缺氧再氧合对卵巢癌细胞系3AO中CD147表达调控作用的影响

目的 :探讨缺氧再氧合过程中卵巢癌细胞中CD14 7表达调控的机制。方法 :卵巢癌细胞系 3AO分别在缺氧 6h ,8h ,2 4h ,和缺氧 6h后再氧合 2h ,4h ,6h ,8h ,7种不同条件下培养后 ,应用反转录聚合酶链反应 (RT PCR)法半定量检测CD14 7mRNA的表达。结果 :缺氧组随缺氧时间的延长CD14 7mRNA表达逐渐增加 ,再氧合组随着氧合时间的延长CD14 7mRNA表达回降 ,再氧合 8h时降至最低 (r =0 .998,P =0 .0 38)。而β actinmRNA表达却不受缺氧和再氧合的影响。结论 :缺氧可以上调卵巢癌细胞系中CD147mRNA的表达 ,但它是可逆的。     

基质金属蛋白酶及其抑制物与卵巢癌转移的研究进展

基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制物(TIMPs)在细胞外基质(ECM)的降解中起重要作用,有大量研究表明ECM降解是卵巢癌浸润正常组织和开始转移的信号及重要途径.MMPs在各型卵巢癌中的表达均有明显增加,提出MMPs及TIMPs在卵巢癌的诊断和治疗中有广阔的研究前景.就MMPs及TIMPs在卵巢肿瘤中的研究情况综述.     

高氧致新生鼠肺损伤中基质金属蛋白酶8和基质金属蛋白酶抑制剂1的动态表达及对Ⅲ型胶原的影响

基质金属蛋白酶类（matrix metalloproteinases，MMPs）是维持细胞外基质（extracellular matrix，ECM）稳定的一蛋白酶家族，它们与其特异性抑制剂（tissue inhibitors of metalloproteinases，TIMPs）结合，共同参与组织重塑等过程。MMP-8是一种胶原酶，能降解间质性胶原，在成人纤维化中起重要作用。本研究以高氧致新生鼠肺损伤模型为对象，动态观察肺组织中MMP-8、TIMP-1蛋白和mRNA表达以及Ⅲ型胶原蛋白含量的变化，以探讨在高氧致新生鼠肺损伤中MMP-8／TIMP-1对Ⅲ型胶原（collagen，Col）的作用。     

RNAi沉默CD147基因对卵巢癌细胞HO-8910pm生物学行为的影响

目的:采用RNA干扰(RNA interference,RNA i)技术,利用构建的稳定转染CD147 shRNA表达质粒载体的HO-8910pm/pGE-1 CD147shRNA细胞株观察卵巢癌细胞系HO-8910pm CD147基因的沉默作用及生物学效应。方法:用免疫细胞化学法、激光共聚焦检测HO-8910pm细胞CD147的表达;MTT法绘制细胞生长曲线,观察裸鼠卵巢癌皮下移植瘤的成瘤性。结果:pGE-1CD147shRNA转染人卵巢癌细胞系后,CD147的表达受到高效且特异的抑制,细胞侵袭力减弱,荷瘤裸鼠成瘤力下降,抑瘤率达58.8%(P<0.01)。结论:RNA i沉默CD147基因可影响卵巢癌的侵袭和成瘤,有可能成为治疗卵巢癌的新途径。     

二氧化碳对基质金属蛋白酶和金属蛋白酶组织抑制剂表达水平的影响

目的:探讨经过不同压力二氧化碳(CO_2)气体控制后的卵巢癌细胞系A2780中基质金属蛋白酶-2、3(MMP-2,3)和金属蛋白酶组织抑制剂-1、2(TIMP-1,2)的相对表达量在压力控制后不同时间点的变化及意义。方法:选用卵巢癌细胞系A2780,进行体外培养、细胞模型建立,对照组于5%CO_2孵箱中孵育3小时,实验组通过体外模拟腹腔镜不同压力的CO_2气腹环境,CO_2压力分别控制在0 mmHg、7 mmHg、15 mmHg,在CO_2压力控制3小时后于0、12、24、48小时收集各组细胞。提取总RNA,运用实时荧光定量聚合酶链式反应技术(RT-qPCR)检测各组样本中MMP-2、3和TIMP-1、2 mRNA相对表达量。结果:卵巢癌细胞经CO_2压力控制后,相同压力组各样本MMP-2 mRNA的相对表达量随压力控制后培养时间的延长而降低。经过CO_2压力控制后卵巢癌细胞在相同时间点上MMP-2 mRNA的相对表达量随CO_2压力的升高而降低。卵巢癌细胞经CO_2压力控制后,相同压力组各样本MMP-3 mRNA的相对表达量随压力控制后培养时间的延长而降低。经过CO_2压力控制后卵巢癌细胞在相同时间点上MMP-3mRNA的相对表达量随CO_2压力的升高而降低。对照组和实验组在不同时间点上和不同CO_2压力情况下TIMP-1、2mRNA的相对表达量之间的两两比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:模拟的CO_2气腹环境可抑制卵巢癌细胞系A2780的侵袭能力,并随时间延长及压力的增高MMP-2、3mRNA相对表达量降低。模拟的CO_2气腹环境对卵巢癌细胞系A2780 TIMP-1、2mRNA的表达无明显影响。     

紫杉醇对卵巢癌细胞基质金属蛋白酶-2、9基因表达的影响

目的:研究紫杉醇对HO8910人卵巢癌细胞的体外杀伤作用;紫杉醇对MMP-2、MMP-9 mRNA表达的影响。方法:采用MTT法检测紫杉醇对HO8910细胞的抑制率;采用半定量RT-PCR法检测紫杉醇作用于HO8910细胞时MMP-2、MMP-9基因mRNA水平的变化。结果:紫杉醇在达10-7mol/L以上浓度时对HO8910细胞抑制率>30％(P<0.01);10-8mol/L以上浓度时紫杉醇可下调MMP-2、MMP-9 mRNA的表达,其作用呈剂量依赖性。结论:在10-7mol/L以上浓度,HO8910细胞对紫杉醇具有药物敏感性;紫杉醇可能通过抑制MMP-2、MMP-9　mRNA的表达,抑制肿瘤的侵袭及转移。     

血清基质金属蛋白酶—9测定在诊断卵巢肿瘤和评估预后中的价值

目的：探讨测定血清基质金属蛋白酶－9（MMP－9）的含量对诊断卵巢上皮癌的价值及它与患者预后的关系。方法：将卵巢上皮癌（OEC）43例,卵巢交界性肿瘤（BOT）12例及卵巢良性肿瘤（OBT）24例分为3个研究组,20例正常妇女为对照组,用ELISA法测定各组术前血清中的MMP－9含量。结果：（1）OEC、OBT、BOT及对照组血清MMP－9的中位数分别为534.60、279.19、200.54、55.56ng/L,上述各组的范围分别为111.18-1766.12ng/L、16.38-874.34ng/L、15.10-423.29ng/L、11.01-201.63ng/L。OEC组血清MMP－9水平高于OBT、BOT及对照组,差异有显著性（P＜0.05）;（2）OEC患者按临床分期、级、组织学类型、淋巴或大网膜转移等影响患者预后的因素分组,各组间血清MMP－9水平无显著性差异。结论：患者血清MMP－9水平与卵巢肿瘤的恶性行为有关,对诊断有一定的价值,但用于判断患者预后的价值有限。     

血清基质金属蛋白酶-9测定在诊断卵巢肿瘤和评估预后中的价值

目的 :探讨测定血清基质金属蛋白酶 - 9(MMP - 9)的含量对诊断卵巢上皮癌的价值及它与患者预后的关系。方法 :将卵巢上皮癌 (OEC) 43例 ,卵巢交界性肿瘤(BOT) 12例及卵巢良性肿瘤 (OBT) 2 4例分为 3个研究组 ,2 0例正常妇女为对照组 ,用ELISA法测定各组术前血清中的MMP - 9含量。结果 :(1)OEC、OBT、BOT及对照组血清MMP - 9的中位数分别为 534.6 0、2 79.19、2 0 0 .54、55.56ng L ,上述各组的范围分别为 111.18～ 176 6 .12ng L、16 .38～ 874 .34ng L、2 5.10～ 4 2 3.2 9ng L、11.0 1～ 2 0 1.6 3ng L。OEC组血清MMP - 9水平高于OBT、BOT及对照组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5) ;(2 )OEC患者按临床分期、病理分级、组织学类型、淋巴或大网膜转移等影响患者预后的因素分组 ,各组间血清MMP - 9水平无显著性差异。结论 :患者血清MMP - 9水平与卵巢肿瘤的恶性行为有关 ,对诊断有一定的价值 ,但用于判断患者预后的价值有限     

丁酸钠对大鼠小肠上皮细胞株-6基质金属蛋白酶-3表达的影响

目的 探讨丁酸钠对大鼠小肠上皮细胞株-6(intestinal epithelial cell line No.6,IEC-6)细胞基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3,MMP-3)和组织金属蛋白酶抑制物-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)表达的影响,为预防新生儿NEC提供理论依据.方法将对数生长期IEC-6细胞分3组进行实验,低浓度丁酸钠组:培养液中加入终浓度为2 mmol/L的丁酸钠;高浓度丁酸钠组:丁酸钠终浓度为14 mmol/L;另设不含丁酸钠的对照组.共培养24 h后获取细胞,采用逆转录聚合酶链反应技术检测MMP-3和TIMP-1 mRNA的水平.培养48 h后,采用Western印迹法检测MMP-3和TIMP-1蛋白的表达水平.组间差异比较采用单因素方差分析及Dunnett-t和Dunnett's T3进行两两检验.结果 高浓度丁酸钠组MMP-3 mRNA水平为0.566±0.140,MMP-3酶原水平为0.756±0.128,MMP-3活性形式蛋白水平为0.255±0.057,均较对照组(分别为0.166±0.041、0.312±0.057和0.042±0.038)明显升高,差异均有统计学意义(P均＜0.01).低浓度丁酸钠组MMP-3 mRNA水平(0.213±0.039)、酶原水平(0.407±0.088)和活性形式蛋白水平(0.103±0.050)与对照组差异均无统计学意义(P＞0.05).高、低浓度丁酸钠组和对照组TIMP-1 mRNA为0.427±0.042,0.383±0.043和0.355±0.048;蛋白水平分别为0.576±0.140,0.524±0.123和0.355±0.062,组间差异均无统计学意义(F=1.97和3.10,P均＞0.05).结论高浓度丁酸钠能选择性诱导IEC-6细胞MMP-3的表达,而低浓度丁酸钠对其没有明显影响.     

子宫内膜癌中基质金属蛋白酶及其组织抑制因子的表达与临床意义

目的研究基质金属蛋白酶(MMPs)- 2、9及其组织抑制因子(TIMPs)- 1、2在子宫内膜癌中的表达并探讨其与子宫内膜癌浸润转移的关系.方法应用免疫组织化学方法对121例子宫内膜癌组织及20例子宫脱垂妇女子宫内膜组织中MMP2、MMP9、TIMP1、TIMP2蛋白进行检测.结果MMP2、MMP9、TIMP1、TIMP2蛋白主要分布在内膜癌细胞中,在间质中也有少量表达.MMP2、MMP9、TIMP1、TIMP2在内膜癌细胞表达的阳性率均高于正常对照组.MMP2、MMP9蛋白的表达,在内膜癌细胞病理分级为G2、G3中,强阳性率高于G1者(P＜0.05);有肌层浸润内膜癌的强阳性率明显高于无肌层浸润者(P＜0.05);有淋巴转移者高于无淋巴转移者(P＜0.05);手术病理分期Ⅲ、Ⅳ期的强阳性率明显高于Ⅰ、Ⅱ期者(P＜0.05).TIMP1蛋白的表达在不同病理分级中差异无显著性(P＞0.05),在深肌层浸润内膜癌中阳性率低于浅肌层浸润(P＜0.05);有淋巴转移者的阳性率低于无淋巴转移者(P＜0.005),手术病理分期为Ⅲ、Ⅳ者阳性率低于Ⅰ期者(P＜0.05);TIMP2蛋白在不同病理分级、肌层浸润、淋巴转移和手术病理分期中的表达率比较,差异均无显著性(P＞0.05).结论MMP2、MMP9蛋白在内膜癌中的表达随病理分级而升高,随肌层浸润程度的加深及有淋巴转移而增加,TIMP1表达随肌层浸润程度的加深及有淋巴转移而下降.     

卵巢癌高频转移细胞模型的建立及其与nm23-H1的相关性研究

目的 :筛选高频转移卵巢恶性肿瘤细胞 ,研究不同转移潜能的细胞和nm2 3的相关性 ,为系统实验研究和临床实践提供依据。方法 :通过反复动物接种和体外培养 ,观察动物肺转移状况 ,筛选高频转移细胞株 ,比较原发肿瘤和转移肿瘤的特征 ,并应用Northern blot测定各类肿瘤细胞nm2 3mRNA表达水平。结果 :8株卵巢恶性肿瘤细胞中 4株有较高转移潜能。多次培养接种可筛选出高频转移细胞亚群。各类细胞nm2 3mRNA表达水平与肿瘤转移特性呈负相关。结论 :肿瘤转移趋势在不同肿瘤种类及细胞亚群中有明显差异 ,这种差异是由基因分子水平决定的 ,同时也可能决定预后和转归     

Genistein对人卵巢癌细胞系TC-1增殖抑制和诱导凋亡作用的研究

目的:研究植物雌激素染料木黄酮(genistein)对人卵巢癌细胞系TC-1细胞增殖的抑制作用和凋亡的诱导作用,探讨其抗癌作用的机制。方法:应用MTT法检测不同浓度genistein对TC-1细胞的生长抑制作用,电镜观察药物作用后细胞超微结构的改变,流式细胞仪检测细胞周期、定量分析凋亡,DNA琼脂糖凝胶电泳法确定凋亡。结果:TC-1细胞经不同浓度genistein处理后,细胞生长明显受到抑制,且这种抑制作用呈时间及浓度依赖性,5mg/L和10mg/L genistein作用72h后,抑制率分别达到89·84%和97·99%。genistein阻断TC-1细胞生长于G2/M期,在G0/G1前出现典型的亚二倍体凋亡峰,且凋亡呈时间依赖性。电镜观察到用药后凋亡细胞典型的形态学特征。DNA凝胶电泳可观察到细胞凋亡特异的DNA梯形带。结论:genistein对TC-1细胞生长的抑制作用呈明显的时间及浓度依赖性,并诱导其发生凋亡。     

间皮素对卵巢上皮性癌细胞生长、粘附和侵袭能力的影响

目的:探讨环境间皮素对卵巢癌SKOV3和OVCAR3细胞增殖能力及侵袭粘附能力的影响。方法:用含不同浓度间皮素蛋白的1640培养基培养卵巢癌SKOV3和OVCAR3细胞,培养至12,24,36,48h,利用MTT和平板克隆形成实验测定其增殖情况;粘附试验测定细胞粘附能力、Transwell小室体外细胞转移侵袭装置测定SKOV3和OVCAR3的迁移、侵袭能力的改变。结果:间皮素可增强细胞的生长增殖能力,影响卵巢癌细胞的体外粘附、迁移和侵袭能力,间皮素干预组的细胞粘附率、迁移率和侵袭率高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:间皮素增强卵巢癌细胞的生长增殖能力及粘附、迁移和侵袭能力。     

mda-7/IL-24基因对卵巢癌细胞耐药性的影响

目的:探讨抑癌基因mda-7/IL-24对卵巢癌细胞株A2780和耐药株A2780/ DDP耐药性的影响。方法:构建人mda-7/IL-24基因重组腺病毒,感染A2780和A2780/ DDP的两种卵巢癌细胞株,MTT法检测细胞感染对顺铂(DDP),阿霉素(ADM),5-氟尿嘧啶(5-FU),泰素(Taxol)4种化疗药物敏感性的变化。结果:重组腺病毒载体Ad．mda-7/ IL-24经测序、酶切电泳检测正确;感染后A2780细胞对DDP、5-FU、Taxol的耐药性降低, DDP的药物敏感性提高了15．45倍,5-FU和Taxol的药物敏感性分别提高了2．15倍和3．63倍;A2780/DDP细胞对5-FU药物敏感性提高了2．62倍。结论:成功构建了Ad．mda-7/IL-24重组腺病毒载体,感染卵巢癌细胞A2780可提高对DDP、5-FU和Taxol的敏感性。     

RelA与uPA在卵巢癌细胞系中表达的相关性研究

目的 探讨RelA对人卵巢癌细胞株A2780、OVCAR-3 uPA合成的影响。方法用RelA、IкBα反义寡核苷酸(ASODN)处理A2780、OVCAR-3细胞株,然后以Western Blot、RT—PCR检测RelA、uPA的表达以及RelA在蛋白、mRNA水平对uPA的调节作用。结果 RelA表达与uPA蛋白及mRNA表达水平均呈明显正相关。RelAASODN下调uPA的表达与其作用时间相俄。结论用RelA ASODN抑制RelA表达可明显下调uPA的表达。