子宫内膜癌CpG岛甲基化谱状态及其意义

目的探讨子宫内膜癌（EC）中肿瘤相关基因DNA启动子区CpG甲基化谱（CIMP）状态及意义。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应技术,分别检测35例EC组织、15例癌旁配对组织及22例正常子宫内膜组织中P14、P16、ER、RASSF1A及COX-2基因启动子区甲基化修饰状况,并分析CIMP的频率及与各基因甲基化的关系。结果 EC组织中甲基化频率从P16的37%至P14的57%不等,癌旁配对组织中由P16的27%至P14的60%不等。正常子宫内膜组织中仅有2例ER、COX-2和4例RASSF1A甲基化。46%（17/35）的EC和47%（7/15）的癌旁组织为CIMP＋（P=0.574）,正常组织中未见CIMP＋。在CIMP＋的EC中,CIMP＋与P16和COX-2的甲基化相关（P=0.001）。结论多基因同时甲基化在EC及癌旁组织频率较高,P16和COX-2的甲基化与CIMP＋状态相关,CIMP＋可能是子宫内膜癌癌变的早期事件。     

TGFβ1及TβRⅡ在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义

目的：研究转化生长因子β1（transforming growth factorβ1，TGFβ1）及转化生长因子Ⅱ型受体（typeⅡ of transforming growth factor β receptor,TβRⅡ）在子宫内膜癌组织中的作用及与其生物学行为的关系。方法：采用SP免疫组化法检测57例子宫内膜癌和30例正常子宫内膜组织中TGFβ和TβRⅡ表达。结果：TGFβ1与TβRⅡ在正常子宫内膜及内膜癌组织中均有表达，且TGFβ与TβRⅡ两者表达呈一致性（P〉0．05）；TGFβ1与TβRⅡ的表达在子宫内膜癌组织中的表达显著高于正常内膜（P均〈0．05）；其表达与内膜癌的临床期别、浸润肌壁深度和淋巴结转移均呈负相关（P均〈0．05），与分化程度则呈正相关（P＜0．01）。结论：TGFβ1及其受体在子宫内膜癌的发生发展中起重要作用，检测TGFβ1及其受体TβRⅡ对评价子宫内膜癌的转移及预后有重要价值。     

子宫内膜癌中TSP－2、TGF－β1表达及其与MVD的相关性研究

目的：研究子宫内膜癌中凝血酶敏感蛋白－2（TSP －2）、转化生长因子－β1（TGF －β1）的表达及其与微血管密度（MVD）的关系。方法：免疫组化 SP 法检测和比较30例子宫内膜癌、30例子宫内膜癌前病变、20例正常子宫内膜组织中 TSP －2、TGF －β1的表达和 CD34标记的 MVD。结果：TSP －2表达在子宫内膜癌组与正常子宫内膜组间有显著差异（P ＜0．05）,且与肌层浸润、手术－病理分期相关（P ＜0．05）。TGF －β1的表达在子宫内膜癌组与正常子宫内膜组间有显著差异（P ＜0．05）,与肌层浸润程度、手术－病理分期和淋巴转移有关（P ＜0．05）。TSP －2表达与 MVD 显著负相关（P ＜0．01）。TGF －β1表达与 MVD 显著正相关（P ＜0．01）。结论：TSP －2、TGF －β1可能参与子宫内膜癌的发生、发展并与肿瘤细胞的恶性侵袭行为相关,TSP －2、TGF －β1和 MVD 联合检测对子宫内膜癌的病情进展、预测转移风险评价具有一定意义。     

子宫内膜中PTEN、p16蛋白的表达及临床意义

目的：研究子宫内膜组织中PTEN、p16蛋白的异常表达,探讨其与子宫内膜癌变的关系和早期诊断及评判预后的可能性。方法：应用免疫组化S—P法对20例正常子宫内膜组织、40例子宫内膜增生症组织、30例内膜腺癌组织中PTEN、p16蛋白的表达进行研究。结果：在正常增生期子宫内膜、子宫内膜增生症（单纯型增生、复杂型增生、不典型增生）、子宫内膜腺癌组织中PTENp16蛋白的阳性表达率呈递减趋势,子宫内膜腺癌与除不典型增生外的子宫内膜增生症组织及正常子宫内膜组织的glEN蛋白表达差异有显著性（P〈0．05）,正常子宫内膜、单纯型增生与不典型增生组织的PTEN蛋白表达差异有显著性（P〈0．05）,子宫内膜腺癌与正常子宫内膜及单纯型增生子宫内膜p16蛋白表达差异有显著性（P〈0．05）,正常子宫内膜与增生症子宫内膜差异无显著性（P〉0．05）增生症子宫内膜各组间p16蛋白表达无显著性差异（P〉0．05）,PTENP16蛋白的表达与子宫内膜癌的手术分期、组织学分级,肌层浸润有关（P〈0．05）。PTEN、p16蛋白表达存在正相关性（r=0．978,P〈0．05）。结论：PTEN、p16蛋白的异常表达与子宫内膜的癌变过程相关。     

claudin-4和MMP-2在子宫内膜癌中的表达及其意义

目的：探讨claudin-4和MMP-2在子宫内膜癌中的表达与临床病理参数之间关系。方法：采用免疫组化S—P法检测75例子宫内膜癌和28例正常增生期子宫内膜中claudin-4和MMP-2表达并作相应分析。结果：子宫内膜癌中claudin-4和MMP-2表达均高于正常增生期子宫内膜中的表达（P〈0．05）;claudin-4和MMP-2高表达均与癌组织肌层浸润深度有关（P〈0．05）,与组织学类型、组织分级、有无淋巴结转移及手术病理分期无关（P〉0．05）;claudin-4与MMP-2呈正相关（r=0．53,P〈0．05）。结论：claudin-4和MMP-2高表达可能促进子宫内膜的发生和发展,claudin-4和MMP-2表达可能是判断子宫内膜癌预后的重要参考指标。     

PPARγ ERα和ERβ在子宫内膜癌的表达及其相关性分析

  目的   探讨PPARγ、ERα和ERβ在子宫内膜癌的表达情况,分析三者之间的相互联系及临床意义。   方法  采用免疫组织化学法及Western blot法检测正常子宫内膜及高中低分化子宫内膜癌组织中PPARγ、ERα和ERβ的表达。   结果  PPARγ在子宫内膜癌中表达量明显降低,且随病理分级的进展,呈递减趋势;ERα在正常子宫内膜及高分化子宫内膜癌中表达量无显著性差异（P>0.05）,而在中、低分化子宫内膜癌中表达量降低（P < 0.05）;ERβ表达量仅在低分化子宫内膜癌降低,在正常子宫内膜及高中分化子宫内膜癌中表达量无显著性差异（P>0.05）。Pearson相关分析提示ERα与PPARγ在不同子宫内膜组织中表达量呈正相关（P < 0.05）,而ERα与ERβ、ERβ与PPARγ间无相关性。   结论  PPARγ及ERα表达水平与子宫内膜癌的分化程度、临床分期相关,在子宫内膜癌的发生发展中可能起重要作用。      

子宫内膜癌中p16基因甲基化与表达的研究

目的 研究ｐ１６基因甲基化状态及其ｐ１６基因表达异常与子宫内膜癌发生发展的关系。方法 采用限制性内切酶酶切、ＰＣＲ及ＲＴ－ＰＣＲ检测子宫内膜检测ｐ１６基因５’ＣｐＧ岛甲基化状态及ｐ１６基因ｍＲＮＡ表达。结果 ８例正常子宫内膜无甲基化,且ｐ１６ ｍＲＮＡ表达正常。６例子宫内膜非典型增生中,有１例甲基化;３８例子宫内膜癌中,１３例甲基化,占３４．２％。６例子宫内膜单纯及复合增生中,有５例ｐ１６ ｍＲＮ     

β-连环素表达及基因突变与子宫内膜癌发生发展相关性的研究

目的：研究β-连环素（β-cat）在子宫内膜癌组织中的表达及基因突变在子宫内膜癌发生中的作用。方法：采用免疫组化SABC法和SSCP-PCR法检测31例子宫内膜癌标本和10例正常子宫内膜中β-cat的表达及基因突变，并对实验结果进行统计学分析。结果：31例子宫内膜癌74％为质／核聚集表达，明显大于正常子宫内膜，P〈0．05。其中，Ⅰ期为84％，明显高于Ⅱ、Ⅲ期（16％），P〈0．05；内膜样腺癌为88％，明显高于非内膜样腺癌，P〈0．01，且60％分化良好，P〈0．05。不同肌层浸润深度间比较差异无统计学意义，P〉0．05。SS-CP法检测出5例突变条带，均为FI-GOI期的子宫内膜癌，且4例为内膜样腺癌，但差异无统计学意义，P〉0．05。突变组均伴有肛cat聚集，与正常组相比差异有统计学意义，P〈0．05。结论：β-cat聚集与子宫内膜癌发生有关，尤其与早期、分化良好的内膜样腺癌的发生有关，但与肌层浸润深度无关。基因突变是β-cat聚集的重要分子事件，是导致子宫内膜癌发生的重要通路之一。     

高迁移率族蛋白A2在子宫内膜癌中的表达及意义

目的：探讨高迁移率族蛋白A2（high mobility group proteinA2,HMGA2）在子宫内膜癌细胞系AN3CA、ECC-1、Ishikawa以及子宫内膜癌组织、正常子宫内膜组织中的表达及意义。方法：采用逆转录-多聚合酶链反应（RT—PCR）、免疫印迹法（Western Blot）检测HMGA2在体外培养的子宫内膜癌细胞系AN3CA、ECC-1、Ishikawa以及21例子宫内膜癌组织标本和18例正常子宫内膜组织标本中的表达。结果：HMGA2-mRNA在子宫内膜癌细胞系AN3CA、ECC-1、Ishikawa中均有表达;在Ⅰ期、Ⅱ期子宫内膜癌患者中表达的阳性率分别为8．3％（1／12）、88．9％（8／9）,HMGA2-mRNA表达的阳性率与手术-病理分期有关（P=0．000,P〈0．05）,在高分化腺癌、中低分化腺癌的组织标本中表达阳性率分别为66．7％（4／6）、33．3％（5／15）,HMGA2-mRNA表达阳性率与子宫内膜癌细胞的分化程度无关（P=0．331,P〉0．05）;HMGA2-mRNA在18例正常子宫内膜组织标本中无一例表达;Western Blot的结果与RT—PCR的结果相符合。结论：HMGA2基因可能参与了子宫内膜癌的发生和发展,在子宫内膜癌细胞的增殖与侵袭中可能发挥重要作用。     

PTEN和CyclinA蛋白在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨PTEN和CyclinA在子宫内膜癌中的表达及其在癌发生发展中的作用。方法：采用免疫组化SP法检测PTEN和CyclinA蛋白在30例正常子宫内膜、30例子宫内膜增生、20例子宫内膜不典型性增生、55例子宫内膜癌组织中的表达。结果：不典型增生组和子宫内膜癌组中PTEN阳性表达率分别为55．00％（11／20）、45．45％（25／55），与全部为阳性表达的正常内膜及阳性表达率为90．00％（27／30）的子宫内膜增生组比较，不典型增生组和癌组中PTEN阳性表达均显著低于正常子宫内膜和子宫内膜增生组（P〈0．05）。CyclinA在不典型增生组和癌组中阳性表达率分别为45．00％（9／20）、67．27％（37／55），显著高于全部阴性表达的正常子宫内膜组和子宫内膜增生组（10．00％，3／30）（P〈0．05）。两者在不典型增生和子宫内膜癌组中的表达均呈显著性负相关（r=-0．5330，r=-0．5556；P〈0．001）。癌组中PTEN阳性表达的缺失与组织学分级有关（P〈0．05），但与肿瘤的浸润转移、临床分期和复发无关（P〉0．05）；CyclinA的阳性表达率与组织学分级、肿瘤的浸润转移和临床分期、复发有关。结论：PTEN表达缺失和CyclinA的过度表达涉及子宫内膜癌的发生、发展过程，二者联合检测可作为子宫内膜癌早期诊断、判断肿瘤生物学行为的免疫学指标。     

PTEN基因甲基化及其表达异常与胃癌的关系

目的：探讨PTEN基因表达、启动子区甲基化与胃癌及其临床病理特征的关系。方法：采用甲基化特异性PCR法（MSP）和逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法，分析胃癌组织及相应癌旁正常组织中PTEN基因启动子区甲基化及其mRNA表达情况。结果：48．2％（27／56）的胃癌组织和3．6％（2／56）的癌旁胃组织PTEN基因启动子区发生甲基化．癌组织PTEN基因启动子区甲基化率显著增高（P〈0．05）：其中，2例甲基化癌旁胃组织均为胃癌组织中有甲基化的病例．发生淋巴结转移的29例胃癌组织中．19例PTEN基因启动子甲基化；发生淋巴结转移的PTEN基因启动子甲基化显著高于无淋巴结转移组（P〈0．05）。RT—PCR结果显示，所有甲基化的胃癌组织中PTEN mRNA均无表达，结论：胃癌中PTEN基因mRNA失表达与其启动子区甲基化有关，这可能是胃癌发生、发展以及转移的原因之一。     

子宫内膜癌组织中PTEN蛋白的表达及其临床意义

目的：探讨PTEN蛋白表达与子宫内膜癌病理特征的关系。方法：应用免疫组化方法检测15例正常子宫内膜、18例子宫内膜癌前病变，60例子宫内膜癌组织中的PTEN蛋白表达。结果：正常子宫内膜、子宫内膜癌前病变和子宫内膜癌组织中PTEN蛋白阳性表达率分别为93．3％、66．7％和40．0％，三者之间有显著性差异（P＜0．05）。子宫内膜癌组织中PTEN蛋白表达缺失率与组织学分级、组织类型和临床分期密切相关（P＜0．05），组织分化程度高、临床分期早、内膜样腺癌组织中PTEN蛋白表达缺失率明显低于组织分化程度低、临床分期晚及其他组织类型癌。结论：PTEN蛋白在子宫内膜癌的发生、发展中起重要作用，PTEN蛋白表达与子宫内膜癌的组织学分级、组织类型和临床分期密切相关。     

STAT3与雌、孕激素受体在子宫内膜癌中表达的相关性

目的探讨孕激素受体（PR）、雌激素受体（ER）与信号转导及转录活化因子3（STAT3）在子宫内膜癌患者中的表达情况及其相关性。方法选取30例经病理组织学证实为子宫内膜癌的患者为研究对象,并选取30例健康体检妇女为对照组,采用免疫组化法测定2组子宫内膜标本中ER、PR、STAT3表达情况,并分析三者相关性。结果子宫内膜癌组织中ER、PR、STAT3阳性表达率显著高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。子宫内膜癌中STAT3、ER表达均与肿瘤临床分期、病理分级、淋巴结转移有关（均P〈0．05）;而PR则与临床分期及病理分级有关（均P〈0．05）。经相关性分析可知,STAT3与ER激素呈正相关（γ=0．452,P=0．000）,与PR激素无关（γ=0．1378,P=0．071）。结论子宫内膜癌的发生与ER、PR、STAT3过度表达有关,而STAT3的表达与雌激素调控有密切关系。     

分化相关基因1在Ⅰ型子宫内膜癌中的表达

[目的]检测NDRG1基因在正常子宫内膜和Ⅰ型子宫内膜癌中的表达，探讨其在Ⅰ型子宫内膜癌发生中的作用机制。[方法]应用免疫组化、原位杂交及RT—PCR技术检测NDRG1基因在正常子宫内膜与Ⅰ型子宫内膜癌中的表达。[结果]免疫组化结果显示，NDRG1蛋自在正常子宫内膜和Ⅰ型子宫内膜癌中的表达率分别为12．5％和83．5％，有显著性差异（P=0．000）；原位杂交结果显示．NDRG1 mRNA在10例正常子宫内膜中只有2例表达．而在30例Ⅰ型子宫内膜癌中有22例表达，有显著性差异（P=0.007）；RT-PCR结果显示，NDRG1mRNA在Ⅰ型子宫内膜癌中的表达比正常内膜增高3倍（P=0.000）。[结论]NDRG1在子宫内膜癌中在蛋白水平和mRNA水平与正常子宫内膜相比都明显升高。它可能是一种肿瘤相关基因，其异常表达可能参与了Ⅰ型子宫内膜癌的发病机制。     

Runx3 基因甲基化与胃癌发生和转移的关系

 目的 探讨Runx3基因启动子甲基化与胃癌发生发展过程的关系。方法 采用逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）检测80例胃癌组织及肿瘤周围粘膜组织中Runx3mRNA的表达，同时用甲基化特异性PCR（MSP）方法检测Runx3基因启动子甲基化情况。结果 80例胃癌组织标本中Runx3基因的表达（0．5971±0．1013）较肿瘤周围组织中表达明显下调（0．8297±0．2912），差异有统计学意义（P〈0．05）。正常粘膜组织中未发现有Runx3基因启动子的甲基化，80例胃癌组织中有43例检测到Runx3基因启动子的甲基化，胃癌组织Runx3基因启动子甲基化率显著增高（P〈0．（15）。胃癌标本中Runx3 mRNA的表达与其病理临床特征密切相关，在低分化和有淋巴结转移胃癌组织标本中Runx3mRNA的表达显著下调（P〈0．05）。结论 Runx3基因启动子甲基化是导致Runx3基因失活的主要原因之一并且与胃癌的发生、发展密切相关。     

分化相关基因1在Ⅰ型子宫内膜癌中的表达

[目的]检测NDRG1基因在正常子宫内膜和Ⅰ型子宫内膜癌中的表达，探讨其在Ⅰ型子宫内膜癌发生中的作用机制。[方法]应用免疫组化、原位杂交及RT—PCR技术检测NDRG1基因在正常子宫内膜与Ⅰ型子宫内膜癌中的表达。[结果]免疫组化结果显示，NDRG1蛋自在正常子宫内膜和Ⅰ型子宫内膜癌中的表达率分别为12．5％和83．5％，有显著性差异（P=0．000）；原位杂交结果显示．NDRG1 mRNA在10例正常子宫内膜中只有2例表达．而在30例Ⅰ型子宫内膜癌中有22例表达，有显著性差异（P=0.007）；RT-PCR结果显示，NDRG1mRNA在Ⅰ型子宫内膜癌中的表达比正常内膜增高3倍（P=0.000）。[结论]NDRG1在子宫内膜癌中在蛋白水平和mRNA水平与正常子宫内膜相比都明显升高。它可能是一种肿瘤相关基因，其异常表达可能参与了Ⅰ型子宫内膜癌的发病机制。     

BCL2－L12在子宫内膜癌中的表达及其与病理参数的关系

目的：通过测定BCL2－L12在正常子宫内膜组织和子宫内膜癌组织中的表达情况,探讨BCL2－L12在子宫内膜癌中的表达及其与病理参数的相关性。方法：应用Real time PCR法检测36例良性病变切除子宫患者（对照组）的正常内膜组织及64例子宫内膜癌患者（实验组）病变内膜组织中BCL2－L12的表达情况,并分析其与临床病理参数的关系。结果：BCL2－L12在子宫内膜癌组织中的表达低于正常子宫内膜组织,差异有统计学意义（P＜0．05）;BCL2－L12在子宫内膜癌组织中的表达水平与肌层浸润程度有关,差异有统计学意义（P＜0．05）。BCL2－L12在子宫内膜癌组织中的表达与其他临床病理特征（比如病理学分期、组织学分化程度等）差异无统计学意义（P＞0．05）。结论：BCL2－L12在子宫内膜癌组织中呈现低表达,且表达水平与肌层浸润程度有关,提示BCL2－L12可能在子宫内膜癌的发生发展中起抑制作用。     

子宫内膜癌及癌周组织VEGF mRNA表达及其临床意义的初步研究

目的：检测血管内皮生长因子（VEGF）在子宫内膜癌组织及癌周组织中的表达情况，分析其在肿瘤生长和转移中的可能作用。方法：采用荧光定量PCR方法检测51例不同临床分期的子宫内膜癌组织和癌旁组织及40例正常子宫内膜标本中VEGF mRNA的表达情况，分析其与各临床病理参数之间的关系。结果：子宫内膜癌组织中的VEGF mRNA表达水平显著高于癌旁组织及正常子宫内膜组织，F=10．24，P〈0．05；子宫内膜癌组织中VEGF mRNA的表达与肿瘤病理类型及患者是否绝经无相关性，F值分别为2．98和3．10，P值均〉0．05；但与临床分期、组织学分级、淋巴结转移和肌层浸润深度显著相关，F值分别为4．72、5．01、5．30和5、23，P值均〈0．05。结论：VEGF在子宫内膜癌的发生、侵袭、转移和预后过程中可能起着十分重要的作用，VEGF有可能成为治疗恶性肿瘤的一个潜在的分子靶点。     

细胞核增殖相关抗原Ki67在子宫内膜病变中的表达

目的：研究Ki67抗原在子宫内膜病变中表达的规律及其在子宫内膜癌的发生和预后评估的临床价值。方法：用免疫组化（SP）法检测子宫内膜增殖症及非典型增生各30例，子宫内膜癌90例；对照组30例，其中包括增生期及分泌期子宫内膜各15例，观察Ki67抗原在不同内膜病变及正常内膜中的阳性表达率。结果：Ki67抗原在分泌期内膜中几乎没有表达，在增生期内膜中有弱表达；在增殖症及非典型增生中有表达，但与对照组比较，无统计学意义（P〉0．05），且两者之间比较，亦无统计学意义（P〉0．05）；在子宫内膜癌组织中表达明显增高，显著高于良性病变组和对照组（P〈0．01）。而且Ki67抗原的阳性率随着临床分期及细胞分化级别的升高及淋巴转移的存在而增加。结论：Ki67抗原与子宫内膜癌发生密切相关．抗原过度表达提示子宫内膜癌患者预后不良。     

MiR-106a 在子宫内膜癌中的表达及意义

目的  检测miR-106a 在子宫内膜癌、不典型增生及正常子宫内膜组织中的表达,探讨它们与子宫内膜癌发生、 发展、侵袭和转移的关系。方法  收集40例子宫内膜癌患者、20例子宫内膜不典型增生患者及30例子宫内膜正常的患者（包 括异常子宫出血及子宫肌瘤患者）的组织标本,应用poly（A）-RT-qPCR 技术,检测miR-106a 在三种不同子宫内膜组织 中的表达,并分别将检测结果和子宫内膜癌患者的临床及病理资料进行统计学分析。结果  miR-106a 在子宫内膜癌、不典 型增生及正常子宫内膜组织中的相对表达量分别为0.667（0.197,1.624）,0.245（0.064,0.759）和 0.104（0.003,1.350）, 表达量逐渐下降,3组间差异有统计学意义（P＜0.01）,子宫内膜癌组织中miR-106a的表达显著高于正常子宫内膜组织（P ＜ 0.01）,同时高于不典型增生组织（P ＜ 0.05）,而不典型增生与正常子宫内膜组织相比较,其差异无统计学意义（P ＞0.05）;miR-106a在Ⅲ+Ⅳ期子宫内膜癌患者中的表达量高于Ⅰ+Ⅱ期;有淋巴结转移的患者中的表达量高于无转移者, 差异均有统计学意义（P ＜ 0.05）;不同年龄、病理类型、病理分级、肌层浸润深度及ER、PR 是否阳性子宫内膜癌患者 中其表达量的差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。结论  miR-106a 在子宫内膜癌组织中高表达,可能作为癌基因调控子宫内 膜癌的发生及发展。