柚皮素对人自然杀伤细胞杀伤肝癌细胞的影响及其机制

目的 将人外周血单个核细胞体外扩增为自然杀伤(NK)细胞,与肝癌细胞1∶1共培养。观察柚皮素对NK细胞杀伤率的影响并初步研究相关机制。方法 淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞,在体外经重组人白细胞介素2诱导培养NK细胞;0、3.125、6.25、12.5、25、50μmol/L浓度柚皮素作用于人肝癌细胞0、24、48 h后CCK8检测肝癌细胞增殖情况;不同浓度柚皮素作用于人NK细胞24 h后,CCK8检测NK细胞增殖情况;柚皮素作用于NK-肝癌细胞1∶1共培养体系24 h后,CellTiter-LumiTM检测NK细胞杀伤率;实时荧光定量PCR法检测NK细胞中激活型受体NKG2D的基因表达,以及肝癌细胞中NKG2D配体的基因表达。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 经重组人白细胞介素2诱导培养后,NK细胞可扩增至人外周血单个核细胞的82.33%±0.70%;柚皮素作用24 h后,所有质量浓度组CLC5肝癌细胞的增殖率无明显差异(P值均>0.05),25及50μmol/L质量浓度组柚皮素对NK细胞的增殖有较明显的促进作用(P值均<0...     

柚皮素与代谢综合征的研究进展

柚皮素属于二氢黄酮类天然化合物,是柚皮苷的苷元,主要存在于蔷薇科、芸香科、柑橘属植物中,具有重要的抗炎、抗菌、抗氧化、抗癌等生物学效应。研究表明,其具有改善肥胖、糖尿病、高血脂、高血压和代谢综合征等作用。本文旨在对柚皮素与代谢综合征的相关研究进行综述,以期为代谢综合征及其相关疾病的防治提供新的理论依据。     

柚皮素对急性肺损伤小鼠保护作用的机制研究

目的 探讨柚皮素(Nar)对急性肺损伤(ALI)小鼠的影响及其作用机制.方法 15只雌性BALB/c小鼠随机分成对照组(Control组)、模型组(LPS组)、柚皮素组(LPS+Nar组).采用气管内滴入脂多糖(5 mg/kg)建立急性肺损伤小鼠模型,造模成功后24 h取动脉血和双肺组织.HE染色观察肺组织病理改变,测...     

柚皮素对酒精性肝病模型大鼠的肝保护作用

背景 既往研究显示柚皮素(naringenin,Nar)可在急性肝损伤动物模型中发挥肝保护作用.而Nar对酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)中的作用尚不清楚,目的 探讨Nar对ALD模型大鼠的肝损伤的影响及作用机制.方法 将40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、低剂量Nar组和高剂量N...     

柚皮素预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察柚皮素（naringenin,NAR）对大鼠心肌缺血再灌注损伤（IRI）的保护作用。方法32只雄性SD大鼠（220 g~250 g）随机分为假手术组（control,n=8）、IRI组（n=8）、NAR 50 mg/kg组（n=8）和NAR 100 mg/kg组（n=8）。NAR 50 mg/kg和NAR 100mg/kg组均在IRI前2 h予相应NAR腹腔注射。大鼠心肌IRI模型制备方法：结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注180 min,而后180 min检测各组大鼠血清白介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量以及再灌后24 h检测心肌梗死面积。结果NAR可显著降低大鼠心肌IRI后心肌梗死面积（与IRI相比,P＜0.05）,同时还可以显著减轻IRI后血清中IL-1β、TNF-α、LDH、CK和MDA的水平,增加SOD水平（与IRI相比,P＜0.05）,并呈浓度依赖性。结论NAR对心肌IRI具有明显的保护作用,其保护机制与抑制IRI后炎症反应和清除氧化应激损伤有关。     

柚皮素脂质体对非酒精性脂肪性肝病大鼠脂质代谢的影响及机制研究

目的 研究柚皮素脂质体对高糖高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠脂质代谢的影响及其机制。方法 将50只SD大鼠随机分为对照组、模型组、柚皮素组、柚皮素脂质体Ⅰ组和柚皮素脂质体Ⅱ组。除对照组大鼠外,其余四组大鼠均采用高糖高脂饲料饲养建立模型,并分别给予生理盐水、柚皮素30 mg·kg^-1·d^-1、柚皮素脂质体20 mg·kg^-1·d^-1和柚皮素脂质体30 mg·kg^-1·d^-1腹腔注射,观察12 w。采用ELISA法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和丙二醛(MDA)水平,采用Western blot法检测肝组织Nrf2蛋白表达,采用RT-PCR法检测肝组织Nrf2 mRNA水平。结果 模型组大鼠体质量、肝质量、血清TC、TG、ALT、AST、SOD、CAT和MDA水平分别为(547.6±19.8)g、(12.9±0.3)g、(1.2±0.2)mmol/L、(2.6±0.2)mmol/L、(69.8±5.3)U/L、(229.6±18.2)U/L、(29.9±6.4)U/L、(26.5±2.4)U/mg和(11.7±1.1)nmol/mL,而柚皮素组、柚皮素脂质体Ⅰ组和柚皮素脂质体Ⅱ组大鼠上述大部分指标均有不同程度的下降(P＜0.05),仅SOD和CAT水平显著升高(P＜0.05);柚皮素组、柚皮素脂质体Ⅰ组和柚皮素脂质体Ⅱ组大鼠肝组织Nrf2蛋白表达和Nrf2 mRNA水平均显著高于模型组。结论 柚皮素脂质体可有效降低NAFLD大鼠血脂水平,促进SOD和CAT生成,其机制可能与激活Nrf2有关。     

芹黄素和柚皮素对肝星状细胞增殖及其胶原合成的作用

中药在治疗肝纤维化方面已展现了良好的应用前景,黄酮类化合物是中药中普遍存在的有效成分,具有抗菌、消炎、清除自由基、抗肿瘤等多种药理作用,我们观察到芹黄素（apigenin,AP）和柚皮素（naringenin,NA）具有降低肝星状细胞（HSC）增殖和胶原合成的作用。     

柚皮素联合Bcl-2抑制剂ABT-263调控信号通路AKT对胃癌细胞增殖凋亡的影响

目的探讨柚皮素(Nar)联合Bcl-2抑制剂ABT-263调控信号通路蛋白激酶B(AKT)对胃癌细胞SGC7901增殖、凋亡的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度的Nar和ABT-263及Nar+ABT-263处理胃癌SGC7901细胞24、48、72 h的增殖抑制率。Nar、ABT-263和Nar+ABT-263处理48 h后,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,用Western印迹检测AKT信号通路相关蛋白AKT和磷酸化(p)-AKT的表达。结果随Nar及ABT-263作用浓度增大及作用时间延长,对SGC7901细胞的增殖抑制率均显著增加(P0.05)。与对照组比较,Nar组、ABT-263组及联合用药组细胞的增殖抑制率均显著增加(P0.05),p-AKT蛋白表达均显著降低(P0.05);与Nar组和ABT-263组比较,联合用药组细胞的增殖抑制率均显著增加(P0.05),p-AKT蛋白表达显著降低(P0.05)。结论 Nar和ABT-263对胃癌细胞SGC7901均具有增殖抑制作用和凋亡促进作用,Nar联合ABT-263对胃癌细胞具有协同增效的作用,作用机制与下调p-AKT抑制AKT信号通路有关。     

基于网络药理学及分子对接研究柚皮素抗胃癌机制

目的:柚皮素是一种广泛存在于多种中药中的黄酮类化合物,具有优秀的抗炎、抗氧化以及抗癌功能,该研究系统探讨柚皮素抗胃癌的可能作用机制.方法:通过检索TCMSP、CTD、GeneCard、OMIM、DisGeN-ET及STRING数据平台获得相关数据,筛选后制成“成分-靶点”网络及蛋白互作网络,利用R软件运行biocond...     

柚皮素缓解小鼠金黄色葡萄球菌肺炎的损伤作用及其机制

目的建立金黄色葡萄球菌肺炎小鼠模型,分析柚皮素对金黄色葡萄球菌肺炎的影响及机制。方法选取90只C57BL/6J小鼠,随机分为对照组、金黄色葡萄球菌肺炎模型组以及干预组,每组30只。模型组以及干预组通过经鼻滴入金色葡萄球菌8325-4建立C57BL/6J小鼠金黄色葡萄球菌肺炎模型,干预组给予柚皮素100 mg/kg,1次/12 h,皮下注射。2 d后,运用颈椎脱臼方法处死小鼠,每组取10只小鼠,对肺内菌落进行计数;每组取10只小鼠,处理肺脏组织制作成病理切片,进行病理学研究;每组取10只小鼠,检测细胞因子白介素(IL)-6、IL-1β以及肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。结果 12 d后,模型组与干预组中肺内菌落计数较对照组均有所增加(P0.05);与模型组比较,干预组肺内菌落计数均有所改善(P0.05);2HE染色观察到,对照组中肺内组织结构完整,肺泡边缘整齐,肺泡腔内无异常;金黄色葡萄球菌8325-4肺炎模型组中的肺内组织结构模糊,无法识别,大量细菌弥漫在整个肺内,无肺泡结构,部分炎性细胞破裂坏死,细支气管上皮细胞部分坏死,其腔内有大量的炎性细胞,同时血管周围水肿,并有纤维组织渗出;柚皮素干预组小鼠肺内组织中部分肺泡腔融合,肺泡壁毛细血管呈现略有扩张、少量的充血以及炎性细胞浸润。32 d后,模型组与干预组中IL-6、IL-1β以及TNF-α均有所增加(P0.05);与模型组比较,干预组IL-6、IL-1β以及TNF-α均有所改善(P0.05)。结论柚皮素能够明显缓解金黄色葡萄球菌肺炎病情。     

柚皮素对结直肠癌细胞侵袭能力及细胞中MMP-2、MMP-9表达的影响

目的探讨柚皮素对结直肠癌细胞侵袭能力及细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9表达的影响。方法以人结直肠癌细胞SW620为研究对象,分别用0、10、20、40、60、80、120μg/ml的柚皮素作用于SW620细胞,培养48 h后,四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞增殖能力并计算半数抑制浓度。0、50μg/ml的柚皮素作用于SW620细胞48 h后,Transwell小室检测细胞侵袭能力,Western印迹检测细胞中MMP-2、MMP-9、发状分裂相关增强子1(Hes1)、Notch神经同源蛋白1前体(Notch1)表达水平。结果 10、20、40、60、80、120μg/ml的柚皮素作用后的细胞存活率均明显低于0μg/ml柚皮素作用组(P<0.01)。计算半数抑制浓度为(51.76±1.48)μg/ml。50μg/ml柚皮素作用后的侵袭细胞数目及细胞中MMP-2、MMP-9、Hes1、Notch1水平均明显低于0μg/ml柚皮素作用组(P<0.01)。结论柚皮素能够抑制结直肠癌细胞增殖、侵袭能力,作用机制可能与Notch1信号通路有关。     

新生儿听力筛查测试时间对结果的影响

2003年12月～2004年3月，我们对新生儿听力筛查测试时间对结果的影响进行了观察，以指导临床工作。现报告如下。     

柚皮素通过调控平滑肌细胞TIMP-3表达促进动脉粥样硬化斑块稳定

目的]探究柚皮素对动脉粥样硬化斑块胞外基质重构和斑块稳定性的影响。 [方法]分离原代小鼠血管平滑肌细胞,进行不同剂量的柚皮素处理。对高脂诱导的ApoE－/－小鼠进行柚皮素灌胃16周,天狼星红-苏木精染色分析主动脉根部斑块坏死核面积、斑块内胶原含量和纤维帽厚度,Van Gieson染色检测弹力蛋白降解,明胶酶谱法和荧光标记明胶法检测斑块内基质金属蛋白酶(MMP)活性。 [结果]柚皮素(50 μmol/L)促进平滑肌细胞信号转导及转录活化因子6(STAT6)磷酸化和组织型基质金属蛋白酶抑制剂3(TIMP-3)的转录活性,TIMP-3的表达升高3.1倍(P＜0.001)。柚皮素(80 mg/kg)处理后,与对照组相比,主动脉根部斑块坏死核面积降低53%(P＜0.01)、纤维帽厚度提高近50%(P＜0.05),弹力纤维降解程度降低。同时,柚皮素促进斑块内TIMP-3的表达,斑块内MMP活性也相应降低。慢病毒介导的体内抑制TIMP-3表达可降低柚皮素对斑块稳定的保护作用。 [结论]柚皮素通过提高平滑肌细胞内TIMP-3表达,改善细胞外基质成分,促进动脉粥样硬化斑块稳定。     

柚皮素对高糖诱导的H9c2心肌细胞凋亡及Nrf2/ARE信号通路的影响

[目的]探讨柚皮素(NAR)对高糖(HG)诱导的大鼠心肌细胞(H9c2)凋亡及核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路的影响。[方法]将培养的H9c2细胞分为对照组(正常糖量)、HG组(35.5 mmol/L葡萄糖)、HG+NAR低、中、高浓度组(35.5 mmol/L葡萄糖+6.25、12.5、25.0μmol/L NAR)。用噻唑蓝法检测H9c2细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡;二氯二氢荧光素二乙酸酯荧光探针染色法检测细胞内活性氧(ROS)水平;Western blot法检测Nrf2、血红素加氧酶1(HO-1)、Bax、Caspase-3、Bcl-2蛋白表达水平。[结果]经HG处理的H9c2细胞增殖活性、Nrf2、HO-1、Bcl-2蛋白表达水平显著降低,细胞凋亡率、ROS水平、Bax、Caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。经HG与NAR共同处理H9c2细胞后,NAR低、中、高浓度组H9c2细胞增殖活性、Nrf2、HO-1、Bcl-2蛋白表达水平显著升高,细胞凋亡率、ROS水平、Bax、Caspase-3蛋白表达水平显著降低(P...     

标本离心时间对凝血项目检测结果的探讨

目的针对凝血项目检测结果,讨论标本离心时间的影响,为日后的临床检测提供参考与指导。方法选择2011年1月~2015年12月来我院进行健康体检的人员82例为研究对象,针对所有人员进行外周血标本采集处理,应用3000 r/min的频率进行离心处理,将标本有效划分成3份,离心时间分别为5 min、10 min、15 min,观察标本的凝血项目检测结果。结果经过临床统计,凝血项目检测的标本离心时间,5 min、10 min、15 min三组的对比,差异无统计学意义(P0.05)。证明标本离心时间的差异,对凝血项目检测结果的影响不大。结论凝血项目检测,是临床上的常见检测类型,对患者的疾病治疗和身体检查,具有非常重要的意义。标本离心时间的不同,在整体上不会对最终的凝血项目检测造成不良影响,因此在日后的临床检测中,建议将凝血时间控制在15 min以内,加快检测效率。     

间皮素基因沉默对胰腺癌化疗药物作用的影响

目的研究胰腺癌特异性抗原间皮素基因沉默对胰腺癌化疗药物的影响。方法以间皮素siRNA和荧光标记的siRNA分别通过脂质体瞬时转染入胰腺癌PANC-1细胞,流式细胞仪和倒置相差荧光显微镜检测转染效率,Western blot检测间皮素基因沉默的效果。以胰腺癌化疗药物吉西他滨、顺铂、阿霉素和葫芦素E分别处理间皮素基因沉默后的PANC-1细胞,继续培养48 h后,MTT法检测细胞增殖情况。结果流式细胞仪和倒置荧光显微镜检测结果证明细胞转染成功;Western blot检测结果显示间皮素基因沉默后,间皮素蛋白基本无表达;MTT结果显示间皮素基因沉默后细胞增殖减少（P〈0.05）;间皮素基因沉默后,能增强化疗药物的作用。结论间皮素基因沉默对胰腺癌化疗药物的作用具有增强作用。     

老年肺炎对凝血功能的影响

目的观察凝血及纤溶指标在老年肺炎患者中的表达水平、临床意义及与预后关系。方法回顾性收集复旦大学附属华东医院2007年12月-2012年4月收治的肺炎患者,以同时期健康体检者为对照组,查阅病史、分析凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（FIB）、D-二聚体（D—D）水平、血小板计数（PLT）、血小板压积（PCT）、平均血小板体积（MPV）、血小板分布宽度（PDW）。结果共收集168例老年肺炎,男108例,女60例,年龄（60～90）岁,平均年龄（76．9±7．6）岁。以老年健康体检者为对照组68例,其中男52例,女16例,年龄（60～90）岁,平均年龄（75．1±7．0）岁。肺炎组PT、APTT、FIB、D-D、PCT和PDW较对照组升高（P〈0．05）,而MPV较对照组降低（P〈0．05）,差异有统计学意义。肺炎组中死亡组FIB、D—D和PLT较存活组升高（P〈0．05）,差异有统计学意义。肺炎组高D-D组死亡率较低D—D组升高（（P〈0．05）,差异有统计学意义。结论老年肺炎患者凝血系统活性增高,继发性纤溶活性增强,抗凝功能降低,存在高凝状态。观察血浆D—D及FIB水平的变化有助于判断老年肺炎的预后和临床疗效。     

左西孟旦对出凝血的影响

左西孟旦是一种新型正性肌力药,已被广泛用于心力衰竭患者及心血管手术患者。左西孟旦可改善心肌的收缩、舒张功能,扩张血管,还具有抗炎、抗凋亡及器官保护作用。近期有研究发现左西孟旦可能对出凝血功能有影响,本文拟对相关证据进行综述。     

昼夜节律对动脉粥样硬化凝血系统的影响

目的研究凝血系统中具有昼夜节律性的基因,分析其在冠状动脉粥样硬化中的调控作用。方法通过选取人循环血液表达谱的相关数据,利用LSPR分析其中基因表达的昼夜节律性,利用Reactome数据库凝血通路及CirGRDB找出具有昼夜节律性的凝血基因,分析动脉粥样硬化相关基因,研究昼夜节律性凝血因子具体凝血功能及在动脉粥样硬化病变中作用。结果具有昼夜节律性的相关凝血基因功能为血小板止血,血小板激活和聚集,纤维蛋白凝块级联反应形成,纤维蛋白凝块溶解,细胞表面与血管壁的相互作用,巨核细胞发育与血小板生成的相关因子,部分凝血因子与不稳定冠状动脉粥样硬化斑块相关,昼夜节律干扰后相关节律性减弱或消失。结论部分凝血因子具有昼夜节律性,动脉粥样硬化斑块中也高表达,节律紊乱干扰相关凝血因子节律性。     

射频消融术对凝血系统的影响

目的：探讨射频消融术（RFCA）后外周血管栓塞的发生机制及防治对策。方法：将90例室上性心动过速患者分为3组：A组术前不用抗凝药,B组术前使用阿司匹林,C组术前使用钙通道阻滞剂－氨氯地平。在术前、插管完成心内电生理检测后、RFCA后即刻及术后2d,抽静脉血观察血小板α－颗粒膜糖蛋白（Gmp-140)、血栓烷B2（TXB2）、蛋白C、蛋白S的变化。结果：A组病人,与术前比较,其他3个时段血浆Gmp-140、TXB2含量明显增加,蛋白C及蛋白S血浆含量无明显变化,且发现左右心导管操作对Gmp-140、TXB2变化无明显影响;B、C组病人与A组相比,相同时段的血浆Gmp-140、TXB2含量减小。结论：RFCA可引起血小板的激活,抗凝系统无明显变化,可能致血栓形成,服用阿司匹林及氨氯地平可阻止血小板的激活,有阻止血栓形成的作用。