Delayed protective effects of limb ischemic preconditioning on liver ischemia-reperfusion injury in rats

目的 观察肢体缺血预处理(LIPC)对大鼠肝缺血-再灌注(I-R)损伤的延迟性保护作用.方法 雄性SD大鼠36只,随机分为对照组(S组),I-R组,LIPC组,每组12只,S组仅行开腹,不作其他处理;I-R组行肝缺血1h,再灌注3 h;LIPC组先行双后肢缺血5min,反复3次24h后行肝缺血1h,再灌注3h.手术完毕,腹主动脉采血用于检测总超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)、血清ALT与AST;切取肝组织,测定肝脏的湿干比(W/D),免疫组化检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达,同时光电镜观察肝组织显微、超微结构的变化.结果 与I-R组比较,LIPC组T-SOD活性增加(P＜0.01),MDA水平、ALT、AST、W/D值及TNF-α的阳性表达均明显降低(P＜0.01),肝脏的显微及超微结构损伤减轻.结论 LIPC对大鼠肝脏I-R损伤有明显的延迟性保护作用.其机制可能与增加机体抗氧化能力、抑制肝脏炎症反应、减轻肝脏水肿、抑制TNF-α的表达和改善肝组织微循环有关.     

缩宫素对大鼠肝脏缺血-再灌注损伤的保护作用及其机制

目的 探讨缩宫素对大鼠肝脏缺血-再灌注(I-R)损伤的保护作用及可能的机制.方法 将48只雌性SD大鼠随机均分为假手术(S)组、I-R组和缩宫素处理(OT)组.建立大鼠70%I-R模型,缺血时间1 h.OT组分别于术前12 h,15 min及再灌注时经腹腔注射缩官索0.5 mg/kg,S组及I-R组在相同时间注射等量生理盐水.各组大鼠分别于肝脏再灌注后2和6 h处死,取肝脏及血液标本,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)以及肝脏组织超氧化物歧化酶(SOD)、髓过氧化物酶(MPO)的活性及丙二醛(MDA)含量,并分别检测肝组织中核因子κB(NF-κB)的表达和肝脏组织的病理改变.结果 与I-R组相比,OT组的ALT、AST、TNF-α水平及MPO、NF-κB阳性表达明显降低(P<0.05),肝脏病理损伤较轻,但是MDA及SOD变化不明显.结论 缩宫素对大鼠肝脏I-R损伤具有保护作用.其机制可能与抑制炎症因子产生及活化有关.     

缺血预处理和缺血后处理联合应用对肝脏缺血-再灌注损伤的保护作用

目的 探讨缺血预处理和缺血后处理联合应用对肝脏缺血-再灌注(I-R)损伤的保护作用.方法 采用大鼠部分肝缺血模型,将SPF级雄性SD大鼠40只随机分为5组,每组8只:假手术(S)组,缺血-再灌注(I-R)组.缺血预处理(IPre)组,缺血后处理(IPost)组,缺血预处理+后处理(IPre+IPost)组.全面复流120 min后收集肝脏组织和血液标本,检测血清ALT,肝组织ATP、MDA和RCR,做肝组织病理检查.结果 IPre+IPost组血清ALT、肝组织MDA显著低于其余各组(P<0.05);IPre+IPost组肝组织ATP、RCR高于其余各组(P<0.05);病理结果:IPre+IPost组肝组织损伤轻于其余各组.结论 IPre和IPost联合应用能更好的保护线粒体,维持组织的能量代谢稳定,从而在再灌注早期更好的减轻肝脏的损伤.     

氟比洛芬酯预先给药对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨氟比洛芬酯预先给药对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响.方法 健康雄性SD大鼠48只,体重250～300 g.随机分为假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)和氟比洛芬酯预先给药组(FB组),每组16例.I/R组和FB组参照Nauta法建立肝脏部分缺血再灌注损伤模型,左、中肝叶缺血60 min,再灌注6 h.S组仅分离血管.FB组在缺血前15min自尾静脉注射氟比洛芬酯10mg/kg,I/R组自尾静脉注射等容量的0.9%氯化钠溶液.再灌注6 h后经腹主动脉采血3 ml,并切取肝组织.检测血清丙氨酸氨基转氨酶(ALT)含量和透明质酸(HA)含量,肝组织的MDA含量和SOD活性,肝脏标本的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达和核因子-κB(NF-κB)的表达,在电镜下观察由伊红(HE)染色的肝组织的形态学改变.结果 与S组比较,I/R组肝组织的ALT、HA及TNF-α水平、MDA含量、NF-κB表达升高,SOD活性下降(P＜0.05);与I/R组比较,FB组ALT、HA及TNF-α水平、MDA含量、NF-κB表达降低,SOD活性增高(P＜0.05).结论 氟比洛芬酯预先给药可以降低对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响.     

褪黑素保护肝脏缺血再灌注损伤的实验研究

目的应用大鼠肝缺血再灌注模型,通过分组对照研究,探讨褪黑素(MT)对肝脏缺血再灌注损伤(IRI)的保护作用及相关机理.方法建立SD大鼠肝缺血再灌注模型,64只大鼠随机分为2组:对照组n=32只:缺血前1h经尾静脉注入生理盐水1ml;MT用药组,n=32只:缺血前70min、缺血前35min、再灌注初期、再灌注1h以及再灌注2h分别向腹腔注射MT10mg/kg.测定两组缺血前、缺血35min末、再灌注2h和再灌注4h血清丙氨酸基转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、肝组织匀浆丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1);免疫组化测定缺血前、再灌注4h肝组织诱导型一氧化氮合成酶(iNOs)的表达.结果①血清学检查:MT组再灌注2h、4h血清ALT、LDH与对照组相比显著降低(P＜0.01),MT组再灌注2h、4h TNF-α与对照组相比显著降低(P＜0.01).②肝组织匀浆:MT组缺血35min末MDA与缺血前相比显著降低(P＜0.01),MT组再灌注2h、4h MDA与对照组相比显著降低(P＜0.01);MT组再灌注2h、4h与对照组相比NO显著降低(P＜0.01);MT组缺血35min末、再灌注2h、再灌注4h与对照组相比ET-1显著降低(P＜0.01);③免疫组化:MT组iNOs蛋白表达显著低于对照组.结论 MT能够明显减轻急性期肝脏IRI,其作用机理可能通过减少氧自由基和TNF-α的释放,抑制iNOs表达,从而减少NO和ET-1的产生.     

银杏内酯保护大鼠肝脏缺血/再灌注损伤作用的机制探讨

目的：观察银杏内酯对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响，探讨其保护大鼠肝缺血再灌注损伤作用的机制。方法：通过大鼠60min缺血、2h再灌注损伤模型，应用硝酸酶还原法测定肝脏缺血前5min和再灌注后10min，30min血清NO水平变化；测定再灌注后2h血清ALT、AST、LDH酶学差异和肝组织内ATP、MDA含量变化；再灌注2h取肝组织完成肝细胞、肝小叶显微结构和超微结构的观察。结果：肝脏缺血再灌注损伤后血清NO水平降低，ALT、AST、LDH水平升高；银杏内酯能提高再灌注后血清NO水平，并对ALT、AST、LDH的病理性升高有降低作用，且能改善肝脏缺血再灌注损伤的微循环，减轻肝细胞内超微结构的损害程度。结论：银杏内酯对大鼠肝脏缺血再灌注损伤有保护作用，其作用机制可能是通过NO介导的。     

谷胱甘肽对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响

目的探讨缺血前经门静脉注射还原型谷胱甘肽(GSH)对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法20只雄性SD大鼠建立部分肝脏缺血再灌注损伤模型,随机分2组,每组10只:缺血再灌注组(IR组),还原型谷胱甘肽预处理组(GPC组)。测再灌注末血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)及GSH含量。结果肝脏缺血45min再灌注40min后,GPC组血清ALT、AST、LDH、MDA含量明显低于IR组(P分别<0.05,0.01,0.01,0.01),而GSH含量明显高于IR组(P<0.01)。结论缺血前经门静脉注射还原型谷胱甘肽预处理可以有效减轻肝脏缺血再灌注损伤程度。其机制可能为增加血循环中GSH,减少肝组织及血循环中自由基含量。     

术前扩容对预防妇科腹腔镜致缺血再灌注肝损害的研究

目的 探讨腹腔镜术前扩容与预防经妇科腹腔镜手术所致肝功能损害的相关性.方法 将我院80例妇科腹腔镜手术患者随机分为术前扩容治疗组(Ⅰ组)和非术前扩容治疗组(Ⅱ组),每组40例;检测并对比各组患者术后肝脏缺血再灌注各个时点(T=1h、3h、6h、12h)肝功能(丙谷氨酸转氨酶ALT、天门冬氨酸转氨酶AST)及缺血再灌注损伤标记物脂质过氧化物丙二醛(MDA)在缺血再灌注期内的水平变化情况.结果 Ⅱ组肝脏缺血再灌注各个时点( T=1 h、3h、6h、12h)的肝功能血清ALT、AST水平及缺血再灌注损伤标记物MDA均明显高于Ⅰ组(P＜0.05);各组血清ALT、AST及MDA水平在缺血再灌注期均呈增高趋势,且在再灌注6h时达高峰,但在12h时有显著回落趋势(P＜0.05);与Ⅱ组相比,Ⅰ组在缺血再灌注期内的ALT、AST及MDA水平等实验室检查指标波动相对平稳,两组结果差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 术前扩容可有效保护腹腔镜手术患者术后肝脏缺血再灌注期的肝功能,是行之有效的预防妇科腹腔镜手术肝功能损伤的治疗措施.     

美洛昔康对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响

目的研究美洛昔康对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用以及环氧化酶-2(COX-2)的表达。方法雄性SD大鼠30只,体质量(300±20g),随机分为A组(美洛昔康组)、B组(缺血再灌注组)、C组(手术对照组),其中A、B组建立70%肝缺血再灌注损伤模型。A组于缺血前30min经腹腔注射美洛昔康(3mg/kg);B组于缺血前30 min经静脉注射等量生理盐水;C组仅作麻醉、开腹、不阻断血流。术后6h,分别采用采用全自动生化分析仪、HE染色、westernblot法、生物酶法分别测定血肝功能酶(ALT,AST),肝组织病理改变,肝内COX-2的表达、肝组织内超氧歧化酶活性(SOD)和丙二醛(MDA)的含量。结果 A组应用美洛昔康后血ALT、AST以及肝组织SOD、MDA显著低于B组(P<0.01),肝脏的明显降低,肝组织形态学无显著改变。结论美洛昔康能抑制肝脏内COX-2表达,缓解肝功能下降,保护大鼠肝脏缺血再灌注损伤。     

百里醌通过抑制氧化应激信号通路减轻肝缺血再灌注损伤

目的探讨百里醌对肝缺血再灌注损伤的影响及其机制。方法建立小鼠肝缺血再灌注损伤模型。30只C57小鼠随机分为3组,每组10只,分别为假手术组、缺血/再灌注损伤组(IRI组)和百里醌预处理组(百里醌组)。IRI组、百里醌组小鼠肝缺血90 min再灌注4 h时采血和收集肝脏标本,分别生化检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量,以及肝组织中活性氧自由基(ROS)、丙二醛(MDA)含量,过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、超氧化物歧化酶(SOD)活性,观察肝组织的病理形态。结果与假手术组比较,IRI组ALT、AST、ROS、MDA含量提高,而CAT、GPx、SOD活性降低,病理改变加重。与IRI组比较,百里醌组ALT、AST、ROS、MDA含量降低,而CAT、GPx、SOD活性提高,病理改变减轻。结论百里醌能通过抑制氧化应激减轻肝缺血再灌注损伤。     

牛磺酸对大鼠肢体缺血-再灌注后肝脏TNF-α、Caspase-3表达及细胞凋亡的影响

目的 观察肢体缺血-再灌注(LI-R)后大鼠肝脏损伤中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、半胱天冬氨酸蛋白酶(Caspase)3表达及细胞凋亡的发生和牛磺酸预处理后对其的影响.方法 Wistar 大鼠建立LI-R损伤模型后,随机分为对照组、LI-R组和牛磺酸+L1-R(TR)组.测定各组动物肝组织丙二醛(MDA)、髓过氧物酶(MPO)、肝组织钙含量、TNF-α水平;免疫组化法观察Caspase 3蛋白表达;利用琼脂糖凝胶电泳观察DNA梯状条带;TUNEL法检测各组肝脏细胞的凋亡情况.结果 与对照组比较,LI-R组和TR组大鼠肝脏各损伤性指标、TNF-α水平及Caspase 3蛋白表达增高,肝脏细胞DNA琼脂糖凝胶电泳可见梯状条带,TUNEL染色结果显示凋亡百分率明显升高(P＜0.05).TR组上述各项指标较L1-R组显著降低(P＜0.05),肝脏细胞DNA琼脂糖凝胶电泳显示梯状条带不明显.结论 细胞凋亡参与了LI-R肝损伤的发生;牛磺酸预处理可降低TNF-α、Caspase-3表达,从而减少大鼠LI-R后肝脏细胞凋亡的发生.     

虎杖提取物对ConA诱导肝损伤小鼠保护作用的研究

目的观察虎杖提取物对ConA诱导肝损伤小鼠的保护作用。方法通过测定血清ALT、AST及TNF-α、肝匀浆SOD、MDA,评价其对肝脏的保护作用。结果虎杖提取物高剂量组明显降低ConA诱导肝损伤小鼠模型的血清ALT、AST、TNF-α、肝匀浆MDA,提高肝匀浆SOD（P〈0.01）。结论虎杖提取物对ConA诱导肝损伤小鼠具有一定的保护作用。     

胰高血糖素样肽-2对幼鼠肠缺血-再灌注损伤的保护作用

目的 研究胰高血糖素样肽2(GLP-2)对肠缺血-再灌注(I-R)幼鼠肠屏障功能的保护作用.方法 采用肠I-R模型,将24只雄性Wistar幼鼠随机均分为假手术(C组)、肠I-R损伤(B组)和肠I-R损伤+GLP-2保护(A组)三组.光镜下观察小肠黏膜形态学改变,检测肠系膜淋巴结的细菌菌落情况、肠黏膜丙二醛(MDA)、血清D-乳酸、内毒素和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平的变化.结果 B组肠黏膜损伤最明显,Chiu's评分、肠系膜淋巴结细菌菌落计数、肠黏膜MDA、血清D-乳酸、内毒素和TNF-α水平均显著高于C组(P<0.01);与B组相比,A组肠黏膜损伤明显减轻,且Chiu's评分、肠系膜淋巴结细菌菌落计数、肠黏膜MDA、血清乳酸、内毒素和TNF-α水平显著降低(P<0.05).结论 GLP-2能够减轻幼鼠肠I-R损伤、保护肠黏膜屏障、减轻细菌/内毒素易位、减少氧自由基和炎性介质的产生和释放.     

野菊花总黄酮对酒精致急性肝损伤小鼠的保护作用

目的 观察野菊花总黄酮(total flavonoids Chrysanthemum indicum,TFC)对酒精致小鼠急性肝损伤的保护作用及部分机制.方法 用TFC(125、250、500 mg·kg-1)连续给小鼠灌胃7 d,末次给药后1 h,一次性灌胃酒精(50%,6 g·kg-1)致小鼠急性肝损伤模型,测定不...     

缺血预适应对肝脏热缺血再灌注损伤保护作用的机制研究

目的 探讨缺血预适应对肝脏热缺血再灌注损伤保护作用的分子机制。 方法 90 只成年清洁级 SD 大鼠随机均分为 3 组, A 组为假手术组, B、C 组建立 SD 大鼠肝脏热缺血再灌注损伤模型, 并对 C 组大鼠进行缺血预适应干预。 于缺血再灌注后 0、2、6、12、24 h 采集血标本测定丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）, 采用酶联免疫吸附（ELISA）技术检测肝细胞中肿瘤坏死因子（TNF）-α 及白细胞介素（IL）-1β 水平; 采集肝组织标本测定丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）, 流式细胞仪测定肝细胞线粒体膜电位。 结果 B、C 组大鼠的血清转氨酶、TNF-α、 IL-1β 及 MDA 水平均明显高于 A 组（P＜ 0.05）; B、C 组大鼠的凝血酶原活动度和胆碱酯酶低于 A 组（P＜ 0.05）; B、C 组大鼠肝脏 SOD 水平明显低于 A 组;C 组大鼠各项指标均优于 B 组（P＜ 0.05）。 缺血再灌注发生后肝细胞线粒体膜电位水平在 0 h 后即达到最低值, 此后呈逐渐上升趋势（P＜ 0.05）, 并且 C 组的肝细胞线粒体膜电位水平在各时段均高于 B 组（P＜ 0.05）。 结论 缺血预适应对肝细胞热缺血再灌注损伤具有一定的保护作用, 缺血预适应可以通过减少炎症因子 TNF-α 及 IL-1β 的释放, 提高 SOD 拮抗自由基的活性, 减轻线粒体损伤等途径发挥其保护作用。     

粉防己碱预处理减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤的机制研究

目的研究粉防己碱（tetrandrine,TET）预处理对大鼠肝缺血再灌注损伤的预防作用及其机制。方法大鼠肝脏左中叶缺血50 min,再灌注24 h后处死（I/R组）,TET＋I/R组缺血前30 min腹腔注射TET（50 mg/kg）,余同I/R组。大鼠处死前采血检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）,天门冬氨酸氨基转移酶（AST）,乳酸脱氢酶（LDH）,取缺血肝组织进行超氧化物歧化酶（SOD）,一氧化氮（NO）,丙二醛（MDA）,湿重干重（W/D）比检测和组织学检查。结果I/R组血清ALT,AST和LDH升高,组织MDA水平,W/D比值也明显升高,SOD活性和NO含量下降。在TET＋I/R组,血清ALT,AST,LDH,以及组织W/D比值较I/R组降低,SOD活性和NO含量升高。此外,TET＋I/R组大鼠血清ALT,AST,组织MDA和W/D比值较假手术组升高,SOD活性和NO含量降低.组织学检查显示TET＋I/R组肝损害减轻。结论TET能减轻但不能防止肝I/R损伤的发生,减少脂质过氧化物产生是TET抗I/R损伤的原因之一。     

Biochanin A protects lipopolysaccharide/D-galactosamine-induced acute liver injury in mice by activating the Nrf2 pathway and inhibiting NLRP3 inflammasome activation

Biochanin A, an isoflavone existed in red clover and peanuts, has been reported to possess a wide spectrum of pharmacological activities, such as anti-inflammatory and antioxidant effects. However, the protective effects and mechanism of biochanin A on liver injury have not been reported. In this study, acute liver injury was induced by intraperitoneal injection of lipopolysaccharide (LPS) and d-galactosamine (D-GalN). Biochanin A was administrated 1 h prior to LPS/D-GalN challenge. Serum ALT, AST, IL-1β, and TNF-α levels, hepatic malondialdehyde (MDA), GPx, SOD, and Catalase contents, tissue histology, IL-1β, TNF-α, NLRP3, and Nrf2 expression were detected. The results showed that serum ALT, AST, IL-1β, and TNF-α levels and hepatic MDA content increased after LPS/GalN treatment. These changes were attenuated by biochanin A. Meanwhile, biochanin A dose-dependently up-regulated the expression of Nrf2 and HO-1. Biochanin A also inhibited hepatic IL-1β and TNF-α expression in a dose-dependent manner. Biochanin A did not inhibit LPS/D-GalN-induced hepatic NLRP3, ASC, and caspase-1 expression. However, the interaction of NLRP3 with ASC and caspase-1 were inhibited by biochanin A. In addition, LPS/D-GalN-induced up-regulation of thioredoxin-interacting protein (TXNIP) and interaction between TXNIP and NLRP3 were also inhibited by biochanin A. In conclusion, biochanin A protected against LPS/GalN-induced liver injury by activating the Nrf2 pathway and inhibiting NLRP3 inflammasome activation.     

重组人促红细胞生成素对大鼠肝脏缺血-再灌注损伤的保护作用

目的探讨重组人促红细胞生成素(rHuEPO)对大鼠肝脏缺血-再灌注(I-R)损伤的保护作用。方法将30只大鼠随机均分为假手术组(A组)、I-R模型组(B组)和rHuEPO 5000IU/kg处理组(C组)。建立70%大鼠肝脏I-R损伤模型,检测各组血清ALT、AST水平,HE染色观察组织学变化,Western blot及RT-PCR检测肝脏诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达。结果与B组相比,C组iNOS mRNA和蛋白表达、ALT和AST水平均明显减少(P<0.05或P<0.01),肝细胞水肿、坏死减轻;而B组和C组间eNOS mRNA和蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 rHuEPO可能通过抑制iNOS表达,减轻大鼠肝脏I-R损伤。     

八角莲致大鼠肝毒性机制研究

目的:研究八角莲对大鼠肝组织超氧化物歧化酶( superoxide.dimutase,SOD)、丙二醛(MDA)、大鼠活性氧簇(ROS)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的影响,探讨八角莲致大鼠肝脏损害的毒性机制.方法:分别给予SD大鼠八角莲水提液与醇提液连续灌胃3d后,取正常组及八角莲给药组(3.50和2.96 g·kg-1)大鼠肝组织,制成10％肝匀浆,按试剂盒方法测定肝组织中SOD、MDA、ROS活性和AL、AST、γ-GT含量,计算SOD/MDA;采用双抗体夹心ABC-ELISA法测定大鼠肝组织TNF-α、IL-6含量.结果:与正常组比较,八角莲水提组与醇提组大鼠肝组织SOD下降,MDA上升,SOD/MDA下降,ROS值上升(P ＜0.05);ALT、AST、γ-GT、TNF-α、IL-6含量升高(P＜0.05).结论:大鼠灌胃给予八角莲后,可对肝脏产生明显的毒性,其机制可能与影响自由基及炎症因子有关.