补肾祛瘀化痰法对载脂蛋白E基因敲除小鼠认知功能的影响

【摘要】目的通过研究补肾祛瘀化痰法对栽脂蛋白E（ApoE）基因敲除小鼠认知功能的影响,探讨其组方通脉益智胶囊对认知障碍的疗效。方法将32只ApoE基因敲除小鼠随机分为4组,即成年中药组、老年中药组、成年模型组及老年模型组,每组8只;将16只相同遗传背景C57BI_,／6J小鼠随机分为2组,即成年正常组及老年正常组,每组8只。成年组小鼠至24周起、老年组小鼠至32周起,中药组以通脉益智胶囊灌胃12周,模型组与正常组以同容积0．9％氯化钠注射液灌胃12周,均每日1次。24周及36周时,成年组小鼠予跳台及避暗实验;32周及44周时,老年组小鼠予跳台及避暗实验。结果在24周给药前,成年中药组、成年模型组与成年正常组小鼠的错误次数比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。记忆成绩显示,成年中药组、成年模型组与成年正常组小鼠的错误次数均较第1d有所减少,但比较差异无统计学意义（P〉0．05）;成年中药组、成年模型组与成年正常组小鼠的潜伏时间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。表明在小鼠24周龄时未出现明显认知障碍。在给药12周后,成年中药组、成年正常组错误次数均较成年模型组降低（P〈0．05,P〈0．01）,成年中药组、成年正常组错误次数比较差异无统计学意义（P〉0．05）。记忆成绩显示,成年中药组、成年正常组错误次数均较成年模型组降低（P〈0．05,P〈0．01）,潜伏时间均较成年模型组增加（P〈0．05。P〈0．01）;成年中药组、成年正常组错误次数、潜伏时间比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。表明在小鼠36周龄后已出现认知障碍．补肾祛痰化瘀法对认知障碍有一定改善。在32周给药前,老年中药组、老年模型组小鼠的错误次数均较老年正常组多（P〈0．05）,老年中药组与老年模型组之间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。第2d的记忆成绩显示,老年中药组、老年模型组小鼠的错误次数均较老年正常组多（P〈0．05）,潜伏时间均较老年正常组减少（P〈0．05）,老年中药组小鼠的错误次数、潜伏时间与老年模型组比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。表明32周龄时ApoE基因敲除小鼠已出现认知障碍。在给药12周后（第44周）．老年中药组、老年正常组的错误次数均老年模型组减少（P〈0．05,P〈0．01）,老年中药组的错误次数与老年正常组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。记忆成绩显示,老年中药组、老年模型组、老年正常组小鼠的错误次数均较前1d有所减少,但比较差异均无统计学意义（P〉0．05）;老年中药组、老年正常组的错误次数均较老年模型组减少（P〈0．01）,潜伏时间均增加（P〈0．01）;老年中药组的错误次数、潜伏时间与老年正常组比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。表明在44周龄时ApoE基因敲除小鼠已出现明显的认知障碍,而补肾祛瘀化痰法则对认知障碍有明显的改善作用。结论老年ApoE基因敲除小鼠存在认知功能损害;补肾祛瘀化痰法干预老年ApoE基因敲除小鼠后可改善行为学表现,进而改善认知功能。     

重组水蛭素对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块的影响及机制

目的探讨重组水蛭素对载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块的影响及机制。方法高脂饲喂7~8周龄Apo E-/-小鼠24只,按体重、窝别进行随机配对分组,分为药物组及模型组,每组12只,以12只高脂饲喂的7~8周龄C57BL/6J小鼠为正常对照组。药物组于10周龄起隔日给予重组水蛭素0.25 mg/kg腹腔注射,连续注射5周;模型组给予等量生理盐水注射;正常对照组不进行任何处理,均给予高脂饮食饲喂20周龄时处死。检测血清TC、TG、LDL-C、HDL-C、高敏C-反应蛋白(hs-CRP)、E-选择素(E-selectin)、白细胞介素-6(IL-6)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)水平;HE染色及形态计量学测定主动脉根部斑块面积/管腔面积及细胞外脂质面积/斑块面积;Western blot测定主动脉钙库操纵性钙通道信号分子,包括基质交感分子1(STIM1)、Orai1蛋白、瞬时受体电位通道1(TRPC1)变化。结果 20周龄时模型组小鼠主动脉血管壁脂质斑块形成。与正常对照组比较,模型组小鼠TC、TG、LDL-C明显升高(P0.01),血清炎症因子hs-CRP、IL-6、E-selectin、MMP-2水平亦明显升高(P0.01,P0.05);小鼠主动脉STIM1、Orai1及TRPC1蛋白表达增多(P0.01);与模型组比较,药物组小鼠斑块面积/管腔面积及细胞外脂质面积/斑块面积明显下降(P0.05,P0.01);血清TC、LDL-C、hs-CRP、E-selction、IL-6、MMP-2水平亦降低(P0.05,P0.01);主动脉根部STIM1、TRPC1、Orai1蛋白表达下调(P0.05,P0.01)。结论水蛭素能改善Apo E-/-小鼠的血脂、内皮功能,下调STIM1、Orai1、TRPC1的表达,并通过影响上述环节进而延缓动脉粥样硬化的发生与发展。     

艾烟与香烟对载脂蛋白E基因敲除小鼠学习记忆功能与海马β淀粉样蛋白沉淀的影响

目的观察艾烟与香烟对载脂蛋白E基因敲除(apolipoprotein E-deficient,Apo E-/-)小鼠学习记忆能力与海马β淀粉样蛋白(β-Amyloid)沉淀的影响。方法将13只8周龄C57BL/6小鼠作为空白对照组,27只同龄Apo E-/-小鼠随机分为Apo E-/-模型组、艾烟组、香烟组。香烟与艾烟组小鼠分别暴露于5~15 mg/m3的香烟与艾烟环境。各组小鼠每天干预20分钟,每周6天,共干预12周。于第13周进行行为学测试,之后处死动物、取材,对其脑组织海马中Aβ沉淀进行刚果红染色。结果与模型组对比,空白对照组、艾烟组、香烟组小鼠均表现出学习潜伏期缩短,记忆潜伏期增长,记忆错误次数减少,差别有统计学意义(P0.05)。模型组小鼠在视野范围内有明显的粉红色弥散样Aβ沉淀,空白对照组明显少于模型组(P0.05)。艾烟组与香烟组在相同海马区域CA3中淀粉样蛋白沉淀均有不同程度的减少,艾烟组中Aβ沉淀较模型组显著降低(P0.05),较香烟组亦有减少(P0.05)。结论艾烟能够发挥Apo E-/-小鼠的海马CA3区保护作用,减少Aβ沉淀进而改善Apo E-/-小鼠学习记忆能力。     

艾灸及艾烟对载脂蛋白E基因敲除小鼠肺组织病理及血清IL-4、IFN-γ的影响

目的 观察艾灸及艾烟对载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠肺组织病理及血清白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)的影响,评价艾灸及艾烟的安全性,并探讨艾灸在动脉粥样硬化炎症反应过程中的起效机制.方法 30只8周龄雄性采用高脂饮食喂养的载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠随机分为3组(每组10只):...     

解毒活血配伍方药对载脂蛋白E基因敲除小鼠血清超敏C反应蛋白的影响

目的 观察解毒活血配伍方药对载脂蛋白E基因敲除［apolipoprotein E gene knock out,ApoE( / ) mice］小鼠血清超敏C反应蛋白（hs CRP）的影响。方法 13周龄110只ApoE( / )小鼠分为高脂饲料组（98只,给予高脂饲料）,普通饲料组（12只,给予普通饲料）,同时设13周龄C57 BL/6J小鼠作为正常对照组（12只,给予普通饲料）。19周后随机抽取高脂饲料ApoE( / )小鼠2只确认易损斑块形成后,剩余96只随机分为8组（模型组、解毒组、活血组、解毒活血配伍高、中、低剂量组、洛伐他汀组和血脂康组）,每组12只。造模成功后每天给予药物干预,解毒组予虎杖提取物266 mg/kg;活血组予芎芍胶囊110 mg/kg;配伍高剂量组予虎杖提取物53.2 mg/kg,芎芍胶囊220 mg/kg;配伍中剂量组给予虎杖提取物26.6 mg/kg,芎芍胶囊110 mg/kg;配伍低剂量组给予虎杖提取物133 mg/kg,芎芍胶囊55 mg/kg;洛伐他汀组给予洛伐他汀3.3 mg/kg;血脂康组给予血脂康0.2 g/kg;以上药物根据剂量蒸馏水溶解,混匀后灌胃,每次0.4 mL。模型组、普通饲料组、C57BL/6J小鼠对照组均灌服生理盐水0.4 mL。用药17周后,下腔静脉取血,全自动酶标仪检测血清hs-CRP浓度。结果 模型组血清hs-CRP水平显著高于正常对照组和普饲组（P<0.05,P<0.01）;各给药组中,洛伐他汀组、解毒组和配伍高剂量组hs-CRP水平下降,与模型组比较,差异有统计学意义（P<0.01）;配伍高剂量组hs-CRP水平低于洛伐他汀组、血脂康组、单纯解毒或活血组及配伍中、低剂量组;解毒组hs-CRP水平低于活血组（P<0.01）。结论 解毒活血配伍方药可降低ApoE( / )小鼠血清hs-CRP水平。     

消瘀降脂胶囊对载脂蛋白E基因敲除小鼠颈动脉粥样硬化的干预作用

目的探讨消瘀降脂胶囊对载脂蛋白E基因敲除(ApoE^-/-)小鼠血脂、颈动脉粥样硬化程度及斑块的影响。方法ApoE^-/-小鼠采用高脂饲料饲养,建立颈动脉粥样硬化模型。将ApoE^-/-小鼠按体重分为模型组、阿托伐他汀组及消瘀降脂胶囊低、高剂量组,每组22只。以12只C57BL/6Cnc小鼠为对照组,采用普通饲料喂养。阿托伐他汀组灌胃阿托伐他汀混悬液1.3 mg/kg,消瘀降脂胶囊低、高剂量组灌胃消瘀降脂胶囊混悬液325、975 mg/kg,对照组和模型组灌胃等体积的蒸馏水。按0.1 ml/10 g小鼠体重灌胃,1次/d,每周记录小鼠体重。连续灌胃12周后,检测小鼠血脂水平、肝脏指数。采用油红O染色和Van Gieson胶原纤维染色观察颈动脉病理学改变。结果与模型组比较,消瘀降脂胶囊高剂量组小鼠体重降低(P<0.05),血清TC[(25.92±4.21)mmol/L比(30.39±4.67)mmol/L]、LDL-C[(7.97±2.14)mmol/L比(10.26±1.97)mmol/L]水平降低(P<0.05),消瘀降脂胶囊低、高剂量组HDL-C[(0.31±0.07)mmol/L、(0.34±0.13)mmol/L比(0.26±0.09)mmol/L]水平升高(P<0.05)。病理结果显示,阿托伐他汀组及消瘀降脂胶囊高剂量组颈动脉脂质沉积阻塞比例低于模型组(P<0.05),且尚未形成血管斑块。结论消瘀降脂胶囊可降低ApoE^-/-小鼠血清LDL-C、TC水平,升高HDL-C水平,改善高血脂症状,减轻颈动脉狭窄程度,减缓颈动脉斑块生成。     

祛痰化瘀补肾益气法治疗缺血性脑卒中认知功能减退的临床观察

目的:观察祛痰化瘀补肾益气法对缺血性脑卒中发病3个月内认知功能改善作用。方法:新发脑梗死非痴呆80例住院患者筛选后分为治疗组47例和对照组15例,分别给予吡拉西坦与祛痰化瘀补肾益气法方药,应用简易智能状态检查量表和蒙特利尔认知评估量表(北京版)在发病14天、1个月、3个月评定认知功能并进行比较。结果:治疗后两组MMSE与MoCA积分较发病14天时均显著提高(P0.05),治疗组优于对照组(P0.05)。结论:祛痰化瘀补肾益气法对缺血性脑卒中认知功能减退经有改善作用。     

通心络胶囊对载脂蛋白E基因敲除小鼠冠状动脉粥样硬化的影响及其机理研究

目的通过通心络胶囊（以下简称“通心络”）对载脂蛋白E基因敲除小鼠[ApoE（-／-）]冠状动脉斑块和心肌病理组织学及其循环内皮细胞（CEC）、内皮素（ET）、基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制剂1（TIMP1）等指标的干预变化,探究其治疗冠心病（CHD）动脉粥样硬化（AS）的疗效机制。方法将40只ApoE（-／-）小鼠作为实验组,建立冠状As模型,随机分为模型组、辛伐他汀组和通心络高、中、低剂量组,分别给予相应药物干预8周;另选8只同系的小鼠作为正常对照组。观察各组小鼠冠状动脉斑块和心肌病理组织学及其CEC、ET、MMP-1、MMP-9、TIMP1等指标的变化。结果模型组小鼠冠状动脉病变主要位于心肌内的小分支、心肌细胞、心肌间质,均分为6．33±1．48。辛伐他汀组均分为2．62±2．25;通心络低、中、高剂量组均分为4．5±1．71、3．12±1．81、2．38±2．34。各给药组与模型组比较,P〈0．05或P〈0．01;通心络中、高剂量组与辛伐他汀组比较,P〉0．05。模型组第4周开始,血中CEC显著增多,与正常组相比,P〈0．01,与通心络高剂量组在造模后第4、8、12周相比,P〈0．05或P〈0．01,与中剂量组在造模后第4、12周相比,P〈0．05。模型组小鼠血清ET含量高于正常组,P〈0．05,与通心络3个剂量组相比,P〈0．01。通心络高剂量组MMP-1和MMP-9水平均低于模型组,而TIMP1水平高于模型组,P〈0．05或P〈0．01,通心络中剂量组MMP-9水平低于模型组,P〈0．05。结论通心络具有抗冠状AS和稳定斑块的作用,其机制可能与改善血管内皮细胞功能障碍（EDF）和抑制血管重构相关。     

补肾化瘀祛痰治疗血管性痴呆30例疗效观察

笔者近几年来，采用补肾化瘀祛痰法治疗VD30例，取得满意疗效，并与西医治疗的30例作对比观察。现报道如下：     

健脾益肾豁痰化瘀法治疗老年高脂血症的疗效观察

目的 :观察健脾益肾豁痰化瘀法治疗老年高脂血症的疗效。方法 :设中药治疗组 48例 ,多烯康对照组 32例 ,均服药 2个月。结果 :治疗组总有效率 85 .41% ,明显优于对照组的 6 2 .5 % (P<0 .0 5 )。治疗组血清总胆固醇 (TC)治疗前后比较有显著性差异 (P <0 .0 1) ,甘油三酯 (TG)、高密度脂蛋白 (HDL )治疗前后比较亦有显著差异 (P <0 .0 5 )。对照组 TC治疗前后比较有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,TG,HDL治疗前后比较无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论 :健脾益肾豁痰化瘀法治疗老年高脂血症疗效显著。     

补肾祛瘀化痰法对载脂蛋白E基因敲除小鼠Morris水迷宫研究的影响

目的通过研究补肾祛瘀化痰法对ApoE基因敲除小鼠Morris水迷宫成绩的影响,探讨补肾祛瘀化痰法对认知功能障碍的改善作用。方法将ApoE基因敲除小鼠共32只随机分为成年中药组、成年模型组及老年中药组、老年模型组,并取相同遗传背景的C57BL/6J小鼠共16只随机分成成年正常组及老年正常组,连续给予补肾祛瘀化痰法组方灌胃12周,成年组至32周龄、老年组至44周龄时检测Morris水迷宫定位航行实验及空间探索实验的成绩。结果定位航行实验逃避潜伏期结果不符合正态分布,故采用非参数检验中K组独立样本检验进行数据统计:成年各组之间逃避潜伏期无明显差异(P0.05)。老年模型组较老年中药组逃避潜伏期显著延长(P0.01),老年模型组较老年正常组亦明显延长(P0.05)。空间探索实验中,第Ⅲ象限路程及第Ⅲ象限时间均符合正态分布,故采用单因素方差分析进行数据统计:成年各组之间在穿台次数、第Ⅲ象限路程及第Ⅲ象限时间均无明显差异(P0.05);老年模型组较老年正常组穿台次数明显减少(P0.05),老年中药组及老年模型组均较老年正常组在第Ⅲ象限路程及第Ⅲ象限时间明显缩短(P0.05)。结论老年中药组及老年正常组小鼠Morris水迷宫成绩较理想,说明补肾祛瘀化痰法可改善老龄小鼠Morris水迷宫成绩,从而改善认知功能。     

补肾化瘀法治疗肝硬化机制探讨

根据肝脏的生理病理特点 ,结合肝硬化临床与实验研究 ,认为肝肾阴虚、瘀血阻络是肝硬化的重要病机 ,肝肾阴虚为病之本 ,瘀血阻络为病之标 ,补肾养肝、化瘀通络是其治疗大法。     

补肾、健脾、活血分别对骨髓抑制贫血小鼠造血的影响

目的:观察补肾、健脾、活血法分别对红系血细胞及其造血细胞因子表达的影响,为化疗后骨髓抑制贫血的中医药治疗提供依据。方法:采用全自动血液分析仪检测实验第14、28天骨髓抑制造模小鼠外周血常规检查(RBC,HGB等);使用实时荧光定量RT-PCR检测实验第14天与第28天骨髓抑制造模小鼠脾脏EPO、EPOR mRNA表达水平的变化。结果:六味地黄汤、补中益气汤、复方丹参饮均能显著提高骨髓抑制贫血小鼠RBC、HGB;六味地黄汤组和补中益气汤组EPO、EPOR mRNA表达水平均显著升高,而复方丹参饮组EPO、EPOR mRNA表达水平与模型对照组比较差异无统计学意义。结论:补肾、健脾、活血法对骨髓抑制贫血均有稳定且可靠的提升外周血血象的作用;补肾、健脾法可通过提高EPO、EPOR mRNA的表达水平,促进骨髓造血干细胞的增殖,并促进向红系血细胞分化以升高红系血细胞;而活血法促进造血的机制尚待进一步研究。     

补肾化瘀泄浊方对高血压性肾损害肾小管功能的影响

目的观察补肾化瘀泄浊方对高血压性肾损害肾小管功能的影响。方法将高血压性肾损害131例随机分为2组,均予西医常规治疗,治疗组79例同时予补肾化瘀泄浊方,日1剂,水煎分2次服。2组均以1个月为1个疗程,连续治疗3个疗程观察疗效。结果治疗后4周、8周、12周2组血压与本组治疗前比较差异均有统计学意义(P0.05),但组间比较差异无统计学意义(P0.05);治疗后2组夜尿次数、尿渗透压、尿β2微球蛋白(β2-MG)、尿α1微球蛋白(α1-MG)与本组治疗前比较差异均有统计学意义(P0.05),组间比较差异亦均有统计学意义(P0.05),治疗组改善优于对照组。结论补肾化瘀泄浊方对高血压性肾损害肾小管功能有很好的保护作用,疗效优于单纯西医治疗。     

补肾化瘀法改善缺血性认知障碍作用机理研究

目的探讨补肾化瘀法改善缺血性认知障碍作用机理。方法采用电磁流量计、同位素标记微球法、碱羟胺比色法、放免法、多发性梗塞性痴呆(MID)大鼠模型,探讨补肾化瘀法增智作用机理。结果补肾化瘀法显著增加模型鼠脑血流量(CBF)、海马和皮质局部血流量(rCBF),提高海马和皮质乙酰胆碱(Ach)含量和神经肽精氨酸加压素(AVP)、生长抑素(SS)含量,降低血浆内皮素(ET)的含量,作用明显优于脑复康组（P＜0.05或P＜0.01)。结论增加脑CBF,调节脑组织神经递质、神经肽为补肾化瘀法干预血管性痴呆(VaD)的作用机理之一。     

化痰祛瘀法治疗肝豆状核变性研究进展

肝豆状核变性(WD)在西医学上是铜代谢障碍导致全身多器官损害等为主要临床特征的常染色体隐性单基因遗传疾病,病变影响肝、脑、肾、角膜等重要脏器。中医通过对WD患者临床症状及病理改变的认识,认为WD的基本病理因素为痰浊、瘀血,二者相互作用而发病,以痰瘀互结为主要的病机,贯穿疾病发展始终,故而运用化痰祛瘀法治疗WD在临床中常见。众多研究表明运用中药汤剂、中医外治法化痰祛瘀治疗可以有效缓解WD患者临床症状,发挥排铜优势、改善肝纤维化、改善脑流动力学、抑制炎症和抗氧化应激作用,进而延缓疾病进程,控制疾病发展。现结合新近研究成果,对化痰祛瘀法在WD的临床应用予以综述,以期为临床治疗WD提供中西医结合治疗有效的方案及依据。     

痰瘀论治缺血性脑卒中的古今机制探讨

中医在缺血性脑疾病的防治中素有内在优势。中医认为,痰瘀在缺血性脑卒中发生发展过程中同为病理产物和致病因素,对其发病产生重要影响,痰瘀互结是缺血性脑卒中的病机关键;现代研究认为,脂质代谢、血液流变异常和炎症反应是与痰瘀相关的重要病理生理机制,因此,痰瘀同治法以其独特作用优势,在缺血性脑卒中防治中发挥重要作用。文章结合古今文献,将围绕痰瘀同治法在缺血性脑卒中防治中的机制理论与研究进展进行探讨和思考。     

冠心病从肾虚痰瘀论治浅议

随着现代社会发展,冠心病成为威胁人类健康的主要疾患之一。在临床实践中发现肾虚痰瘀互结在冠心病的发生、发展过程中具有重要地位,论述现代社会肾虚是冠心病的重要始动因素,肾虚导致痰浊瘀血内生,进而痰瘀互结,痹阻心脉是冠心病的重要病理环节,在冠心病的治疗上提出在固护元气,培补肾精的基础上痰瘀并治的治疗方法,论述了临床使用补肾培元、化痰祛瘀法治疗冠心病取得了较好的临床疗效,证明补肾化痰祛瘀法是治疗冠心病的有效方法。