组织工程皮肤种子细胞的研究进展

组织工程皮肤是应用生命科学和工程学的原理与方法,构建出的接近于人体组织结构的生物活性替代物。种子细胞的研究是组织工程皮肤产品研制中的关键部分。现就种子细胞相关研究的进展进行综述。     

骨髓间充质干细胞生物学特性及中药对其生物学行为的影响

目的：综述骨髓问充质干细胞(MSCs)的生物学特性及中药对其生物学行为的影响，探讨中药在MSCs研究中的应用前景。方法：查阅国内外检索类期刊，归纳骨髓MSCs的生物学特点及中药对其影响。结果：骨髓MSCs容易获取、可以体外大量扩增、干细胞特性不易丧失，是组织工程和细胞治疗中理想的种子细胞，中药可诱导骨髓MSCs定向分化成神经元。结论：中药对骨髓MSCs的生物学特性有影响，并有待深入研究。     

骨髓间充质干细胞治疗退变椎间盘的研究进展

腰腿痛是骨科临床常见的疾患,绝大多数与椎间盘退变有关.目前,腰腿痛的临床治疗都只能缓解疼痛等症状,而不能阻止、逆转椎间盘退变的发生.随着对退变椎间盘病理生理认识的深入,及组织工程和细胞治疗学的兴起,利用骨髓间充质干细胞(bonemesenchymal stem cells,BMSC)治疗退变椎间盘已成为可能.BMSC是一群存在于骨髓中的非造血干细胞,其作为组织工程的种子细胞在来源,分化潜能,免疫学等方面具有诸多优势.本文就BMSC及其治疗椎间盘退变的研究进展作一综述.     

海藻酸钠在组织工程中的应用

摘要：组织工程是以细胞生物学和材料科学为基础,在体内或体外构建组织或器官的新兴学科。组织工程主要研究种子细胞和支架材料,支架材料为种子细胞提供三维立体空间结构,并且可以为细胞的气体交换、营养物质获取等提供通路,本文将针对一种具有良好安全性、可生物降解性等的天然材料—海藻酸钠(SA)的性质及在组织工程中的应用进行综述。     

间充质干细胞分化为心肌细胞的研究进展

心肌梗死等缺血性心脏病严重威胁人类生存和生活质量,组织工程技术为根治心肌梗死等心脏病提供了一种新的方法,近年来,心肌组织工程有了较大的进展,但在种子细胞等方面的难题还远没有解决。本文对关于间充质干细胞分化为心肌细胞的研究作了一下综述,为细胞替代治疗的研究提供一定的参考。     

人椎间盘纤维环软骨细胞外基质小分子蛋白的双向电泳和质谱鉴定研究

目的初步研究双向电泳和质谱鉴定在人椎间盘纤维软骨的蛋白质组特性研究中的价值和作用,为进一步研究椎间盘疾病的治疗寻找有效途径。方法取人的正常椎间盘的纤维环组织,针对细胞外基质的小分子蛋白进行蛋白萃取,通过固相pH梯度(IPG)等电聚焦和梯度聚丙烯酰胺双向电泳分别分离纤维环的蛋白质,分析电泳图像,使用基质辅助激光解吸附飞行时间质谱仪(MALDI)对蛋白质点进行分析鉴定。结果双向电泳显示,纤维环中的胶原结合蛋白在pH3~10,相对分子质量在22000~250000范围内能够被很好地分离,对各蛋白质点进行质谱仪鉴定,确定了其中的17种蛋白质。结论双向电泳可有效地分离椎间盘纤维环组织中的细胞外基质小分子的胶原结合蛋白质,通过质谱仪鉴定可以确定其组成成分,为进一步研究椎间盘病变中胶原结合蛋白的改变及作用打下基础。     

胚胎干细胞向成骨细胞转化的研究现状

骨组织工程实际应用的关键是成骨细胞成骨以修补骨缺损,其前提是找到良好的种子细胞.而目前种子细胞的老化是组织工程中的一大难题,一些分化和增殖能力强的原始细胞即干细胞,是解决这一难题的希望所在.目前研究较多的是骨髓基质干细胞,但它却存在着：①相对低的产生率,大约100 000个细胞中才有1个真正的干细胞;②自我更新能力有限,而且随着时间的延长,增生潜能及向特殊类型细胞转化的能力均消失殆尽的问题.因此,基于骨组织工程的目的仍需发展一种新的细胞资源.而胚胎干细胞（embryonic stem cells,ESC）因其具有全能性和无限增殖的能力,有望成为组织工程中种子细胞的新来源.     

兔舌黏膜细胞的体外培养及生物学特性研究

目的 探讨舌黏膜细胞的培养方法,为进一步以舌黏膜细胞作为种子细胞构建组织工程化角膜上皮提供实验依据.方法 体外切取舌侧面和底面黏膜组织,经0.25%Dispase分离上皮层后,再经0.05%的胰酶分离为单个细胞,接种在无血清角质细胞培养液(KSFM)中,进行体外培养,并对其形态学以及生长曲线、传代特点、各代生长特点进行观察.同时,对体外培养获得的舌黏膜细胞进行广谱角蛋白免疫荧光鉴定.结果 舌黏膜细胞能够在无血清角质细胞培养液中稳定生长,呈现典型的"铺路石"状,细胞形态单一,可传至3～4代.细胞免疫荧光显示,体外培养获得的舌黏膜细胞AE1/AE3免疫荧光染色阳性.结论 应用无血清角质细胞培养液,可在短期内获得大量具有增殖能力的舌黏膜细胞,为进一步将其作为种子细胞构建组织工程化角膜上皮奠定了良好的基础.     

人羊膜作为组织工程支架材料的应用进展

组织工程是应用细胞生物学和工程学的原理,研究开发制作用于修复、改善损伤组织结构和功能替代物的技术。种子细胞、支架材料和组织构建是当前组织工程研究的主要内容。细胞载体的支架材料有人工合成的高分子聚合物和天然生物材料。人羊膜作为天然的高分子物质,在组织工程中也有所研究和应用,本文就人羊膜的特点及其在科研和临床中的应用进展进行综述。     

骨组织工程研究进展

组织工程学是一门应用工程学和生命科学的原理和方法,以载体结合被分离细胞,并能在宿主体内降解释放细胞,形成新的有功能组织的科学。近年来应用骨组织工程临床治疗骨缺损成为目前研究的热点,可以减少自身骨移植的供区损伤,也可避免同种异体移植供体来源有限和不可避免的免疫排斥反应。目前骨组织工程的研究主要包括:细胞种植基质材料的研究开发,种子细胞的体外培养,组织培养中各种因子的调控作用。1支架材料现在组织工程学一致认同良好的支架材料应具有以下条件:①良好的生物相容性;②良好的骨传导和骨诱导性;③合适的三维结构,能为细胞和…     

异种脱细胞真皮基质治疗大面积深度烧伤的研究进展

自体皮源的严重缺乏一直是大面积深度烧伤临床治疗的主要难点,因此,制备新型皮肤替代物已经成为大面积深度烧伤临床治疗亟待解决的问题。伴随着组织工程学的发展及制备工艺的改善,异种脱细胞真皮基质作为理想的皮肤替代物,在治疗大面积深度烧伤中被大量应用。本文对近几年异种脱细胞真皮基质的临床应用现状、治疗机理研究现状、不同脱细胞真皮基质的优缺点进行综述。     

成纤维样滑膜细胞原代培养及其在类风湿关节炎治疗机制研究中的应用进展

目的:综述成纤维样滑膜细胞(FLS)及其在类风湿关节炎(RA)药效作用机制研究中的应用进展。方法:以"成纤维样滑膜细胞""类风湿关节炎""中药单体""滑膜细胞""Arthritis""Fibroblast-like synoviocytes"为关键词,组合检索2006年1月-2015年10月在Pub Med、中国知网、维普等数据库中对FLS原代培养及其在RA治疗机制研究中的应用文献进行总结和归纳。结果:共查阅到相关文献68篇,其中有效文献32篇。FLS原代培养成功率较高,培养方法多样且日趋完善,在RA的治疗机制研究中得到了广泛的应用;同时,中药及化学合成药、激酶抑制剂等可通过NF-κB、Akt等信号通路抑制炎症因子或相关蛋白基因从而达到治疗RA的目的。结论:FLS体外试验在RA相关研究中得到广泛的应用,治疗药物如中药及化学合成药、激酶抑制剂通过细胞分子水平研究在信号通路的介导下都对RA有治疗作用。     

骨髓间充质干细胞的成骨研究进展

骨组织工程学研究内容主要包括3方面:①种子细胞的研究;②支架材料的研究;③组织工程化骨的临床应用,其中种子细胞是组织工程研究中首要的、最基本的环节.     

BrdU单抗免疫组化法观察人工皮肤种子细胞生长

目的研究贵州小型香猪来源的组织工程皮肤自体及同种异体移植后种子细胞生长情况,为复方壳多糖组织工程皮肤临床应用提供实验依据。方法构建猪的组织工程皮肤并于移植后第1、4、8周采集标本,BrdU单抗免疫组化染色,观察移植后种子细胞存活情况。结果猪组织工程皮肤移植后8周 BrdU单克隆抗体免疫组化染色阳性。结论笔者构建的组织工程皮肤自体及同种异体移植后种子细胞存活良好。本实验为复方壳多糖组织工程皮肤临床应用提供了有力的实验依据。     

母体来源人胎盘间充质细胞的分离培养及其分化能力的研究

目的探讨胎盘母体来源间充质细胞的分离、培养方法及其向脂肪和成骨诱导分化潜能。方法采用酶消化获得母体来源胎盘间充质干细胞体外扩增后,利用流式细胞仪检测其表面标志物;进行诱导分化后,采用油红O及茜素红染色鉴定其向脂肪和成骨诱导分化潜能。结果体外培养的母体来源胎盘间充质干细胞呈长梭形,细胞形态均一;细胞表面标志鉴定：CD73、CD90和CD105呈阳性表达,而CD14、CD34、CD45,和HLA—DR呈阴性表达;细胞诱导分化后,经油红O、茜素红染色证实其可分化为脂肪细胞和成骨细胞。结论建立了母体来源胎盘间充质干细胞的分离培养方法;证实其具有成脂、成骨分化潜能,有望成为细胞治疗及组织工程更为理想的种子细胞。     

微环境影响椎间盘组织工程修复的研究进展

椎间盘退变是骨科常见病。椎间盘自我修复能力非常有限，目前临床治疗主要是将椎间盘摘除或进行融合。新兴的组织工程技术应用生物支架及干细胞再生进行椎间盘修复，但由于椎间盘结构和功能特殊、组织缺乏血运以及承受巨大的应力负荷，且退变的椎间盘纤维环破裂等，使得植入椎间盘的干细胞面临巨大生存挑战。良好的外部环境是组织工程修复的前提和基础，近年来有关椎间盘所处微环境的相关研究逐渐增多。本文综述微环境影响椎间盘组织工程修复的研究进展，为临床治疗提供可能思路。     

Fas及其配体在腰椎间盘组织中的表达及意义

目的了解Fas与FasL在正常椎间盘及椎间盘突出症患者椎间盘组织中的表达情况。方法收集20例腰椎间盘突出症患者的椎间盘组织(破裂型与非破裂型各10例)及8例脑死亡者的正常椎间盘组织,通过免疫组织化学观察FasL,Fas的表达情况。结果正常髓核组织中仅有FasL的表达,突出的椎间盘组织中存在FasL,Fas的表达,而且表达程度在正常组与腰椎间盘突出症患者组之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论正常髓核组织中存在FasL的表达,提示FasL是使髓核组织产生免疫豁免效应的一个重要因素。当椎间盘突出时(纤维环破裂),则会在局部激发炎症反应,引起髓核细胞凋亡,而髓核细胞通过自分泌或旁分泌途径导致FasL表达增高是可能的机制之一。     

组织工程细胞支架与种子细胞复合培养的研究进展

组织工程的核心是建立由生物材料与细胞结合的三维空间复合体,即以合适的生物材料构建与所需要修复的组织或器官结构相同或类似的支架并复合特定细胞,用以对病损组织进行形态、结构和功能的重建而达到永久性替代[1].支架材料是组织工程的基础,它既要为细胞提供生长的空间又要被植入体内,故材料的性质会对细胞的生长、繁殖、分化和宿主内环境产生重要影响.因此,选择具有良好的生物相容性及细胞亲和性好的支架材料尤为重要.另外,要构建细胞支架复合体,又必须考虑种子细胞黏附于支架的问题,支架材料、种子细胞以及复合体的构建在组织工程中被称为三大基本要素.     

机械刺激对体外培养椎间盘细胞的影响

椎间盘组织和细胞的生长受多种因素的影响,机械刺激是其中之一.细胞三维培养体系希望模拟体组织中细胞所处的生理环境.在椎间盘组织中细胞存在复杂应力环境,如牵张力、压应力、振动等.近年来,随着机械作用细胞培养模型的建立,应力对体外培养椎间盘细胞作用的研究得以实现.     

家兔动脉血管平滑肌细胞培养方法的改进

目的提高家兔血管平滑肌细胞(vascular smooth mus-cle cell,VSMC)体外培养的成功率。方法以传统的主动脉平滑肌细胞培养方法中的组织块贴壁法为基础,从动物选择、培养基配制、血管取材、组织块的大小和接种间距、培养液的量及换液量、细胞传代的时机等多个重要环节进行改进;用倒置显微镜、电镜对培养细胞进行形态学观察,并用平滑肌细胞特异性α-肌动蛋白(α-actin)单克隆抗体免疫组织化学方法进行鉴定。结果台盼蓝检查传代细胞的存活率大于97%;光镜下见培养细胞平行排列呈长梭形及"峰、谷"样结构特征;免疫组织化学染色鉴定培养细胞中VSMC的纯度为97%;电镜技术观察到VSMC完整的超微结构。结论此培养方法能提高动脉平滑肌细胞原代培养的成功率,传代后血管平滑肌细胞生物学特征的稳定性好,可作为研究血管平滑肌细胞生物学行为的有效模型。