氯血红素诱导人脐静脉内皮细胞血红素氧合酶表达及其对血管保护作用

目的观察氯血红素对血管内皮细胞血红素氧合酶(HO)表达和内源性一氧化碳(CO)的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,用氯血红素和原卟啉锌,以诱导和阻断HO-1的表达。通过逆转录聚合酶链式反应和免疫细胞化学法检测HO-1、HO-2 mRNA和蛋白的表达,酶联免疫法检测培养上清液中碳氧血红蛋白(COHb)含量,四唑氮比色法检测细胞增殖。结果HO蛋白主要定位于在内皮细胞胞浆,HO-2的表达高于HO-1;氯血红素显著增加血管内皮细胞HO-1 mRNA、蛋白质的表达及培养上清液中COHb含量,同时促进细胞增殖。结论HO-1表达和内源性CO增加是保护内皮细胞的分子生物学基础,提示HO/CO信号系统在心血管病的发生和发展中具有重要作用。     

血红蛋白氧合酶在妊娠期高血压疾病发病中的作用

目的探讨血红蛋白氧合酶（hemeoxygenase，HO）的生理状态下主要存在形式血红蛋白氧合酶-1、血红蛋白氧合酶-2在妊娠期高血压疾病（hypertensive disorder complicating pregnancy）患者与正常晚孕妇女胎盘中的表达规律，以及其产物一氧化碳（carbon monoxide，CO）在外周血的变化，研究血红蛋白氧合酶在妊娠期高血压疾病发病中的作用。方法选取2005年5月至2005年12月在山西医科大学第一医院刮宫产分娩的56例孕妇为研究对象，采用原位杂交技术和免疫组化法检测30例妊娠期高血压疾病患者（观察组，其中，观察组A患者为8例．观察组13为22例）与26例正常晚孕妇女（对照组）胎盘组织中HO-1mRNA，HO-2mRNA的表达和定位。并应用血气仪检测外周血中碳氧血红蛋白（COHb）的变化。结果①HO-1mRNA和HO-2mRNA在观察组胎盘滋养细胞及血管内皮细胞中的表达与对照组比较，差异无显著意义（P〉0．05）。②血红蛋白氧合酶-1在观察组胎盘滋养细胞中的表达，明显低于对照组，两组比较，差异有显著意义（P〈0．05）；血红蛋白氧合酶2在观察组胎盘滋养细胞和血管内皮细胞中表达，均明显低于对照组，与对照组比较，差异有显著意义（P〈0．05），并且随着妊娠期高血压疾病病情的加重，血红逐逝越弱，与对照组对比，差异有显著意义（P〈0.05）。③碳氧血红蛋白在观察组外周血中的水平明显低于对照组，两组比较，差异有显著意义（P〈0．05）。结论血红蛋白氧合酶可能参与妊娠期高血压疾病的发生。     

妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中HSP70、HIF-1α的表达及相关性研究

目的通过测定妊娠期高血压疾病患者和正常妊娠妇女胎盘组织中热休克蛋白70(Heat Shock Protein 70,HSP70)及胎盘组织中缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-Inducible Factor-1α,HIF-1α)的表达,探讨其在妊娠期高血压疾病发病中的作用,并为临床治疗提供实验性理论依据。方法收集90例妊娠期高血压疾病患者为妊娠期高血压疾病组(妊娠期高血压组30例,轻度、重度子痫前期组各30例),同期健康孕妇30例为对照组。用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法检测胎盘组织中HSP70、HIF-1α蛋白表达水平并进行定位、半定量及相关性分析;用逆转录聚合酶链法检测胎盘组织中HSP70、HIF-1αmRNA表达水平并进行相关性分析。结果 (1)胎盘组织中HSP70蛋白、mRNA表达水平:妊娠期高血压组、轻度、重度子痫前期组高于对照组(P0.05);重度子痫前期组高于妊娠期高血压组、轻度子痫前期组(P0.05);轻度子痫前期组较妊娠期高血压组升高,但差异无统计学意义(P0.05)。(2)胎盘组织中HIF-1α蛋白、mRNA表达水平:轻度、重度子痫前期组均高于对照组、妊娠期高血压组(P0.05);重度子痫前期组高于轻度子痫前期组(P0.05);妊娠期高血压组较对照组升高,但差异无统计学意义(P0.05)。(3)胎盘组织中HSP70和HIF-1α蛋白、mRNA表达的相关性:妊娠期高血压疾病组胎盘组织中HSP70蛋白表达水平与HIF-1α蛋白呈正相关(r=0.648,P0.05),HSP70 mRNA表达水平与HIF-1αmRNA呈正相关(r=0.619,P0.05)。结论 (1)HSP70、HIF-1α在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中表达均升高,且随疾病严重程度加重表达明显升高。(2)HSP70与HIF-1α在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中表达呈正相关,提示HIF-1α表达升高可能上调HSP70表达,两者紧密联系共同在妊娠期高血压疾病发病的病理生理过程中发挥作用。     

妊娠期高血压疾病患者胎盘中AngⅡ与AT_1R的表达及意义

目的:探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及其Ⅰ型受体(AT1R)在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学方法检测60例妊娠期高血压疾病患者及20例正常妊娠妇女胎盘组织中AngⅡ及AT1R的表达。结果:妊娠期高血压疾病组与正常妊娠组比较胎盘组织中AngⅡ表达明显升高(P<0.01)。妊娠高血压组、轻、重度子痫前期组胎盘组织中AngⅡ表达逐渐增强,各组间差异具有显著性(P<0.05)。妊娠期高血压疾病组胎盘AT1R表达水平显著高于正常妊娠组(P<0.01)。轻、重度子痫前期患者胎盘组织中AT1R表达强度明显高于正常妊娠组(P<0.05,P<0.01)。AngⅡ的表达与胎盘重量及新生儿体重呈负相关(r=-0.244,P<0.05;r=-0.347,P<0.01)。结论:妊娠期高血压疾病患者胎盘中AngⅡ、AT1R表达水平的变化与妊娠期高血压疾病的发病及病情发展有关。     

妊娠期高血压疾病患者血清IL-6与胎盘MMP-9和TIMP-1相关性

目的:探讨妊娠期高血压疾病患者血清IL-6与胎盘MMP-9和TIMP-1的表达、相互关系及其意义。方法:随机选择妊娠期高血压疾病患者85例为病例组,同期住院的正常孕妇70例为对照组,采用酶联免疫吸附实验ELISA法检测孕妇血清中IL-6的水平,免疫组化染色SP法测定胎盘组织中MMP-9和TIMP-1的表达。结果:病例组血清中IL-6含量高于对照组(P<0.05);病例组胎盘组织中MMP-9蛋白的表达低于对照组(P<0.05);病例组胎盘组织中TIMP-1蛋白的表达低于对照组(P<0.05)。血清中IL-6的含量与胎盘组织中MMP-9蛋白的表达呈明显的负相关(P<0.05),相关系数为-0.883;IL-6与TIMP-1蛋白的表达无相关性(P>0.05)。结论:IL-6和MMP-9与TIMP-1均参与了妊娠期高血压疾病的发生,IL-6和MMP-9协同作用,加速妊娠期高血压疾病的发生、发展。     

转录因子-kB在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达

目的:检测胎盘组织中转录因子-kB(nuclear factor-kappaB,NF-kB)的表达,探讨其与妊娠期高血压疾病发病的关系。方法:用免疫组化法对18例正常孕妇和50例妊娠期高血压疾病患者(其中妊娠期高血压15例,子痫前期轻度17例、重度18例)胎盘中NF-kB进行检测。结果:妊娠期高血压疾病患者胎盘中的NF-kB表达明显高于正常妊娠组(P<0.05),结论:胎盘组织中的NF-kB表达升高与妊娠期高血压疾病的发病有关。     

妊娠期高血压疾病患者血清及胎盘中AngⅡ及胎盘中AT_1R水平变化的研究

目的:检测妊娠期高血压疾病患者母血及胎盘组织中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及胎盘组织中血管紧张素Ⅱ的Ⅰ型受体(AT1R)水平的变化,以探讨AngⅡ及AT1R在妊娠期高血压疾病发病中的作用。方法:采用酶联免疫吸附双抗体夹心法(ELISA)检测60例妊娠期高血压疾病患者及20例正常妊娠妇女血清中AngⅡ水平,同时采用免疫组织化学方法检测胎盘组织中AngⅡ及AT1R的表达。结果:妊娠期高血压疾病组血清中AngⅡ水平明显高于正常妊娠组(P<0.01)。重度子痫前期组较轻度子痫前期组血清AngⅡ水平明显升高(P<0.01),轻度子痫前期组高于妊娠期高血压组(P<0.05)。妊娠期高血压疾病组与正常妊娠组比较胎盘组织中AngⅡ表达明显升高(P<0.01)。妊娠期高血压组、轻、重度子痫前期组胎盘组织中AngⅡ表达逐渐增强,各组间差异具有统计学意义(P<0.05)。妊娠期高血压疾病组胎盘AT1R表达水平显著高于正常妊娠组(P<0.01)。轻、重度子痫前期患者胎盘组织中AT1R表达强度明显高于正常妊娠组(P<0.05,P<0.01)。妊娠期高血压疾病组及正常妊娠组血清AngⅡ水平与胎盘组织AngⅡ表达均呈正相关(r=0.378,P<0.01;r=0.665,P<0.01)。AngⅡ的表达与胎盘重量及新生儿体重呈负相关(r=-0.244,P<0.05;r=-0.347,P<0.01)。结论:妊娠期高血压疾病患者血清AngⅡ水平显著升高,且随病情加重,血清AngⅡ有进一步上升的趋势,说明血清AngⅡ从一定程度上反映了病情的轻重,有望成为一种预测妊娠期高血压疾病的监测指标。妊娠期高血压疾病患者胎盘中AngⅡ、AT1R表达水平的变化与妊娠期高血压疾病的发病及病情发展有关。     

妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中IGF-1的表达及意义

目的:检测胎盘滋养细胞中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)表达水平,评估IGF-1在妊娠期高血压疾病中的作用。方法:用免疫组化法测定胎盘组织中IGF-1的表达,检测正常妊娠胎盘滋养细胞60例、妊娠期高血压疾病患者胎盘滋养细胞126例中IGF-1的表达水平,并通过观察切片中滋养细胞免疫染色情况对结果进行判定。结果:与正常胎盘滋养细胞比较,妊娠期高血压疾病患者胎盘滋养细胞中IGF-1的表达强度显著降低。结论:胎盘滋养细胞表达IGF-1的多少,与妊娠期高血压疾病的发生有关。     

妊娠期高血压疾病患者血浆NO水平及胎盘eNOS表达变化的意义

目的:研究妊娠期高血压疾病患者血浆一氧化氮(nitric oxide,NO)水平及胎盘内皮型一氧化氮合酶(endo-thelia nitric oxide synthase,eNOS)表达变化的意义。方法:应用硝酸还原酶法检测妊娠期高血压疾病患者及正常妊娠妇女血浆NO3-/NO2-浓度水平(反映NO的良好指标);采用RT-PCR技术检测胎盘中eNOS mRNA的含量,对其表达水平进行半定量比较;Western blot方法检测胎盘中eNOS蛋白含量,分析各组间是否存在表达水平的差异。结果:病例组血浆中NO3-/NO2-浓度分别明显低于对照组〔(40.71±13.21)μmol/L比(54.86±8.09)μmol/L,t=4.67、P<0.001〕,病例组胎盘eNOS mRNA(66.96±5.85比102.97±6.06,t=21.51、P<0.001)和蛋白(128.54±37.61比176.19±6.99,t=6.47、P<0.001)的表达明显低于对照组。并且患者血浆一氧化氮水平和胎盘eNOS mRNA及蛋白表达随疾病严重程度呈现下降趋势。结论:血浆一氧化氮水平和胎盘eNOS mRNA及蛋白表达降低与妊娠期高血压疾病的发病有关,并可能参与了疾病的病理生理过程。     

水通道蛋白1蛋白和mRNA在羊水量异常的妊娠妇女胎盘及胎膜中的表达

目的:研究水通道蛋白1(AQP1)在足月正常妊娠及羊水量异常的妊娠妇女胎盘及胎膜中的定位及表达,探讨AQP1表达与羊水量异常的相关性及其与羊水调节的关系。方法:应用免疫组化SP法和实时荧光定量PCR技术分别检测AQP1蛋白与mRNA在羊水量过少(羊水过少组)、羊水量正常(正常对照组)及特发性羊水过多(羊水过多组)足月孕妇胎盘、羊膜及绒毛膜组织中的表达,每组20例。结果:AQP1蛋白在胎盘血管内皮细胞、羊膜上皮细胞及绒毛膜滋养细胞中均有表达。与正常对照组相比,羊水过少组羊膜组织中AQP1 mRNA的表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);正常对照组与羊水过少组胎盘组织和绒毛膜组织中AQP1 mRNA的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。与正常对照组相比,羊水过多组羊膜组织中AQP1 mRNA的表达明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);正常对照组与羊水过多组胎盘组织和绒毛膜组织中AQP1 mRNA的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:当发生羊水量异常时,AQP1主要通过影响羊水的膜内吸收来维持羊水稳态平衡。胎盘、绒毛膜中的AQP1可能主要参与正常妊娠期间的羊水循环,对异常羊水量的调节作用较小。     

MMP-9及TIMP-1在妊娠高血压综合征患者母胎界面的表达及意义

目的:研究基质金属蛋白酶(m atrix m etalloprote inases,MMP)-9及其组织抑制物(tissue inh ib itor of m etallo-prote inases,TIMP)-1在妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘组织的表达情况及其与妊高征发病的关系。方法:采用免疫组织化学SP法检测48例妊高征(轻度10例、中重度38例)胎盘组织中MMP-9及TIMP-1的表达情况;同时做HE染色观察妊高征时胎盘的病理改变。结果:MMP-9、TIMP-1主要表达于滋养细胞、绒毛间质血管壁及蜕膜组织中。轻度妊高征MMP-9呈阳性表达,TIMP-1蛋白呈强阳性表达;中、重度妊高征MMP-9和TIMP-1蛋白均呈弱阳性表达,分别与正常妊娠和轻度妊高征相比表达均减弱,差异有极显著性(P<0.01)。中重度妊高征时胎盘组织绒毛数及间质血管数减少,出现典型的纤维素样坏死。结论:母胎界面MMP-9/TIMP-1表达异常与妊高征发病及胎盘病理改变的发生发展有关。     

核转录因子-kappa B在妊娠高血压综合征患者胎盘组织中的表达

目的:观察妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘滋养细胞中核转录因子-kappaB(NF-kB)的表达情况,探讨其在妊高征发病中的作用。方法:采用免疫组化法检测正常产妇及妊高征产妇胎盘组织中NF-kBp65的表达,并采用计算机图像分析系统进行定量分析。结果:①绒毛毛细血管内皮细胞中的表达:NF-kBp65主要表达于内皮细胞胞浆、胞核内,阳性率明显高于对照组(χ2=9.905,P=0.002),妊高征组间差异有显著性(χ2=7.580,P=0.023);妊高征组NF-kBp65表达强度明显高于对照组(P<0.001),且随着病情的加重逐渐增强,其组间比较差异有极显著性(P<0.01)。②胎盘滋养细胞中的表达:NF-kBp65表达于滋养细胞的胞浆和胞核内,妊高征组的阳性表达率明显高于对照组(χ2=8.479,P=0.014),其组间NF-kBp65阳性率随妊高征病情加重而增高,差异有显著性(χ2=8.479,P=0.014);妊高征组中NF-kBp65的表达强度明显高于对照组(P<0.001),且随着病情的加重其表达强度明显增强,组间比较差异有极显著性(P<0.01)。结论:妊高征患者胎盘血管内皮细胞及滋养细胞中NF-kB的表达较正常孕妇明显增强,且随病情加重而升高,可能在妊高征的发生发展中具有重要作用。     

妊娠高血压疾病胎盘绒毛组织内皮素-1及其受体的mRNA表达

目的探讨妊娠高血压疾病患者胎盘绒毛组织内皮素-1(ET-1)及其受体(ETA、ETB)的mRNA表达,了解其与妊娠高血压疾病的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测60例妊娠高血压疾病和30例正常妊娠胎盘绒毛组织ET-1、ETA和ETB的mRNA表达,并设立GAPDH内对照对PCR产物作半定量分析。结果胎盘绒毛组织存在ET-1、ETA及ETB mRNA的表达,且妊娠高血压疾病组ET-1和ETA mRNA表达明显高于正常对照组,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。ETB mRNA表达在两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论胎盘绒毛组织ET-1表达增加及其受体的变化在妊娠高血压疾病的发病中起重要作用。     

大鼠哮喘模型肺组织血红素氧合酶-1蛋白及基因表达

目的 探讨大鼠哮喘模型肺组织血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白及基因表达特点以及其与HO-1的活性之间的相关性.方法 清洁级雄性SD大鼠20只,随机分为对照组和哮喘组,每组10只.测定全血碳氧血红蛋白(COHb)的百分比含量;计算肺泡灌洗液(BALF)沉渣中细胞总数和分类;计数气道壁中浸润的炎性细胞数;用免疫组织化学染色法观察HO-1在哮喘大鼠肺组织的表达;用RT-PCR方法 检测哮喘大鼠肺组织HO-1基因表达.结果 HO-1阳性细胞主要定位于支气管上皮细胞及黏膜下巨噬细胞,气道平滑肌细胞偶有表达.2组表达HO-1的阳性细胞百分比分别为(5.03±1.22)%和(27.14±4.68)%;2组HO-1基因表达光密度比值分别为(0.32±0.05),(0.68±0.02);2组全血COHb的百分比含量分别为(0.45±0.35),(3.89±1.15);哮喘组HO-1蛋白、基因的表达水平以及全血COHb的百分比含量均显著高于正常组(P＜0.01).HO-1蛋白表达水平、基因表达水平与全血COHb的百分比含量均呈正相关(r=0.897,0.971,P＜0.01).结论 哮喘大鼠的肺组织HO-1蛋白基因表达水平显著增加,且反应HO-1活性的全血COHb的百分比含量亦显著增加,提示HO-1可能参与了哮喘的发病过程.     

子痫前期患者血红素氧合酶-1及一氧化碳测定

目的:探讨血红素氧合酶-1(Heme oxygennase-1,HO-1)在子痫前期中的表达和作用机制。方法:选取2002年6月~2005年6月,在兰州医学院第一附属医院及省妇幼保健院产科住院的子痫前期患者58例作为子痫前期组,其中轻、重度子痫前期患者分别为30、28例。另选50例同期住院的正常晚孕妇女作为对照组。对两组孕妇血清及胎盘溶浆中的HO-1活性及HbCO水平进行测定。结果:子痫前期组血清中HO-1活性、HbCO水平与对照组比较显著降低(P<0.05)。其中,轻度子痫前期患者的HO-1含量降低与对照组比较差异无显著性(P>0.05),而重度则有显著差异(P<0.05)。胎盘溶浆中HO-1、HbCO的变化趋势与血中测定一致。结论:血清和胎盘溶浆中HO-1的活性、HbCO水平的变化与子痫前期的病情发展有关,可作为病情变化的指标之一。     

低氧诱导因子-1与妊高征发病的研究进展

滋养细胞浅着床是妊娠期高血压疾病发病的关键环节 ,而滋养细胞的浸润深度直接影响到妊高征的发病。近年来关于低氧诱导因子 1在早孕滋养细胞浸润中的作用及在妊娠高血压综合征胎盘中的表达情况时有报道。该文对此加以综合分析 ,认为低氧诱导因子 1通过影响滋养细胞分化及浸润 ,可能在妊高征发病中起到关键作用     

正常妊娠不同孕期胎盘组织中基质金属蛋白酶-9及其组织抑制物-1的表达

目的 :探讨基质金属蛋白酶 (MMP) - 9及其组织蛋白酶抑制物 (TL MP) - 1在正常妊娠不同孕期胎盘组织中的表达情况及其在滋养层细胞侵蚀及孕卵着床等正常妊娠过程中的作用。方法 :采用免疫组织化学 SP法检测 4 5例正常孕妇 (早孕 10例、中孕 15例、晚孕 2 0例 )胎盘组织中 MMP- 9/ TIMP- 1表达程度。结果 :MMP- 9在早、中孕组的滋养细胞、基质细胞、蜕膜组织中呈强阳性表达 ,晚孕组呈阳性表达 ,与早、中孕期组相比表达明显减弱 ,有极显著性差异 (P<0 .0 1) ;TIMP- 1在早、中孕组呈阳性表达 ,晚孕组呈强阳性表达 ,与早、中孕组相比表达明显增强 ,有极显著性差异 (P<0 .0 1)。结论 :MMP-9/ TIMP- 1可能在胎盘的形成、子宫 -胎儿血管系统的建立等过程中发挥重要作用。     

Dynamic Changes of Heme Oxygenase-1 in the Hippocampus of Rats After Acute Carbon Monoxide Poisoning

Heme oxygenase-1 (HO-1), an inducible enzyme, degrades heme to carbon monoxide (CO), iron, and bilirubin. We have investigated the relationship among HO-1 protein expression, HO activity, and CO concentrations in the hippocampus of CO-exposed rats. Western blotting and immunohistochemistry revealed that the enzyme is predominantly localized in hippocampal CA1 and CA3 pyramidal cells and in granule cells of the dentate gyrus. HO enzyme activity was reduced immediately following CO exposure, while expression of HO-1 protein was consistently upregulated in a time-dependent manner. Local CO concentrations in hippocampus rose immediately following exposure, but the elevation was maintained for ~20 h despite the decline in blood carboxyhemoglobin levels toward baseline. We suggest that CO initially inhibits HO enzyme activity, whereas at later time points the inhibition is released and local CO generation is maintained by the activity of the endogenous HO enzyme. And the noninducible form of heme oxygenase, HO-2, was not altered following CO administration. Together these results indicate that the HO/CO pathway in the rat hippocampus is induced by acute CO exposure; local CO production may play a regulatory role in brain injury following CO poisoning.     

胎盘绒毛滋养层细胞MMP-9表达与妊高征的关系

目的 :研究MMP 9在胎盘绒毛滋养层细胞的表达 ,探讨MMP 9在妊高征发病中的作用。方法 :用免疫组化两步法检测 42例妊高征患者及 2 5例正常妊娠者胎盘组织中滋养层细胞MMP 9的表达。结果 :正常妊娠组滋养细胞MMP 9表达阳性率为 72 0 % ,明显高于妊高征组 (4 0 5 % ) ,P <0 0 5。随妊高征病情的加重 ,MMP 9的表达有减少趋势。结论 :妊高征患者胎盘滋养细胞MMP 9的表达明显减少 ,且随其病情加重 ,MMP 9表达有减少趋势。表明MMP 9与妊高征的发生有密切关系。