黄连解毒汤自沉淀化学成分及其抗PC12细胞损伤研究

目的探讨黄连解毒汤(HJD)自沉淀制备条件,测定自沉淀主要成分量及自沉淀对PC12细胞损伤模型的保护作用。方法以提取时间和投水量为影响因素,确定自沉淀的制备工艺;采用HPLC法,测定自沉淀中黄芩苷、小檗碱、栀子苷、巴马汀、黄连碱、汉黄芩苷的量;采用CCK-8法评价HJD上清液、自沉淀对CoCl_2损伤的PC12细胞模型作用。结果在10倍量水回流提取30 min的煎煮条件下,干燥后HJD自沉淀质量约占上清液质量的10%,自沉淀中81.28%的成分为酸碱性化合物,其中黄芩苷占42.12%,小檗碱占31.17%,黄连碱占5.89%,汉黄芩苷占1.50%,巴马汀占0.60%,未检测到中性成分栀子苷。上清液、自沉淀对CoCl_2损伤的PC12细胞的EC50值分别28.25、19.58μg/m L。结论自沉淀制备工艺操作简单,重复性好,通过成分分析,得出自沉淀的形成机制以酸碱络合为主的假想;与上清液相比,自沉淀表现出较好的神经保护活性,为HJD的二次开发提供参考。     

基于网络药理学的黄连解毒汤治疗脑胶质细胞瘤的分子机制预测

目的:采用网络药理学方法和生物信息学理论,挖掘黄连解毒汤有效成分,预测黄连解毒汤作用靶点,探求作用机制,从系统生物整体的角度为临床治疗及进一步的试验提供数据支持,并指导下一步的实验。方法:使用中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)筛选黄连解毒汤有效成分群,通过构建相关网络及分析其特征明确潜在分子成分和靶点,结合疾病靶点绘制药物入血活性成分及疾病靶点PPI网络,寻找交集、发现关键靶点并进行富集分析。结果:通过TCMSP检索共发现黄连解毒汤相应成分168个,根据OB值和DL值筛选出入血活性成分60个,在此基础上获得147个预测靶点及379个关键基因;根据GO分析结果可知,黄连解毒汤作用于该疾病主要涉及细胞内通路、免疫和炎症相关通路、癌症信号通路等大量通路。结论:基于网络药理学的活性成分筛选和靶点预测具有一定的准确性,为研究黄连解毒汤多成分、多靶点与多种疾病间复杂的网络关系提供了新的研究思路。     

基于分子对接技术研究黄连解毒汤治疗糖尿病的物质基础

目的:采用分子对接技术研究黄连解毒汤的降糖分子机制。方法:基于文献和TCMSP数据库收集黄连解毒汤中化学成分并构建其小分子结构数据库,采用i GEMDOCK软件对黄连解毒汤中19个化学成分与糖尿病网络中6个关键蛋白(PPARγ、DPP-IV、PTP1B、醛糖还原酶、α-葡萄糖苷酶、GSK-3)进行分子对接,并采用Cytoscape 2. 8. 1软件构建黄连解毒汤多成分-多靶点蛋白网络模型。结果:黄连解毒汤化学成分与靶标蛋白对接评分结果较好,其多成分多靶点效应明显。发现PPARγ、PTP1B、醛糖还原酶、α-葡萄糖苷酶、GSK-3是黄连解毒汤发挥降糖的主要分子机制。结论:初步阐释黄连解毒汤降糖的分子机制,为进一步研究黄连解毒汤的降糖作用靶标选取提供理论指导。     

黄连解毒汤物质基准量值传递分析

目的 阐明黄连解毒汤（Huanglian Jiedu Decoction,HJD）物质基准的关键质量属性,建立HJD物质基准指纹图谱并测定其中盐酸黄连碱、表小檗碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、盐酸药根碱、盐酸黄柏碱、黄芩苷、栀子苷含量及其转移率,为后期HJD的复方制剂研究奠定基础。方法 按古代工艺制备15批物质基准,测定出膏率,建立物质基准的HPLC指纹图谱并进行相似度评价,确定共有峰,同法测定物质基准中8种成分的含量,进行饮片到物质基准量值传递分析。结果 15批HJD物质基准平均出膏率为16.02%,指纹图谱共有18个共有峰,与对照指纹图谱的相似度均大于0.9;指认出8个色谱峰分别为盐酸黄连碱、表小檗碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、盐酸药根碱、盐酸黄柏碱、黄芩苷、栀子苷。各指标成分从饮片到物质基准的转移率分别为盐酸黄连碱0.61%～1.08%,表小檗碱0.14%～0.24%,盐酸巴马汀0.93%～1.52%,盐酸小檗碱4.09%～6.36%,盐酸药根碱0.81%～1.07%,盐酸黄柏碱0.78%～1.06%,黄芩苷7.45%～12.26%,栀子苷0.42%～2.82%。结论 指纹图谱结合出膏...     

基于方证对应理论的黄连解毒汤肠道吸收分析

目的:基于方证对应理论研究正常和脑缺血病理状态下黄连解毒汤中指标成分肠吸收情况的差异性,探讨临床对症治疗脑缺血疾病的合理性。方法:以黄连解毒汤中盐酸小檗碱、黄芩苷、栀子苷为检测指标,建立在体单向肠灌流模型,考察不同浓度黄连解毒汤在正常和脑缺血大鼠的肠吸收情况。结果:与正常组比较,不同浓度黄连解毒汤中盐酸小檗碱、黄芩苷、栀子苷在脑缺血模型组大鼠不同肠段的肠吸收均有一定程度增加,其中盐酸小檗碱在十二指肠、空肠有显著性增加;黄芩苷在全部肠段的肠吸收均有显著性增加;栀子苷在空肠、回肠、结肠有显著性增加。结论:黄连解毒汤主要药效成分在脑缺血大鼠的肠道吸收情况优于正常组,为该复方临床对症治疗脑缺血疾病的合理性提供实验依据,体现了中医方证对应理论。     

组合药物及黄连解毒汤对小檗碱在大鼠脑组织中药动学的影响

目的研究组合药物(小檗碱+黄芩苷+栀子苷)及黄连解毒汤复方对小檗碱在大鼠脑组织药动学的影响。方法 SD大鼠,分为小檗碱(247.39 mg/kg)组、组合药物(小檗碱、黄芩苷、栀子苷,247.39、130.11、113.01 mg/kg)组、黄连解毒汤(3.92 g/kg,小檗碱247.39 mg/kg)组,各组分别ig相应剂量的药物,分别于给药后0.083、0.25、0.5、1、2、4、6、8、12、24 h各取6只大鼠,处死取脑组织,UPLC-MS法测定小檗碱在脑组织中的质量浓度。计算各组中小檗碱药动学参数。结果与小檗碱组达峰浓度(Cmax 108.01 ng/g)相比,组合药物组小檗碱的Cmax(368.59 ng/g)显著增加,明显高于黄连解毒汤原方给药中小檗碱的Cmax(31.97 ng/g);组合药物组的AUC0~∞(3 236.60 min·ng/g)远大于小檗碱组的AUC_(0~∞)(2 701.37min·ng/g)和黄连解毒汤组的AUC_(0~∞)(420.34 min·ng/g)。结论与小檗碱组相比,组合药物能促进小檗碱进入脑组织,而黄连解毒汤复方抑制小檗碱进入脑组织。     

黄连解毒汤治疗乙型脑炎的作用机制研究

目的：采用网络药理学和分子对接的方法研究黄连解毒汤治疗乙型脑炎(Japanese encephalitis, JE)的作用机制。方法：通过中药系统药理学数据库与分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform, TCMSP)获得黄连解毒汤4味中药的化学成分及相关靶点。在GeneCards数据库、DisGeNET数据库和在线人类孟德尔遗传数据库(online mendelian inheritance in man, OMIM)中检索JE疾病相关靶点。取活性成分相关靶点与JE相关靶点的交集为黄连解毒汤治疗JE的潜在作用靶点。将潜在靶点导入String数据库进行蛋白质互作(protein-protein interaction, PPI)分析,并采用Cytoscape v 3.8.2软件进行可视化。使用DAVID数据库对潜在作用靶点进行基因本体(gene ontology, GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of gen...     

基于网络药理学的黄连解毒汤治疗动脉粥样硬化的潜在分子机制研究

目的通过网络药理学方法探讨黄连解毒汤治疗动脉粥样硬化(AS)的潜在分子生物学机制。方法从中药系统药理学分析平台(TCMSP)及文献资料中寻找与黄连解毒汤中4味中药相关的所有成分和作用靶点,并构建药物分子-靶点网络;通过TTD、DrugBank、DisGeNET数据库筛选与AS相关的靶标,利用STRING平台构建药物-疾病靶点交互网络;对核心靶点进行网络拓扑分析,利用DAVID数据库对核心靶点蛋白进行GO生物过程分析及KEGG通路富集分析,并构建黄连解毒汤活性成分-AS靶点-KEGG通路多维网络关系图。结果根据筛选条件[口服生物利用度(OB)≥30%、类药性(DL)≥0.18)]及查阅文献资料共得到71个活性成分,165个药物潜在靶点。黄连解毒汤中活性成分主要有谷甾醇、槲皮素、小檗碱、去氢丹参酮Ⅱ_A、黄芩新素等能够干预AS形成。3个疾病数据库以"atherosclerosis"为搜索条件共收集到175个疾病靶点。根据度(degree)值筛选出黄连解毒汤干预AS的核心靶标蛋白223个,主要涉及NOS2、NOS3、PTGS2、TNF、CYP2C9、HMOX1等。GO生物过程分析根据错误发现率(FDR)≤0.05,确定50个条目,主要包括SRP依赖的靶向膜转运蛋白、核转录的mRNA分解代谢过程、病毒转录、核糖体核糖核酸处理、翻译等生物分析过程。KEGG富集结果显示有74条通路与AS相关,主要涉及到核糖体通路、病毒致癌通路、参与细胞周期通路、雌激素信号通路通路等。结论黄连解毒汤治疗AS是多成分、多靶点、多途径相互作用的结果,为黄连解毒汤的临床应用以及AS相关疾病的基础或临床研究提供一定的理论依据,同时对新药的研发与应用具有一定的参考价值。     

基于网络药理学探究黄连解毒汤治疗溃疡性结肠炎的作用机制研究

目的 基于网络药理学预测黄连解毒汤治疗溃疡性结肠炎(UC)的有效成分、靶点和作用机制.方法 通过TCMSP、GeneCards、OMIM数据库筛选黄连解毒汤的活性成分、作用靶点和UC疾病相关的基因.使用Cytoscape软件构建"药物活性成分-靶点-疾病"网络.通过STRING数据库构建蛋白互作(PPI)网络,推测核心...     

基于网络药理学研究黄连解毒汤抗幽门螺杆菌感染作用机制

目的:运用网络药理学方法预测黄连解毒汤抗Hp感染的主要有效成分、靶点及信号通路,挖掘其潜在作用机制,为后续实验研究提供依据。方法:应用TCMSP筛选黄连解毒汤中黄连、黄芩、黄柏、栀子4味中药的主要有效成分及其潜在作用靶点。通过GeneCards数据库和人类孟德尔遗传数据库（OMIM）筛选Hp感染相关靶点,并取药物和疾病...     

基于网络药理学的黄连解毒汤治疗高血压潜在机制研究

目的利用网络药理学技术预测黄连解毒汤治疗高血压的作用机制。方法从中药系统药理学分析平台(TCMSP)中寻找与黄连解毒汤中4味中药相关的所有化学成分和作用靶点,构建化合物靶点相互作用网络图;通过OMIM数据库、TTD数据库以及PharmGkb数据库筛选高血压疾病相关的靶标;PPI数据库构建黄连解毒汤和高血压的交互靶标;筛选药物靶点和疾病靶点相互作用的核心靶点,采用Davidv6.8数据库对核心靶点进行GeneOntology(GO)分析,利用KEGG数据库对核心靶点进行相关通路富集。结果选择口服利用度(OB)≥30%、类药性(DL)≥0.18作为化合物分子的筛选条件,并通过文献查找加以补充,共筛选出黄连解毒汤的61个潜在活性成分和154个潜在靶点;通过度、介度中心度、接近中心度等网络拓扑特征评价筛选出与黄连解毒汤在高血压方面作用核心靶点228个,GO分析共包含118条富集结果,其中生物过程59条,分子功能31条,细胞组成28条。利用KEGG数据库对入选靶标进行相关通路富集,筛选出45条通路在高血压疾病方面具有作用。结论黄连解毒汤具有多成分、多途径、多靶点协同作用的作用特点,预测了黄连解毒汤治疗高血压疾病的可能作用机制,为寻找其有效成分和作用机制及临床应用奠定基础。     

黄连及黄连解毒汤对小鼠的急性毒性实验研究

 目的 探讨黄连单味药及其复方黄连解毒汤对小鼠的急性毒性,摸索半数致死量（LD₅₀）或最大耐受量,并确定其毒性靶器官。方法 采用灌胃给药的方法,给予不同剂量黄连水煎液或黄连解毒汤水煎液,连续观察7 d,检测药物对小鼠的急性毒性作用,用加权回归几率法（Bliss）计算LD₅₀,对死亡小鼠进行主要脏器的病理学观察。结果 黄连水煎液的小鼠LD₅₀剂量（以含黄连生药量计）为18.826 g·kg-1,95%可信限为16.923~21.314 g·kg-1,LD₅为12.407 g·kg-1,LD₉₅为28.565 g·kg-1。病理结果提示,黄连对小鼠的主要毒性靶器官为脑、肝、脾、肺、肾。黄连解毒汤未引起小鼠死亡,其最大耐受量（以含黄连生药量计,黄连-黄芩-黄柏-栀子=20∶6∶6∶9）为80 g·kg-1。结论 单味黄连水煎液具有毒性,其小鼠LD₅₀剂量（以含黄连生药量计）为18.826 g·kg-1,毒性靶器官为脑、肝、脾、肺、肾;经配伍后的黄连解毒汤则较为安全。     

黄连解毒汤的药动学-药效学相关性研究

目的研究大鼠给予黄连解毒汤(HJD)、黄芩提取物及黄芩苷后,血清中黄芩苷和汉黄芩苷的经时变化及抗氧化作用的药动学-药效学(PK-PD)相关性。方法以HPLC法同步监测血清黄芩苷、汉黄芩苷的水平,求算其血药浓度-时间曲线下面积(AUC),并将含药血清抗氧化作用的效应-时间曲线下面积(AUE)与对应的AUC进行相关性分析。结果 HJD、黄芩提取物及黄芩苷的lgAUC-AUE均呈近似"S"形曲线。结论 HJD、黄芩提取物及黄芩苷的抗氧化作用与血清黄芩苷、汉黄芩苷水平呈正相关,黄芩苷可能是HJD及黄芩抗氧化作用的活性成分,汉黄芩苷也有一定的抗氧化作用。     

黄连解毒汤对荷瘤小鼠免疫调节作用的实验研究

目的：探讨黄连解毒汤对荷瘤小鼠免疫调节作用。方法：选择H22肝癌小鼠模型，通过检测免疫指标，研究黄连解毒汤对正常小鼠和模型小鼠免疫反应的影响。结果：实验组小鼠的自然杀伤细胞（NK）杀伤活性及T细胞分泌白细胞介素-4（IL-4）的能力均有显著增高（P〈0．01，P〈0．001）。结论：黄连解毒汤能增强荷瘤小鼠体内NK细胞的杀伤功能及体液免疫功能。     

黄连解毒汤对糖尿病大鼠血清chemerin水平的影响

目的研究黄连解毒汤干预糖尿病大鼠血清chemerin水平的变化情况,初步探讨黄连解毒汤改善胰岛素抵抗的作用机制。方法实验采用高脂高糖饮食联合链脲佐菌素（STZ）复制大鼠糖尿病模型,连续给黄连解毒汤6周后测定空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量,同时以测定脂肪因子chemerin水平的变化。结果给予黄连解毒汤组治疗的糖尿病大鼠,其血清中FBg、TC、Tg、LDL-C水平显著低于模型组（P〈0.01）,HDL-C水平高于模型组（P〈0.01）,血清chemerin水平显著低于模型组（P〈0.01）。结论黄连解毒汤对高脂高糖饮食联合小剂量STZ所致糖尿病大鼠有一定的治疗作用,能改善胰岛素抵抗,其机制可能是通过调节脂肪因子chemerin的表达,从而降低了炎症信号通路,改善了脂肪组织的慢性炎症反应,继而改善胰岛素抵抗。     

黄连解毒汤抗脑缺血作用研究进展

黄连解毒汤由黄连、黄芩、黄柏和栀子组成,是清热解毒的代表方。在临床及动物实验中对缺血性脑损伤具有良好的治疗效果,能够明显延长模型动物的生存时间,改善能量代谢和血流状况,抑制脂质过氧化及炎症反应,还能改善脑缺血所致的认知功能障碍。现将近几年的相关研究进行总结,分析黄连解毒汤的作用机制,以期为临床应用和药理研究提供指导。     

黄连解毒汤治疗脓毒症的网络药理学研究

目的：探索黄连解毒汤治疗脓毒症的核心作用靶点、主要活性成分及作用机制。方法：在中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)以黄连、黄芩、黄柏、栀子为关键词分别检索,按照口服生物利用度(OB)≥30%,类药性(DL)≥0.18的条件筛选,获得黄连解毒汤各中药的活性成分及其作用靶点;通过在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)、GeneCards、治疗靶点数据库(TTD)检索脓毒症的疾病靶点;将预测到的成分及其疾病靶点运用Cytoscape软件进行中药-成分-疾病-靶点网络构建及分析,筛选核心靶点及主要活性成分,通过STRING数据库结合Cytoscape软件绘制蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络并进行网络拓扑学分析,通过R语言运行后对核心靶点进行基因本体(GO)分析和京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路注释分析,设定阈值P<0.05,Q<0.05,筛选具有显著性差异的生物过程及信号通路。结果：筛选出黄连解毒汤78个成分和841个药物靶点;这些共同靶点涉及147条生物过程包括TNF信号通路、趋化因子信号通路、HIF-1信号通路、细胞凋亡通路等代谢通路,内分泌抵抗等与内分泌系统...     

黄连解毒汤对胰岛素抵抗大鼠瘦素和抵抗素的影响

目的 探讨黄连解毒汤对胰岛素抵抗大鼠脂质代谢、瘦素和抵抗素的影响。方法观察黄连解毒汤对实验性胰岛素抵抗大鼠的血脂[甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、载脂蛋白A1（apoAI）、载脂蛋白B（apoB）、游离脂肪酸（FFA）]、骨骼肌组织甘油三酯（mTG）、糖耐量（OGTT）、空腹血糖（FB6）、血清胰岛素（INS）及体重的变化,用ELISA方法检测血清瘦素和抵抗素的含量。结果 与模型组比较,黄连解毒汤组大鼠血清TC、TG、apoB、FFA、mTG及FBG水平均明显降低,而HDL-C与apoA1水平显著升高,OGTT改善,大鼠体重减轻,瘦素和抵抗素明显降低（P〈0．05或P〈0．01）。结论 黄连解毒汤能调节胰岛素抵抗大鼠脂质代谢,同时能降低瘦素和抵抗素的水平,这可能与其改善胰岛索抵抗有关。     

黄连解毒汤对糖尿病大鼠肠道二糖酶活性的影响

目的研究黄连解毒汤对糖尿病大鼠的降血糖作用及对糖尿病大鼠肠道二糖酶活性的影响。方法链脲佐菌素(ip)建立糖尿病大鼠模型;糖尿病大鼠ig给予黄连解毒汤提取物治疗1个月,观察治疗后血糖变化,测定各肠段肠内容物中的二糖酶(蔗糖酶、麦芽糖酶、乳糖酶)活性。正常大鼠小肠注入麦芽糖,30、60、120 min后取门静脉、外周静脉血,测定门静脉与外周静脉血中葡萄糖浓度差值。结果高、低剂量黄连解毒汤治疗后糖尿病大鼠的血糖分别降低(42.2±4.9)%、(23.1±3.8)%;黄连解毒汤治疗后糖尿病大鼠十二指肠、空肠和回肠的麦芽糖酶活性分别降低(32.2±4.3)%、(26.5±2.9)%、(36.5±5.2)%;蔗糖酶活性分别降低(33.3±3.7)%、(32.8±4.6)%、(27.4±3.3)%,乳糖酶活性分别降低(35.4±4.2)%、(17.9±2.3)%、(6.3±1.8)%。黄连解毒汤能减小大鼠小肠注入麦芽糖后门静脉与外周静脉血中葡萄糖浓度差值。结论黄连解毒汤能显著降低糖尿病大鼠血糖,其降糖机制可能与抑制糖尿病大鼠肠道二糖酶活性有关。