Th9、Th17、CD4~+CD25~+FoxP3~+调节性T细胞在慢性淋巴细胞白血病患者外周血中的变化

目的探讨慢性淋巴细胞白血病患者外周血中Th9、Thl7和CD4~+CD25~+FoxP3~+调节性T细胞及相关细胞因子的表达水平及意义。方法采用流式细胞仪检测36例CLL患者和45例健康对照组外周血Th9、Th17和Treg细胞的表达率,采用酶联免疫吸附方法(ELISA)检测外周血中细胞因子IL-9、IL-17、TGF-β的表达水平。结果 1)CLL组患者外周血Th9、Th17细胞比例及细胞因子IL-9、IL-17浓度均明显高于健康对照组[(1.29±0.35)%vs(0.74±0.23)%,P0.05;(2.15±0.46)%vs(1.08±0.37)%,P0.05;(24.25±7.05)%vs(16.35±5.42)%,P0.05;(11.47±3.99)%vs(7.36±2.85%),P0.05]。CD4~+CD25~+FoxP3~+细胞比例及细胞因子TGF-β浓度明显低于对照组[(4.76±0.89)%vs(7.26±1.95)%,P0.05;(3.82±1.39)%vs(6.82±2.01)%,P0.05]。2)相关性分析:患者Th9、Th17细胞比例及IL-9、IL-17浓度与淋巴细胞计数负相关(γ_s=-0.374,P=0.034;γ_s=-0.382,P=0.032;γ_s=-0.445,P=0.011;γ_s=-0.413,P=0.024);患者Treg细胞比例及TGF-β浓度与淋巴细胞计数正相关(γ_s=0.416,P=0.023;γ_s=0.403,P=0.028)。结论慢性淋巴细胞白血病患者Th9、Th17与CD4~+CD25~+FoxP3~+调节性T细胞比例失衡,血清IL-9、IL-17和TGF-β水平变化,这些原因可能参与慢性淋巴细胞白血病的免疫发病过程。     

CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞增龄性变化及其与老年肺癌的关系

目的探讨CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的增龄性变化及其与老年肺癌发生、发展的关系。方法肺癌患者70例和体检健康者60例,分别按年龄(青年18~45岁、中年45~60岁、老年60岁)分为青年肺癌组21例、中年肺癌组25例、老年肺癌组24例和青年健康组20例、中年健康组20例、老年健康组20例。采用流式细胞分析法测定各组外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg占CD4~+T细胞的百分率,采用实时荧光定量PCR法测定功能基因Foxp3 mRNA的相对表达量;分析肺癌患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞百分率与临床特征的关系。结果老年肺癌组外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞占CD4~+T细胞百分率[(11.81±2.40)%]及Foxp3 mRNA相对表达量(3.14±1.30)高于中年肺癌组[(11.25±1.84)%、2.53±1.16]和青年肺癌组[(9.05±2.14)%、2.28±1.21],中年肺癌组高于青年肺癌组(P0.05);老年健康组外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞占CD4~+T细胞百分率[(9.82±1.19)%]及Foxp3mRNA相对表达量(2.67±0.99)高于中年健康组[(7.81±1.16)%、1.76±0.80]和青年健康组[(6.23±0.91)%、1.17±0.51],中年健康组高于青年健康组(P0.05);相同年龄段,各肺癌组中CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞占CD4~+T细胞百分率及Foxp3 mRNA相对表达量均明显高于各健康组(P0.05);肺癌患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞占CD4~+T细胞百分率在肺癌分期、有无淋巴结转移上差异有统计学意义(F=28.660,P=0.002;t=21.084,P0.001),在不同性别、病理类型上差异无统计学意义(t=2.330,P=0.120;F=0.020,P=0.980)。结论 CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞的增龄性变化可能是导致老年肺癌发生、发展的原因之一。     

急性肝衰竭患儿细胞免疫及肠黏膜屏障功能临床研究

目的探讨急性肝衰竭患儿细胞免疫及肠黏膜屏障的功能变化。方法急性肝衰竭患儿30例为肝衰竭组,体检健康儿童30例为对照组,检测2组细胞免疫、调节性T细胞、血浆内毒素、二胺氧化酶水平变化。结果肝衰竭组患儿CD4~+细胞比率[(21.6±8.7)%]、CD4~+/CD8~+比值(1.33±0.42)、CD4~+CD25~+FOXP3~+调节性T细胞比率[(4.22±1.33)%]较对照组[(59.7±9.2)%、3.75±0.53、(8.35±2.89)%]明显减少(P0.01),CD8~+细胞比率[(29.8±5.4)%]、血浆内毒素[(21.71±4.47)EU/mL]、二胺氧化酶[(18.91±4.03)u/L]水平较对照组[(23.1±4.4)%、(3.10±1.73)EU/mL、(3.59±1.99)u/L]明显增高(P0.05)。结论急性肝衰竭患儿存在细胞免疫紊乱,参与肝衰竭的发生、发展,并加重肠道黏膜屏障功能受损。     

巨细胞病毒性肺炎儿童体内淋巴细胞亚群的变化特点

目的研究巨细胞病毒性肺炎儿童体内淋巴细胞亚群的变化。方法收集儿童巨细胞病毒(CMV)肺炎感染者共102例,同时选取15例同龄的健康儿童作为对照组。根据CMV-pp65抗原检测结果将CMV肺炎患儿分为CMV肺炎高活动性感染组和CMV肺炎活动性感染组,使用流式细胞仪检测各组儿童外周血液中CD3~+T淋巴细胞、CD3~+CD4~+T淋巴细胞和CD3~+CD8~+T淋巴细胞的比例。结果在CMV肺炎高活动性感染组患儿体内,CD3~+T淋巴细胞、CD3~+CD4~+T淋巴细胞和CD3~+CD8~+T淋巴细胞的比例分别为(71.35±2.58)%、(30.31±2.47)%和(41.36±1.24)%,与健康对照组相比差异有统计学意义(P0.05);在CMV肺炎活动性感染组患儿体内,CD3~+T淋巴细胞、CD3~+CD4~+T淋巴细胞和CD3~+CD8~+T淋巴细胞的比例分别为(74.89±1.78)%、(45.69±3.11)%和(33.39±2.01)%,与健康对照组相比差异具有统计学意义(P0.05)。结论 CMV肺炎感染患儿体内CD3~+T淋巴细胞和CD3~+CD4~+T淋巴细胞比例下降,CD3~+CD8~+T淋巴细胞比例升高。     

急性白血病患儿T淋巴细胞亚群及血清白三烯B4含量变化的临床意义

目的 探讨急性白血病(AL)患儿外周血T淋巴细胞亚群和血清白三烯B4含量的变化及临床意义.方法 用免疫荧光流式细胞技术检测40例AL患儿(观察组)及40名正常儿童(对照组)外周血T淋巴细胞亚群CD3+T细胞、CD4+T细胞和CD8+T细胞水平及自然杀伤(NK)细胞活性;同时采用酶联免疫吸附试验(ELSA)方法检测上述AL患儿与正常儿童血清白三烯B4含量的变化情况.结果 AL患儿CD3+T细胞[(49.51±6.53)%]、CD4+T细胞[(22.15±4.87)%]及CD8+T细胞[(23.41±3.96)%]均低于对照组[分别为(67.63±5.23)%、(34.43±5.07)%(28.17±4.61)%],差异有统计学意义(t=13.698、t=11.047、t=4.953,P＜0.01);AL患儿自然杀伤细胞活性[(5.41±4.25)%]明显低于对照组[(13.10±4.91)%],差异有统计学意义(t=7.498,P＜0.01);而AL患儿血清白三烯B4含量[(25.23±6.24)ng/L]明显高于对照组[(8.28±2.53)ng/L],差异有统计学意义(t=15.921,P＜0.01).结论 AL患儿T淋巴细胞亚群及白三烯B4发生明显改变,对揭示AL发病机制提供重要的理论依据.

Abstract：

Objective To study the changes of T lymphocyte subtype levels and serum levels of leukotriene B4 ( LTB4 )in children with acute leukemia (AL). Methods The activity of T lymphocyte subsets:CD3+ T cells,CD4+ T cells,CD8 + T cell levels and NK cell were detected in 40 cases of AL and 40 control by Flow Cytometry(FCM). The serum level of LTB4 was measured by ELISA in all subjects. Results Compared with normal control , the percentages of CD3 + T cells ( [ 49.51 ± 6.53 ] ％ vs [ 67.63 ± 5.23 ] ％ ), CD4 + T cells ([22.15±4.87]％ vs [34.43 ±5.07]％),CD8+ T cell ([23.41 ±3.96]％ vs [28. 17 ±4.61]％),NK cell ( [5.41 ± 4.25 ] ％ vs [ 13.10 ± 4.91 ] ％ ) were significantly lower in children AL patients, ( Ps ＜0.01 ). However,the serum levels of LTB4 increased significantly in AL patients compared with normal control ( [ 25.23 ± 6.24 ] ng/L vs [ 8.28 ± 2.53 ] ng/L, P ＜ 0.01 ). Conclusion T lymphocyte subtype and serum level of LTB4 showed significant changes in children AL patients compared with normal control, which revealed an important theoretical basis to AL pathogenesis.     

吉西他滨和顺铂方案联合康莱特注射液治疗晚期非小细胞肺癌的临床分析

目的探讨吉西他滨和顺铂(GP)方案联合康莱特注射液治疗Ⅲb~Ⅳ期非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效及安全性。方法选取2011年3月至2015年6月收治的137例Ⅲb~Ⅳ期NSCLC患者,随机分为观察组70例与对照组67例。观察组接受GP方案联合康莱特注射液治疗,对照组仅接受GP方案治疗。两个疗程化疗后对所有患者进行疗效、免疫功能以及不良反应评价。结果观察组部分缓解19例,疾病稳定28例,疾病进展23例,对照组部分缓解15例,疾病稳定27例,疾病进展25例,两组近期疗效比较,差异无统计学意义(P0.05)。化疗前,两组患者CD3+T细胞百分比[(56.8±11.5)%vs.(55.7±10.4)%]、CD4+T细胞百分比[(38.3±9.1)%vs.(38.0±8.7)%]、CD8+T细胞百分比[(28.8±6.3)%vs.(27.9±5.8)%]、CD4+/CD8+[(1.33±0.72)vs.(1.24±0.51)]比较差异无统计学意义(P0.05);化疗后,观察组CD3+T细胞百分比[(65.9±12.6)%vs.(53.3±10.2)%]、CD4+T细胞百分比[(35.8±8.4)%vs.(30.1±7.2)%]、CD8+T细胞百分比[(30.8±6.0)%vs.(27.1±5.3)%]、CD4+/CD8+[(1.27±0.21)vs.(1.13±0.16)]均显著高于对照组(P0.05)。观察组患者的不良反应分级均显著低于对照组(P0.05)。结论GP方案联合康莱特注射液治疗晚期NSCLC可以改善患者免疫功能,降低化疗药物毒副作用,值得临床进一步推广。     

急性髓样白血病患者骨髓干细胞CD200的表达及与临床疗效的关系

目的研究急性髓样白血病(AML)患者骨髓中CD200的表达情况及与临床疗效关系的相关研究。方法将51例急性髓样白血病患者根据初发时白细胞计数分为高白细胞组(18例)与非高白细胞组(33例),根据化疗效果分为完全缓解组(31例)和未缓解组(20例),同期选取51例缺铁性贫血或巨幼细胞贫血患者为对照组。采用流式细胞术检测AML患者化疗前后CD200、Foxp3~+/CD4~+的表达,酶联免疫吸附试验检测AML患者及对照组患者外周血白细胞介素17(IL-17)、IL-4和干扰素γ的水平。同时,采用Pearson线性相关分析研究AML患者中CD200表达水平与化疗前后血清IL-17、IL-4、干扰素γ水平及骨髓中Foxp3~+/CD4~+水平的关系。结果高白细胞组患者CD200阳性表达率明显高于非高白细胞组患者[(4.8±2.8)%vs.(3.7±2.2)%,t=4.961,P0.001]。未缓解组患者较完全缓解组患者明显偏高[(4.8±2.6)%vs.(3.1±1.6)%,t=5.716,P0.001]。对照组患者与AML患者化疗前比较,IL-17及干扰素γ水平均明显升高(t=26.970,P0.001;t=4.370,P0.001),IL-4水平及Foxp3~+/CD4~+细胞均明显降低(t=9.965,P0.001;t=7.346,P0.001)。而对照组患者与AML患者化疗后比较,仅IL-17及IL-4水平比较,差异有统计学意义(t=8.897,P0.001;t=3.965,P0.001)。与AML患者化疗前比较,化疗后IL-17[(147±42)ng/L vs.(332±68)ng/L,t=15.920,P0.001]及干扰素γ[(24±8)μg/L vs.(31±12)μg/L,t=3.576,P0.001]水平均明显升高,IL-4水平[(142±54)μg/L vs.(84±31)μg/L,t=6.644,P0.001]及Foxp3~+/CD4~+细胞[(7.5±2.4)%vs.(5.2±2.4)%,t=5.330,P0.001]均明显降低。Pearson线性相关分析发现,CD200表达水平仅与化疗后骨髓中Foxp3~+/CD4~+水平呈正相关(r=0.347,P=0.012)。结论 CD200可能通过抑制免疫相关因子影响AML患者临床疗效。     

CD39+和CD73+调节性T细胞与原发性胆汁性胆管炎肝脏损伤的相关性研究

目的分析原发性胆汁性胆管炎(primary biliary cholangitis,PBC)患者腺苷代谢通路相关分子的变化及其与PBC炎性损伤的关系。方法连续选择2016年10月-2017年10月在太仓市第一人民医院和常熟市第二人民医院就诊的PBC患者49例和体检健康者36例。流式细胞术分析外周血腺苷代谢通路关键分子CD39和CD73在CD4+T细胞和Foxp3+调节性T细胞(Treg)中的表达情况,高效液相色谱串联质谱(UHPLC-Q-TOF/MS)分析患者血清三磷酸腺苷(ATP)水平。分析以上指标的统计学差异及其与肝脏炎性损伤指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)和Mayo评分之间的相关性。结果 PBC组CD4+CD39+T细胞占CD4+T细胞比例[(5.28±1.92)%]较对照组[(11.01±3.19)%]显著降低(t=10.25,P0.01),CD4+CD25+Foxp3+CD39+T细胞(CD39+Treg)在Foxp3+Treg中所占比例[(23.75±9.48)%]同样显著低于对照组[(54.68±5.18)%],差异有统计学意义(t=13.79,P0.01)。PBC组和对照组CD4+CD73+T细胞在CD4+T细胞中的占比和CD4+CD25+Foxp3+CD73+T细胞在Foxp3+Treg中的占比差异无统计学意义(t值分别为2.235和1.083,P0.05)。PBC组血清ATP水平[(200.28±79.41)μg/L]明显高于对照组[(89.20±33.76)μg/L],差异有统计学意义(t=8.367,P0.01)。PBC组CD39+Treg占Treg比例与ATP、GGT和Mayo评分水平呈负相关关系(r值分别为-0.413、-0.378和-0.382,P值分别为0.003、0.007和0.007)。结论 CD39+Treg在PBC患者中比例显著降低,可能通过降低ATP的分解导致炎性损伤加剧。CD73+Treg在PBC患者中未见明显变化。     

血清TNF-α、TGF-β1及T淋巴细胞亚群水平与放射性肺病的临床相关性研究

目的研究放疗前后血清TNF-α、TGF-β1及T淋巴细胞亚群水平与急性放射性肺病的关系。方法收集食管癌和非小细胞肺癌患者60例,采用ELISA法检测放疗前后血清TNF-α、TGF-β1水平,采用流式细胞术检测放疗前后T细胞亚群水平,并评价它们与急性放射性肺病之间的关系。结果 (1)放疗后患者血清TNF-α水平升高,但高损伤组(放射性肺病≥2级)与低损伤组(放射性肺病<2级)TNF-α水平无统计学差异。(2)放疗结束时和放疗结束后3个月高损伤组TGF-β1水平显著高于低损伤组[(13.06±5.24)ng/ml vs.(9.14±4.93)ng/ml,P=0.009;(10.88±4.95)ng/ml vs.(7.02±3.42)ng/ml,P=0.008]。(3)放疗结束时和放疗结束3个月高损伤组总T细胞水平显著低于低损伤组[(56.12±9.88)%vs.(66.88±14.27)%,P=0.007;(59.88±10.02)%vs.(66.98±10.21)%,P=0.019],但CD4+和CD8+T细胞水平均未显现出统计学差异。(4)放疗结束时和放疗结束后3个月高损伤组CD4+CD25+T细胞水平显著高于低损伤组[(17.81±3.87)%vs.(14.51±5.19)%,P=0.022;(16.39±3.78)%vs.(13.05±3.61)%,P=0.003]。(5)CD4+CD25+T细胞水平与TGF-β1水平之间存在一定的正相关性。结论放疗后TGF-β1升高、总T细胞降低及CD4+CD25+T细胞水平升高者,发生放射性肺损伤较明显,且TGF-β1与CD4+CD25+T细胞水平之间存在一定的正相关性。     

原发免疫性血小板减少症患者外周血Tr1细胞表达

目的探讨原发免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia, ITP)患者外周血1型调节性T(type 1 regulatory T, Tr1)细胞表达及与血小板计数的关系。方法 ITP患者15例为ITP组,同期体检健康者13例为对照组。2组均行血常规检查,记录血小板计数、淋巴细胞计数;采用流式细胞仪检测2组外周血CD4~+T淋巴细胞、Tr1细胞计数,计算Tr1细胞占淋巴细胞百分比(Tr1/Lym)、CD4~+T淋巴细胞占淋巴细胞百分比(CD4~+T/Lym)、Tr1占CD4~+T淋巴细胞百分比(Tr1/CD4~+T);Pearson法分析ITP组Tr1细胞计数与血小板计数的相关性。结果 ITP组Tr1细胞计数[(0.940 9±0.672 2)×10~6/L]、血小板计数[(25.152 6±16.159 0)×10~9/L]、Tr1/Lym[(0.058 3±0.047 7)%]均较对照组[(1.644 0±0.992 6)×10~6/L、(282.738 5±95.414 4)×10~9/L、(0.130 8±0.122 1)%]降低(P0.05),Tr1/CD4~+T[(0.167 5±0.164 0)%]、CD4~+T/Lym[(39.559 4±9.918 4)%]与对照组[(0.383 5±0.382 4)%、(38.810 5±10.152 8)%]比较差异无统计学意义(P0.05)。Pearson相关分析结果显示,ITP组Tr1细胞计数与血小板计数无线性相关(r=0.530,P=0.063)。结论 ITP患者外周血Tr1细胞计数减少,免疫抑制作用减弱,Tr1细胞计数与血小板计数无明显相关。     

复发性视神经脊髓炎患者外周血记忆T细胞与IL-7水平的变化

目的:观察复发与未复发视神经脊髓炎(neuromyelitis optica,NMO)患者外周血记忆T细胞(CD4~+CD45RA~-T细胞)和IL-7水平的变化,探讨记忆T细胞在NMO复发机制中的作用。方法:利用流式细胞仪检测复发组(15例)、未复发组(17例)NMO患者及健康对照组(15例)CD4~+CD45RA~-细胞的比例。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测3组血浆白细胞介素7(IL-7)的浓度。分析32例患者的CD4~+CD45RA~-细胞比例与IL-7水平的相关性。结果:复发组CD4~+CD45RA~-细胞比例(32.86±5.53)%高于未复发组(19.98±5.72)%及健康对照组(19.59±4.49)%,差异均有统计学意义(P0.01);未复发组CD4~+CD45RA~-细胞比例高于健康对照组,但差异无统计学意义。复发组IL-7水平[(418.73±78.96)pg/mL]高于未复发组[(313.33±57.65)pg/mL]及健康对照组[(303.43±40.48)pg/mL],差异均有统计学意义(P0.01);未复发组IL-7水平高于健康对照组,但差异无统计学意义。NMO患者CD4~+CD45RA~-细胞比例与IL-7的水平显著相关(r=0.817,P=0.000)。结论:记忆T细胞参与NMO的复发过程,而IL-7对记忆T细胞的生成和功能有促进作用     

强化阿托伐他汀对急性冠状动脉综合征行介入治疗患者内皮细胞微粒和CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的影响

目的 探讨强化剂量阿托伐他汀治疗对急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)行经皮冠状动脉介入术(percutaneous coronary intervention,PCI)治疗患者外周血内皮细胞微粒(endothelial microparticles,EMP)水平和CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞及细胞因子水平的影响。方法 行PCI治疗的ACS患者104例,根据治疗方法分为阿托伐他汀强化治疗组(强化组)和阿托伐他汀常规治疗组(常规组)各52例。常规组PCI术前、术后均口服阿托伐他汀20mg/d,强化组PCI术前口服阿托伐他汀80mg/d,术后40mg/d。分别于术前、术后1周检测2组外周血EMPs水平、CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞百分率、Foxp3mRNA和转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)表达水平,分析EMPs与CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞百分率、Foxp3mRNA和TGF-β1水平的相关性。结果 强化组和常规组术后CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞百分率[(4.62±0.51)%、(3.85±0.60)%]、Foxp3 mRNA[(224.2±10.9)%、(173.7±11.6)%]和TGF-β1[(305.2±33.9)、(214.6±36.1)ng/L]均高于术前[(3.19±0.55)%、(3.25±0.49)%,(99.9±8.2)%、(101.2±9.4)%,(159.8±32.8)ng/L、(167.3±38.2)ng/L],EMPs水平[(1 062.2±336.8)个/μL、(1 387.8±353.6)个/μL]低于术前[(1 661.9±346.5)个/μL、(1 647.4±368.2)个/μL](P0.01),且强化组较常规组变化更明显,差异有统计学意义(P0.01);EMPs与CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞百分率、Foxp3mRNA和TGF-β1水平均呈负相关(r=-0.526,P=-0.000;r=-0.487,P=-0.001;r=-0.581,P=0.000)。结论 强化剂量阿托伐他汀治疗可能通过下调EMPs水平,从而上调CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞和TGF-β1水平,进而减轻炎症反应,稳定斑块。     

黄芪-莪术不同提取物对小鼠H22荷瘤的抑制作用及免疫调节的影响

目的研究黄芪-莪术不同提取物对小鼠H_22荷瘤的抑制作用及其对肿瘤小鼠血常规、T细胞亚群以及IL-2的影响。方法建立H_22荷瘤模型,分别灌服不同方法提取的黄芪-莪术提取物40倍人用生药量,观察抑瘤率,检查其对H_22肿瘤小鼠外周血常规、CD4~+、CD8~+T淋巴亚群以及IL-2水平调节的影响,应用SPSS 19.0统计软件进行数据分析,计量资料两两比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果 EH1~EH4四种提取物组均有一定的抑瘤效果,抑瘤率分别为47.55%,36.12%,29.96%,34.68%。与模型组相比,EH1组白细胞数[(9.57±3.46)×10~9/L,t=-2.582]、淋巴细胞[(3.25±0.66)×10~9/L,t=-4.422]、嗜酸粒细胞[(0.27±0.19)×10~9/L,t=-2.123]均升高(P<0.05),EH_2组淋巴细胞[(3.41±1.04)×10~9/L,t=-3.567]升高(P<0.01),EH3组淋巴细胞[(3.79±0.56)×10~9/L,t=-7.380]、单核粒细胞[(1.15±0.36)×10~9/L,t=-5.947]升高(P<0.05),EH4组白细胞[(9.93±3.82)×10~9/L,t=-2.647]、淋巴细胞[(3.59±1.14)×10~9/L,t=-3.756]、单核粒细胞[(1.47±1.06)×10~9/L,t=-3.046]升高(P<0.05)。EH1和EH4组CD4~+T细胞(35.878±4.584,t=-2.299;37.540±9.210,t=-1.838)升高,EH1组CD8~+T细胞(27.444±4.454,t=-0.814)升高。EH3和EH4组IL-2水平(208.308±21.414,t=-2.693;206.192±20.931,t=-2.575)升高(P<0.05)。结论 95%醇提、50%醇提、水提醇沉、传统水煎四种方法提取的黄芪-莪术成分均有不同程度的抗肿瘤效果,其发挥抗肿瘤效果可能是通过调节H_22小鼠外周血中异常的白细胞数,CD4~+、CD8~+T淋巴细胞数和IL-2水平来实现的。     

骨髓增生异常综合征患者CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞特点及环孢素对其的影响

目的探讨骨髓增生异常综合征(myelodysplastie syndrome,MDS)-难治性贫血(refractory anemia,RA)及难治性血细胞减少伴有多系发育异常(refractory cytopenia with multiple dysplasia,RCMD)患者CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞与白细胞介素(interleukin,IL)-10表达水平,评估环孢素对MDS患者CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞的影响。方法选择2016年1月至2018年1月于新疆维吾尔自治区人民医院25例MDS-RA及RCMD患者(MDS组)和13名健康对照(健康对照组),采用流式细胞术及酶联免疫吸附试验检测外周血标本CD4+CD25+FOXP3+Treg与IL-10表达水平,检测MDS-RA及RCMD患者在应用以环孢素为基础的免疫抑制方案治疗前、治疗6个月后及MDS组治疗有效及无效的CD4+CD25+FOXP3+Treg与IL-10的表达情况。结果全部25例患者中,13例(52%)有效,12例(48%)无效。MDS组CD4+CD25+FOXP3+Treg占CD4+T细胞比例显著高于健康对照组[(0.37±0.10)%与(0.12±0.06)%,t=2.02,P<0.001]。MDS组IL-10水平显著高于健康对照组[(7.16±1.27)μg/L与(2.75±1.06)μg/L,t=2.03,P<0.001]。MDS治疗有效组CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞比例低于无效组[(0.15±0.06)%与(0.26±0.08)%,t=1.71,P<0.001],有效组IL-10水平低于无效组[(3.22±1.01)μg/L与(4.25±1.22)μg/L,t=2.06,P=0.030]。25例MDS患者外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg比例与IL-10表达水平呈正相关关系(r=0.35,P=0.02)。结论MDS患者存在CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞与IL-10的表达升高,环孢素治疗后降低。     

维生素D_3对支气管哮喘患儿CD4~+CD25~+调节性T细胞和Th17细胞的影响

目的探讨维生素D_3对支气管哮喘患儿CD4~+CD25~+调节性T细胞和Th17细胞表达的影响及其治疗支气管哮喘的效果。方法支气管哮喘患儿160例,随机分为观察组和对照组各80例,对照组在常规对症支持治疗基础上给予硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂1揿/次,3次/d,喷吸;观察组在对照组治疗基础上给予维生素D_30.25μg/次,1次/d,口服;2组疗程均为12周。采用ELISA法检测2组治疗前、后血清1,25-二羟维生素D_3[1,25-dihydroxyvitamin D_3,1,25(OH)_2D_3]、白细胞介素(interleukin,IL)-4,IL-10,IL-17水平,采用流式细胞技术检测CD4~+CD25~+调节性T细胞和Th17细胞表达,比较2组疗效。结果观察组总有效率(96.2%)高于对照组(87.5%)(P0.05);观察组和对照组治疗后CD4~+CD25~+调节性T细胞[(7.56±1.24)%、(5.44±1.34)%]、1,25(OH)_2D_3[(36.06±5.98)、(31.44±6.32)nmol/L]水平均高于治疗前[CD4~+CD25~+调节性T细胞:(3.53±1.03)%、(3.54±1.01)%;1,25(OH)_2D_3:(25.64±5.24)、(25.72±4.65)nmol/L],Th17细胞[(1.94±0.73)%、(2.87±0.97)%],IL-17[(58.26±10.24)、(76.21±9.42)ng/L]、IL-4[(14.26±3.24)、(21.21±4.26)ng/L]及IL-10[(42.44±9.53)、(64.37±11.33)ng/L]水平均低于治疗前[Th17细胞:(4.38±1.68)%、(4.36±1.21)%;IL-17:(110.22±15.32)、(109.24±16.64)ng/L;IL-4:(41.22±9.32)、(41.24±10.64)ng/L;IL-10:(92.43±12.83)、(92.40±10.42)ng/L](P0.05),且观察组治疗后各指标改善较对照组明显(P0.05)。结论补充维生素D_3可提高支气管哮喘患儿临床疗效,其机制可能与上调CD4~+CD25~+调节性T细胞、抑制Th17细胞表达有关。     

肺炎支原体肺炎患儿外周血和肺泡灌洗液中T细胞及细胞因子变化研究

目的探讨肺炎支原体肺炎(MPP)患儿外周血和肺泡灌洗液(BALF)中T细胞亚群及细胞因子变化情况,以探讨该病可能的免疫损伤机制。方法选择43例MPP患儿(MPP组)为研究对象,并选取同期40例普通肺炎患儿(普通肺炎组),以及因异物入院行软式支气管镜术的25例患儿(对照组)作为对照。流式细胞仪检测外周血和BALF中T细胞亚群构成比,ELISA法检测白细胞介素(IL)-6、IL-10水平,并进行统计学分析。结果 MPP组患儿外周血及BALF中CD3~+CD8~+T细胞水平显著高于普通肺炎组及对照组(P0.05);MPP组外周血及BALF中CD3~+CD4~+T细胞、CD3~+CD4~+CD25~+T细胞水平显著低于普通肺炎组及对照组(P0.05);MPP组患儿血清及BALF中IL-6水平显著高于普通肺炎组及对照组(P0.05),IL-10水平显著高于对照组(P0.05);MPP患儿血清与BALF中IL-6(r=0.635,P=0.000)、IL-10(r=0.396,P=0.009)水平呈显著性正相关。结论肺炎支原体肺炎患儿外周血及BALF中T细胞失衡表达,细胞因子IL-6、IL-10显著升高。     

骨髓瘤患者外周血中CD4+ CD25+ CD127low/-调节性T细胞及淋巴细胞亚群的研究

目的研究多发性骨髓瘤(MM)患者外周血中CD4~+CD25~+CD~(127low/-)调节性T细胞(Treg)及淋巴细胞亚群的比例,初步探讨其在MM患者发生免疫抑制机制中作用。方法采用流式细胞术分别检测65例MM患者和20例健康对照组外周血中CD4~+CD25~+CD~(127low/-)Tregs以及淋巴细胞亚群的比例。结果 MM患者外周血中CD4~+CD25~+CD~(127low/-)Treg比例[(10.85±2.19)%]高于健康对照组[(7.48±1.66)%],差异有统计学意义(P0.01);MM患者外周血中CD3~+CD4~+(Th)细胞的比例[(31.39±5.19)%]低于健康对照组[(36.55±3.02)%],差异有统计学意义(P0.01);MM患者外周血中CD3~+CD8~+(Tc)细胞的比例[(34.80±4.29)%],高于健康对照组[(28.93±3.61)%],差异有统计学意义(P0.01);同时,MM组外周血中Th/Tc的比值(0.95±0.24)低于健康对照组(1.29±0.27),差异有统计学意义(P0.01)。结论 MM患者存在淋巴细胞亚群的比例异常,导致MM患者更易产生免疫功能失调;同时,由于MM患者CD4~+CD25~+CD~(127low/-)Treg细胞比例的增加可能进一步加剧骨髓瘤患者的免疫抑制,促进了肿瘤细胞的免疫逃逸。     

再生障碍性贫血患者穿孔素和颗粒酶B表达及意义

目的探讨再生障碍性贫血(aplastic anemia, AA)患者外周血穿孔素及颗粒酶B的表达及其临床意义。方法 AA患者60例,其中重型AA(severe AA, SAA)患者22例为SAA组,非SAA患者38例为非SAA组,选取60例体检健康者为正常对照组;采用流式细胞仪检测3组外周血T淋巴细胞亚群及穿孔素和颗粒酶B表达情况,采用ELISA法检测3组血清穿孔素和颗粒酶B水平,并进行比较。结果 SAA组及非SAA组外周血CD4~+细胞比率、CD4~+/CD8~+和自然杀伤(natural killing, NK)细胞比率均低于正常对照组(P0.05),CD8~+细胞比率高于正常对照组(P0.05)。SAA组和非SAA组CD8~+T淋巴细胞中穿孔素[(17.72±5.53)%、(15.95±6.11)%]和颗粒酶B[(76.91±17.44)%、(69.89±16.69)%]阳性表达率均高于正常对照组[(8.83±4.76)%、(32.57±15.22)%](P0.05),SAA组NK细胞穿孔素[(78.82±9.41)%]和颗粒酶B[(87.66±10.53)%]阳性表达率高于正常对照组[(62.33±5.76)%、(73.15±8.94)%](P0.05);SAA组血清穿孔素[(6 195.26±1 168.35)ng/L]和颗粒酶B[(7.726±2.611)ng/L]水平高于非SAA组[(3 875.77±1 094.68)ng/L、(3.152±1.787)ng/L]和正常对照组[(3 324.92±1 283.51)ng/L、(2.878±0.997)ng/L](P0.05),非SAA组与正常对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 CD8~+T细胞参与了AA的免疫应答,CD8~+T淋巴细胞、NK细胞中穿孔素和颗粒酶B在AA发病中可能起一定作用。     

颈动脉超声造影及血浆T淋巴细胞亚群在急性冠状动脉综合征中的应用

目的探讨颈动脉超声造影及血浆T淋巴细胞亚群在急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)中的应用价值。方法冠心病患者220例分为ACS组130例和稳定型心绞痛(stable angina pectoris,SAP)组90例,同期住院非冠心病患者50例为对照组。3组均行颈动脉超声造影,采用声学定量分析软件分析颈动脉斑块数目、斑块类型、斑块新生微血管等级评分、斑块峰值强度(peak intensity,PI)、达峰时间(time to peak,TTP)、增强密度(density echo,DE)等指标,采用ELISA法检测3组血浆CD3~+T淋巴细胞、CD4~+T淋巴细胞、CD8~+T细胞表达水平,计算CD4~+/CD8~+。结果 ACS组和SAP组血浆CD3~+T淋巴细胞[(56.32±9.87)%、(54.33±10.08)%]、CD4~+T淋巴细胞[(36.44±8.12)%、(33.54±7.91)%]及CD4~+/CD8~+(1.84±0.65、1.25±0.57)均高于对照组[(50.37±9.36)%、(28.29±7.23)%、0.97±0.45],且ACS组高于SAP组(P0.05),CD8~+T淋巴细胞[(20.81±6.92)%、(22.76±6.85)%]均低于对照组[(25.38±6.41)%],且ACS组低于SAP组(P0.05);ACS组、SAP组颈动脉软斑比率(55.18%、37.08%)、PI[(0.75±0.09)、(0.58±0.07)cm]、DE[(3.47±0.71)、(2.69±0.65)db/cm2]、斑块新生微血管等级评分[(3.42±0.84)、(1.98±0.67)分]均高于对照组[13.89%、(0.26±0.05)cm、(1.78±0.52)db/cm2、(0.88±0.32)分],且ACS组高于SAP组(P0.05),TTP[(17.04±2.98)、(18.75±3.52)s]均较对照组[(20.57±3.19)s]短,且ACS组短于SAP组(P0.05)。结论颈动脉超声造影及T淋巴细胞亚群有助于发现ACS患者颈动脉内斑块的不稳定状态。