苄基四氢巴马汀细胞内用药对豚鼠乳头状肌动作电位和心室肌细胞延迟整流钾电流的作用

目的　研究将苄基四氢巴马汀(BTHP)导入细胞内对豚鼠乳头状肌动作电位及单个心室肌细胞延迟整流钾电流的影响。方法　利用外加电压脉冲将药物导入乳头状肌细胞内，并用标准微电极方法测定动作电位；利用浓度差扩散方式使药物进入单个心室肌细胞内，采用全细胞膜片钳技术记录延迟整流钾电流（I_K）。结果　100 μmol.L^-1 BTHP使APD₂₀和APD₉₀分别延长13.5%和20.5%。30 μmol.L^-1 BTHP使I_K和I_K,tail分别从（14.1±2.2) pA.pF^-1和(4.0±0.6) pA.pF^-1降至(9.4±1.3) pA.pF^-1和(2.1±1.0) pA.pF^-1，下降率分别为33.2%和35.3%。 该药使I_K和I_K,tail的I-V曲线幅度降低，对曲线形状影响不明显。结论　BTHP入细胞内后可阻滞延迟整流钾电流和延长动作电位时程。     

他克林对培养大鼠海马神经元延迟整流钾电流和瞬间外向钾电流的影响

目的研究他克林对培养大鼠海马神经元上延迟整流钾电流(I_K)和瞬间外向钾电流(I_A)的影响。方法 大鼠海马神经元原代培养,全细胞膜片钳记录培养大鼠海马神经元上电压依赖性外向钾电流和瞬间外向钾电流变化。结果他克林明显抑制海马神经元延迟整流钾电流和瞬间外向钾电流,呈浓度依赖性,对延迟整流钾电流的敏感性高于瞬间外向钾电流。30 μmol·L^-1他克林显著影响I_K和I_A稳态激活曲线,使所有电流的V_1/2左移。结论他克林明显抑制延迟整流钾电流和瞬间外向钾电流,对延迟整流钾电流的敏感性高于瞬间外向钾电流。     

雌激素对Kv2.1钾电流及大鼠海马神经元延迟整流钾电流的影响

目的研究17β-雌二醇对Kv2.1钾电流和原代培养大鼠海马神经元延迟整流钾电流的作用。方法采用HEK293-Kv2.1细胞培养、大鼠海马神经元原代培养和膜片钳全细胞记录技术。结果17β-雌二醇浓度依赖地抑制Kv2.1钾电流和原代培养大鼠海马神经元延迟整流钾电流(I_K)。17β-雌二醇抑制Kv2.1钾电流和原代培养大鼠海马神经元延迟整流钾电流的IC₅₀分别为2.4和4.0 μmol·L^-1。通道动力学研究发现，17β-雌二醇(3 μmol·L^-1)显著左移Kv2.1钾电流的稳态激活和失活曲线，但只显著左移海马神经元延迟整流钾电流稳态激活曲线，而不影响该电流的稳态失活曲线。结论17β-雌二醇抑制Kv2.1钾电流与抑制I_K的程度相近，17β-雌二醇抑制I_K的作用可能部分通过阻断Kv2.1钾电流而实现。     

阿米洛利对豚鼠心肌细胞钾电流及钙电流的作用

目的研究阿米洛利（amiloride）对豚鼠心肌细胞钾电流及钙电流的作用。方法采用全细胞膜片钳技术记录豚鼠心室肌细胞钾通道及钙通道电流。结果阿米洛利在10~100 μmol·L^-1抑制L型及T型钙电流,不改变钙电流I-V曲线的形状，仅抑制这两型电流的幅度。当累积浓度达100 μmol·L^-1时，阿米洛利轻微抑制快激活延迟整流钾电流(I_Kr)，对慢激活延迟整流钾电流(I_Ks)无影响。阿米洛利在1~100 μmol·L^-1浓度依赖性地抑制内向整流钾电流(I_K1)。结论阿米洛利抑制电压依赖性的钾、钙电流，为其抗心律失常作用提供了离子基础。     

苄基四氢巴马汀对豚鼠心室肌细胞快激活延迟整流钾电流的作用

目的研究苄基四氢巴马汀(BTHP)对心室肌细胞快激活(I_kr)延迟整流钾电流的作用。方法 用全细胞膜片钳技术记录豚鼠心室肌细胞钾离子通道电流。结果BTHP在1～100 μmol·L^-1以浓度依赖性方式阻滞I_kr,其IC₅₀为13.5 μmol·L^-1(95%可信范围:11.2～15.8 μmol·L^-1)。30 μmol·L^-1 BTHP可使I_kr及I_kr,tail分别降低(31±4)%和(36±5)% (N=6,P<0.01)。与多数III类抗心律失常药物不同,BTHP可频率依赖性地抑制I_kr。该药主要改变I_kr的失活过程,可使I_kr的失活时间常数(τ)从(238±16) ms降至(196±14) ms,而对I_kr的激活动力学影响不大。结论BTHP对I_kr有明显的抑制作用,且其阻滞作用呈现频率依赖性特征。     

慢性孵育β-淀粉样肽(25-35)对培养大鼠海马神经元外向钾电流的影响

目的　研究慢性孵育β-淀粉样肽_(25-35) (β-AP_25-35)对海马神经元上瞬时外向钾电流(I_A)和延迟整流钾电流(I_K)的影响。方法　在培养的大鼠海马神经元上用膜片钳全细胞记录钾通道电流。结果　β-AP_25-35 3μmol·L^-1 孵育细胞24h ,I_K 电流幅度增加(44.3±5.4)% ,电流密度由(30.4±6.4)pA·PF^-1 增加至(43.8±4.7)pA·PF^-1 ;β-AP_25-3510μmol·L^-1 孵育12h ,I_K 电流幅度增加(69.8±4.1) % ,电流密度增加至(51.6±7.9)pA·PF^-1,呈浓度依赖性;β-AP_25-35引起的I_K 增加对TEA 5mmol·L^-1 敏感;β-AP_25-35上调I_K 的作用主要发生在β-AP_25-355用药后48h内。β-AP_25-35对I_A无显著性影响。结论　β-AP_25-35选择性地增加海马神经元上I_K,这一作用可能与β-AP的神经毒性有关     

AMP579与腺苷对大鼠和豚鼠心室肌钾离子或钠离子通道作用的比较

目的研究AMP579和腺苷对钾离子与钠离子通道的影响及其作用机制，比较它们对负性变力及抗心律失常作用的离子机制。方法采用膜片钳全细胞记录模式记录大鼠和豚鼠心室肌细胞离子通道电流。结果腺苷对大鼠心室肌瞬时外向钾电流(I_{to)的激动作用强于AMP579，腺苷和AMP579的EC50值分别为2.33与8.32 μmol·L^-1 (P<0.05)；两者激动Ito的作用均可被腺苷A1受体阻滞剂PD116948阻断，表明其作用机制均是通过腺苷A1受体介导的。腺苷对豚鼠心室肌延迟整流钾电流(IK)的抑制作用强于AMP579，腺苷和AMP579的IC50值分别为1.21与2.31 μmol·L^-1 (P<0.05)；AMP579对内向整流钾电流(IK1)的抑制作用强于腺苷，AMP579和腺苷的IC50值分别为4.15与20.7 μmol·L^-1 (P<0.01)。AMP579和腺苷对大鼠心室肌钠电流(INa)的抑制作用相似，其IC50值分别为9.46与6.23 μmol·L^-1。结论腺苷对大鼠心室肌Ito的激动作用强于AMP579，两者对Ito的作用机制均是通过腺苷A1受体介导的。AMP579对IK1的抑制作用强于腺苷，而腺苷对IK的抑制作用强于AMP579，两者对INa的抑制作用相似，这些离子机制与两者发挥负性变力与抗心律失常作用有关系。}     

勾藤碱对大鼠和豚鼠心肌细胞钾离子通道的影响

用膜片钳全细胞记录的方法研究了勾藤碱对大鼠和豚鼠心肌细胞上电压依赖性钾通道的影响。CdC1₂0.1mmol/L存在时,勾藤碱30μmol/L减少大鼠心肌细胞一40至60mV去极化时产生的瞬时外向K⁺电流(I_A)30%,并减少一40至50mV去极化时,豚鼠心肌细胞的延迟整流K+电流(I_K)60%,同样剂量的勾藤碱对大鼠和豚鼠心肌细胞的内向整流K⁺通道(I_K1)无影响。提示勾藤碱的抗心律失常作用除了Ca通道阻断外,与其r通道抑制作用有关。     

妥卡尼对豚鼠心室肌细胞钙电流和钾电流的抑制作用

利用酶分散的成年豚鼠心室肌细胞和全细胞电压钳技术,研究了妥卡尼(tocainide)对心室肌细胞钙电流(I_ca)、延迟整流钾电流(I_k)和ATP敏感性钾电流(Ik,ATP)的作用。结果表明,妥卡尼对I_ca和I_k均显示浓度相关的抑制作用,妥卡尼50umol·L^-1对I_ca和I_k的抑制率分别为16%和3%。这可能是妥卡尼有效抑制室上性心动过速和缩短心肌动作电位平台期的重要机制。     

环维黄杨星D对分离大鼠心室肌细胞内Ca2+和L型钙电流的影响

目的研究环维黄杨星D（CD）对大鼠心室肌细胞内Ca²⁺动员和L型钙电流(I_{Ca-L/sub>)的影响。方法采用全细胞膜片钳和激光扫描共聚焦显微术研究CD对心肌细胞ICa-L/sub>以及氯化钾、咖啡因诱发心肌细胞内Ca²⁺动员的影响。结果CD浓度依赖性抑制ICa-L/sub>。指令电压为10 mV时，1和10 μmol·L^-1 CD分别使ICa-L/sub>电流密度从（-9.9±1.8）pA/pF降至（-6.4±1.4）pA/pF和（-4.2±0.6）pA/pF。共聚焦实验显示1和10 μmol·L^-1 CD不影响静息心肌细胞［Ca²⁺］i?/sub>，对氯化钾诱发［Ca²⁺］i?/sub>升高水平无明显抑制作用；咖啡因引起的细胞内Ca²⁺动员可被CD进一步增强。结论CD浓度依赖性抑制大鼠心室肌细胞ICa-L/sub>，并有促进咖啡因诱发心肌细胞内Ca²⁺释放的作用。}     

III类抗心律失常药RP58866对豚鼠及犬内向整流及瞬时外向钾电流的作用

目的:研究III类抗心律失常药RP58866 对I_K1 ,瞬时外向钾电流(Ito) 的作用。方法:用豚鼠和犬离体心肌细胞及全细胞电压钳技术。结果:在- 100 m V 时,RP58866 以浓度依赖方式明显减少了豚鼠心室肌细胞I_K1,其IC₅₀为(3-4±0-8) μmol·L^-1。在犬心室肌细胞,RP58866 可明显抑制Ito( 在100 μmol·L^-1 时减少87% ±2-1% ),其IC₅₀为(2-3±0-5) μmol·L^-1 。结论:RP58866 对心肌细胞的IK1 和Ito 均有抑制作用,而不是一种特殊的IK1抑制剂。     

用β-escin穿孔膜片技术研究粉防己碱对豚鼠心室肌钙电流的作用

目的用β-escin穿孔膜片(PPR)技术研究粉防己碱(tetrandrine,Tet)对I_Ca,L和I_Ca,T的作用。方法用PPR和全细胞记录(WCR)模式记录心室肌细胞I_Ca,L和I_Ca,T。结果25 μmol·L^-1 β-escin可在心室肌细胞形成稳定的PPR模式,用此模式记录的I_Ca,L衰减明显减慢。在PPR模式下1～300 μmol·L^-1 Tet浓度依赖性地减小I_Ca,L幅值。3,30和300 μmol·L^-1 Tet对I_Ca,T的抑制率分别为(16±5)%,(40±7)%和(75±11)%。结论用25 μmol·L^-1 β-escin在豚鼠心室肌细胞能得到较稳定的PPR模式,在此模式下Tet浓度依赖性地抑制I_Ca,L和I_Ca,T。     

苄基四氢巴马汀对表达于非洲爪蟾卵母细胞及中华大蟾蜍卵母细胞的延迟整流钾电流的抑制作用

苄基四氢巴马汀对表达于非洲爪蟾卵母细胞及中华大蟾蜍卵母细胞的延迟整流钾电流的抑制作用童秋生，夏国瑾，姚伟星，江明性，白小川，包永德（同济医科大学基础医学院药理学教研室，武汉４３００３０；中国科学院上海生理学研究所，上海２０００３１）苄基四氢巴马汀（ｂ...     

苄基四氢巴马汀对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流的影响

利用全细胞膜片钳技术测定大鼠心室肌细胞的I_to, 研究苄基四氢巴马汀（BTHP）对大鼠心室肌瞬时外向钾电流 (I_to) 的影响. 结果显示,5.0 μmol·L^-1 BTHP可以降低I_to, 使I_to幅值从（13.8±2.2）pA·pF^-1降至（5.1±1.4）pA·pF^-1（P＜0.01）. 在1～100 μmol·L^-1范围内BTHP的作用呈浓度依赖性,IC₅₀为3.6 μmol·L^-1,该药不改变I_to 电流-电压曲线的形状,而使电流幅值减少. 5.0 μmol·L^-1 BTHP使稳态激活曲线右移,半激活电压（V_1/2）从（－6.8±0.2）mV移至（－1.5±0.1）mV,但曲线斜率基本不变. BTHP对失活曲线影响不大,5.0 μmol·L^-1 BTHP使通道失活后恢复时间常数从（75±19）ms延长为 （119±21）ms（P＜0.01）. 结果说明,BTHP浓度依赖地阻滞大鼠心室肌细胞的I_to.     

青蒿素抗心律失常的作用机理

采用全细胞电压钳技术, 以确定青蒿素对分离的豚鼠心室肌细胞和狗的浦肯野纤维钾离子电流的影响. 在豚鼠心室肌细胞,青蒿素呈浓度依赖关系显著降低内向整流钾电流〔I_K1,膜电位为-100 mV时, IC₅₀为(7.2±0.8) μmol·L^-1〕,且这种抑制作用不呈现频率依赖性. 50 μmol·L^-1的青蒿素降低延迟整流钾电流(I_K): 时间依赖性外向钾电流(I_Kstep)在膜电位为+40 mV时减少(38±10)%. 尾电流步阶分析提示,I_K的快组分(I_Kr)和慢组分(I_Ks)均被抑制. 在犬浦肯野纤维,青蒿素明显抑制瞬时外向钾电流(I_to),IC₅₀为(4.2±0.3) μmol·L^-1. 实验结果表明,青蒿素以相似效率抑制I_K1, I_to和I_K,其抗心律失常作用可能与抑制I_K1,I_to,I_Kr和I_Ks有关.     

四肽FMRFa对大鼠心室肌Na+/Ca2+交换的抑制

目的　研究四肽FMRFa对大鼠单个心室肌细胞Na⁺/Ca²⁺交换的作用。方法　用膜片钳全细胞记录法测定成年大鼠心室肌细胞Na⁺/Ca²⁺交换电流(I_Na⁺/Ca²⁺)和其他离子通道电流。结果　FMRFa对大鼠心室肌细胞I_Na⁺/Ca²⁺呈浓度依赖性抑制,100μmol·L^-1浓度时抑制内向和外向I_Na⁺/Ca²⁺密度分别达60.1%和56.5%,对内向电流及外向电流的IC₅₀分别为20μmol·L^-1和34μmol·L^-1。FMRFa5μmol·L^-1抑制I_Na⁺/Ca²⁺内向和外向电流密度分别为38.7%和34.9%,但FMRFa5μmol·L^-1及20μmol·L^-1对L型钙电流、钠电流、瞬时外向电流和内向整流钾电流均无显著抑制作用。结论　FMRFa对大鼠心室肌细胞是一个特异性Na⁺/Ca²⁺交换抑制剂。     

苄基四氢巴马汀对豚鼠心室肌细胞钾电流及钙、钠电流的作用

目的：研究苄基四氢巴马汀（BTHP）对心肌细胞的作用特点,以探讨其抗心律失常机制。方法：用全细胞膜片钳技术考察BTHP对心室肌细胞钾电流及钙、钠电流的作用。结果：BTHP 30 μmol.L^-1明显阻滞延迟整流钾电流（I_K包括：I_Kr及I_Ks）。可使I_Kr及I_Kr,tail的幅值下降,且对I_Kr阻滞作用呈频率依赖性;对I_Ks及I_Ks,tail幅值也有明显的抑制作用。BTHP 200　μmol.L^-1可明显阻滞I_Ca,L,使其电流幅值降低,但对I_K1,I_Ca,T,I_Na电流均无影响。结论：BTHP可明显阻滞心室肌细胞I_Kr,I_Ks,I_Ca,L电流,且对I_Kr阻滞作用呈频率依赖性。     

M受体阻断剂对粉防己碱心肌负性肌力作用的调节及其离子机理

研究M受体阻断剂对粉防己碱(Tet)负性肌力作用的影响并探讨其机理. 记录Tet对豚鼠离体左心房收缩力,兔心房肌细胞动作电位及豚鼠单个心室肌细胞Ca²⁺,K^＋通道电流的作用及M受体阻断剂的影响.M受体阻断剂阿托品(0.03 μmol·L^-1)及M₂受体亚型阻断剂AF-DX 116(1.0 μmol·L^-1)能使Tet负性肌力作用的量效曲线平行右移, EC₅₀(μmol·L^-1)由28.9±0.9分别增至125±21和127±13;Tet(1-100 μmol·L^-1)浓度依赖性缩短兔心房肌细胞动作电位时程APD₂₀,APD₅₀, 此作用被阿托品(0.03 μmol·L^-1)部分拮抗,而Tet延长APD₉₀的作用不受阿托品的影响.阿托品(1 μmol·L^-1)部分拮抗Tet(30 μmol·L^-1)对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流的阻滞作用,而不影响其抑制内向整流钾电流(I_K1)的作用. 1 μmol·L^-1乙酰胆碱则能逆转Tet对I_K1的抑制. M受体阻断剂对Tet阻滞钙通道作用的影响可能是其拮抗Tet负性肌力作用的主要离子机理.