血管生成素基因表达对前列腺移植瘤生长及PI3K/AKT信号通路的影响

正血管生成素(angiogenin,Ang)家族是近年来研究发现与血管新生密切相关的新蛋白,Ang是唯一的既含有受体激动剂又含有受体抑制剂的血管生长因子家族,它们与其他血管生长因子相互作用,共同调节血管生成的过程~([1])。磷脂酰肌醇-3-羟激酶(phosphatidyl Inositol 3-kinase,PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(AKT)/雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)分子信号转道通路作为     

布比卡因通过PI3K/AKT/mTOR通路对膀胱癌细胞凋亡和铁死亡的影响

目的 探讨布比卡因对膀胱癌细胞凋亡和铁死亡的影响及其机制。方法 常规培养人膀胱癌细胞(T24和5637)和人尿路上皮细胞(SV-HUC-1),MTT实验检测布比卡因细胞毒性,筛选合适处理浓度,将T24和5637细胞分为对照组、0.25、0.5和1 mmol/L布比卡因组、布比卡因+铁死亡激动剂(Erastin)组、布比卡因+铁死亡抑制剂(Fer-1)组细胞和布比卡因+PI3K激动剂(740Y-P)组。采用流式细胞术检测细胞凋亡率,相应试剂盒检测Fe²⁺、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和活性氧(ROS)水平,Western blot检测Bcl-2、Bax、细胞色素C、xCT、GPX4和磷脂酰肌醇3/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)相关蛋白表达。结果 0.25、0.5、1、2、4、8、16 mmol/L布比卡因均可明显抑制T24和5637细胞的活性(P<0.001),选择仅对癌细胞有毒性的0.25、0.5和1 mmol/L布比卡因进行后续研究。与对照组比较,随着布比卡因浓度增加,T24和5637细胞凋亡率、Fe^2+...     

PI3K/AKT信号传导通路与肠道炎症

磷酸肌醇-3激酶(phosphatidylinositol3kinase,PI3K)是生长因子超家族信号传导过程中的重要分子,可被多种细胞因子和理化因素激活,调节多种细胞功能,如凋亡、增殖、代谢、生长转化、膜转运、分泌和趋化等,并在炎症、肿瘤、代谢和心血管疾病的发病机制中起重要作用[1]。炎症性肠     

PI3K/AKT信号传导通路与鼻咽癌侵袭转移关系的探讨

目的观察PI3K/AKT信号传导通路与鼻咽癌侵袭转移之间的对应关系。方法选择我院及遵义医学院所收集的存档石蜡标本共计50例作为分析对象,25例标本为无淋巴道转移的鼻咽癌组织,25例标本为有淋巴道转移的鼻咽癌组织,分别设置为对照组以及观察组。所有标本均进行HE染色以及免疫组化染色处理,对处理结果进行观察分析。结果对照组患者P13K与E-cad表达呈负相关关系,AKT与E-cad表达呈负相关关系,P0.05,具有统计学意义;观察组患者P13K与E-cad表达呈负相关关系,P0.05,具有统计学意义。AKT与E-cad表达无明显相关性关系,P0.05,无统计学意义。结论 PI3K/AKT信号传导通路的激活与鼻咽癌侵袭转移之间存在相关关系,值得临床重视。     

基于PI3K/AKT信号通路探讨汉黄芩素对宫颈癌HeLa细胞移植瘤抑制作用影响

目的 探究汉黄芩素对宫颈癌HeLa细胞移植瘤的抑制作用及机制。方法 随机选取2018年1月—2020年12月常熟市中医院的50只Balb/c小鼠进行宫颈癌荷瘤模型造模,随机分为5组：模型对照组、阳性对照组、小剂量组、中剂量组及大剂量组。模型对照组不做特殊处理,阳性对照组腹腔注射25 mg/kg环磷酰胺,小剂量组、中剂量组、大剂量组小鼠灌胃25 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg汉黄芩素。处死小鼠取出瘤体,比较各组肿瘤质量、体积,计算肿瘤生长抑制率;取出胸腺、脾脏并计算相关脏体指数。将小鼠肿瘤分为两份,一份采用伊红-美兰(HE)染色进行组织学观察;另一份采用免疫印迹法检测各组小鼠PI3K、AKT、p-AKT表达情况。结果 阳性对照组的肿瘤生长抑制率为69.63%,大剂量组、中剂量组、小剂量组的肿瘤生长抑制率分别为77.78%、54.81%和31.85%均高于模型对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。大剂量组肿瘤生长抑制率为77.78%高于阳性对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。免疫印迹法结果显示,与模型对照组比较,大剂量组、中剂量组与小剂量组PI3K、...     

PI3K/AKT信号通路与鼻咽癌的预后关系

目的对PI3K/AKT信号通路与鼻咽癌的预后关系进行研究分析。方法选取2011年1月～11月在院治疗的48例鼻咽癌患者,另选取15例鼻咽黏膜慢性炎症患者作为对照组,共63例患者作为研究对象。48例鼻咽癌患者中已发生转移19例,未发现浸润或转移性29例。将所有患者的活检标本进行HE染色和免疫组化检测,对PI3K、AKT、pAKT的阳性表达进行数据统计和分析。结果鼻咽黏膜慢性炎与鼻咽癌组织中PI3K、AKT、pAKT阳性表达有显著差异（P〈0.05）,具有统计学意义;转移组与非转移组中PI3K、pAKT阳性表达有显著差异（P〈0.01）,具有显著统计学意义。结论鼻咽癌的发生、发展与PI3K/AKT信号传导通路有密切的关系,其中PI3K、AKT、pAKT对鼻咽癌的转移和预后有关。     

HL-60细胞Nucleostemin表达下调对PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白的影响

目的:探讨HL-60白血病细胞中核干细胞因子Nucleostemin(NS)表达下调对其非依赖P53通路的候选途径PI3K/AKT/mTOR中相关蛋白表达是否有影响。方法:采用重组慢病毒表达载体NS-RNAi-GV248转染至P53缺失型HL-60细胞中干扰NS的表达。用Western blot技术评价转染后HL-60细胞NS蛋白的表达水平并检测干扰前后PI3K/AKT/mTOR信号通路中相关蛋白水平的表达变化。结果:重组慢病毒载体NS-RNAi-GV248成功感染了HL-60细胞,在荧光显微镜下可见到GFP荧光表达较强(80%)。Western blot结果显示,NS蛋白表达明显下调,干扰表达有效;干扰HL-60细胞中NS的表达后AKT、p-AKT、p70s6k、p-p70s6k蛋白变化不明显(t_1=2.31,P=0.074;t_2=3.62,P=0.069;t_3=1.60,P=0.251;t_4=2.72,P=0.113),而mTOR复合物中的GβL蛋白表达明显下调(t=15.01,P=0.002)。结论:HL-60细胞中NS蛋白可影响mTOR复合物中GβL蛋白的表达,PI3K/AKT/mTOR通路可能为NS非依赖P53作用途径之一。     

抑制自噬增加PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制剂引起的胃癌细胞死亡

目的为了研究3-MA是否可能增强胃癌细胞对PI3K/mTOR抑制剂NVP-BEZ235的敏感性。方法以胃癌SNU16细胞系为研究对象,SNU16细胞用不同浓度的NVP-BEZ235(10nM、20nM和50nM)处理24h。实验分为四组:Control组,20nM NVP-BEZ235组,5mM 3-MA组,20nM NVP-BEZ235联合5mM 3-MA组。MTT法用来检测不同组内细胞的生存率,Western blotting用来检测Cleaved Caspase-3和Cytochrome C的表达水平。结果MTT结果表明NVP-BEZ235能抑制SNU16细胞的增殖,3-MA增强了NVP-BEZ235对SNU16细胞的增殖抑制作用。Western blotting结果表明NVP-BEZ235增加了Cleaved Caspase-3和Cytochrome C的表达,而NVP-BEZ235联合3-MA会进一步诱导Cleaved Caspase-3和Cytochrome C蛋白的表达。结论 3-MA通过抑制自噬增加了SNU16细胞对NVP-BEZ235的敏感性。     

PI3K/AKt/mTOR信号通路与肿瘤关系的研究进展

近年来,随着人们对肿瘤信号通路的不断研究,其中尤以PI3K/AKt/m TOR信号通路已逐渐成为研究热点,胞內磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)作为该信号转导通路中重要的介导分子,发挥着不可或缺的作用。因此,本文就PI3K/AKt/m TOR信号通路的激活及其主要效应分子的作用机制,与肿瘤及血管瘤之关系的研究进展作一介绍。     

槲皮素通过PI3K/AKT/mTOR通路减轻脓毒症小鼠心肌损伤

目的基于磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路探究槲皮素减轻脓毒症小鼠心肌损伤的分子机制,为槲皮素治疗脓毒症提供理论依据。方法采用盲肠结扎穿孔法构建脓毒症小鼠模型,将造模成功的小鼠随机分为模型组、槲皮素组(200 mg/kg)、抑制剂组(PI3K/mTOR抑制剂NVP-BEZ235 60 mg/kg)和槲皮素+抑制剂组(槲皮素200 mg/kg+PI3K/mTOR抑制剂NVP-BEZ235 60 mg/kg),每组15只,另取15只小鼠作为假手术组。假手术组和模型组小鼠灌胃等体积生理盐水,其余各组灌胃相对应药物,给药体积10 m L/kg。给药24 h后,超声检测平均动脉压(MAP)、左心室收缩压(LVSP)、左心室等容舒张期压力下降最大速率(-dp/dtmax)和左心室等容舒张期压力上升最大速率(+dp/dtmax);全自动生化分析仪检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)和心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察心肌组织病理学变化;酶联免疫吸附(ELISA)法检测心肌组织白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测心肌组织PI3K、AKT和mTOR蛋白磷酸化水平。结果心肌组织病理损伤:模型组小鼠心肌组织出现结构紊乱、心肌细胞变性、心肌纤维断裂、心肌横纹模糊、细胞间质水肿等病理损伤;槲皮素组较模型组减轻,抑制剂组较模型组加重;槲皮素+抑制剂组较槲皮素组加重。MAP、LVSP、-dp/dtmax、+dp/dtmax、SOD含量及PI3K、AKT、mTOR蛋白磷酸化水平:模型组较假手术组降低;槲皮素组较模型组升高,抑制剂组较模型组降低;槲皮素+抑制剂组较槲皮素组降低,较抑制剂组升高,差异均有统计学意义(P <0.05)。CK-MB、cTnI水平及TNF-α、IL-6、MDA含量:模型组较假手术组升高;槲皮素组较模型组降低,抑制剂组较模型组升高;槲皮素+抑制剂组较槲皮素组升高,较抑制剂组降低,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论槲皮素可能通过上调PI3K/AKT/mTOR通路降低脓毒症小鼠心肌组织炎症和氧化应激反应,从而减轻心肌损伤。     

EGFR/PI3K/AKT信号通路在肺癌中的研究进展

正肺癌是临床最常见的恶性肿瘤之一,为我国城市肿瘤相关死亡的主要病因,近年来肺癌的发病率和病死率增长迅速,严重危害人类健康和生命。在我国,每年大约有30万人被诊断患有肺癌,超过25万人因该病死亡~([1])。肺癌从组织学上分为小细胞型肺癌和非小细胞型肺癌(NSCLC),其中NSCLC占     

PI3K／AKT／mTOR信号通路在造血干细胞中作用的研究进展

PI3K／AKT／mTOR信号通路调节细胞生长、增殖和存活等生命过程,在多种细胞生命过程中起着关键的作用,在造血干细胞中同样也扮演着重要的角色。过度激活PI3K／AKT／mTOR信号通路会造成造血干细胞的耗竭,而抑制PI3K／AKT／mTOR信号通路,则B细胞的分化会受到显著的抑制。本文系统介绍PI3K／AKT／mTOR信号通路中关键节点的蛋白,包括PI3K,AKT,mTOR,FoxO和GSK-3等在造血干细胞中作用的最新研究进展。     

温针灸对膝骨关节炎大鼠软骨细胞凋亡及MiR-27a介导的PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响

目的 观察温针灸对早期膝骨关节炎（KOA）模型大鼠软骨细胞凋亡及miR-27a介导的PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响。 方法 采用随机数字表法将50只SD大鼠分为对照组、模型组、温针灸组、抑制剂组及抑制剂+温针灸组(简称联合组),每组10只大鼠。于造模前3 d对抑制剂组及联合组大鼠给予局部miR-27a抑制剂药物干预;除对照组以外,其余各组大鼠均通过局部注射木瓜蛋白酶方法制成早期KOA大鼠模型。待造模完成后,联合组及温针灸组大鼠均给予内、外侧膝眼穴温针灸治疗,每次治疗30 min,共治疗14 d。模型组及抑制剂组大鼠则同期在固定器上制动30 min。于干预2周后采用苏木精-伊红(HE)染色观察各组大鼠软骨组织病理学改变,采用TUNEL法检测软骨细胞凋亡情况,采用ELISA法检测软骨组织白介素（IL）-1β和IL-6水平;采用WB技术检测软骨组织p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、PI3K、AKT、mTOR、LC3-Ⅱ及Beclin1蛋白表达,采用qRT-PCR技术检测软骨组织中miR-27a含量。 结果 干预结束后发现温针灸组软骨细胞形态较模型组明显改善,抑制剂组及联合组软骨细胞形态较温针灸组进一步改善;温针灸组软骨细胞凋亡率明显低于模型组（P＜0.05）;与温针灸组比较,抑制剂组及联合组软骨细胞凋亡率均显著降低（P＜0.05）,抑制剂组与联合组软骨细胞凋亡率组间差异无统计学意义（P＞0.05）;温针灸组、抑制剂组和联合组IL-1β、IL-6、LC3-Ⅱ、Beclin1、miR-27a蛋白表达及mRNA水平均较模型组明显降低（P＜0.05）,抑制剂组及联合组上述指标均较温针灸组显著降低（P＜0.05）;温针灸组、抑制剂组和联合组p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT及p-mTOR/mTOR水平均较模型组明显升高（P＜0.05）,抑制剂组及联合组上述指标水平亦显著高于温针灸组（P＜0.05）,抑制剂组及联合组上述蛋白表达及mRNA水平组间差异均无统计学意义（P＞0.05）。 结论 温针灸可能通过下调miR-27a表达,促进PI3K/AKT/mTOR信号通路激活,能抑制早期KOA模型大鼠软骨细胞过度自噬及凋亡,有助于减轻关节炎症反应及损伤,延缓关节退变进程。     

过表达乙酰肝素酶对胆囊癌细胞增殖及PI3K/AKT信号通路的影响

目的 探讨过表达乙酰肝素酶(HPSE)对胆囊癌细胞系GBC-SD细胞增殖及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(PI3K/AKT)信号通路的影响。方法 构建HPSE真核表达载体,然后获得转基因过表达HPSE的胆囊癌细胞株GBD-SD。通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot分析GBC-SD和GBD-SD中HPSE mRNA和蛋白表达。通过集落形成实验、MTT来评估各组细胞的增殖情况。采用Western blot分析PI3K/AKT信号通路相关蛋白(p-PI3K、PI3K、p-AKT和AKT)的水平。结果 成功转染后的GBD-SD中HPSE mRNA水平和蛋白水平升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与正常表达HPSE的GBC-SD相比,过表达HPSE的GBD-SD细胞光密度(OD)值和集落形成能力提高,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测结果显示,与GBC-SD细胞相比,过表达HPSE的GBD-SD组细胞p-AKT、p-PI3K蛋白表达水平、p-AKT/AKT值和p-PI3K/PI3K值增加,差异有统计学意义...     

异甘草酸镁诱导乳腺癌细胞凋亡及对PI3K/AKT信号通路的影响

目的 探究异甘草酸镁通过磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)对乳腺癌细胞的影响。方法 在美国典型培养物保藏中心(ATCC)细胞库购买乳腺癌细胞株,随机分为三组：高浓度组采用500μmol/L异甘草酸镁溶液混合培养;低浓度组采用50μmol/L异甘草酸镁溶液混合培养;对照组不做其他处理,正常培养。分析三组乳腺癌细胞凋亡、增殖情况,以及PI3K、AKT的蛋白含量和mRNA的表达含量的差异性。结果 高浓度组细胞凋亡率明显高于低浓度组和对照组,低浓度组细胞凋亡率高于对照组(χ²分别=3.42、4.98、6.78,P均<0.05);高浓度组细胞增殖OD值低于低浓度组和对照组,低浓度组细胞增殖OD值低于对照组(t分别=3.12、3.80、6.45,P均<0.05);高浓度组乳腺癌细胞中PI3K、AKT蛋白含量低于低浓度组和对照组,低浓度组蛋白含量明显低于对照组(t分别=3.16、4.12、5.18、3.12、3.65、4.12,P均<0.05);高浓度组PI3K、AKT mRNA含量明显低于低浓度组和对照组,低浓度组PI3K、AKT mRNA表...     

人胚胎干细胞Pten基因表达及PI3K/Akt/mTOR信号通路下游蛋白的磷酸化

背景:各种磷酸化蛋白质表达水平对人胚胎干细胞维持未分化状态或定向分化的影响逐渐成为人胚胎干细胞的研究热点,研究发现磷酸化蛋白质表达水平可能决定着人胚胎干细胞的命运。目的:对PI3K/Akt途径下游的关键蛋白磷酸化水平进行检测,寻找PI3K/Akt途径中能够维持人胚胎干细胞未分化状态的下游蛋白。方法:用胎鼠成纤维细胞作为饲养层,二维培养的方法培养人胚胎干细胞,胶原酶消化后待测;以饲养层细胞、K562细胞株为对照。观察人胚胎干细胞生长状态;RT-PCR检测Pten基因表达;WesternBlot检测p-PTEN、p-mTOR、p-P70S6Kp-4E-BP14种蛋白的表达。结果与结论:人胚胎干细胞在未分化状态时PtenmRNA表达高于肿瘤细胞K562,而且Pten抑制的mTOR信号通路中关键蛋白表达均明显低于K562,尤其以p-4E-BP1表达最低。提示PI3K/Akt/mTOR信号通路下游磷酸化蛋白在人胚胎干细胞活性较低,如果抑制负调节蛋白PTEN或直接激活该通路正调节关键蛋白,可能会加快人胚胎干细胞增殖、减少凋亡,进而为定向分化、再生医学提供更多的细胞来源。     

PI3K/Akt/mTOR信号转导通路与淋巴瘤形成

大量研究显示PI3K/Akt/mTOR信号通路的异常激活在淋巴瘤的形成及发展中起着重要作用,该信号通路上主要分子的抑制剂为淋巴瘤的靶向治疗提供了新方向.本综述介绍并总结了PI3K/Akt/mTOR信号传导通路概况、该通路在各淋巴瘤亚型上的最新研究发现以及mTOR抑制剂在淋巴瘤靶向治疗方面的应用前景.     

FOXN2通过PI3K/AKT信号通路对肾癌细胞增殖、凋亡的影响

目的 研究FOXN2通过PI3K/AKT信号通路对肾癌增殖、凋亡的影响.方法 实验分FOXN2过表达组、空载体对照组、对照组三组;检测FOXN2在人正常肾上皮细胞HK-2和肾癌细胞786-O中的表达;检测FOXN2过表达组、空载体对照组、对照组细胞的增殖情况和凋亡情况;检测FOXN2过表达组、空载体对照组、对照组细胞P...     

PI3K/AKT信号通路与缺血性脑损伤引起的细胞凋亡研究进展

PI3K/AKT信号通路是细胞内调控信号转导的一个重要途径,其组成较为复杂,参与细胞增殖、凋亡、代谢等活动。缺血性脑损伤是一个复杂的病理过程,而细胞凋亡在此过程中发挥重要作用。PI3K/AKT信号通路是细胞存活的关键通路,在缺血性脑损伤、神经退行性疾病及肿瘤等诸多疾病中起调控作用。因此,研究该通路并探讨其在缺血性脑损伤中的作用对进一步探寻此类疾病的治疗具有重要意义。