代,用血凝实验测定病毒效价;病毒感染细胞后观察CPE,采用Karber公式计算病毒的TCID50,用100TCID50的病毒液感染MDCK细胞;五加皮的水浸液作用于未经病毒感染的MDCK细胞48h,采用MTT法检测找出药物对细胞的最大无毒浓度。分别采用治疗给药、预防给药、直接灭活3种方式作用于MDCK细胞,观察药物对病毒的作用,并计算药物的抗病毒有效率（ER）。结果 1病毒感染MDCK细胞浓度为：100TCID50=2.14×10^-3;2药物作用于MDCK细胞的最大无毒浓度为1.78 mg/m L,其细胞存活率高达99.4%;33种给药方式中,五加皮水浸液治疗给药组没有作用（ER﹤0）,预防给药组（ER=78.26%）及直接灭活病毒组（ER=27.78%）抗病毒均有效,其中预防给药组的抗病毒有效率最高,作用效果最好。结论五加皮在体外具有较好的抗甲型流感病毒的作用,且预防给药方式抗病毒效果最好。     

不同种质板蓝根和大青叶的抗甲型流感病毒作用

目的：研究板蓝根和大青叶抗甲型流感病毒作用。方法：选用鸡胚法分别考察各１５个种质的板蓝根和大青叶对甲型流感病毒（Ａ１京防８６－１）的抑制作用。结果：血凝滴度实验表明，在对甲型流奇形怪状现毒的直接作用，治疗作用和预防作用３方面大多数板蓝板和大青叶有效，但各种质药样品抗病毒活性的有无及强度有明显差异。结论：在保证药材来源可靠的前提下，证明了板蓝根和大青叶确具抗病毒作用，并为药材种质的优选提供一定的依据     

复方感冒冲剂体外抗流感病毒作用

目的探讨复方感冒冲剂体外对流感病毒（H3N2）的抑制作用,为临床合理用药提供科学依据。方法使用狗肾传代细胞（Madin-Darby canine kidney,MDCK）建立体外病毒感染模型。将病毒与药物通过三种不同给药方式,通过细胞病变法观察复方感冒冲剂对流感病毒的抑制及对被感染细胞的保护作用。结果复方感冒冲剂在感染病毒同时加药方式下对流感病毒（H3N2）感染的MDCK细胞有明显的保护作用;在先给药再感染病毒的方式下对MD-CK细胞的保护作用较弱;在先加病毒后加药的方式下,复方感冒冲剂对病毒感染的MDCK细胞无明显保护作用。结论复方感冒冲剂具有体外抗流感病毒作用,其药效发挥可能依赖机体的代谢并与给药方式有关。     

2009年新型甲型H1N1流感流行特征及防控措施

自2009年3月墨西哥发现首例甲型H1N1流感病例以来,截至2009年5月29日已有53个国家和地区正式报告15 510例确诊病例,2009年4月29日,世界卫生组织（WHO）已将全球流感大流行警告级别从4级提升到5级,并且还有进一步升级的可能。引发此次疫情的病原体是一种之前从未在人和猪身上出现过的新型甲型H1N1流感病毒。该新病毒对奥司他韦（达菲）和扎那米韦较敏感,但对金刚烷胺和金刚乙胺具有抗药性。人群对该病毒普遍易感,经由人-人形式传播。甲型流感在潜伏期内有传播能力,因此必须对密切接触者进行严格检疫;民众应做到勤洗手,咳嗽、喷嚏、吐痰时使用纸巾掩住口鼻等预防措施以减少传播机会。公共场所良好的通风条件、个人良好的卫生习惯和健康状况是预防该病的关键。     

河南省18岁以下人群甲型H1N1流感抗体水平调查分析

目的 了解河南省18岁以下人群甲型H1N1流感抗体水平,为甲流防控提供相关依据。方法 采用微量血凝抑制试验对国家卫生部“甲型H1N1流感血清学横断面调查”的2020人(≤18岁)进行甲型H1N1流感抗体水平检测。结果 河南省18岁以下人群血清抗体阳性率为29.60%,13~18岁、7~12岁、0~6岁阳性率分别为45.70%、25.67%、23.71%,各年龄组阳性率比较差异有统计学意义(χ2=80.07,P<0.01)。城乡有差异(郑州市35.47%、其他市36.00%、农村23.67%)。接种疫苗人群抗体水平(63.89%)显著高于未接种人群(25.91%),χ2=117.18,P<0.01;有无流感样症状者的抗体阳性率差异无统计学意义(χ2=0.75, P>0.01)。结论 18岁以下人群具有一定的甲型H1N1流感抗体,但抗体水平较低,人群普遍易感,建议提高甲型H1N1流感疫苗接种率,进一步加强甲型H1N1流感防控措施。