榼藤子总皂苷抗糖尿病作用机制的初步研究

目的:探讨榼藤子总皂苷对2型糖尿病大鼠胰岛形态及骨骼肌PI3K通路相关蛋白表达的影响。方法:通过高脂饲料喂养结合注射小剂量链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病大鼠模型。实验大鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组(二甲双胍,200 mg.kg-1)、榼藤子总皂苷低、高(25,50 mg.kg-1)剂量组。治疗3周后对各组大鼠胰腺HE染色病理切片胰岛形态、数目等进行观察比较,采用Western blot方法检测各组大鼠骨骼肌组织中胰岛素受体底物-1(IRS-1)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白酪氨酸磷酸酶-1B(PTP-1B)和葡萄糖转运子4(GLUT4)等蛋白的表达水平。结果:同模型组相比,榼藤子总皂苷各给药组胰腺组织病理切片均结构相对正常、胰泡细胞清晰可见、被膜结构完整,胰岛数目均接近于对照组;同时上述各给药组大鼠骨骼肌组织中IRS-1,PI3K和GLUT4蛋白表达水平均较模型组有所上调,PTP-1B蛋白表达水平均较模型组有所下调。结论:榼藤子总皂苷对2型糖尿病大鼠胰腺组织具有保护作用,并对骨骼肌组织中蛋白的异常表达具有干预作用。     

傣药榼藤子仁及榼藤子总皂苷的镇痛作用研究

目的：对傣药榼藤子仁生品、炮制品以及榼藤子皂苷进行镇痛作用研究。方法：一次性灌胃小鼠O．5h、1h后,分别测定实验小鼠对热板致疼痛、红外辐射致疼痛、压痛致疼痛痛阈,以及给药0．5h后ip0．6％醋酸10ml／kg,25min内的扭体次数,观察榼藤子仁生品、炮制品以及榼藤子皂苷对小鼠的镇痛作用。结果：当灌胃小鼠给药0．5h后,榼藤子生品剂量8．0g生药／k时,实验小鼠对热板致疼痛、红外辐射致疼痛以及压痛致疼痛,均显示显著镇痛作用,但与此生药剂量相当的榼藤子炮制品及皂苷未见显著镇痛作用;给药后1．0h,榼藤子生品、炮制品及皂苷未见显著镇痛作用。对于醋酸致小鼠扭体实验,榼藤子生品、炮制品、皂苷均能显著减少醋酸引起的扭体反应次数,抑制活性与剂量相关。榼藤子生品和炮制品剂量4．0g生药／k时即显示显著镇痛作用,但与此生药剂量相当的榼藤子皂苷未见显著镇痛作用;当剂量增加至相当于10．0、20．0生药／kg时,榼藤子皂苷具有显著镇痛作用。结论：榼藤子生品、炮制品以及榼藤子皂苷均有不同程度的镇痛作用,其作用机理有待于进一步研究。     

榼藤子生品和炮制品总皂苷体内抗肿瘤作用

目的:考察榼藤子生品和炮制品总皂苷体内抗肿瘤作用.方法:荷瘤小鼠随机分为8组,接种后第2天给药,连续10 d,模型对照组ig以等量生理盐水,阳性对照组腹腔注射顺铂3 mg· kg -1,低、中、高剂量榼藤子生品、炮制品总皂苷组分别ig 0.25,0.5,1 g·kg-1剂量.观察榼藤子总皂苷的肿瘤抑制作用;计算抑瘤率、胸腺指数、脾指数、肝脏指数;测定血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平.结果:榼藤子生品高、中、低剂量组的抑瘤率分别为58.86％,49.52％,43.45％,榼藤子炮制品高、中、低剂量组的抑瘤率分别为59.41％,48.81％,44.59％,榼藤子生品及炮制品总皂苷还能提升荷瘤小鼠血清SOD的活力,降低MDA水平.结论:榼藤子生品和炮制品总皂苷具有抗小鼠肿瘤作用,并可增强抗氧化能力.     

绞股蓝总皂苷对2型糖尿病大鼠游离脂肪酸代谢的影响及改善胰岛素抵抗相关机制研究

目的:通过实验研究绞股蓝总皂苷对2型糖尿病大鼠游离脂肪酸代谢的影响,探讨绞股蓝总皂苷改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗相关机制。方法:将实验用SD大鼠建造为2型糖尿病模型,分别给予药物灌服及普通饲料喂养4周。采用荧光定量PCR法检测各组大鼠肝脏及脂肪组织中PPAR-a mRNA;血清学测定血清中游离脂肪酸(NEFA)、空腹血糖(FPG)、甘油三脂(TG)、胰岛素(INS)的含量,根据血糖值及胰岛素的测定结果计算出胰岛素抵抗指数;采用胰腺β细胞HE染色及细胞凋亡检测胰岛细胞凋亡。结果:绞股蓝总苷高、中、低剂量能提高PPAR-a mRNA的表达;与模型组比较有所改善,绞股蓝总苷高剂量能明显降低糖尿病大鼠的血糖、血脂、游离脂肪酸;绞股蓝总苷高、中、低剂量动物胰腺B细胞可见凋亡,绞股蓝总苷高、中、低剂量均能增强糖尿病大鼠的胰岛素水平,增强对胰岛素的敏感性,减小抵抗指数。结论:绞股蓝总皂苷可以通过提高PPAR-a mRNA的表达,明显降低糖尿病大鼠游离脂肪酸浓度,从而增强胰岛素敏感性、减少胰岛素抵抗。     

皂苷改善胰岛素抵抗研究进展

2型糖尿病已经成为全世界的健康问题,胰岛素抵抗是其发生以及发展的主要表现之一。中医药在治疗糖尿病方面有其独特的优势,其中皂苷单体在降糖方面效果显著。在相关的细胞以及动物模型研究中发现,中药皂苷单体能够提高胰岛素的敏感性,改善胰岛素抵抗。现就皂苷改善胰岛素抵抗作用及机制的研究进展进行综述,以期对进一步的临床研究和治疗提供一定的参考。     

榼藤子药材质量标准研究

目的:建立榼藤子药材的质量标准,为该药材质量控制提供依据。方法:以榼藤子中主要活性成分榼藤子苷、榼藤子酰胺A-O-β-D-吡喃葡萄糖苷为指标,分别采用TLC和HPLC进行定性鉴别和含量测定研究;参照《中国药典》2010年版附录相关方法,对榼藤子药材的水分、灰分及醇溶性浸出物进行测定。结果:TLC鉴别分离良好,斑点清晰。HPLC含量测定方法学结果表明榼藤子苷在0.014~2.747 g·L^-1具有良好的线性关系,r=0.999 6(n=9),平均回收率为101.06%,RSD 0.90%(n=6);榼藤子酰胺A-O-β-D-吡喃葡萄糖苷在0.002~0.452 g·L^-1具有良好的线性关系,r=0.999 7(n=9),平均回收率为101.52%,RSD 1.09%(n=6);21批样品含榼藤子苷质量分数为5.12%~9.24%,榼藤子酰胺A-β-D-吡喃葡萄糖苷的质量分数为0.55%~2.17%。醇溶性浸出物为30.9%~45.2%,水分为6.6%~8.6%,总灰分为2.4%~2.9%。结论:建立的方法可用于榼藤子药材的质量控制。     

榼藤子种仁化学成分研究

 目的研究豆科植物植藤子[Entada phaseoloides(L.)Merr.]种仁的化学成分。方法采用硅胶,Sephadex LH-20等分离纯化,通过理化常数测定和现代波谱学技术(MS、¹H-NMR、¹³C-NMR)进行结构鉴定。结果分离得到8个化合物,分别为2,5-二羟基苯乙酸乙酯(1),2,5-二羟基苯乙酸甲酯(2),5-羟基-苯并呋喃-2-酮(3),榼藤酰胺A(4),硬脂酸甲酯(5),β-谷甾醇(6),胡萝卜苷(7),豆甾醇(8)。结论化合物1,3,5,7,8为首次从该属植物中分离得到,6为首次从该植物中分离得到。     

南苜蓿总皂苷对2型糖尿病大鼠血液流变学及胰岛素抵抗作用的研究

目的:观察南苜蓿总皂苷对实验性2型糖尿病大鼠血液流变学及胰岛素抵抗的影响。方法:采用高糖高脂饲料喂养1个月加小剂量的链脲菌素(30 mg/kg)的方法建立实验性2型糖尿病大鼠模型,分为正常组、模型组、二甲双胍组、南苜蓿总皂苷高、低剂量组,连续静脉滴注4周,末次给药后测定血液流变学指标、空腹血糖、空腹胰岛素、糖化血红蛋白、肝糖原、计算胰岛素抵抗指数和敏感指数,并采用葡萄糖耐量和胰岛素耐量评价模型动物的胰岛素敏感性,采用蛋白免疫印迹法检测胰岛素信号传导通路的相关蛋白的表达。结果:与模型组比较,南苜蓿总皂苷1.4 g/kg能显著全血黏度、血浆黏度、全血还原黏度,RBC压积(P0.05或P0.01);降低空腹血糖、胰岛素和糖化血红蛋白水平(P0.01或P0.05);降低胰岛素抵抗指数(P0.01);升高胰岛素敏感指数和肝糖原含量(P0.01);改善胰岛素耐量及糖耐量异常;增加肝脏组织中IRS1、PI3K、PAKT的表达。结论:南苜蓿总皂苷对改善2型糖尿病大鼠血液流变性,降低血液的高黏状态,合成肝糖原,改善胰岛素抵抗,达到调节血糖的作用。     

傣药材榼藤子质量标准研究

目的：建立傣药材榼藤子的质量标准。方法：采用生药学方法对榼藤子的性状、显微粉未进行了鉴别;建立榼藤子中皂苷的薄层色谱鉴别方法;《中国药典》一部附录方法,测定傣药材毛叶巴豆水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物。结果：薄层色谱鉴别重现性好,专属性强;规定水分不得过9.5%,总灰分不得过4.0%,酸不溶性灰分不得过0.5%,浸出物不得少于36.5%。结论：该方法简便快速,能有效控制傣药材榼藤子的质量。     

傣药材榼藤子质量标准研究

目的：建立傣药材榼藤子的质量标准。方法：采用生药学方法对榼藤子的性状、显微粉未进行了鉴别;建立榼藤子中皂苷的薄层色谱鉴别方法;《中国药典》一部附录方法,测定傣药材毛叶巴豆水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物。结果：薄层色谱鉴别重现性好,专属性强;规定水分不得过9.5%,总灰分不得过4.0%,酸不溶性灰分不得过0.5%,浸出物不得少于36.5%。结论：该方法简便快速,能有效控制傣药材榼藤子的质量。     

过岗龙化学成分分离鉴定

目的:过岗龙为植物榼藤Entada phaseoloides的干燥藤茎,民间常用于风湿骨痛的治疗,为探寻过岗龙的化学物质和活性组分,课题组对其化学成分进行系统研究。方法:取过岗龙9.0 kg,粉碎后用70%乙醇室温浸提3次,每次24 h,提取液减压浓缩,加水混悬后,依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取,利用正反相硅胶,LH-20羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20),小孔树脂凝胶(MCI)等柱色谱和半制备高效液相色谱对正丁醇部位进行分离纯化,应用1H-NMR,13C-NMR和MS等现代波谱分析技术结合理化性质鉴定所得化合物的结构。结果:从过岗龙70%乙醇提取物中分离得到10个化合物,分别鉴定为没食子儿茶素(1),尿嘧啶核苷(2),表没食子儿茶素(3),儿茶素(4),表儿茶素(5),原花青素B3(6),原花青素B1(7),圣草次苷(8),(-)-香橙素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(9)和柚皮苷二氢查尔酮(10)。结论:化合物2,6~10为首次从该植物中分离得到。     

榼藤子的现代研究进展及质量标志物预测分析

榼藤子Entada phaseoloides（Linn.）Merr.为傣族常用中药材,药用历史悠久,临床疗效显著,其化学成分复杂多样,主要含有皂苷类、含硫酰胺类、酚及酚苷类等化学成分,具有抗肿瘤、抗炎、镇痛、降糖、调脂等药理作用。对榼藤子的化学成分、药理作用方面进行系统综述,并依据质量标志物（Q-marker）“五原则”对榼藤子的Q-marker进行预测分析,建议将榼藤子苷、榼藤子酰胺A-β-D-吡喃葡萄糖苷、榼藤酰胺A、榼藤子皂苷D及榼藤子皂苷E作为榼藤子药材潜在质量控制指标,为榼藤子的质量评定及新型产品研发提供参考依据。     

藤三七总皂苷和总黄酮提取工艺优选

目的: 优选藤三七总皂苷和总黄酮的提取工艺。方法: 采用UV测定总皂苷和总黄酮含量。以总皂苷和总黄酮提取量为指标,采用单因素试验考察提取次数,正交试验考察乙醇体积分数、提取时间及乙醇用量对藤三七中总皂苷和总黄酮提取工艺的影响。结果: 藤三七中总皂苷和总黄酮的最佳提取工艺为加12倍量75%乙醇回流提取2次,每次2 h,总皂苷、总黄酮平均提取量分别为16.23,46.40 mg·g^-1。结论: 优选的提取工艺合理可行。     

三七总皂苷透皮凝胶膏剂的制备和含量测定

目的: 优选三七总皂苷透皮凝胶膏剂的制备工艺,并建立其含量测定方法。 方法: 以凝胶膏剂样品的初黏力、外观、涂布性等为综合评价指标,通过正交试验优选凝胶膏剂的成型工艺;采用HPLC测定三七总皂苷的含量。 结果: 优化的基质处方为部分聚合的聚丙烯酸钠4 g,羧甲基纤维素钠1 g,高岭土3.5 g,甘羟铝0.18 g,甘油-丙二醇(2:1)25 g,聚乙烯吡咯烷酮0.5 g,聚维酮0.5 g,聚乙烯醇0.25 g。HPLC测得三七皂苷R₁在0.42～3.36 μg线性关系良好(r=0.999 6);人参皂苷Rg₁在4.82～38.56 μg线性关系良好(r=0.999 4);人参皂苷Rb₁在1.24～9.92 μg线性关系良好(r=0.999 7)。 结论: 优选的凝胶膏剂制备工艺稳定可行;建立的HPLC操作简便、可靠,适用于该制剂的含量测定和质量控制。     

榼藤子生品与炮制品HPLC指纹图谱研究

目的:建立榼藤子生、炮制品HPLC指纹图谱的评价方法,分析各样品指纹图谱的变化。方法:采用HPLC-UV分别对榼藤子生品和炮制品的指纹图谱进行研究,用HPLC-ESI-MS对其生品共有峰进行鉴定。结果:标示出生品16个共有峰,炮制品21个共有峰,应用HPLC-MS和对照品保留时间的对应初步鉴定了其中9个共有峰,主要为榼藤子三萜皂苷类和其他糖苷类成分的吸收峰。结论:榼藤子生品炮制后,60%甲醇提取液中部分化学成分含量有不同程度的下降或上升,指纹图谱的主峰数目也有变化,说明该法可以较全面地反映榼藤子炮制前后化学成分的差异,用于控制生品和炮制品的内在质量。     

喜马拉雅紫茉莉总皂苷的提取工艺优选

目的:优选喜马拉雅紫茉莉总皂苷的提取工艺条件.方法:以人参皂苷Re为对照品,用香草醛-高氯酸比色法测定喜马拉雅紫茉莉总皂苷的含量,以总皂苷收率为指标,采用单因素试验及正交试验考察乙醇体积分数、提取温度、提取时间、提取次数、料液比对喜马拉雅紫茉莉总皂苷收率的影响.结果:各因素对总皂苷收率的影响顺序为提取温度＞提取时间＞乙醇体积分数;最佳提取工艺为加12倍量60％乙醇于70℃提取2次,每次2h,总皂苷收率0.704％.结论:采用回流法提取喜马拉雅紫茉莉总皂苷的方法可行.     

楤木总皂苷提取物在不同介质中平衡溶解度的测定

目的:测定楤木总皂苷在水,0.1 mol·L-1盐酸和不同pH磷酸盐缓冲液中的平衡溶解度,为楤木总皂苷提取物的剂型设计提供实验依据。方法:以楤木皂苷A为指标,采用HPLC测定楤木皂苷A在不同介质中平衡溶解度,流动相乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B)梯度洗脱(0~18 min,35%~43%A;18~19 min,43%A;19~25 min,43%~35%A),检测波长205 nm。结果:37℃时,楤木皂苷A在水,0.1 mol·L-1盐酸和pH 2,4,6,7,8,10的磷酸盐缓冲液中平衡溶解度分别为1.780,0.241,0.420,0.472,1.196,1.746,0.180,0.242 g·L-1。结论:楤木总皂苷提取物微溶于水,但受介质的pH影响大。     

大孔树脂纯化大蒜总皂苷的工艺优选

目的:优选大蒜总皂苷的大孔树脂纯化工艺.方法:以总皂苷转移率为指标,采用单因素试验考察树脂型号、吸附性能(吸附容量、上样液质量浓度、pH、吸附速度)、洗脱性能(洗脱剂浓度、流速、体积),优选大蒜总皂苷纯化工艺.结果:优选的纯化工艺条件为采用AB-8型大孔树脂,树脂-生药1∶1.3,上样液质量浓度0.8 g·mL-1,pH 7,吸附速度2 BV·h-1,加30％乙醇3 BV除杂,95％乙醇5 BV洗脱,洗脱速度3 BV·h-1,大蒜总皂苷纯度＞65％.结论:AB-8型大孔树脂可用于纯化大蒜提取物中总皂苷,优选的纯化工艺稳定可行.