血管内皮生长因子受体导向毒素的制备

目的 以噬菌体肽库中筛选的与血管内皮生长因子受体(KDR)有特异结合活性的小肽为先导分子,制备KDR的导向毒素。方法 KDR为靶蛋白,以亲和筛选和竞争性洗脱法,从噬菌体环7肽库中,筛选到一段能特异结合KDR的小肽P5,将P5与大肠杆菌分泌的志贺氏毒素的毒性亚基StxA部分,以融合蛋白的形式原核表达,制备导向毒素。结果 获得了融合表达毒素P5-StxA。ELISA和Western blotting检测结果表明,融合毒素P5-StxA在体外能特异结合KDR。细胞毒性实验显示,P5-StxA具有与单独StxA分子同样的毒性。鸡胚绒毛尿囊膜实验结果表明,P5-StxA对鸡胚绒毛尿囊膜新生血管的形成有抑制活性。结论 导向毒素P5-StxA对KDR有特异结合活性,小肽P5有希望成为导向药物的先导小分子。     

成人急性白血病患者细胞血管内皮生长因子及其受体FLT-1、KDR的表达

目的　探讨成人急性白血病 (AL )患者细胞血管内皮生长因子 (VEGF)及其受体 FL T- 1(fm s- like tyro-sine kinase)、KDR(kinase- dom ain insert containing receptor)的表达。方法　采用 RT- PCR方法检测骨髓单个核细胞 (BM MNCs) VEGF及其受体 FL T- 1、KDR m RNA的表达水平。结果　 (1)初发未治患者、骨髓缓解患者 (BMR)和正常对照者 BM MNCs VEGF m RNA阳性表达例数的差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ,而 BM MNCs VEGF/β- actin相对表达量 ,在初发未治组显著高于 BMR组和正常对照组 (P值均 <0 .0 1) ,后两组之间的差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ;AML组高于 AL L患者 (P<0 .0 5 )。 (2 )初发未治患者 BM MNCs FL T- 1、KDR m RNA阳性表达例数较 BMR及正常对照者高 (P值均 <0 .0 5 ) ,后两组之间的差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ;AML组 BM MNCs KDR m RNA阳性表达例数高于 AL L组 (P<0 .0 5 ) ;应用 FL T- 1/β- actin、KDR/β- actin相对表达量分析与上述结果一致。 (3) BM MNCsVEGF的相对表达量与其受体 FL T- 1和 KDR的相对表达量呈相关性 (P值均 <0 .0 5 )。结论　 AL细胞 VEGF、FL T- 1和 KDR m RNA呈过表达 ;VEGF和 KDR m RNA表达强度 ,在 AML明显高于 AL L。应用半定量方法更能反映患者细胞 VEGF m RNA表达     

以血管内皮生长因子受体KDR为靶的肿瘤治疗的研究进展

血管内皮生长因子受体Ⅱ（激酶功能区受体，KDR）是介导血管内皮生长因子（VEGF）在肿瘤新生血管形成中发挥功能的主要受体，以KDR为靶，通过抑制VEGF与KDR的相互作用来抑制血管生长从而达到治疗肿瘤目的已经成为肿瘤治疗的新途径。本文从抗KDR的单克隆抗体、酪氨酸激酶小分子抑制剂、KDR的小肽抑制剂、核酸抑制物和导向制剂等几个方面综述了以KDR为靶治疗肿瘤的基础和临床现状及研究进展，探讨不同各种方法的优势与不足，以期在临床实施中选择合适的方法进行KDR靶向的肿瘤治疗。     

血管内皮生长因子及其受体与上皮性卵巢癌发展

目的　探讨血管内皮生长因子 (VEGF)及其受体 (KDR)与上皮性卵巢癌发展的关系。方法　用免疫组化方法检测 4 5例人上皮性卵巢癌中VEGF及KDR的表达 ,分析VEGF及KDR表达与卵巢癌FIGO分期、淋巴结转移及预后的关系。结果　 4 5例上皮性卵巢癌中 ,VEGF、KDR表达阳性率分别为 73.3% (33/ 4 5 )、5 7.8% (2 6 / 4 5 )。Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌VEGF表达阳性率 (94 .4 % ,17/ 18)高于Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌 (5 9.3% ,16 / 2 7)。淋巴结转移阳性组中VEGF表达阳性率 (10 0 % ,12 / 12 )高于淋巴结转移阴性组 (16 / 2 6 ,6 1.5 % ) ,(P <0 .0 5 )。VEGF表达阴性者生存率高于VEGF表达阳性者 (P =0 .0 4 7)。不同组织学类型上皮性卵巢癌中VEGF表达无明显差异。KDR表达与卵巢癌分期、淋巴转移及预后无关。结论　VEGF与上皮性卵巢癌发展有关。     

血管内皮生长因子及受体与卵巢癌

肿瘤血管生成与肿瘤的增殖、侵袭和转移密切相关，在众多影响肿瘤血管生成的因子中，血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)及受体的研究倍受人们关注，本文就二者与卵巢癌的关系作一简要综述。     

血管内皮生长因子及其受体与肿瘤

1971年,Folkman等首先提出了控制肿瘤生长新途径的设想——抗血管生成治疗。在众多的血管生长因子中,能够特异地刺激血管内皮细胞的是血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)。最早于1989年由Ferrara和Gispharowiz等分别在牛脑垂体滤泡星状细胞体外培养液中分离提纯,它可与血管内皮细胞的相应受体结合,刺激血管内皮细胞的增殖,同时还可促进血管内物质的泄漏,为血管内皮细胞的迁移和肿瘤细胞的转移提供基质[1]。大多数肿瘤细胞均表达较高水平的VEGF,特别是由于VEGF的生物活性与实体瘤的生长密切相关。VEGF与肿瘤的…     

血管内皮生长因子受体在恶性肿瘤中的研究进展

血管内皮生长因子受体（VEGFR）是血管内皮生长因子的特异性受体，包括VEGFR-1、VEGFR-2、VEGFR-3、神经纤维因子-1及神经纤维因子-2。前三者是酪氨酸激酶亚家族的成员之一，具有特征性的胞外区和酪氨酸激酶区，通过与相应的VEGF结合刺激血管内皮细胞增殖、迁移、促进新生血管的生成，与机体多种常见肿瘤的发病和转移有着密切的关系。本文就VEGFR家族成员、基因结构及其与肿瘤的关系做一系统综述。     

血管内皮生长因子及其受体与脑肿瘤的关系

新生血管形成是肿瘤生长的必要条件,而且也是肿瘤发生、发展、浸润、转移的重要原因之一。肿瘤血管形成是一个复杂过程,目前研究认为血管内皮生长因子(VEGF)及其受体在该过程中起着重要的作用。国内外学者研究VEGF及其受体已有多年,近几年主要集中在VEGF及受体的调节与作用机制、与脑肿瘤血管形成及瘤周水肿的关系和抗脑肿瘤治疗等方面。本文对近年来VEGF/VEGFR的研究成果以及与脑肿瘤相关的部分进行综述。     

胃腺癌的血管内皮细胞生长因子和KDR受体的表达及其临床意义

目的：研究胃腺癌的血管内皮细胞生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌ ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ, ＶＥＧＦ）及其受体 ＫＤＲ（ＶＥＧＦＲ）的表达,并探讨其临床意义。方法：应用免疫组织化学染色法检测ＶＥＧＦ／ＶＥＧＦＲ的表达,并分析其与６１例胃腺癌临床病理特征之间的关系。结果：胃腺癌组织ＶＥＧＦ／ＶＥＧＦＲ的阳性表达率分别为５５．９％和３９．３％;其中粘液腺癌和管状腺癌表达率较高（Ｐ＜０．０５,Ｐ＜０．０１）,ＶＥＧＦ／ＶＥＧＦＲ表达率分别为７１．４Ｔ／４２．８％和６１．９％／５２．４％;ＶＥＧＦ／ＶＥＧＦＲ的阳性表达与ＴＮＭ分期有显著差异（Ｐ＜０．０５,Ｐ＜０．０１）,阳性率为Ⅵ＞Ⅲ＞Ⅱ＞Ⅰ期,Ⅳ、Ⅲ、Ⅱ、Ⅰ期的表达率分别为 ８０．０％／５０．０％,６８．２％／４５．５％,４０．０％／３０．０％和３６．８％／３１． ６％;胃腺癌并转移患者,ＶＥＧＦ／ＶＥＧＦＲ的阳性表达分别为７６．２％和４７．６％,远高于无转移的４５．０％和３５．０％（Ｐ＜０．０５,Ｐ＜０．０１）;术后生存期小于１年的ＶＥＧＦ的表达率为６６．７％,明显高于术后生存期１年以上的５２．２％。结论：ＶＥＧＦ是胃腺癌血管生成的正向调     

血管内皮生长因子及其受体与肿瘤的关系

1971年Folkman提出肿瘤生长依赖血管生成假说。从血管生成的角度，将恶性肿瘤的发展分为血管生长前期和血管生长期两个阶段。当实体瘤生长至1mm^3以上时即需要瘤内血管生成，否则肿瘤静止于休眠状态，不发生转移，而一旦进入血管生长期，即迅速生长，其转移潜能也迅即出现。目前证实肿瘤血管     

重组可溶性KDR及其抗体对内皮细胞的增殖抑制作用

目的：分析可溶性KDR（sKDR)及其抗体对内皮细胞增殖的抑制作用。方法：通过ELISA分析大肠杆菌表达的sKDR纯化产物与VEGF165结合的能力；sKDR免疫家兔制备KDR262抗血清，Wenstern blot分析该抗血清与KDR262蛋白结合的特异性；用^3H-TdR掺入法，MTT法和细胞计数3种方法分析重组sKDR及其抗体对内皮细胞的增殖抑制作用。结果：sK-DR蛋白可与VEGF165特异性结合，肝素可增强其结合能力。KDR262抗血清具有特异性识别KDR蛋白的能力，其滴度为1：2000，用^3H-TdR掺入法和MTT2种方法分析sKDR蛋白及其抗体对内皮细胞的增殖抑制作用结果一致，sKDR蛋白浓度在10μg/ml,2μg/ml,0.4μg/ml时对内皮细胞增殖抑制率平均为56%，44%和32%；抗KDR262抗体在稀释度为50，200和800倍时对内皮细胞增殖的抑制率平均为70%，56%和43%，细胞计数法测定结果，sKDR及抗KDR262抗体组与VEGF165单独刺激组，GST和PBS对照组相比，内皮细胞增殖被明显抑制，随浓度增加抑制活性明显增强，但抗体的抑制活性比sKDR蛋白高。结论：大肠杆菌表达的sKDR及其抗体对内皮细胞均具有明显的增殖抑制作用。     

Caveolin-1对KDR信号通路的作用

目的：研究Caveolin-1对血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）受体KDR、p42／44MAPK的作用。方法：以腺病毒为载体介导在内皮细胞中表达外源Caveolin-1，应用Western-blotting检测KDR、p42／44MAPK的磷酸化水平。结果：与对照组相比，感染腺病毒表达外源Caveolin-1蛋白的内皮细胞中KDR1054酪氨酸残基和p42／44MAPK磷酸化水平分别降低了42．3％和43．5％。结论：Caveolin-1蛋白抑制KDR信号通路，对内皮细胞增殖可能具有抑制作用。     

血管内皮生长因子及其受体KDR在前列腺癌细胞中的表达研究

目的:探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)及其受体(KDR)在前列腺癌细胞中的表达及意义.方法:免疫细胞化学和Western blot检测体外培养的LNCaP,PC-3,PC-3M,DU-145和22RV1前列腺癌细胞中VEGF及其受体KDR的蛋白表达,RT-PCR检测mRNA,ELISA检测前列腺癌细胞培养上清VEGF蛋白含量.结果:免疫细胞化学染色显示VEGF和KDR在前列腺癌细胞LNCaP,PC-3,PC-3M,DU-145和22RV1中均有表达,但表达水平略有差别.LNCaP,PC-3和DU-145细胞中VEGF和KDR蛋白表达及其mRNA的含量显著高于PC-3M和22RV1(P＜0.01).细胞培养上清中VEGF蛋白含量结果与免疫细胞化学染色结果相同.结论:VEGF及其受体KDR在前列腺癌细胞中的表达量不近相同,但二者的表达对研究前列腺癌的发生发展及其机理有重要意义.     

鼻咽癌ＫＤＲ受体信号传导相关蛋白的表达及意义*

目的　分析鼻咽癌组织中ＫＤＲ及其下游信号分子ＰＫＣ-β和ｐ-ＥＲＫ的表达,并探讨上述蛋白表达与鼻咽癌患者临床特征和生存期的关系。方法　免疫组织化学法检测１１０例鼻咽癌和３０例鼻咽良性病变石蜡切片中ＫＤＲ、ＰＫＣ-β和ｐ-ＥＲＫ的表达情况,用Ｓｐｅａｒｍａｎ法分析它们之间的相关性,Ｋａｐｌａｎ-Ｍｅｉｅｒ法计算生存情况,行Ｌｏｇ-ｒａｎｋ检验和Ｃｏｘ比例风险模型分析。结果　鼻咽癌组织中ＫＤＲ、ＰＫＣ-β和ｐ-ＥＲＫ阳性表达率分别为８８.２％（９７／１１０）、６３.６％（７０／１１０）和５１.８％（５７／１１０）,而在鼻咽良性病变阳性表达率低。鼻咽癌组织中ＫＤＲ表达与ＰＫＣ-β及ｐ-ＥＲＫ表达呈正相关（ｒ＝０.２９７,Ｐ＝０.００２;ｒ＝０.３３６,Ｐ＜０.００１）,ＰＫＣ β表达与ｐ ＥＲＫ表达呈正相关（ｒ＝０.３０１,Ｐ＝０.００１）。ＫＤＲ和ｐ-ＥＲＫ表达与原发肿瘤的侵犯范围相关（Ｐ＜００５）;ＰＫＣ β和ｐ ＥＲＫ表达与临床分期相关（Ｐ＜０.０５）;ＫＤＲ和ＰＫＣ-β表达与肿瘤局部复发或远处转移相关（Ｐ＜０.０５）。３种蛋白表达均与总生存不佳相关（Ｐ＜０.０５）。Ｃｏｘ多因素相关分析显示年龄＞５０岁为不良预后因素（Ｐ＜０.０５）。结论　ＫＤＲ及其下游信号分子ＰＫＣ-β和ｐ-ＥＲＫ在鼻咽癌中表达,与鼻咽癌患者的临床特征和预后关系密切。     

筛选与KDR有结合活性的小肽

目的：从噬菌体12肽库和环7肽库中,筛选能够与KDR分子有特异结合活性的小肽。方法：以KDR/IgGFc为靶分子筛选噬菌体12和肽7肽库,经过3轮筛选和竞争性洗脱后,由ELISA、细胞-ELISA和竞争结合实验,鉴定阳性噬菌体克隆并测序。结果：从40个噬菌体克隆中得到12个能特异性与靶分子结合的阳性克隆,其中,6个噬菌体克隆与靶分子有较强的结合力,6个结合力较弱。结论：测序结果表明,12条小肽的一级结构中没有发现共同模式。特异性与KDR结合的活性小肽,有望在临床上作为放化疗药物的导向肽,以提高药物的选择性和降低其毒副作用。     

胃癌细胞AGS中KDR的表达对人脐静脉内皮细胞生物学行为的影响

目的观察胃癌细胞AGS中血管内皮生长因子受体KDR表达水平发生变化时，其培养上清对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)生物学行为的影响。方法采用Western blot及免疫细胞化学的方法检测AGS细胞中KDR的表达；利用重组腺病毒介导的KDR siRNA转染AGS细胞，通过细胞增殖试验、迁移试验及管状结构形成试验，观察不同条件培养基作用下内皮细胞生物学特性的变化。结果胃癌细胞AGS表达KDR，转染siRNA后表达水平降低；条件培养基影响了HUVECs增殖、迁移、形成管状结构的能力，转染siRNA的AGS细胞或亲本细胞组较RPM11640组均增强，前者更强。结论胃癌细胞AGS来源的条件培养基对内皮细胞的增殖、迁移、管状结构的形成具有促进作用，抑制AGS细胞中KDR的表达，这种作用被增强。     

大肠癌中C-Met VEGF及其受体KDR 的表达与预后的相关性*

目的:探讨C-Met 、VEGF及其受体KDR在大肠癌组织中的表达与预后的关系,为判断大肠癌患者预后提供参考。方法:应用免疫组织化学法检测60例大肠癌标本中C-Met 、VEGF及其受体KDR的表达情况。随访统计5 年生存率。结果:C-Met 、VEGF及其受体KDR在大肠癌组织中的表达阳性率分别为43.3% 、61.7% 及68.3% ;三者在大肠癌组织中的表达与患者的年龄及性别无明显相关（P>0.05）,与肿瘤侵袭深度、是否淋巴结转移及Dukes分期密切相关（P 均<0.05）。 C-Met 、VEGF及KDR阳性者5年生存率分别为42.3% 、43.2% 及51.2% ,阴性者5 年生存率分别为73.5% 、87.0% 及78.9% ,两组差异有统计学意义（P<0.05）。 Cox回归生存分析显示:对于大肠癌患者,VEGF、KDR及C-Met 均是独立危险因素;联合检测VEGF、KDR及C-Met ,是预测大肠癌预后很好的指标。结论:C-Met 、VEGF及其受体KDR在大肠癌患者组织中的表达与大肠癌的发生、发展有关,三者均阳性表达提示患者预后差,可作为评价预后的指标。      

表达KDR的T7噬菌体疫苗对小鼠异位移植肿瘤的免疫治疗

目的 构建KDR基因重组的T7噬菌体疫苗以及研究其对小鼠异位移植肿瘤（Lewis肺癌）的免疫治疗。方法 克隆KDR的膜外Ⅱ区基因,构建KDR基因重组T7噬菌体疫苗,免疫小鼠,免疫4次后接种Lewis肺癌,观察肿瘤的生长情况,14d后眼球取血,脱颈椎杀死小鼠,取出瘤体称重,计算抑瘤率,观察免疫治疗效果。结果 实验组抑制程度明显,肿瘤生长速度最慢,肿瘤重量与生理盐水组和空白噬菌体组相比有统计学差异（P〈0.05）,抑瘤率可达57．0％,远大于空白噬菌体组（16．0％）：结论 KDR基因重组的T7噬菌体疫苗对小鼠Lewis肺癌具有明显的抗肿瘤作用,用人源KDR作为免疫原免疫小鼠通过免疫交叉反应可以打破对自身抗原的免疫耐受,产生特异性的免疫反应。     

EXPRESSION OF VEGF RECEPTOR KDR IN DIFFERENT ORIGINATED CARCINOMAS

Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓｉｓｔｈｅｐｒｅｒｅｑｕｉｓｉｔｅｏｆｓｏｌｉｄｔｕｍｏｒｇｒｏｗｔｈ．１Ｄｕｒｉｎｇｔｈｅｐｒｏｃｅｓｏｆｔｕｍｏｒｐｒｏｇｒｅｓｉｏｎ，ｔｕｍｏｒｃｅｌｓｃａｎｓｅｃｒｅｔｅｖａｒｉｏｕｓａｎｇｉｏｇｅｎｉｃｆａｃｔｏｒｓ...     

KDR蛋白在卵巢浆液性肿瘤组织中的表达及临床意义

目的:探讨卵巢浆液性肿瘤(OSC)与正常卵巢组织中血管内皮生长因子受体(KDR、蛋白)的表达情况及临床意义。方法:利用Western Blotting方法对38例OSC、14例卵巢交界性浆液性瘤、11例卵巢良性浆液性瘤以及10例正常卵巢组织中KDR蛋白进行检测。结果:OSC组织中KDR蛋白表达的阳性率(89.5%)高于卵巢交界性浆液性瘤组织(64.3%)(P<0.05)。OSC组织中KDR蛋白表达的相对含量(141.10±87.31)明显高于卵巢交界性浆液性瘤(65.60±11.61)组织(P<0.005)。KDR蛋白在OSC和卵巢交界性浆液性瘤组织中表达的阳性率和相对含量均高于卵巢良性浆液性瘤(18.2%,42.62±12.66)及正常卵巢(10.0%,37.72±12.96)组织(P<0.05)。手术病理分期Ⅲ期 Ⅳ期OSC组织KDR蛋白表达的阳性率(96.2%)和相对含量(181.96±96.37)高于Ⅰ期 Ⅱ期(75.0%,112.37±59.28)OSC组织(P<0.05)。组织学Ⅲ级OSC组织KDR蛋白表达的阳性率(95.5%)和相对含量(171.76±91.66)高于Ⅰ级(4/6,87.96±35.59),有统计学意义(P<0.05)。有淋巴结转移的OSC组织中KDR蛋白表达的阳性率(96.2%)和相对含量(219.25±92.4)与无淋巴结转移的OSC组织(75.0%,108.43±30.45)相比较,有统计学意义(P<0.05)。有腹水的OSC组织中KDR蛋白表达的阳性率(83.3%)及相对含量(139.94±83.94)与无腹水的OSC组织(85.7%,167.07±93.66)相比较,无统计学意义(P>0.05)。结论:卵巢浆液性肿瘤的发生、发展与KDR蛋白的过高表达密切相关。KDR蛋白表达与卵巢浆液性癌生物学行为相关。