补肾祛瘀化痰法对载脂蛋白E基因敲除小鼠认知功能的影响

【摘要】目的通过研究补肾祛瘀化痰法对栽脂蛋白E（ApoE）基因敲除小鼠认知功能的影响,探讨其组方通脉益智胶囊对认知障碍的疗效。方法将32只ApoE基因敲除小鼠随机分为4组,即成年中药组、老年中药组、成年模型组及老年模型组,每组8只;将16只相同遗传背景C57BI_,／6J小鼠随机分为2组,即成年正常组及老年正常组,每组8只。成年组小鼠至24周起、老年组小鼠至32周起,中药组以通脉益智胶囊灌胃12周,模型组与正常组以同容积0．9％氯化钠注射液灌胃12周,均每日1次。24周及36周时,成年组小鼠予跳台及避暗实验;32周及44周时,老年组小鼠予跳台及避暗实验。结果在24周给药前,成年中药组、成年模型组与成年正常组小鼠的错误次数比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。记忆成绩显示,成年中药组、成年模型组与成年正常组小鼠的错误次数均较第1d有所减少,但比较差异无统计学意义（P〉0．05）;成年中药组、成年模型组与成年正常组小鼠的潜伏时间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。表明在小鼠24周龄时未出现明显认知障碍。在给药12周后,成年中药组、成年正常组错误次数均较成年模型组降低（P〈0．05,P〈0．01）,成年中药组、成年正常组错误次数比较差异无统计学意义（P〉0．05）。记忆成绩显示,成年中药组、成年正常组错误次数均较成年模型组降低（P〈0．05,P〈0．01）,潜伏时间均较成年模型组增加（P〈0．05。P〈0．01）;成年中药组、成年正常组错误次数、潜伏时间比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。表明在小鼠36周龄后已出现认知障碍．补肾祛痰化瘀法对认知障碍有一定改善。在32周给药前,老年中药组、老年模型组小鼠的错误次数均较老年正常组多（P〈0．05）,老年中药组与老年模型组之间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。第2d的记忆成绩显示,老年中药组、老年模型组小鼠的错误次数均较老年正常组多（P〈0．05）,潜伏时间均较老年正常组减少（P〈0．05）,老年中药组小鼠的错误次数、潜伏时间与老年模型组比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。表明32周龄时ApoE基因敲除小鼠已出现认知障碍。在给药12周后（第44周）．老年中药组、老年正常组的错误次数均老年模型组减少（P〈0．05,P〈0．01）,老年中药组的错误次数与老年正常组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。记忆成绩显示,老年中药组、老年模型组、老年正常组小鼠的错误次数均较前1d有所减少,但比较差异均无统计学意义（P〉0．05）;老年中药组、老年正常组的错误次数均较老年模型组减少（P〈0．01）,潜伏时间均增加（P〈0．01）;老年中药组的错误次数、潜伏时间与老年正常组比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。表明在44周龄时ApoE基因敲除小鼠已出现明显的认知障碍,而补肾祛瘀化痰法则对认知障碍有明显的改善作用。结论老年ApoE基因敲除小鼠存在认知功能损害;补肾祛瘀化痰法干预老年ApoE基因敲除小鼠后可改善行为学表现,进而改善认知功能。     

补肾祛瘀化痰法对载脂蛋白E基因敲除小鼠Morris水迷宫研究的影响

目的通过研究补肾祛瘀化痰法对ApoE基因敲除小鼠Morris水迷宫成绩的影响,探讨补肾祛瘀化痰法对认知功能障碍的改善作用。方法将ApoE基因敲除小鼠共32只随机分为成年中药组、成年模型组及老年中药组、老年模型组,并取相同遗传背景的C57BL/6J小鼠共16只随机分成成年正常组及老年正常组,连续给予补肾祛瘀化痰法组方灌胃12周,成年组至32周龄、老年组至44周龄时检测Morris水迷宫定位航行实验及空间探索实验的成绩。结果定位航行实验逃避潜伏期结果不符合正态分布,故采用非参数检验中K组独立样本检验进行数据统计:成年各组之间逃避潜伏期无明显差异(P0.05)。老年模型组较老年中药组逃避潜伏期显著延长(P0.01),老年模型组较老年正常组亦明显延长(P0.05)。空间探索实验中,第Ⅲ象限路程及第Ⅲ象限时间均符合正态分布,故采用单因素方差分析进行数据统计:成年各组之间在穿台次数、第Ⅲ象限路程及第Ⅲ象限时间均无明显差异(P0.05);老年模型组较老年正常组穿台次数明显减少(P0.05),老年中药组及老年模型组均较老年正常组在第Ⅲ象限路程及第Ⅲ象限时间明显缩短(P0.05)。结论老年中药组及老年正常组小鼠Morris水迷宫成绩较理想,说明补肾祛瘀化痰法可改善老龄小鼠Morris水迷宫成绩,从而改善认知功能。     

搜风祛痰法对ApoE基因敲除小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达的影响

目的 通过观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPAR-γ）的表达水平,来阐明搜风祛痰法中药对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化不稳定斑块的干预作用机制.方法 制备ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化模型,随机分为5组：模型组、稳斑汤低剂量组、中剂量组、高剂量组及西药（他汀）组,另设空白对照组.采用HE染色、Masson染色法用于实验观察,应用RT-PCR法检测PPAR-γmRNA的表达.结果 与空白组、模型组相比,稳斑汤各剂量组及西药组PPAR-γ mRNA表达水平明显升高（P＜0.01）.结论 稳斑汤可以提高PPAR-γmRNA表达水平,对小鼠动脉粥样硬化有一定稳定斑块的效应,因剂量不同而各异.     

通心络胶囊干预载脂蛋白E基因敲除小鼠CEC、ET机理的研究

目的通过观察通心络胶囊对载脂蛋白E（ApoE）基因敲除小鼠循环内皮细胞（CEC）、小鼠内皮素（ET）水平的干预变化,探究其对ApoE基因敲除小鼠冠状动脉粥样硬化（AS）的调节作用和机理。方法将40只ApoE基因敲除小鼠作为实验组,建立冠状AS模型,随机分为模型组等5组。结果通心络胶囊干预后,通心络胶囊高、中、低剂量组和辛伐他汀组、模型组相比,通心络胶囊高剂量组在造模后第4、8、12周血中CEC均明显低于模型组,中剂量组在造模后第4周和第12周时血中CEC与模型组相比显著降低。模型组小鼠血清ET含量高于正常组,通心络胶囊各剂量组小鼠血清ET含量均低于模型组。结论通心络胶囊能降低ApoE基因敲除小鼠CEC、ET水平,具有调节血管内皮细胞功能和抑制炎症因子的作用。     

搜风祛痰法对ApoE基因敲除小鼠主动脉易损斑块炎症反应及PPARγ基因表达的影响

目的 观察搜风祛痰中药复方稳斑汤对动脉粥样硬化（AS）ApoE基因敲除小鼠不稳定斑块炎症反应及动脉组织过氧化物酶增殖体激活型受体γ（PPAR-γ）基因表达的影响.方法 建立ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化不稳定斑块模型,并设立空白组、模型组、西药组、稳斑汤低、中、高剂量组.实验周期1个月,麻醉处死小鼠取主动脉组织HE染色后在光学显微镜下进行病理学观察,然后采用半定量RT-PCR技术检测PPAR-γ基因表达的变化.结果 与空白组相比,模型组PPAR-γ基因表达量明显增加（P＜0.01）;与模型组相比,西药组及稳斑汤各剂量组均能增加PPAR-γ基因表达量（P＜0.01）;与西药组相比,稳斑汤高剂量组增加PPAR-γ基因表达量无差异（P＞0.05）.光镜下观察中药各剂量组和西药组炎症反应均明显弱于模型组.结论 ApoE基因敲除小鼠AS不稳定斑块的形成与发展和炎症因子密切相关,搜风祛痰中药复方稳斑汤能够抑制斑块内的炎症反应并上调实验性AS不稳定斑块ApoE基因敲除小鼠PPAR-γ基因表达.     

稳斑汤对ApoE基因敲除小鼠主动脉粥样硬化不稳定斑块HSP70表达的影响

目的 观察搜风祛痰法中药复方稳斑汤对ApoE基因敲除小鼠主动脉粥样硬化（AS）不稳定斑块HSP70表达的影响.方法 ApoE基因敲除小鼠高质饮食喂养13周后,待其形成成熟的AS斑块,随机分为模型组、稳斑汤低剂量组、稳斑汤中剂量组、稳斑汤高剂量组、西药组、空白对照组.各组相应处理13周后,取主动脉组织HE染色后在光学显微镜下进行病理学观察,然后采用免疫组化和RT-PCR技术检测HSP70的表达水平.结果 治疗组主动脉组织中HSP70表达水平高于对照组（P＜ 0.05或P＜0.01）,稳斑汤高剂量组HSP70表达水平与西药组无明显差异（P＞0.05）.结论 搜风祛痰中药复方稳斑汤可通过影响HSP70以稳定易损斑块,其机制可能与HSP70对心血管系统的保护作用相关.     

化瘀祛痰方对ApoE-/-AS小鼠主动脉G6PD/NF-κB表达及炎症水平的影响

目的 基于G6PD/NF-кB表达,探讨化瘀祛痰方对ApoE^-/-动脉粥样硬化(athrosclerotic, AS)小鼠斑块及炎症反应的影响及机制研究。方法 24只ApoE基因敲除(ApoE^-/-)小鼠随机分为模型组、化瘀祛痰方组、辛伐他汀组,给予高脂饲料喂养12周。选用8只C57BL/6J小鼠作为空白组,给予普通饲料喂养。化瘀祛痰方组以及辛伐他汀组分别给予相应的药物灌胃,空白组与模型组给予等量的生理盐水。4周后采用酶联免疫法(ELISA)检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量;采用苏木素-伊红(HE)染色观察主动脉斑块形态学改变;ELISA法检测各组小鼠血清中IL-6、IL-1β、TNF-α水平;Western Blot法及实时荧光定量Q-PCR法检测主动脉IL-6、IL-1β、TNF-α、G6PD、NF-κB蛋白及mRNA的表达。结果 与空白组比较,模型组小鼠血清TC、TG和LDL-C含量显著升高(P<0.05或P<0.01),HDL-C含量无明显...     

天香丹对ApoE(-/-)基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

目的:观察天香丹对ApoE(-/-)基因敲除小鼠高脂血症及动脉粥样硬化的影响.方法:将30只8周龄的ApoE(-/-)基因敲除小鼠随机分为模型组、天香丹组和阿托法汀组,每组各10只,另以相同遗传背景的同龄正常C57BL/6J小鼠为正常对照组(n=10).天香丹组每只灌服天香丹7.2g·kg-1·d-1,阿托伐他汀组每只灌服阿托伐他汀10mg·kg-1·d-1,模型组和正常对照组每只灌服0.9％生理盐水0.2ml·10g-1·d-1.连续灌胃12周后眼眶采血测定各组血脂含量,取小鼠主动脉弓部进行形态学观察及图像分析.结果:模型组血清总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白水平明显高于正常对照组(P＜0.05),而天香丹组和阿托伐他汀组以上3项指标与模型组相比明显下降(P＜0.05).图像分析测量结果显示模型组与正常对照组比较其斑块总面积明显增加(P＜0.05);天香丹组动脉硬化病变程度较模型组减轻,其斑块总面积明显减小(P＜0.05).结论:天香丹有降低ApoE(-/-)基因敲除小鼠血清总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇水平及减缓动脉粥样硬化病变的作用.     

泽泻萜类化合物对ApoE基因敲除动脉粥样硬化小鼠肝脏基底膜HSPG的调节作用

目的：观察泽泻萜类化合物对ApoE基因敲除小鼠实验性动脉粥样硬化肝脏基底膜硫酸乙酰肝素蛋白多糖的调节作用。方法：将8周龄C57／BL小鼠12只设为正常对照组，8周龄ApoE基因缺陷小鼠36只随机分为3组：模型组、中药组、舒降之阳性对照组。正常对照组、模型组予0．9％生理盐水灌胃，给药组正常人每kg体重的10倍量灌胃90天后，全自动生化仪测定血清血脂含量，用免疫印记法测定各组肝脏基底膜硫酸乙酰肝素蛋白多糖的表达，用Quantity One 6．0软件进行光密度分析。结果：中药组、阳性对照药组与模型组比较，总胆固醇、低密度脂蛋白水平均明显降低。中药组、阳性对照药组肝脏基底膜HSPG表达与模型组比较明显上调，但与正常对照组比较则明显下调。结论：泽泻萜类化合物对apoE-基因敲除高脂饲料喂养所致动脉粥样硬化小鼠具有降低血清总胆固醇、低密度脂蛋白的作用，对该模型小鼠的肝脏基底膜HSPG表达有调节作用。     

补肾活血法对系统性红斑狼疮合并动脉粥样硬化小鼠免疫功能和组织病理学的影响

目的:观察补肾活血法对系统性红斑狼疮(SLE)合并动脉粥样硬化模型小鼠免疫功能和主动脉斑块的影响.方法:8周龄大雌性载脂蛋白E基因敲除小鼠(ApoE-/-mice)45只,给予一次性腹腔注射降植烷(pristane)0.5ml,继续喂养16周后,小鼠随机分为中药治疗组、西药治疗组和模型组3组各15只,以同周龄C57BL...     

温阳补肾祛瘀化痰法治疗阿茨海默病临床研究

目的:观察温阳补肾祛瘀化痰法治疗阿茨海默病(AD)的临床疗效。方法:选择AD患者80例,随机分为治疗组及对照组,每组各40例。治疗组服用中药温阳补肾祛瘀化痰法中药,对照组口服尼莫地平、盐酸多奈哌齐片,治疗3月。2组分别在治疗前后进行简易智能状态检查修正表(MMSE)和日常生活能力量表(ADL)评分。结果:治疗组显效10例,有效19例,无效11例,总有效率72.5%;对照组显效8例,有效13例,无效19例,总有效率52.5%。2组比较,治疗组总有效率优于对照组(P0.05)。2组治疗后MMSE和ADL评分均高于治疗前(P0.05),且治疗组高于对照组,差异有显著性意义(P0.05)。结论:温阳补肾祛瘀化痰法治疗AD疗效确切。     

基于血浊理论探析轻度认知功能障碍的辨证论治

轻度认知功能障碍（MCI）是处于正常衰老和痴呆之间的一种过渡状态,其过程具有可逆性,早期治疗有助于改善轻度认知功能障碍。文章基于血浊理论对MCI的治疗进行了探讨,阐述了肾精亏虚、血浊扰神是轻度认知功能障碍的病机关键,血浊生痰化瘀成毒是其基本病理变化,提出运用补肾化浊、化痰逐瘀解毒的方法来治疗轻度认知功能障碍。     

许建中教授治疗肺间质纤维化学术经验

许建中教授认为,肺间质纤维化的主要病机为本虚标实,"痰"、"瘀"为标,肺肾两虚为本,治疗上应标本同治,既注重祛血瘀、化痰浊、通肺络,同时兼顾补肺益肾,益气养阴,此外,少佐清热解毒之品在治疗肺纤维化中也起到了不可忽视的作用。     

益肾降压颗粒治疗高血压早期肾损害的临床研究

目的观察益肾降压颗粒对原发性高血压肾气亏虚痰瘀阻络证的疗效。方法将55例符合标准的高血压病早期肾损害患者随机分为试验组（30例）与对照组（25例）。试验组在常规西药的基础上加用益肾降压颗粒治疗,对照组仅给予常规西药治疗,8周为1个疗程。观察治疗前后血压和尿微量蛋白的变化。结果试验组不仅能明显降低血压,而且能显著降低尿微量蛋白的排出量,疗效明显优于对照组（P〈0.05）。结论补肾祛痰活血通络法是治疗高血压病早期肾损害的一种有效治法,益肾降压颗粒是治疗高血压病早期肾损害的一组有效药物,与常规西药合用疗效更佳。     

脂肪肝辨证论治体会

脂肪肝的中医辨证论治思路灵活多样,与西医治疗相比临床疗效稳定。脂肪肝的治疗原则不离疏肝理气、健脾化痰,注重痰瘀同治,不忘补肾益精,用药时化痰防瘀、祛邪不伤正,临床观察远期疗效较好。     

针药合治腰肌劳损35例疗效观察

目的：观察补肾祛瘀针刺法与中药内服合治腰肌劳损的临床疗效。方法：将105例腰肌劳损患者分为针刺组、中药组、针药组各35例。针刺组采用补肾祛瘀针刺法治疗,中药组采用补肾祛瘀中药口服治疗,针药组同时采用补肾祛瘀针剃法和补肾祛瘀中药口服治疗。观察治疗前后患者的病情改善情况,统计疼痛分级指数（PRI）,测定腰背肌耐力,对比分析3组治疗方法的临床疗效。结果：针药组治愈率和愈显率均高于针剌组和中药组,组间比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;经治疗后3组患者PRI均明显降低,腰背肌耐力均明显提高,针药组改善更明显,且差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：针药合治腰肌劳损疗效优于单用针刺和单用中药治疗。     

益气化瘀补肾方治疗腰椎间盘突出症的实验研究

目的:研究中药益气化瘀补肾方治疗腰椎间盘突出症的机理。方法:以中药益气化瘀补肾方为观察对象,设立模型组、假手术模型对照组、正常对照组、西药对照组对照观察,观察与腰椎间盘突出症密切相关的血清免疫球蛋白IgG,IgM及椎间盘组织细胞因子IL-1α,IL-6,TNFα等指标的变化。结果:中药益气化瘀补肾方对降低腰椎间盘突出症兔模型的IgG,IgM,IL-1α,TNFα的含量有明显作用(P<0.05或P<0.01)。结论:减少自身免疫刺激从而缓解神经根的疼痛是中药益气化瘀补肾方治疗腰椎间盘突出症的一个途径。     

罗玲主任医师治疗肺结节用药规律的聚类分析

目的 基于聚类分析方法 ,探讨罗玲主任医师治疗肺结节的用药和配伍规律.方法 以2018年1月-2019年6月在罗玲主任医师门诊就诊的130例肺结节患者为研究对象,对罗玲主任医师治疗肺结节常用药物进行频数和聚类分析,探索其治疗肺结节的常用药物和配伍规律.结果 罗玲主任医师治疗肺结节使用最多的药物为山药、半夏、夏枯草、莪术...     

孙桂芝治疗原发性肝癌经验

介绍孙桂芝教授治疗原发性肝癌的临床经验。认为肝癌病位在脏,与肝、脾、肾有关,属本虚标实之证,湿聚、气滞、血瘀、痰凝、毒蕴为标,脾虚、肝郁、肾亏为本;治疗以疏肝健脾益肾扶正固本,辅以解毒化湿、行气开郁、祛瘀散结、化痰软坚、消积导滞以祛邪。