β-连环素及Notch1蛋白质在鼻内翻性乳头状瘤中的表达及意义

目的通过对鼻内翻性乳头状瘤（nasal inverted papilloma,NIP）组织中β-连环素（β-catenin）及Notch1表达水平的测定,探讨NIP中Wnt及Notch信号传导系统的调控作用。方法63例鼻内翻性乳头状瘤、30例鼻息肉、38例鼻腔鼻窦鳞状细胞癌（简称鳞癌）及11例正常鼻黏膜组织均采用免疫组织化学法检测β-catenin及Notch1蛋白质的表达水平。结果鼻息肉、鼻内翻性乳头状瘤和鼻腔鼻窦鳞癌中的β-catenin异常表达率分别为3.33%、58.73%和78.95%;正常鼻黏膜、鼻息肉、鼻内翻性乳头状瘤和鼻腔鼻窦鳞癌中Notch1阳性表达率分别为27.27%、36.67%、73.02%和92.11%,呈阶梯状升高且差异有统计学意义（P〈0.05）;β-catenin异位表达与鼻内翻性乳头状瘤不典型增生程度有一定的相关性（P〈0.05）,复发组中Notch1的水平明显高于初发组（P〈0.05）。结论Wnt/β-catenin和Notch信号途径的异常激活对NIP中起不同作用,β-catenin对NIP的发生发展及最终恶变成鳞癌可能起到了重要作用,术后Notch1水平升高可提示NIP复发。     

鼻内翻性乳头状瘤组织中新生血管化与细胞增殖活性的相关性研究

目的 :检测鼻内翻性乳头状瘤 (NIP)组织中CD34、增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达 ,探讨新生血管生成与细胞增殖活性在NIP中的作用及相互关系。方法 :应用免疫组织化学SP方法检测 30例NIP、16例鼻息肉(NP)及 11例鼻腔鳞状细胞癌 (NSCC)组织中CD34、PCNA的表达 ,并在此基础上检测其微血管密度 (MVD)和PCNA阳性指数 (PCNA LI)。结果 :CD34在NP、NIP及NSCC组织中的表达分别为 (32 .4 1± 5 .6 8)、(5 3.2 2± 9.31)和 (80 .37± 10 .2 1)个 /× 2 0 0视野 ,两两比较 ,差异均有统计学意义 (均P <0 .0 1) ;PCNA LI分别为 (2 8.6 7± 9.2 9)、(35 .35±7.0 2 )和 (6 3.18± 12 .17) % ,NP与NIP比较 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;NP和NIP分别与NSCC比较 ,差异亦有统计学意义 (P <0 .0 1)。PCNA LI与MVD有显著正相关关系 (r =0 .5 6 ,P <0 .0 1)。结论 :MVD、PCNA LI与细胞分化程度有很好的一致性 ,可分别作为反映NIP侵袭发展、恶变潜能的良好指标。     

p27蛋白和增殖细胞核抗原在上颌窦鳞癌中的表达

目的探讨p27蛋白和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在上颌窦鳞癌中的表达及其与上颌窦鳞癌发生发展的关系.方法应用免疫组化SABC法检测35例上颌窦鳞癌和15例鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤的p27蛋白和PCNA表达.结果p27蛋白及PCNA染色阳性细胞均为细胞核着色.其中上颌窦鳞癌的p27蛋白阳性率为25.71%,鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤的阳性率为73.3%.二者差异有高度显著性(P＜0.01).但鳞癌各组间经统计学检验差异无显著性.上颌窦鳞癌PCNA指数为86.94±9.83,鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤的PCNA指数为46.14±2.66,二者差异有高度显著性(P＜0.001).随上颌窦鳞癌分化程度的降低,PCNA指数增加,不同分化间PCNA指数差异有显著性(P＜0.05).结论检测上颌窦鳞癌组织中p27蛋白和PCNA的表达能够快速、准确地反映肿瘤细胞的增殖状态和评价预后,对判定上颌窦鳞癌的恶性程度及指导治疗有一定的意义.     

鼻内翻性乳头状瘤与PTEN及P16蛋白表达的关系

目的：探讨PTEN和P16蛋白在鼻内翻性乳头状瘤（NIP）中的表达及与肿瘤发生、发展、预后的关系。方法：采用免疫组织化学SP法和计算机图像分析系统,检测27例NIP和10例正常蝶窦黏膜中PTEN、P16蛋白的表达,并对两者在不同NIP预后分组中的表达进行对比分析。结果：PTEN和P16蛋白在NIP组织中的表达与正常蝶窦黏膜相比,均差异有统计学意义（均P〈0．05）。NIP无复发组PTEN蛋白的表达下降,与复发组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;P16蛋白的表达下调在不同预后效果的NIP分组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：PTEN蛋白减少或缺失是NIP发生、发展及不良预后的重要指标,P16蛋白亦与NIP的发生、发展相关,两者具有重要的临床意义。     

糖皮质激素受体α和β在慢性鼻-鼻窦炎鼻息肉中的表达

目的 探讨糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)α和β在鼻-鼻窦炎鼻息肉发生发展中的表达情况.方法 采用免疫组化SP法和计算机图像分析系统,观察17例复发性鼻息肉和术后随访无鼻息肉复发的18例Ⅱ型、12例Ⅰ型慢性鼻-鼻窦炎患者鼻息肉或鼻窦黏膜组织中GRα和GR β的表达情况.结果 GRα阳性细胞数(-x±s)在复发组(20.2±6.9)、鼻息肉组(20.7±7.2)、鼻窦炎组(16.9±7.2)和对照组(16.1±5.3)中差异无统计学意义(P值均＞0.05).GR β在复发组(34.2±7.4)和鼻息肉组(31.5±5.9)中高表达,与鼻窦炎组(19.8±7.8)和对照组(10.1±6.7)比较差异有统计学意义(P值均＜O.05);复发组GR β阳性细胞数较鼻息肉组有增高趋势,但差异无统计学意义(P=0.558).GR β/GR α比值(-x±s)复发组(1.80±0.47)和鼻息肉组(1.65±0.49)与对照组(0.77±0.66)间差异有统计学意义(P值均＜0.05),与鼻窦炎组(1.23±0.27)差异无统计学意义(P值均＞0.05).结论 GR β在鼻息肉组织中高表达,可能是促进鼻息肉发生发展的一个重要因素.     

增殖细胞核抗原与喉癌生物学行为相关性的研究

目的探讨增殖细胞核抗原(PCNA)表达与喉癌生物学行为的相关性.方法采用流式细胞免疫法检测40例喉鳞状细胞癌患者PCNA的表达,同时检测8例癌旁组织作为对照.结果高中分化鳞癌与低分化鳞癌差异有高度显著性(P＜0.01),淋巴结转移阳性组与阴性组差异有显著性(P＜0.05),早期组(I,Ⅱ)与晚期组(Ⅲ,Ⅳ)差异无显著性(P＞0/05),癌组织与癌旁组织间PCNA指数差异有高度显著性(P＜0.001).结论PCNA表达与喉癌的病理分级、淋巴结转移呈显著正相关,与临床分期无关,PCNA高表达是喉癌的重要生物学特征.     

细胞凋亡相关蛋白Fas、FasL和Bcl-2表达活性与鼻息肉上皮细胞增殖和凋亡活性平衡机制的相关性

目的探讨细胞凋亡相关蛋白Fas、FasL和Bcl-2表达活性与鼻息肉上皮细胞增殖和凋亡活性平衡机制的相关性。方法鼻息肉组织标本29例,下鼻甲黏膜标本11例,免疫组化法检测上皮细胞Fas、FasL、Bcl-2和PCNA蛋白的表达活性,TUNEL过氧化酶原位标记法检测上皮原位细胞凋亡活性。结果在鼻息肉组,PCNA阳性细胞指数（PIPCNA）大于自身的细胞凋亡指数（AI,P〈0.01）,而且PIPCNA和AI绝对值均大于下鼻甲组（P〈0.01）,但PIPCNA/AI比值（1.95±0.66）却小于下鼻甲组（P〈0.01）;FasL和Bcl-2阳性细胞指数（PIFasL、PIBcl-2）均大于自身的Fas阳性细胞指数（PIFas,P〈0.05）,但该三指数均大于下鼻甲组（P〈0.01）;PIBcl-2/PIFas比值大于下鼻甲组（P〈0.01）,但组间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论鼻息肉上皮细胞的增殖活性和凋亡活性均增强,但前者仍然大于后者;Bcl-2介导的细胞凋亡抑制机制和FasL介导的细胞免疫逃逸机制可能对鼻息肉上皮细胞凋亡活性产生部分抑制作用。     

细胞凋亡相关蛋白Fas、FasL和Bcl-2表达活性与鼻息肉上皮细胞增殖和凋亡活性平衡机制的相关性行

目的 探讨细胞凋亡相关蛋白Fas、FasL和Bcl-2表达活性与鼻息肉上皮细胞增殖和凋亡活性平衡机制的相关性.方法 鼻息肉组织标本29例,下鼻甲黏膜标本11例,免疫组化法检测上皮细胞Fas、FasL、Bcl-2和PCNA蛋白的表达活性,TUNEL过氧化酶原位标记法检测上皮原位细胞凋亡括性.结果 在鼻息肉组,PCNA阳性细胞指数(PIPCNA)大于自身的细胞凋亡指数(AI,P<0.01),而且PIPCNA和AI绝对值均大于下鼻甲组(P<0.01),但PIPCNA/AI比值(1.95±0.66)却小于下鼻甲组(P<0.01);FasL和Bcl-2阳性细胞指数(PIFasLL、PIBcl-2均大干自身的Fas阳性细胞指数(PIFasP<0.05),但该三指数均大干下鼻甲组(P<0.01);PIBcl-2/PIFas比值大于下鼻甲组(P<0.01),但组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 鼻息肉上皮细胞的增殖活性和凋亡活性均增强,但前者仍然大干后者;Bcl-2介导的细胞凋亡抑制机制和FasL介导的细胞免疫逃逸机制可能对鼻息肉上皮细胞凋亡活性产生部分抑制作用.     

趋化因子CCL-19在慢性鼻-鼻窦炎患者鼻黏膜中的表达及意义

目的观察趋化因子CCL-19在慢性鼻-鼻窦炎患者鼻黏膜中的表达及其病理意义。方法不伴鼻息肉的慢性鼻-鼻窦炎患者36例,伴有鼻息肉的慢性鼻-鼻窦炎患者5例,健康对照者12例,分别取鼻腔黏膜或息肉组织标本,Western blot法检测CCL-19蛋白表达活性,比较其在病变鼻黏膜、息肉组织和正常鼻黏膜中的表达差异,探讨其病理意义。结果鼻息肉组织和不伴鼻息肉的慢性鼻-鼻窦炎鼻黏膜组织CCL-19蛋白表达水平均较正常鼻黏膜明显上调,差异有统计学意义(P0.05),水肿型病变黏膜组织尤为显著(P0.05);嗜酸性粒细胞性慢性鼻窦炎CCL-19蛋白表达水平又明显高于非嗜酸性粒细胞性者(P0.05)。结论水肿型慢性鼻窦炎和嗜酸性粒细胞性慢性鼻窦炎病变黏膜CCL-19表达明显上调,提示CCL-19表达活性可能与慢性鼻-鼻窦炎病变组织的嗜酸性粒细胞浸润和组织水肿密切相关。     

p27、p53和Bcl－2蛋白在喉癌和切缘组织中的表达

目的研究p27、p53和Bcl-2在喉鳞状细胞癌和切缘中的表达及其临床意义。方法用Evision免疫组化两步法检测39例喉鳞状细胞癌和相对应的14例喉癌切缘组织中p27、p53和Bcl-2蛋白的表达情况。结果①39例喉癌组织中p27、p53和Bcl-2的阳性表达率分别为48.7%(19/39)、51.3%(20/39)和7.7%(3/39),且p27、p53和Bcl-2与喉鳞状细胞癌患者的年龄、病理分级、临床分期和预后无明显的相关性;②14例喉癌切缘组织中p27、p53和Bcl-2的阳性表达率分别为57.1%(8/14)、14.3%(2/14)和28.6%(4/14),且切缘中p27、p53和Bcl-2蛋白的表达与喉鳞状细胞癌患者的年龄、病理分级、临床分期无明显的相关性。切缘中p27蛋白的表达与预后相关,而切缘中p53和Bcl-2蛋白的表达与预后无关;③p53蛋白在14例喉癌和喉癌切缘组织中的表达有统计学意义(P=0.001)。Bcl-2蛋白在14例喉癌和切缘组织中的表达有统计学意义(P=0.031);④在喉鳞状细胞癌中p27、p53蛋白的表达无相关性。结论①p27、p53和Bcl-2与喉癌患者的年龄、淋巴结转移、分期等无明显的相关性;②p27在切缘中的表达与预后有一定相关性;③p53、Bcl-2蛋白在喉鳞状细胞癌组织和喉癌切缘中的表达有统计学意义;④在部分喉癌切缘中见p53蛋白表达可能与喉癌术后复发有一定的相关性。Bcl-2可能在分子水平提示正常细胞向喉癌细胞的恶性转化。     

人乳头状瘤病毒感染与鼻内翻性乳头状瘤的发病及恶变关系的研究

目的:探讨人乳头状瘤病毒(HPV)感染与鼻内翻性乳头状瘤(NIP)的发病及恶变的关系。方法:将57例NIP患者分为不伴恶变组(45例)和伴恶变组(12例),应用PCR技术,检测其HPV6、11、16、18等4个型别的HPV-DNA,同时以30例鼻息肉患者为对照组。结果:57例NIP患者HPV-DNA总阳性率为64.9%(37/57)。不伴恶变组HPV-DNA阳性率为60%(27/45),均为单一的低危型HPV11型感染;伴恶变组HPV-DNA阳性率为83.3%(10/12),以检出HPV16、18型DNA为主,其中5例为双重感染(4例为HPV16、18型,1例为HPV11、16型),4例为单一型HPV16型感染,1例为单一型HPV11型感染。而30例鼻息肉患者均未检出HPV-DNA。结论:HPV在NIP的发病中有重要作用,而高危型HPV16、18型与NIP恶变可能密切相关。     

Expression of CD68 CD45RO CD20 and proliferating cell nuclear antigen in nasal polyps]

OBJECTIVE: To study the cellular expression of CD45RO, CD20, CD68 and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) in nasal polyps. METHODS: Nasal polyp tissues from 50 patients were evaluated for cellular expression of CD45RO, CD20, CD68 and PCNA using immunohistochemistry SP by counting the average number in 5 chosen high-power fields, Histopathological observations were combined with HE. Analyses were performed on SPSS10.0. RESULTS: CD68+ cells were expressed more in nasal polyps dominated by eosinophils than by neutrophils(P < 0.05). There was no difference between CD45RO and CD20, but both of them had negative correlation(P = 0.05). Significant correlation was found between CD68+ cells and eosinophils or PCNA positive cells on epithelium. PCNA positive cells on epithelium had significant correlation on fibroblast (P < 0.05). CONCLUSION: Inflammatory cell infiltration (eosinophilia CD45RO, CD20, CD68) and cell proliferating in epithelium cells, glandular cell and fibroblast are strongly correlated with formation of nasal polyps. The nasal polyps are not only characteristic of eosinophilia but also by lymphocytes dominated by CD45RO and CD68 positive cells. CD68 may be stem cell of nasal polyp.     

鼻腔及鼻窦内翻性乳头状瘤与人乳头状瘤病毒感染及病毒亚型的关系

目的 采用多聚酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)检测鼻腔及鼻窦内翻性乳头状瘤(nasal inverted papilloma，NIP)中人乳头状瘤病毒(human papilloma virus，HPV)DNA及其亚型，旨在探讨HPV在NIP发病中的作用及其与预后的关系。方法将28例鼻腔及鼻窦NIP分为无复发组、复发组、癌变组，用聚合酶链反应检测其HPV通用型、6、11、16及18型的感染情况，同时以10例慢性炎症鼻黏膜或炎症性鼻息肉病例为对照。结果28例NIP患者HPV-DNA总阳性率为75％(21例)。无复发组病例HPV-DNA阳性率为42％(5／12)，均为单一的低危型HPV感染(4例为HPV6型，1例为HPV11型)；复发组的13例和癌变组的3例中，均可检出HPV-DNA。复发者以检出HPV6、HPV11型DNA为主，4例具有双重感染。癌变者以检出HPV16、HPV18型DNA为主，其中2例为双重感染。结论NIP的发生与HPV感染密切相关。应用PCR检测HPV及各亚型感染情况有助于预测肿瘤的临床行为及预后，指导临床对高危患者进行重点监测。     

Proliferative activity and cytometric characteristics in polyps of the nasal cavity and paranasal sinuses

Although several investigations have revealed the influence of cytokines, allergy, and environmental factors in polyp development, the etiology of nasal polyps is still unknown. To estimate the biology of this common disease the operative specimens of 50 patients who underwent surgery for polyps of the nasal cavity and the paranasal sinuses were examined; of these, 10 patients had recurrent disease and 23 patients had an allergy. The investigations included routine histology and quantitative DNA measurements, along with immunohistochemical identification of proliferation markers (i.e., MIB-1; proliferating cell nuclear antigen, PCNA). Histologically, most polyps revealed an infiltration with lymphocytes, eosinophilic granulocytes, and plasma cells. Twenty-five percent had a squamous metaplasia of the respiratory epithelium. Quantitative DNA analysis demonstrated diploid stemlines and lack of aneuploid cells with a DNA content exceeding 5c in most cases. Immunohistochemical detection of proliferation markers showed low proliferation rates in all cases. In 27 polyps no MIB-1 expression was detected, and in 7 polyps no PCNA expression was detected. The polyps of the 23 patients with proven allergic diathesis did not reveal higher scores for the parameters of DNA analysis (i.e., ploidy status and percentage of aneuploid cells) and proliferation scores. Nasal polyps of 10 patients with recurrent disease displayed higher scores for proliferation markers, and in five cases aneuploid cells with 5c exceeding rate (5cER) of 1.5-11.7% were detected. According to these results, polyps of the nasal cavity and paranasal sinuses showed low proliferation scores and were diploid. The data demonstrated that there was no increase of proliferation activity or ploidy shift toward aneuploidy in patients with allergy. Nevertheless, in recurrent disease some increase in proliferation activity and some changes in the parameters of the DNA analysis occurred, indicating more aggressive behavior of recurrent polyps in single cases.     

黏蛋白在鼻息肉及变应性鼻炎中的基因表达水平的研究

目的：探讨5种人黏蛋白基因（MUC2、MUC5AC、MUC5B、MUC18、MUC19）在鼻息肉和变应性鼻炎中的基因表达水平及临床意义。方法：采用RT-PCR及实时荧光定量RT-PCR,检测35例鼻息肉、18例变应性鼻炎患者下鼻甲及18例正常人黏蛋白基因（MUCS）在下鼻甲黏膜上皮的基因表达水平。结果：RT-PCR及实时荧光定量RT-PCR的结果表明,MUC5AC、MUC5B在鼻息肉组和变应性鼻炎组中的表达高于对照组（P〈0.05）,鼻息肉组与变应性鼻炎组及对照组间表达差异均无统计学意义（P〉0.05）。MUC2、MUC18在3组中的表达差异无统计学意义（P〉0.05）。MUC19在变应性鼻炎组中的表达高于鼻息肉组和对照组（P〈0.05或P〈0.01）。结论：MUC5AC和MUC5B在鼻息肉、变应性鼻炎的黏液过度分泌过程中具有重要意义;MUC19在变应性鼻炎的黏液过度分泌过程中也有重要意义,但是对鼻息肉患者的黏液分泌没有明显作用;未发现MUC2、MUC18在变应性鼻炎的黏液过度分泌过程中起明显作用。     

巨噬细胞和淋巴细胞及增殖细胞核抗原在鼻息肉组织中的表达及病理学意义

目的　研究巨噬细胞 (CD68)、T细胞 (CD45RO)、B细胞 (CD2 0 )和增殖核细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen ,PCNA)在鼻息肉组织中的表达。方法　应用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白过氧化酶 (strept avidinoxidase,SP)法对 50例鼻息肉分别做CD2 0、CD45RO、CD68、PCNA的免疫组化染色 ,结合常规HE染色切片进行分析。结果　①CD68+ 细胞在嗜酸性粒细胞性鼻息肉较嗜中性粒细胞性鼻息肉表达率高 ,差异具有显著性意义 (P <0 0 5) ;②CD45RO、CD2 0在鼻息肉均有阳性表达 ,CD45RO与CD2 0呈负相关 (P =0 0 5) ;③CD68阳性细胞与嗜酸性粒细胞浸润及鼻息肉上皮PCNA阳性表达有相关性 (P <0 0 5)。鼻息肉上皮的PCNA阳性表达和成纤维细胞PCNA阳性表达有相关性 ,(P <0 0 5)。结论　鼻息肉的形成与炎性细胞浸润密切相关。鼻黏膜局部的细胞免疫与体液免疫异常导致上皮细胞、成纤维细胞增殖、腺体增生是鼻息肉发生的基础 ,CD68+ 细胞可能是鼻息肉中的炎性干细胞     

The prognostic value of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and p53 protein expression in patients with advanced nasopharyngeal carcinoma

CONCLUSION: p53 protein and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) were not ideal prognostic indicators in advanced nasopharyngeal carcinoma (NPC). Further investigation in searching for other potential biomarkers is needed to enhance the prediction of treatment outcome. OBJECTIVE: To assess the prognostic significance of p53 protein and PCNA expression in patients with advanced NPC. PATIENTS AND METHODS: This study included 46 patients with advanced NPC who had received treatment and regular follow-up for at least 5 years. We used immunohistochemistry (IHC) staining to assess p53 protein expression and PCNA labeling index, and correlate them with pathological subtypes, TNM stage, the presence of locoregional recurrence, and 5-year survival rate. RESULTS: p53 nuclear staining was positive in 32 patients (69.6%). All cases had positive PCNA nuclear staining with labeling index (LI) ranging from 6.5% to 92.9% (mean 53.4%). Only advanced T stage was found to be associated with high PCNA LI. Overexpression of p53 and PCNA LI had no impact on 5-year survival in this study group.     

Smac、XIAP、caspase-3在鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤中的表达及意义

目的:研究Smac、XIAP、caspase-3在鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤(NIP)的发生、发展及癌变过程中的表达及意义。方法:选取正常鼻腔黏膜(NM)10例,NIP 45例。其中的NIP组根据不同的病理分级分为3组,即无不典型增生组(25例)、伴有不典型增生组(11例)、恶变组(9例),通过免疫组织化学SP法进行Smac、XIAP、caspase-3的检测。结果:Smac、Caspase-3在NIP组中的阳性表达强度弱于在NM组中的表达,在NIP不同病理分级中,阳性表达强度随病理分化程度的降低而降低,无不典型增生组及恶变组间的表达差异有统计学意义。XIAP在NM、NIP组中的阳性表达强度呈增强趋势,在NIP不同病理分级中,组织的分化程度越低,阳性表达强度越高,无不典型增生组及恶变组间的表达具有统计学意义。Smac与XIAP的表达为负相关(rs=-0.323,P<0.05),XIAP与caspase-3的表达负相关(rs=-0.408,P<0.01),Smac与caspase-3的表达为正相关(rs=0.424,P<0.01)。结论:Smac、XIAP、caspase-3与NIP的发病及恶变有关。