即刻法室内质控在ELISA实验中的应用

室内质控是保证血液质量的重要措施之一 ,EL ISA实验的质控一般采用临床化学实验质控的方法。由于 ELISA试剂盒效期短、批号更换频繁 ,试剂昂贵。加上其灵敏度高、特异性强 ,批内测定不能代表批间测定 [1] ,故实际操作较难。笔者在EL ISA实验中采用即刻法室内质控 ,并绘制了即刻法室内质控表。取得了良好的效果。现以 EL ISA法检测抗 - HIV为例报告如下。材料与方法1　质控血清　由卫生部临检中心提供 ,抗 - HIV4NCU/ml,批号 0 0 0 2。2　试验　抗 - HIV ELISA试剂盒 ,由北京金豪公司提供 ,批号 2 0 0 0 0 5 2 3。3　仪器　 …     

两种方法检测抗-HIV在献血者中的应用

国产 ELISA抗 - HIV体外免疫诊断试剂盒有间接法和双抗原夹心法两种。为了加强对献血者抗 - HIV检测的质量控制 ,笔者对 1 997年～ 2 0 0 1年 5月间本站用 EL ISA抗 - HIV间接法筛选的结果进行了分析 ,同时又对 2 0 0 1年 1～ 5月间用两种不同厂家的 ELISA抗 - HIV间接法检测呈现阳性反应的 1 8份血标本 ,再次用多家 ELISA抗 - HIV的间接法试剂和多家双抗原夹心法试剂进行对比检测分析 ,现将结果报告如下。材料与方法1　抗 - HIV诊断试剂盒　 EL ISA抗 - HIV间接法所采用的试剂盒分别来自北京吉比爱生物技术有限公司 ,批…     

ELISA检测HIV抗体室内质控血清的制备与应用

由于很多因素都会影响到ELISA法检测结果的准确性．所以每次检测都应进行室内质控。我们试制了抗-HIV室内质控血清．并与卫生部临床检测中心生产的HIV抗体室内质控血清进行了对照．考核了其精密性、均匀性和稳定性。现报告如下。     

受血者输血前传染性血清标志物检测分析

本院于 1999年 6月起对受血者输血前血清 HBs Ag、抗 -HCV、抗 - HIV及梅毒抗体等 4项标志物进行检测 ,现将结果报告如下。材料与方法1　血清标本　所有血清均来自于 1999年 6月～ 2 0 0 1年 12月在本院住院需输血的患者 ,共 2 384 5例 ,标本均在输血前采集。2　检测方法　 HBs Ag与抗 - HCV检测采用 EL ISA法 ,试剂由北京耀华生物技术公司提供 ;抗 - HIV检测采用 EL ISA双抗原夹心法 ,试剂由北京万泰生物技术公司提供 ;梅毒抗体检测采用 EL ISA双抗原夹心法 ,试剂由北京金伟凯生物技术公司提供。梅毒抗体阳性标本用 TPPA作…     

2000～2002年周口市无偿献血者输血传染病标志物检测结果分析

从计划献血到自愿无偿献血是保证血液质量和输血安全的关键 ,为了解本地无偿献血的基本情况 ,笔者对 2 0 0 0～ 2 0 0 2年无偿献血者血液标本的检测结果进行分析 ,现报告如下。1　对象和方法1.1　对象　 2 0 0 0～ 2 0 0 2年度 ,周口市参加无偿献血者 35 195人次 ,年龄 18～ 5 5岁。1.2　仪器　 L absystems MK2洗板机 ,Wellscan MK3酶标仪(芬兰产 )。1.3　方法　 HBs Ag抗 - HCV、抗 - HIV检测均采用 EL ISA法 ,梅毒采用 TRUST和 EL ISA法 ,AL T采用赖氏法 (试剂分别由洛阳华美 ,河南理利 ,上海生物制品研究所提供 )批批检合…     

HIV抗体外部对照质控血清的制备及评估

目的 制备HIV抗体弱阳性外部对照质控血清并进行评估.方法 利用HIV抗体试剂盒中的阳性对照与正常人血清按一定比例混合,制备质控血清.ELISA法进行质控效果和稳定性检验.结果 ①在室内质控方面:自制质控血清与万泰公司质控血清有相似的效果.②稳定性检验:质控血清在4℃保存至少稳定2 mo,室温保存稳定1 mo,-20℃冻存至少稳定1 y.③反复冻融和加入硫柳汞对检测结果没有影响.结论 质控血清制备方法简便,易于保存,从质控效果和稳定性两方面评估符合国家质控物要求,可用于HIV抗体检测的室内质控.     

受血者输血前传染性血清标志物检测分析

安全输血一直是血站、医院及受血者最为关注的问题。本站为掌握输血前患者感染血液传染性疾病的状况 ,现笔者对2 0 0 0年以来 2 384 5例输血前患者血清 AL T、HBs Ag、抗 - HCV、抗 - HIV及梅毒等 5项标志物进行检测 ,现将结果报告如下。1　对象和方法1.1　对象　 2 0 0 0 - 0 3～ 2 0 0 2 - 12在周口市中心医院住院的输血前患者血清 2 384 5例 ,标本均在输血前采集。1.2　仪器　 L absystems MK2洗板机 ,Wellscan MK3酶标仪(芬兰产 )。1.3　方法　 HBs Ag、抗 - HCV、抗 - HIV检测均采用 EL ISA法 ,梅毒采用 TRUST和 EL I…     

HBsAg、抗-HCV及抗-HIV试剂质控结果分析

全国血液质量管理委员会在血站评审时明确要求 ,试剂使用前必须由质控部门对试剂进行抽样检查 ,合格后方可使用 ,笔者将 2 0 0 1年HBsAg、抗 HCV及抗 HIV试剂质控情况分析报告如下。材料与方法1　检测参比品　HBsAg血清盘 :阴性参考品 2 0份 ,阳性参考品 3份 ,灵敏度参考品 4份 ,(1ng/ml,2ng/ml,5ng/ml,高浓度 ) ,精密性参考品 1份 ;抗 HCV血清盘 :阴性、阳性参考品各 4 0份 ,抗 HIV血清盘 :阴阳参考品各 2 0份 ,精密性参考品为阳性 18号。以上产品均由中国药品生物制品检定所提供。表 1　 2 0 0 1年 1～ 12月HBsAg试剂质控结果厂…     

献血者丙型肝炎病毒核酸检测分析

目的　为了解抗 - HCV阴性和阳性与 HCV- RNA检测分析的符合率 ,选取 HCV检测的筛查方法。方法　用现代分子技术 ,对 30 0 0例 EL ISA抗 - HCV检测阴性和 2 80例 EL ISA抗 - HCV检测阳性的样本进行 HCV- RNA检测分析。结果　 EL ISA抗 - HCV阴性样本中 ,HCV- RNA检测阳性率为 0 .17% (5 / 30 0 0 ) ,EL ISA抗 - HCV阳性样本中 ,HCV- RNA检测阳性率为 87.8% (2 4 6 / 2 80 )。结论　 EL ISA抗 - HCV阴性样本中有 HCV感染窗口期漏检样本 ,EL ISA抗 - HCV阳性样本中 HCV- RNA阴性检出率为 12 % (34/ 2 80 ) ,血液 HCV感染的检测需同时使用 EL ISA和 HCV- RNA两种方法检测。     

自制人类免疫缺陷病毒抗体等质控血清及室内质控方法建立研究

目的用人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体阴性血清梯度稀释HIV抗体酶联免疫试剂盒中阳性对照,制备室内质控血清。建立艾滋病酶联免疫检测的室内质控方法。进行方法可靠性和质控血清稳定性的评价,同时比较两个厂家生产的HIV抗体试剂盒进行自制质控血清室内质控结果以及自制丙型肝炎抗体、乙型肝炎表面抗原血清的室内质控结果的评价。方法将自制的HIV质控品与卫生部HIV质控品按照HIV抗体检测的SOP文件用HIV抗体试剂随患者进行检测,每天测定吸光度,计算S/CO値。连续检测20次计算S/CO值和s,以x±2s为控制限,以x±3s为失控限绘制质量控制框架图。每天随患者标本各加入1份自制质控品和1份卫生部购质控品进行质控将其各自的S/CO描在质控图上,应用多规则质量控制原则分析以发现当天测定批的误差以及误差原因。控制每批次检测的重复性,观察试剂盒间的差异进行两种质控血清质控结果的比对研究。结果自制HIV抗体质控血清方法科学可靠,减少了基质效应,能确保结果的准确性和可靠性。结论稀释阳性对照制备质控品,建立酶联免疫室内质控方法也适用于乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎抗体等其他免疫项目的酶联免疫室内质控。不同厂家试剂用自制质控品进行质控结果无差异。     

国产ELISA试剂检测抗-HIV假阳性原因分析

酶联免疫吸附试验 (EL ISA)是检测人类免疫缺陷病毒抗体 (抗 - HIV)最常用的方法 ,国产 EL ISA试剂以其较高的敏感性和较好的特异性以及价格低廉为国内许多初筛实验室所采用。但在实际工作中我们有时会遇到假阳性的困扰 ,结合近几年国内试剂的发展 ,就其影响因素进行分析如下。1　材料和方法1.1　材料　抗 - HIV使用美国 BIO- RAD公司 CODA 型全自动酶免分析系统检测 ,国产第 2代试剂盒 A(批号 2 0 0 2 0 92 2 )、第 3代试剂盒 B和 C(批号 2 0 0 2 12 0 1和 2 0 0 30 4 16 ) ;类风湿因子(RF)采用胶乳凝集法 ,试剂由军事医学科…     

自制HIV抗体外部对照质控血清探讨与评估

目的:自制HIV抗体质控血清并评估.方法:利用HIV抗体试剂的阳性对照与正常人血清按比例混合制备质控血清.ELISA法进行质控效果和稳定性检验.结果:与万泰公司质控血清有相似的效果.结论:质控血清制备方法简便,易于保存,质控效果和稳定性评估符合国家要求,可用于HIV抗体检测的室内质控.     

即刻法室内质控的应用

“即刻法”室内质控因简单、实用而被免疫实验室广泛采用。但本站在应用”即刻法”室内质控的过程中 ,发现一些很少出现但对实际工作有一定影响的问题 ,现报告如下。材料与方法1　材料1.1　所用试剂均为通过“批批检定”的国产ELISA (HBsAg、抗 HCV、抗 HIV)试剂。1.2　自制弱阳性临界值质控血清 ,S/CO值控制在 1.5～ 3.0 (S为质控品双孔测定值的均值 ,CO为阈值 )。1.3　CS 5 0 0 0酶标仪 (北京航天 )。2　方法　依照即刻性室内质控方法 ,当检测完 3次数值后 ,将测定值从小到大排列 :X1、X2 、X3 ………Xn(X1为最小值 ,Xn 为…     

ELISA法测定HBsAg临床研究

为了解临床日常工作中 EL ISA法检测 HBs Ag误诊误报情况 ,笔者对 1998- 0 1～ 1999- 12河南周口部分地区无偿献血者、临床住院患者、中学生等 480 85份血清标本 ,在相同的实验条件下分别用两种不同厂家试剂平行检测 ,现将结果报道如下。1　对象和方法1.1　对象　血站无偿献血者血清 2 2 0 0 0例份 ,周口地区人民医院患者血清 3838例份 ,周口地区高考体检学生血清 2 2 2 47例份。1.2　试剂与仪器　 HBs Ag EL ISA试剂盒由河南理利生物技术公司、厦门新创科技公司和上海实业科华生物技术公司提供 ;试剂盒均经过国家批批检 ,并在有效期…     

血液抗-HCV初复检采用不同试剂的必要性

生部规定每袋血液必须经初、复检确认五项指标 ( ALT、HBs Ag、抗 - HCV、抗 - HIV、梅毒 )均为阴性后方可用于临床 ,而目前国产的试剂盒 ,不同厂家在抗原 (抗体 )包被和灵敏度方面都有所差异 ,特别是抗 - HCV试剂盒。故笔者对联合使用不同厂家试剂对抗 - HCV检测的必要性进行了探讨 ,现报告如下。材料与方法1　标本来源　均为本站采集的城郊两区的血样1 642份。2　方法2 .1　血清抗 - HCV初检采用上海实业科华技术有限公司提供的酶联免疫 ( EL ISA)试剂盒 ,批批检定合格 ,批号 980 5 30 0 1 ,复检采用厦门新创科技有限公司提供 …     

无偿献血者中检测出抗-HIV阳性的报告

目前 ,我国已实行了无偿献血制度 ,关于无偿献血人群是否存在 HIV感染 ,国内报道不多 ,笔者在 1 999～ 2 0 0 1年期间从街头无偿献血者中初检出9例抗 - HIV抗体阳性 ,阳性标本经市卫生防疫站HIV初筛实验室及省 HIV确认实验室检测 ,结果5例为抗 - HIV- 1阳性 ,现报告如下。材料与方法1　一般资料　 9名献血者中女性 1名 ,男性 8名 ,献血前的健康检查按照《献血者健康检查标准》操作 (其本人均否认有吸毒史 ,肝炎史 ,性病史 ) ,金标法检测 HBs Ag阴性。2　实验室检查　抗 - HIV1 /2抗体检测均采用EL ISA间接法。试剂盒分别由上海实…     

2012年HIV筛查实验室室内质量控制分析的评价

目的 评价HIV抗体检测筛查实验室的检测质量,促进质控水平的提高.方法 对本室内部对照及外部对照标本采用ELISA法进行检测,并对其结果进行回顾性分析.结果 ①在最佳条件下连续检测20次HIV抗体其结果为2.011±0.113,CV值为5.6％.②本实验室在本年度本批次的质控品及质控结果CV值均小于10％,表明本批次质控血清的稳定性和灵敏度较好,均符合国家对抗-HIV诊断试剂盒变异系数的要求.结论 通过对室内质控结果的连续观察,监测实验室检验结果的精密性,来保证实验室的质量,室内质控必须持之以恒,不断观察、分析和解决实验中的质量问题,才能使检验工作的质量得到稳步提高.解决质控考核中所发现的问题,并严格按照操作规程进行操作,就能避免出现各种问题,把艾滋病检测工作做得更好.     

HCMV—IgM捕获ELISA法的建立及其应用

目的　建立检测人巨细胞病毒 (HCMV)抗原特异性 Ig M的酶联捕获技术 (Capturing- EL ISA)。方法　应用 Capturing- EL ISA法检测 12 8份巨细胞病毒感染者血清中抗 HCMV- Ig M,并与常用的间接 EL ISA法进行比较。结果　抗原浓度、抗 HCMV抗体酶结合物浓度对所测得的标本 OD值都有不同程度的影响 ,用最适的实验条件建立的 Cap-turing- EL ISA法特异性及敏感性均高于间接 EL ISA法 ,且不受 RF因子的影响。结论　 Capturing- EL ISA敏感性高、特异性强 ,且简便、快速 ,重复性好 ,具有实际应用价值     

光照对ELISA试验结果的影响

EL ISA法作为血站最常用的试验 ,具有灵敏、特异、重复性好的特点 ,但影响因素也很多 ,尤其是试验过程中底物的避光问题常被一些操作者忽视 ,有些商品试剂盒在说明书中指明加入底物溶液后应避光 ,但有些试剂说明书则未特别强调 ,且光照对 EL ISA的影响也少见报道。本文着重探讨了光照对 EL ISA试验结果的影响材料与方法1　试剂盒　上海科华抗 - HCV (批号 2 0 0 1110 5 )、HBs Ag(批号 2 0 0 112 0 7) ,厦门新创 HBs Ag(批号 2 0 0 110 2 5 0 1) ,美国雅培抗 - HCV (批号 M80 6 310 ) ,荷兰欧嘉隆抗 - HIV (批号A4 2 KA)。均…     

受血者输血前血液传染性指标的调查分析

安全输血一直是血站、医院及受血者最为关注的问题。笔者为掌握受血者输血前感染血液传染性疾病的状况 ,对 1998年以来 32 5 8例患者输血前 AL T、HBs Ag、抗 - HCV、抗 - HIV及梅毒 5项血液指标进行了调查分析 ,现将检测结果报告如下。1　对象和方法1.1　对象　 1998- 10～ 2 0 0 0 - 12在周口市中心医院住院的受血者输血前血清 35 2 8人份。周口地区公民无偿献血 19770人份作为对照组。1.2　试剂与仪器　 HBs Ag、抗 - HCV、抗 - HIV EL ISA试剂盒由厦门新创科技公司和河南省生物研究所理利生物公司提供 ;梅毒试剂由上海荣盛生…