阳性血培养中的布鲁菌的快速分子鉴定

目的 建立一种快速、简便、准确的方法,直接检测阳性血培养液中的布鲁氏菌,用于布鲁菌病的早期诊断。 方法 将疑似布鲁菌病患者的阳性血培养液在生物安全柜内涂片,并转种至血培养皿及巧克力平皿进行培养。应用特异性的布鲁菌探针Bru-996,采用荧光原位杂交法检测涂片上的细菌;分别采用Vitek2自动细菌鉴定仪和16SrRNA基因测序法鉴定经培养的细菌。将荧光原位杂交法检测结果与Vitek2自动细菌鉴定仪和16SrRNA基因测序法检测结果进行比较。 结果 35份阳性血培养液经检测,荧光原位杂交法检出布鲁菌34株,非布鲁菌1株;基因测序法检出马耳他布鲁菌34株,洋葱伯克霍尔德菌1株;Vitek2鉴定法分别检出马耳他布鲁菌28株、洋葱伯克霍尔德菌1株、吉拉尔玫瑰单胞菌5株,支气管鲍特菌1株。荧光原位杂交法与基因测序法检出结果一致,6株布鲁菌经Vitek 2鉴定错误。 结论 荧光原位杂交法可直接快速简便准确地检测阳性血培养液中的布鲁菌。     

荧光原位杂交法快速鉴定阳性血培养中的不动杆菌

目的建立一种快速鉴定阳性血培养中不动杆菌的方法。方法Bact／Alert3 D120报警后,取阳性血培养液15uL于玻片上,预处理后50℃杂交45min,荧光显微镜下观察,作荧光原位杂交法（FISH）分析。同时将阳性标本转种至血平板和巧克力平板,用Vitek32系统鉴定,比较两种鉴定方法的符合率。结果探针的特异性经标准菌株和临床分离株证实,最低检测限为10^3CFU／mL。通过对31株临床标本的检测,杂交法的特异性为96．4％。结论荧光原位杂交法可快速鉴定阳性血培养标本中的不动杆菌。     

利用旋转培养箱进行快速血培养及细菌鉴定

目的:寻找一种快速而准确的血培养及细菌鉴定方法,为临床及时诊断提供科学依据。方法:在增菌培养基中加入氯化-235三苯基四氮唑(TTC)琥珀酸并利用旋转培养箱进行血液增菌;直接从阳性瓶中提取菌体,在加大生化鉴定管底物浓度和接种菌量的情况下进行生化鉴定。结果:血增菌培养显示阳性时间最早为4 h,90%以上的阳性标本能在24 h内呈现阳性反应。呈现阳性反应后大部分革兰阴性杆菌能在4 h内鉴定到种。结论:利用旋转培养箱进行血培养和细菌鉴定可缩短细菌培养和鉴定时间。     

血培养厌氧菌实验室鉴定

目的:通过血培养厌氧菌病例的临床及实验室检测资料,掌握厌氧菌鉴定方法,探讨实验室开展厌氧菌检测的重要性。方法:观察血培养仪厌氧血培养瓶阳性报警曲线,转种厌氧血琼脂厌氧环境培养,观察茵落形态,涂片革兰氏染色,VITIE 2鉴定到种。结果:12份血培养出厌氧菌13株。其中2份为需氧菌和厌氧菌混合感染,分别是脆弱拟杆菌混合血液链球菌和中间链球菌;1份血培养分离出2种厌氧菌分别为脆弱拟杆菌和梭形梭菌;其他血培养分别培养出产气荚膜梭菌、脆弱拟杆菌、单形拟杆菌等。结论:厌氧菌感染多为混合感染,且培养、鉴定要求条件较高。加强对厌氧菌感染的认识和实验室检测,对临床诊断、治疗以及合理使用抗生素具有指导作用。     

荧光原位杂交法在检测硫酸盐还原菌中的应用

目的 探讨荧光原位杂交法在检测淡水湖泊沉积物硫酸盐还原菌检测中的应用.方法 建立荧光原位杂交方法 并应用该法进行洱海沉积物硫酸盐还原菌含量分析,所用寡核酸苷酸探针为依据硫酸盐还原菌16SrRNA特异性区域而设计的SRB385.结果 荧光显微镜下标本中可见发特异性红色荧光的硫酸盐还原菌菌体.经荧光原为杂交分析,洱海沉积物前18cm硫酸盐还原菌含量为(0.08-8.50)×103个/g,平均为(1.91±2.51)×103个/g.硫酸盐还原菌含量在空间分布上表现为悬浮层、5和8cm深度有较小谷值,3、6和11cm深度有较高的峰值,其中11cm深度形成的峰较宽.结论 荧光原位杂交法具有快速准确、检测信号强、杂交特异性高的特点,可以进行淡水湖泊沉积物硫酸盐还原菌含量的检测.洱海沉积物硫酸盐还原茵含量丰富且不同深度的沉积物中硫酸盐还原菌含量分布是不均一的.     

荧光原位杂交技术在快速产前诊断应用的研究进展

随着分子生物学技术和医学遗传学的发展,产前诊断技术向早期、快速、准确、无创伤发展,使越来越多的出生缺陷能够在胚胎发育的较早期诊断出来.荧光原位杂交技术（FISH）是一种为遗传病诊断提供更直观、快速诊断的分子细胞遗传技术,随着DNA技术的发展与染色体特异性探针的出现,FISH技术越来越多应用于生殖医学领域的临床诊断.该文对FISH技术在快速产前诊断中的研究进展作一综述.     

血培养采用溶血增菌法结果观察

本文就血培养，采用溶血增菌与常规增菌培养进行对比观察，４０６例血培养标本，常规增菌阳性５４例，阳性率为１３．３％，溶血增菌阳性９３例，阳性率为２２．９％，以检出例数最多的表皮葡萄球菌及微球菌为检验依据，进行两种方法比较，经统计学处理有显著性差异，提出溶血增菌培养优于常规增菌培养。     

小儿肺炎支原体的快速培养鉴定法

目的早期快速培养鉴定法诊断肺炎支原体（MP）。方法对100例疑似MP感染的患儿的咽拭子进行培养。结果检出率可高达85．3％,有利于早期、迅速、高效、特异地提高支原体感染的检出率。     

省时实用的嗜麦芽窄食单胞菌的快速鉴定法

嗜麦芽窄食单胞菌(stenotroophomo-nas maltophilia)，原名为嗜麦芽假单胞菌。由于该菌对多种抗生素常显示出多重耐药性，因此，也常常是造成医院内感染的常见菌，并给临床的治疗带来很多困难，同时该菌在临床标本非发酵菌检出率中已占到第三位。目前对于该菌的鉴定按常规的非发酵菌鉴定方法，操作繁杂、费时。本科利用嗜麦芽     

100例自然流产或死胎组织的染色体FISH检测

目的 1.探讨中国孕妇妊娠前三个月、中三个月、后三个月自然流产或死胎死产胎儿组织细胞中染色体异常总发生率及异常种类和各种异常发生率;2.为完善中国产前诊断与遗传咨询指南提供理论依据。方法对95例自然流产绒毛及5例死胎肌肉标本利用FISH检测13、16、18、21、22、X、Y染色体数目异常。结果检出异常病例44例,异常率为44%,其中阳性病例占20.45%,包括16号染色体三体,X染色体单体及47,XXY,分别占异常病例的2.27%,13.64%,4.55%。孕妇前、中、后三个月自然流产或死胎死产的发生率分别为77%,20%,3%;染色体异常率分别为66.67%,33.33%,0。结论染色体异常是导致自然流产的重要因素之一,FISH检测是进行染色体检查的一项有效方法,对自然流产的病因、诊断及再次妊娠具有重要的指导意义。     

3960份血液标本细菌培养结果及耐药性分析

目的了解医院2009年1月～2009年12月血液培养结果及耐药状况,为血液感染性疾病的诊断、治疗提供依据。方法采用BACTEC9050全自动血培养仪及Vitek鉴定板和梅里埃公司药敏卡对血培养阳性标本进行菌种鉴定和药物敏感试验。结果3960份血液标本分离出病原菌629株,阳性率15.9%,其中革兰阳性菌378株,革兰阴性菌233株,真菌18株。革兰阳性球菌对万古霉素、利福平、米诺环素较为敏感,而革兰阴性杆菌对亚胺培南、美洛培南、阿米卡星的敏感性较高。结论革兰阳性球菌为本地区引起菌血症的主要病原菌,药敏结果提示检出菌耐药性强且广谱耐药。     

血培养分离菌的菌谱特征及耐药性分析

目的了解该院血培养阳性标本中的菌谱分布情况和细菌耐药情况,以指导临床合理用药。方法采用全自动血培养仪Bact/Alert120及专用血培养瓶培养细菌,阳性标本转种至培养基分离、鉴定、药敏。结果 2 370份血培养标本共分离到细菌291株,阳性率为12.28%。临床分离的2 370株病原菌中,革兰阳性菌占71%,革兰阴性菌占23%,真菌占1%,其他占5%。分离数列前3位的病原菌分别为凝固酶阴性葡萄球菌（45%）、大肠埃希菌（26%）、金黄色葡萄球菌（13%）。主要革兰阳性菌对万古霉素高度敏感,未出现耐药菌株;主要革兰阴性菌耐药率最低的是亚胺培南,其次是阿米卡星。结论血培养分离株以革兰阳性菌为主,凝固酶阴性葡萄球菌所占比例高,抗菌药物耐药率较高;了解血培养中细菌的分布和耐药性,对减少细菌耐药和医院感染,指导临床合理用药具有重要意义。     

全自动血培养仪阳性病原菌种类及报警时间分析

目的：分析血培养阳性病原菌种类及仪器报警时间。方法：用BDBACTEC9120全自动血培养仪检测笔者所在医院2010年4月-2012年4月共计2180份血标本,分析血标本在需氧瓶和厌氧瓶中生长细菌的种类及仪器报警时间。结果：2180例血培养标本中报警阳性282例,其中真阳性263例,阳性率为12．1％。分离出细菌269株,其中革兰阳性球菌占40．1％,革兰阴性杆菌占57．2％,真菌占2．6％。其中仅需氧瓶报阳的阳性率为6．3％,仅厌氧瓶报阳的阳性率为2．8％,需氧瓶及厌氧瓶均报阳的阳性率为2．9％;最快阳性检出时间为5．02h,24h内检出的阳性数占69．1％,48h检出的阳性数占92．5％,72h检出的阳性数占97．O％;假阳性率为0．87％,假阴性率为O．09％。结论：应用BDBACTEC9120全自动血培养仪同时进行需氧瓶及厌氧瓶培养能提高血培养阳性率,缩短了阳性检出时间。     

狼疮性肾炎患者外周全血培养细胞白细胞介素-18的分泌和基因表达

目的　探讨白细胞介素 - 18(IL - 18)在狼疮性肾炎 (LN)发病机制中的作用。方法　取 16例活动性LN患者和 10例正常人的静脉全血体外培养 2 4h,应用酶联免疫吸附法 (ELISA)检测上清液中IL - 18水平 ,并应用半定量反转录聚合酶链反应 (RT -PCR)技术检测全血培养细胞IL - 18mRNA的表达 ,分析LN患者全血培养细胞IL - 18的产生及其与狼疮活动指标的相关关系。结果　活动性LN患者与正常人全血培养细胞IL - 18的分泌和基因表达量间的差别有显著性意义 (P<0 0 0 1)。活动性LN患者自发分泌的IL - 18与狼疮疾病活动指数 (SLEDAI)、血沉(ESR)、 2 4h尿蛋白定量 (2 4hUPQ)呈正相关关系 ,与血清C3 无相关关系。结论　IL - 18在活动性LN患者全血培养细胞中表达和分泌增高 ,且与狼疮活动指数相关 ,提示其在LN的发病机制中起重要作用 ,抑制IL - 18的产生可能是狼疮治疗的一个新途径     

荧光原位杂交检测乳腺癌HER2基因的表达及其意义

目的：探讨荧光原位杂交（FISH）在检测乳腺癌组织HER2基因表达的临床意义。方法：应用FISH法对50例乳腺癌患者进行HER2基因检测,分析基因表达程度与临床特征之间的关系,比较基因和免疫组化（IHC）法蛋白表达的差异性。结果：FISH法与IHC法检测结果总符合率为88%,我院女性乳腺癌人群中HER2基因过表达率为44%,其过表达与肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期之间差异无统计学意义（P〉0.05） 孕激素受体（PR）阳性组高于PR阴性组,差异有统计学意义（P〈0.01） 雌激素受体（ER）阳性组与ER阴性组间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：HER2基因的过表达与肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期及ER无关,与PR成负相关。FISH法检测乳腺癌HER2基因敏感性及稳定性较高,可作为最终确诊HER2基因状态的方法。     

我院2011～2012年血培养送检标本病原菌分布及药敏分析

目的了解本院近两年来血液感染病原菌的种类及其对常用抗生素的敏感情况,指导临床合理使用抗生素。方法采用Bactec 9120细菌培养仪进行血液标本的培养,VETEK-Ⅱ细菌鉴定仪和phoenix-100全自动细菌分析仪进行细菌鉴定及药敏试验,并应用WHONET5.4软件进行数据分析。结果临床送检的8 040份血培养标本中,分离出病原菌898株,阳性率11.2%。最常见的主要为大肠埃希菌(164株,占18.3%)、表皮葡萄球菌(112株,占12.5%)和肺炎克雷伯菌(83株,占9.2%);革兰阴性菌敏感性最好的药物为亚胺培南,其次为哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦,革兰阳性球菌敏感性最好的药物为替考拉宁和万古霉素。结论近两年本院血液感染致病菌以革兰阴性菌为主,且菌种多样化,有较高耐药率,提示应定期对血液感染病原菌的分布和耐药情况进行监测,以便及时了解病原菌变化及耐药趋势,监督指导临床用药。